معلومة

هل سيكون الشخص المصاب بطفرة مزدوجة في التباين طبيعيًا؟


عادة ما يكون لدى أنثى الإنسان X allosome من والدها و X allosome من والدتها. ماذا لو حدثت طفرة مزدوجة ، مما تسبب في أن يكون لدى شخص ما اثنين من الطيف X من والدته ولا يوجد أي جسيمات من والدها؟ هل سيكون هذا الشخص أنثى عادية؟

لاحظ أنه من الممكن أنه لا يوجد أي جسيمات من الأب أو الأم (المعروفة باسم متلازمة تيرنرز ، (45 ، X)) وأن هناك اثنين من التباين X من الأم (المعروفة باسم (47 ، XXX) و (47 ، XXY) على التوالي).

نظرًا لأن متلازمة تيرنر تحدث عند ولادة واحدة من بين كل 5000 ولادة ، وتحدث متلازمة تريبل إكس لواحد من كل 1000 ولادة ، فإنني أقدر أن هذا سيحدث مرة واحدة من كل 5 ملايين ولادة.


رف الكتب

NCBI Bookshelf. خدمة للمكتبة الوطنية للطب ، المعاهد الوطنية للصحة.

Griffiths AJF و Miller JH و Suzuki DT وآخرون. مقدمة في التحليل الجيني. الطبعة السابعة. نيويورك: دبليو إتش فريمان 2000.

  • بالاتفاق مع الناشر ، يمكن الوصول إلى هذا الكتاب من خلال ميزة البحث ، ولكن لا يمكن تصفحه.


العلاج بالهرمونات البديلة وطفرة العامل الخامس ليدن

من نظام بوسطن للرعاية الصحية لشؤون المحاربين القدامى ومركز بيث إسرائيل ديكونيس الطبي ، كلية الطب بجامعة هارفارد بوسطن ، ماساتشوستس.

في عام 1993 ، تم تحديد الأفراد الذين لديهم استعداد وراثي للانصمام الخثاري الوريدي الذين أظهرت البلازما استجابة ضعيفة للبروتين المنشط C (APC) في اختبار وقت الثرومبوبلاستين الجزئي المنشط. 1 كان الأساس الجزيئي لهذا النمط الظاهري للمختبر لمقاومة APC هو طفرة الجوانين للأدينين عند النوكليوتيدات 1691 في جين العامل الخامس. 2 ينتج عن هذا استبدال الأرجينين (R) في الموضع 506 بالجلوتامين في البروتين الناتج ، وهو عيب يسمى العامل الخامس ليدن. R506 هو الموقع الأول من بين ثلاثة مواقع تشق فيها APC عادةً عامل التجلط Va وتثبط نشاطه. يؤدي استبدال Q506 إلى تعطيل العامل Va تقريبًا بمقدار l0 ضعفًا بشكل أبطأ من المعتاد ، مما يجعل العامل المساعد مقاومًا نسبيًا للعمل المضاد للتخثر لـ APC. 3 وهذا يسمح بزيادة توافر عامل Va داخل مجمع البروثرومبيناز ، وبالتالي تعزيز توليد الثرومبين وتطوير حالة فرط التخثر.

العامل الخامس لايدن هو عامل الخطر الوراثي الأكثر شيوعًا للانصمام الخثاري الوريدي ، مما يزيد من خطر الإصابة بالتجلط الوريدي بنسبة 4 إلى 10 أضعاف في الزيجوت متغايرة الزيجوت و 50 إلى 100 ضعف في الزيجوت المتماثلة الزيجوت. يمكن تحديد 4،5 تغاير الزيجوت في 12 ٪ إلى 20 ٪ من المرضى البيض غير المختارين الذين يعانون من تجلط وريدي و 40 ٪ إلى 50 ٪ من المرضى الذين لديهم تاريخ عائلي إيجابي قوي. ما يقرب من 3 ٪ إلى 7 ٪ من المرضى البيض العاديين هم حاملون متغاير الزيجوت للعامل الخامس لايدن ، لكن الطفرة نادرة في السكان الأفارقة والآسيويين الأصليين.

بعد فترة وجيزة من تحديد العامل V Leiden ، تم التعرف على أن وجود الطفرة يزيد بشكل كبير من خطر الإصابة بالخثار الوريدي المرتبط باستخدام موانع الحمل الفموية (راجعه Vandenbroucke وآخرون 6). بين النساء اللواتي يتناولن موانع الحمل الفموية ، يزداد الخطر بمقدار 35 ضعفًا بين ناقلات الزيجوت غير المتجانسة للطفرة مقارنة بزيادة قدرها 4 أضعاف بين غير الناقلين. يشير هذا إلى أن الجمع بين هذين العاملين له تأثير فوق مضاف ، وليس مجرد مادة مضافة ، على مخاطر الجلطات بشكل عام. يكون خطر الإصابة بالخثار الوريدي أكبر في السنة الأولى من استخدام موانع الحمل الفموية. يرتبط الجيل الثالث من البروجستين ، مثل ديسوجيستريل وجيستودين ، في مستحضرات منع الحمل الفموية منخفضة الإستروجين ، بزيادة التجلط. 6،7

إن الآلية التي تعمل بها موانع الحمل الفموية على تخثر الدم هي آلية معقدة. تشمل تأثيرات البروثرومبين زيادات متواضعة في مستويات عوامل التجلط (العامل السابع ، العامل الثامن ، العامل العاشر ، البروثرومبين ، الفيبرينوجين) وانخفاض مستويات البروتينات المضادة للتخثر (مضاد الثرومبين ، البروتين S). بمقايسة جيل الثرومبين ، تبين أن النساء اللواتي يتناولن موانع الحمل الفموية يكتسبن مقاومة APC. على الرغم من أن الأساس الجزيئي لهذه الظاهرة غير معروف ، إلا أنه يقدم تفسيراً معقولاً لخطر الجلطة المتزايد بشكل كبير بين مستخدمي موانع الحمل الفموية الذين يحملون طفرة العامل V Leiden (راجعه Vandenbroucke et al 6 و Rosendaal et al 8).

تم التعرف على التجلط في موانع الحمل الفموية بعد فترة وجيزة من تقديمها في الستينيات ، 6 ولكن تم الإبلاغ بشكل قاطع عن وجود أدلة مقنعة على أن جرعة الاستروجين المنخفضة المستخدمة في العلاج بالهرمونات البديلة مرتبطة بزيادة خطر الإصابة بالجلطات الدموية الوريدية. بالنسبة لاستبدال الهرمونات ، تختلف كيميائيًا عن تلك الموجودة في موانع الحمل الفموية ، ولكنها تعتبر ذات فاعلية بيولوجية أقل بكثير. يزداد خطر التخثر الوريدي المرتبط بالعلاج بالهرمونات البديلة من 2 إلى 4 أضعاف ، وهو تأثير مشابه من حيث الحجم لموانع الحمل الفموية. ومع ذلك ، فإن استخدام العلاج بالهرمونات البديلة يؤدي إلى عدد أكبر بكثير من الحالات الزائدة نتيجة للزيادة الكلية المرتبطة بالعمر في حدوث تجلط الدم.

بناءً على التفاعلات بين موانع الحمل الفموية والعامل الخامس لايدن ، كان من المتوقع أن يكون حاملو الطفرة الذين يتلقون العلاج ببدائل الهرمونات معرضين بشكل كبير لخطر الإصابة بالجلطات الدموية الوريدية. في هذا العدد من تصلب الشرايين والجلطة، وعلم الأحياء الأوعية الدموية، تقرير Herrington et al 9 عن دراسة الحالات والشواهد المتداخلة للنساء المسجلات في دراسة استبدال القلب والاستروجين (HERS) وتجربة استبدال الاستروجين وتصلب الشرايين. كان كلاهما تجارب عشوائية للعلاج بالهرمونات البديلة مقابل العلاج الوهمي في النساء اللواتي لديهن أدلة سريرية على مرض الشريان التاجي. تم العثور على طفرة العامل V Leiden في 17 ٪ من حالات الجلطات الدموية الوريدية و 6 ٪ من الضوابط أسفرت عن نسبة أرجحية تبلغ 3.3. كان العلاج بالهرمونات البديلة يحمل نسبة أرجحية 4.5 ، لكن المستخدمين الذين يعانون من العامل الخامس لايدن لديهم نسبة أرجحية قدرها 14.1 مقارنة مع غير الحاملين للعلاج الوهمي. استنادًا إلى بيانات الوقوع من التجارب ، قدر المؤلفون خطر الإصابة بالخثار الوريدي في الحاملات غير المتجانسات وغير الحاملات للعامل V Leiden ليكون 15.2 و 5.8 لكل 1000 مريض سنة عند النساء اللائي يخضعن لبدائل الهرمون ، على التوالي ، مقارنة بـ 2.0 لكل 1000 مريض. - سنوات في غير الناقلين الذين يتناولون الدواء الوهمي. ويقدرون أن عدد النساء المصابات بمرض الشريان التاجي اللازم للفحص لمنع حدوث نوبة واحدة من الجلطات الدموية الوريدية هو 374.

تتشابه نتائج Herrington et al 9 مع نتائج دراسة نُشرت مؤخرًا من المملكة المتحدة. 10 وجدت دراسة الحالات والشواهد هذه لنساء تتراوح أعمارهن بين 45 و 64 عامًا مع نوبة أولى من الجلطات الدموية الوريدية زيادة خطر الإصابة بالجلطات الدموية الوريدية بمقدار 15 ضعفًا عند النساء اللائي يعوضن بالهرمونات مع طفرة العامل الخامس لايدن. على غرار البيانات الخاصة بالنساء اللائي لديهن طفرة في العامل V Leiden على موانع الحمل الفموية ، كانت نسبة الأرجحية هذه أكبر من نسبة الأرجحية المتوقعة لمزيج من عاملي الخطر ، وكان الخطر أعلى في السنة الأولى من الاستخدام.

الإستروجين في العلاج بالهرمونات البديلة له تأثيرات على نظام الإرقاء مشابهة لتلك الموجودة في موانع الحمل الفموية. يؤدي العلاج بالهرمونات البديلة إلى زيادة تعتمد على الجرعة في علامات تنشيط البروثرومبين وتوليد الفيبرين ، مع تعزيز انحلال الفبرين وتقليل مستويات البلازما لمثبط منشط البلازمينوجين الأول. 11-13

من الواضح أنه نادراً ما يتم وصف العلاج بالهرمونات البديلة للنساء إذا كان لديهن حدث خثاري وريدي سابق. 14 بالنسبة للنساء المعروفات أنهن مصابات بأمراض القلب التاجية وطفرة العامل الخامس لايدن دون وجود تاريخ شخصي للتخثر الوريدي ، يشير هيرينجتون وزملاؤه 9 إلى أن خطر الإصابة بالانصمام الخثاري الوريدي سوف يتجاوز بكثير أي فوائد محتملة لاستبدال الهرمونات. 9 هذا صحيح بشكل خاص بالنظر إلى أن العلاج بالهرمونات البديلة لم يثبت أنه يبطئ من تطور آفات تصلب الشرايين وقد يترافق مع زيادة في أحداث الشريان التاجي في العديد من تجارب الوقاية الثانوية بما في ذلك HERS. 15،16 قد يترافق إعطاء موانع الحمل الفموية أو العلاج بالهرمونات البديلة للنساء المصابات بطفرات تخثرية وعامل خطر قلبية مع زيادة خطر احتشاء عضلة القلب. 17-19

يتم وصف العلاج بالهرمونات البديلة لملايين النساء والذي يمكن أن يرتبط بآثار جانبية خطيرة. لا يقتصر الانصمام الخثاري الوريدي بأي حال من الأحوال على أولئك الذين يعانون من عيوب تخثرية يمكن تحديدها. نظرًا لأن التجارب المستقبلية لم تظهر بعد أن العلاج بالهرمونات البديلة يقلل من خطر حدوث مضاعفات الجلطة الشريانية ، يمكن القول بشدة أنه يجب على الأطباء الامتناع عن وصف الدواء لهذا الغرض بدلاً من فحص النساء بحثًا عن طفرات مثل العامل الخامس لايدن للقضاء على النساء في مخاطر عالية لمضاعفات الجلطات الوريدية.

بدعم جزئي من دائرة البحوث الطبية التابعة لإدارة شؤون المحاربين القدامى.


يتحدث الى لائق بدنيا في مقال آخر ، تحدث الدكتور شهيد جميل أيضًا عن كيف أن المتغيرات والطفرات هي عملية طبيعية تحدث في الفيروسات ، وليست مدعاة للقلق في معظم الحالات.

يقول الدكتور ميشرا: "غالبًا ما تتحور الفيروسات دون أي عواقب. لكن تلك الطفرات القادرة على إصابة الناس بشكل متساوٍ أو أكثر كفاءة ، هي تلك التي نعتبرها متغيرات محددة".

المتغيرات تصبح "متغيرات مثيرة للقلق" في ظل حالتين ،

  • عندما ينتشر بشكل أسرع ويبدأ في تكوين أكثر من 5 في المائة أو 10 في المائة من العدوى.
  • إذا كانت هناك طفرات نعتقد أنها قد تخلق مشاكل من حيث الأعراض أو اللقاحات.

يقول ، "في حالة المتغيرات التي تنتشر بشكل أسرع ولكن ليس لها أي نتائج أخرى مختلفة ، فإنها تُعرف باسم" المتغيرات ذات الأهمية "وستستمر مراقبتها بحثًا عن أي تغييرات أخرى".

يقول الدكتور ميشرا عندما يتعلق الأمر بالمتغيرات المثيرة للقلق ،


يمكن أن تصبح عملية إصلاح الحمض النووي الطبيعية مصدرًا رئيسيًا للطفرات في السرطان

الطفرات المفرطة هي حدث غير عادي يمكن أن يؤدي إلى العديد من الطفرات المجاورة في وقت واحد ، مما يؤدي إلى إلحاق أضرار جسيمة بموادنا الجينية ومن المحتمل أن يتسبب في الإصابة بالسرطان. النوع الأكثر شهرة من فرط الطفرات الموضعية ، والذي يسمى الدش الطفري أو العاصفة الرعدية ، غير شائع تمامًا ويؤدي إلى العديد من الطفرات المتراكمة في منطقة صغيرة ، على سبيل المثال. جين واحد.

اكتشف باحثون من مختبر علوم بيانات الجينوم التابع لـ IRB Barcelona ، بقيادة باحث ICREA فران سوبك ، نوعًا جديدًا من التحولات المفرطة يسمى ضباب الطفرات ، والذي يمكن أن يولد مئات الطفرات في كل خلية. تنتشر مثل هذه الطفرات على نطاق واسع ، ولكنها تتراكم في أهم مناطق الجينوم ، حيث توجد الجينات (ما يسمى بالكروماتين الحقيقي). حقيقة أن هذه الطفرات منتشرة تفسر سبب بقائها غير مكتشفة حتى الآن.

من المثير للدهشة أن العلماء قد حددوا أيضًا أن نوع الطفرات المفرطة المكتشفة حديثًا مرتبط بعملية إصلاح الحمض النووي الطبيعية. عندما تشعر الخلايا بعدم تطابق في الحمض النووي الخاص بها ، فإنها تخضع لرد فعل لإصلاح الحمض النووي ، من أجل الحفاظ على المعلومات الجينية. بشكل ملحوظ ، يمكن أن يقترن هذا التفاعل بإنزيم APOBEC - الذي تستخدمه الخلايا البشرية عادةً للدفاع ضد الفيروسات وله دور مهم في مكافحة التهاب الكبد وفيروس نقص المناعة البشرية. يشير العمل الذي قام به مختبر علوم بيانات الجينوم إلى أنه في بعض الحالات ، عندما تكون كل من إنزيمات APOBEC وعملية إصلاح الحمض النووي نشطة في نفس الوقت ، تختطف APOBEC عملية إصلاح الحمض النووي ، مما يؤدي إلى حدوث طفرات ضبابية.

يشرح فران سوبك: "نعتقد أن ضباب الطفرات الذي يحركه APOBEC لديه إمكانات مطفرة تتطابق أو حتى تتجاوز تلك الموجودة في المواد المسرطنة القوية المعروفة ، مثل دخان التبغ أو الأشعة فوق البنفسجية". تشير الأعمال الحديثة التي أجرتها مجموعات بحثية أخرى إلى أن العملية تبدو أكثر نشاطًا في السرطانات المنتشرة في مراحلها الأخيرة: فهي تساعد السرطان على التطور ، وتمكنه من مقاومة الأدوية والإشعاع. يضيف سوبك: "تجعل هذه النتيجة APOBEC هدفًا جذابًا لعلاج السرطان ، وإزالة قدرته على التطور وأن يصبح أكثر عدوانية".

أصل نصف الطفرات في بعض سرطانات الرئة والثدي

أدى التحليل الشامل لأكثر من 6000 جينوم سرطاني بشري ، بما في ذلك أورام الرئة وأورام الثدي والأورام الميلانينية ، من بين أمور أخرى ، إلى اكتشاف أن ضباب الطفرات هو ظاهرة شائعة. يقول ديفيد ماس بونتي ، المؤلف الأول للدراسة وطالب الدكتوراه في مختبر بيانات الجينوم: "أكثر من نصف طفرات APOBEC في بعض سرطانات الرئة أو الثدي يتم إنشاؤها بواسطة آلية فرط الطفرة التي وجدناها".

من المعروف أن بعض أنواع السرطان ، مثل سرطان عنق الرحم أو بعض سرطانات الرأس والرقبة ، ناتجة عن الفيروسات. ومع ذلك ، فقد وجدت هذه الدراسة الطفرات التي تسببها نظام APOBEC هذا ليس فقط في هذه الأورام ولكن أيضًا في السرطانات غير المعروفة حاليًا بأنها مرتبطة بالفيروسات. يجب أن يوضح المزيد من العمل ما الذي يطلق نظام APOBEC. ويضيف ماس بونتي: "قد يكون لفهم APOBEC بشكل أفضل آثار واسعة النطاق على علاج السرطان".

طريقة HyperClust الإحصائية

صمم Mas-Ponte و Supek طريقة إحصائية ، تسمى HyperClust ، يمكنها بسرعة تحليل كميات كبيرة من البيانات الجينية البشرية للعثور على عمليات طفرة غير عادية يمكن أن تؤدي إلى طفرات متزامنة ، مثل حالات الضباب الطفري. تم وصف هذه الطريقة الإحصائية في المقالة التي تم نشرها في علم الوراثة الطبيعي، ومتاح أيضًا كبرنامج مفتوح المصدر في مستودع Github.

تم تمويل هذا العمل من قبل ERC Start Grant "HYPER-INSIGHT" الممنوحة إلى الباحث Fran Supek ICREA و EMBO Young Investigator ومنحة Severo Ochoa الممنوحة إلى IRB Barcelona. حصل David Mas-Ponte على زمالة FPI-SO.


طفرات فك التشفير ومتغيرات فيروس COVID-19 المتطور

من الرماد إلى الرماد: حرق جثث جثث الموتى بسبب Covid-19 في قرية Channenahalli بالقرب من بنغالورو | بهانو براكاش شاندرا

Mea culpa ، rues Anurag Agarwal. صاغ Agarwal ، رئيس معهد CSIR لعلم الجينوم والبيولوجيا التكاملية (CSIR-IGIB) في نيودلهي ، مصطلح "متحولة مزدوجة" ، والتي أصبحت الكلمة الطنانة في الهند الآن. لكنه يقول إنه لم يقصد أبدًا أن تكون جزءًا من اللغة الشائعة.

يقول أغاروال: "كنا نكتب ملاحظة علمية ، حيث كنا نصف متغيرًا جديدًا للقلق (VoC) تم العثور عليه". كان لهذا النوع من فيروس SARS-CoV-2 ، الذي تم تحديده لأول مرة في ولاية ماهاراشترا ، العديد من الطفرات ، كما هو الحال مع الأجيال الجديدة من الفيروسات. ومع ذلك ، من بين هذه الطفرات ، كان اثنان من الطفرات ذات أهمية خاصة ، حيث أظهروا "الهروب المناعي" في المختبر. هذا يعني أنه عندما زرع علماء الوراثة جينومات الفيروس في المختبر وأخضعوها لضغط شديد من الأجسام المضادة ، والذي من شأنه أن يحيد الفيروس بشكل فعال ، فإن بعض الطفرات لا تزال على قيد الحياة.

باستخدام طريقة تسمية تسمى Pango (هناك طرق تسمية متعددة ، والتي تسبب الكثير من الارتباك حتى بين المجتمع العلمي ، وننسى الأشخاص العاديين) ، حددوا هذا المتغير من خلال اسم صوت غير مثير للاهتمام يسمى B.1.617 ، مع وضع علامة على اثنين من الطفرات المختلفة. هذه الطفرات هي E484Q و L452R ، وهي مجرد رموز للنقطة الموجودة على الجينوم التي يتم فيها استبدال حمض أميني معين (يشار إليه بالحرف) بآخر. يوضح أغاروال: "أثناء كتابة الورقة ، كان علينا أن نتحدث مرارًا وتكرارًا عن المتغير ، وقد أشرت إليه في مرحلة ما على أنه المتحول المزدوج".

سمعت هذه الكلمة الجذابة لأول مرة علنًا في 24 مارس ، عندما استخدمها وزير الصحة في الاتحاد ، راجيش بوشان ، في إحاطته الإعلامية. وقبل أن يعرفوا ذلك ، كان المصطلح متداولًا من قبل الجميع تقريبًا. كما تسبب في قدر من القلق ، حيث بدأ الناس يعتقدون خطأً أن الطفرة المزدوجة جعلت الفيروس عدوًا أسوأ من سلسلة ووهان الأجداد.

بعد أسابيع قليلة ، حدث تطوران. لاحظ بعض العلماء أن هناك طفرة أخرى ، P681R ، على متغير B.1.617 كانت "مثيرة للاهتمام" لأن هذه الطفرة "ربما تساعد الفيروس على دخول الخلية المضيفة بسهولة أكبر" ، على حد تعبير عالم الفيروسات سوميترا داس ، الذي يرأس الجمعية الوطنية. معهد علم الجينوم الطبي الحيوي (NIBMG) ، كالياني ، غرب البنغال. لذلك ، بدأ الناس يتحدثون عن المتحولة المزدوجة كونها في الواقع "متحولة ثلاثية" وبالتالي فهي مخيفة أكثر. يقول أغاروال: "إنه نفس الشكل - B.1.617". "كنا ندرس من أجل الهروب المناعي ، لذلك حددنا الطفرتين اللتين ربطناهما بهذه السمة. لقد لاحظنا أيضًا P681R ، لكن في قصتنا ، لم يكن الأمر سوى رفيق كان البطلان الأولين. بالنسبة لشخص آخر ، كان يبحث عن خاصية أخرى ، أصبح P681R نجم السرد ".

ولكن حتى قبل توضيح هذا الالتباس ، قامت NIBMG بوضع علامة على متغير آخر ، B.1.618 ، وهو السائد في ولاية البنغال الغربية. نظرًا لأنه حدد ثلاث طفرات هنا ، فقد تمت الإشارة إلى هذا أيضًا باسم المتحولة الثلاثية ، مرة أخرى ، مما ينسب إليه ثلاثة أضعاف القدرة على التدمير. وهكذا ، يوجد الآن اثنان من المسوخ الثلاثي يقومان بجولات البلاد ، وهما ماهاراشترا المزدوج وهو ثلاثي ، والبنغال ثلاثي! 618 ، كما هو أفضل لتسمية هذا المتغير ، لا يزال قيد الدراسة. يقول داس إنه لم يتم تصنيفها حتى على أنها VoC. لم تظهر أي إمكانية للانتشار بشكل أكثر ضراوة أو مهاجمة أكثر فتكًا.

الارتباك السائد طبيعي فقط ، بالنظر إلى النظام المعقد وغير القياسي لتسمية الفيروسات ومتغيراتها. يقول أغاروال في دفاعه: "لا يهتم عامة الناس عادةً بأسماء الفيروسات ، ونظام الأرقام والحروف الحالي يعمل جيدًا للمجتمع العلمي ، لأننا جميعًا نعرف الرموز ، ويمكننا على الفور تحديد الطفرات بأسمائها". مباشرة من جينوم الأسلاف (جينوم آدم أو حواء) ​​، يمكن أن تكون شجرة النشوء والتطور للفيروس أبجدية محيرة للعقل وحساء رقمي ، حيث تتجمع الأجيال اللاحقة في طبقات وسلالات ومتغيرات. ليس من المستغرب أن تدخل مصطلحات مثل متحولة مزدوجة أو إجهاد المملكة المتحدة إلى مفرداتنا ، وكلها مضللة للغاية.

حصل النسب B.1.1.7 ، المشار إليه باسم متغير المملكة المتحدة ، على اسمه لأنه تم تحديده لأول مرة في المملكة المتحدة ، فهذا لا يعني أنه نشأ في المملكة المتحدة. على الرغم من وصمة العار التي تطلقها مثل هذه الأسماء على مكان ما ، إلا أنها أصبحت شائعة. لقد رأينا ذلك مع فيروسات الإنفلونزا الإسبانية والإيبولا والنيفا وزيكا ومجموعة من الأمراض. على الرغم من جهود المجتمع العلمي لعدم ربط الوباء بالصين ، فإن اتصال ووهان لا يزال يتعذر محوه. تعمل منظمة الصحة العالمية على وضع نظام تسمية موحد ، ولكن في حين أن ذلك قد يخفف من الارتباك بين العلماء ، بالنسبة للأشخاص العاديين ، فإنه سيظل في الغالب مبتذلاً.

تمت الإشارة إلى 618 لأول مرة باسم البديل الهندي ، على الرغم من إصرار بوشان على عدم وجود مثل هذا المصطلح. في حين أن محاولته كانت لضمان عدم وصمة العار للهند ، فإن الحقيقة هي أنه بالنظر إلى اتساع الهند ، لا يمكن أن يكون هناك نوع هندي واحد. بالفعل ، يُطلق على 617 اسم متغير ماهاراشترا ، بينما يُطلق على 618 اسم البنغال البديل. ولكن إذا تم الإبلاغ عن متغير آخر من هذه الحالات ، فماذا سيتم تسميته ، يسأل Agarwal. يلاحظ راكيش ميشرا ، رئيس مركز البيولوجيا الخلوية والجزيئية ومقره حيدر أباد ، "في الوقت الحالي ، نظرًا للعدد الكبير من الحالات ، يجب أن يكون لدى الهند أكبر مجموعة من المتغيرات أيضًا" ، مضيفًا أن الطفرة هي طبيعة الفيروسات. فقط إذا ارتبطت الطفرة بعدوى أكثر شدة أو مقاومة للأجسام المضادة ، فإنها تصبح مصدر قلق.

في الواقع ، خلال العام الماضي ، تغيرت خريطة الفيروس للبلد بشكل ديناميكي. في الأسابيع الأولى ، وصلت سلسلة جبال ووهان إلى الهند ، ولكن بسرعة كافية ، ظهر متغير يسمى D614G في جميع أنحاء الهند ، كما يقول ميشرا. ظلت مهيمنة حتى فصل الشتاء ، عندما جاء البديل البريطاني عن طريق الرحلات الجوية. يُعرف هذا المتغير بارتفاع معدل العدوى أو الانتشار ، ولكن ليس بالضرورة ارتفاع معدلات المراضة لدى المرضى.

خسارة لا تُحصى: عمر فاروق من سريناغار يقيس قبرًا محفورًا لأمه المتوفاة بكوفيد -19 | وكالة فرانس برس

بحلول ديسمبر ، بدأت الخريطة المتنوعة للهند تتغير بشكل ملحوظ. لم يتم احتواء متغير المملكة المتحدة ، على الرغم من كونه VoC ، بشكل صحيح ، خاصة في شمال الهند. في البنجاب ، تمثل الآن 90 في المائة من الحالات في دلهي ، لنصف الحالات التي تم أخذ عينات منها ، تليها المتغير 617. من ناحية أخرى ، على الرغم من الرحلات الجوية الدولية إلى مومباي وحيدر أباد ، فإن تحديد الركاب الدوليين الذين يحملون هذه العدوى والحجر الصحي يعني أن البديل البريطاني أقل رسوخًا في شبه الجزيرة. بينما في ولاية ماهاراشترا ، 617 هو البديل الأكثر انتشارًا ، في أماكن أخرى في الجنوب ، يعتبر N440K أكثر شيوعًا. يقول ميشرا: "إنه ليس له عواقب حقيقية لأنه لا يؤدي إلى أي عدوى أكبر". تظهر المتغيرات البرازيلية وجنوب إفريقيا أيضًا في الهند ، ولكن في عيار منخفض جدًا.

في ولاية البنغال الغربية ، يتنافس 618 و 617 على السيادة ، ويشعر العلماء أن المحرك 617 الأكثر قدرة على الحركة قد يصبح مهيمنًا بل ويتفوق على 618. وما زالت زيادة سرعة أوتار براديش قيد الدراسة. في حين أنه من المحتمل أنه بسبب القرب ، قد يكون لأوتار براديش نمط متغير مماثل مثل دلهي ، يقول سوجيت سينغ ، رئيس المركز الوطني لمكافحة الأمراض ، الذي يحلل عينات من شمال الهند ، إن الصورة ستتضح بمجرد الانتهاء من تحليلها. . يقول علماء الوراثة إن الطفرة في بنغالورو لا يهيمن عليها أي متغير معين. بشكل عام ، يعتبر البديل البريطاني هو السائد في البلاد ، ويرجع ذلك إلى حد كبير إلى اندفاع شمال الهند.

ماذا يعني فهم هذه المتغيرات للناس؟ لا شيء ، كما يقول العلماء. يظل انتشار الفيروس كما هو ، بغض النظر عن البديل. حتى الآن هو العلاج. وهكذا ، يعمل البروتوكول الحالي للوقاية. يشير ميشرا: "في البنجاب ، على سبيل المثال ، البديل البريطاني هو المسيطر ، لكن أي متغير كان سيؤدي نفس الوظيفة ، عندما كان الناس يتجمعون بأعداد كبيرة للاحتجاجات والحفلات".

هذه الدراسات الجينومية هي أكثر لفهم الباحثين في الدراسات الوبائية. ستُظهر خريطة متغيرة ديناميكية كيفية انتشار العدوى ، وبالتالي يمكن استخدامها بشكل فعال في إدارة الوباء ، عن طريق قطع المنطقة التي تنتشر منها فعليًا. أظهر تحديد هوية 617 في المملكة المتحدة وكندا مسار سفرها.

تساعد الدراسات الجينومية أيضًا في إنشاء الأدوية واللقاحات المستهدفة. حتى الآن ، لا يوجد دواء مثبت لعلاج كوفيد -19. لكن الدراسات تظهر أن بروتوكول العلاج الحالي واللقاحات تعمل بشكل فعال ضد جميع المتغيرات الموجودة. هذا لأن الطفرات تحدث فقط في نقطة معينة ، لكن اللقاح يستهدف عدة نقاط على الفيروس. وهكذا ، حتى إذا أظهر موقع معين "هروبًا مناعيًا" في ظل الظروف المختبرية ، فسيظل اللقاح قادرًا على استهداف الفيروس ككل. في الوقت الحاضر على الأقل. مرة أخرى ، لم تغير أي من الطفرات الطريقة التي انتشر بها الفيروس ، لذا فإن القناع والمسافة الاجتماعية ونظافة اليدين تعمل ضد الجميع. هذا للحاضر. أما بالنسبة لمستقبل العدوى ، فإن que sera sera (ما سيكون ، سيكون).

يُظهر متغير الاهتمام تغييرات في الارتباط بالمستقبل. يمكن أن يكون لها القدرة على تقليل تحييد الأجسام المضادة الناتجة عن نوبة سابقة من العدوى أو التطعيم ، أو التأثير التشخيصي المحتمل أو الزيادة المتوقعة في قابلية انتقال المرض أو شدته. يعتبر B.1.617 في الغالب مؤهل VoI ، وقد لا يتم تأهيل B.1.618 حتى باعتباره VoI.

المتغير المثير للقلق هو متغير يوجد له دليل على زيادة قابلية الانتقال وشدة المرض ، وانخفاض كبير في تحييد الأجسام المضادة من العدوى أو التطعيم السابق ، وانخفاض فعالية العلاج وفشل التحري التشخيصي. البديل البريطاني هو VoC.


خذ DNA مزدوج

من فصل علم الأحياء إلى "CSI" ، يُقال لنا مرارًا وتكرارًا أن الجينوم الخاص بنا يقع في قلب هويتنا. اقرأ التسلسلات في الكروموسومات لخلية واحدة ، وتعلم كل شيء عن المعلومات الجينية للشخص - أو ، كما تقول شركة 23andme ، وهي شركة اختبار جينية بارزة ، على موقع الويب الخاص بها ، "كلما زادت معرفتك بالحمض النووي الخاص بك ، زادت معرفتك عن نفسك."

لكن العلماء يكتشفون - بدرجة مدهشة - أننا نحتوي على أعداد جينية عديدة. منذ وقت ليس ببعيد ، اعتقد الباحثون أنه من النادر أن تختلف الخلايا في شخص سليم جينيًا بشكل كبير. لكن العلماء يجدون أنه من الشائع جدًا أن يمتلك الفرد جينومات متعددة. بعض الناس ، على سبيل المثال ، لديهم مجموعات من الخلايا بها طفرات غير موجودة في بقية الجسم. بعضها لديه جينومات أتت من أشخاص آخرين.

قال ألكسندر أوربان ، عالم الوراثة بجامعة ستانفورد: "كان هناك همسات في المصفوفة حول هذا الأمر منذ سنوات ، وحتى عقود ، ولكن فقط بمعنى افتراضي للغاية". وقال إنه حتى قبل ثلاث سنوات ، فإن اقتراح وجود تباين جيني واسع النطاق في جسم واحد كان سيقابل بالتشكيك. "كنت لتركض في اتجاه الحائط."

لكن سلسلة من الأوراق البحثية الأخيرة للدكتور أوربان وآخرون أظهرت أن تلك الهمسات لم تكن مجرد افتراضات. الاختلاف في الجينوم الموجود في شخص واحد أكبر من أن يتم تجاهله. قال الدكتور أوربان: "نحن نعلم الآن أنها موجودة". "الآن نحن نرسم خريطة لهذه القارة الجديدة."

كتب الدكتور جيمس ر. لوبسكي ، الخبير البارز في الجينوم البشري في كلية بايلور للطب ، في مراجعة حديثة في مجلة Science أن وجود الجينومات المتعددة في الفرد يمكن أن يكون له تأثير هائل على ممارسة الطب. قال في مقابلة: "لقد غيرت طريقة تفكيري".

يجد العلماء روابط من جينومات متعددة إلى أمراض نادرة معينة ، وقد بدأوا الآن في التحقيق في الاختلافات الجينية لإلقاء الضوء على الاضطرابات الأكثر شيوعًا.

تثير وجهة نظر العلم المتغيرة أيضًا أسئلة حول كيفية استخدام علماء الطب الشرعي لأدلة الحمض النووي لتحديد هوية الأشخاص. كما أنه يطرح تحديات أمام المستشارين الوراثيين ، الذين لا يستطيعون افتراض أن المعلومات الجينية من خلية واحدة يمكن أن تخبرهم عن الحمض النووي في جميع أنحاء جسم الشخص.

مخطط الإنسان

عندما تجمع البويضة والحيوانات المنوية الحمض النووي الخاص بهما ، فإن الجينوم الذي ينتجانه يحتوي على جميع المعلومات الضرورية لبناء إنسان جديد. عندما تنقسم البويضة لتشكل جنينًا ، فإنها تنتج نسخًا جديدة من ذلك الجينوم الأصلي.

على مدى عقود ، اكتشف علماء الوراثة كيف يمكن للجنين استخدام التعليمات الموجودة في جينوم واحد لتطوير العضلات والأعصاب والأجزاء العديدة الأخرى من جسم الإنسان. يستخدمون أيضًا التسلسل لفهم الاختلافات الجينية التي يمكن أن تزيد من خطر الإصابة بأمراض معينة. يمكن لمستشاري الوراثة أن ينظروا في نتائج الفحوصات الجينية لمساعدة المرضى وأسرهم على التعامل مع هذه الأمراض - تغيير نظامهم الغذائي ، على سبيل المثال ، إذا كانوا يفتقرون إلى جين لإنزيم مهم.

انخفضت تكلفة تسلسل الجينوم بأكمله بشكل كبير في العشرين عامًا الماضية - الآن بضعة آلاف من الدولارات ، انخفاضًا من 3 مليارات دولار للشراكة بين القطاعين العام والخاص التي حددت تسلسل الجينوم البشري الأول - حيث بدأ الأطباء في تسلسل الجينوم بأكمله جينومات بعض المرضى. (يمكن إجراء التسلسل في أقل من 50 ساعة.) وهم يحددون الروابط بين الطفرات والأمراض التي لم يسبق رؤيتها من قبل.

ومع ذلك ، فإن كل هذه الاختبارات القوية تستند إلى افتراض أن الجينوم داخل أجسامنا هو جينوم. يعتقد العلماء أن بإمكانهم النظر إلى الجينوم المأخوذ من الخلايا المأخوذة في مسحة الخد وأن يكونوا قادرين على التعرف على جينومات الخلايا في الدماغ أو الكبد أو في أي مكان آخر في الجسم.

في منتصف القرن العشرين ، بدأ العلماء في الحصول على أدلة على أن هذا لم يكن صحيحًا دائمًا. في عام 1953 ، على سبيل المثال ، تبرعت امرأة بريطانية بنصف لتر من الدم. اتضح أن بعض دمها كان من النوع O والبعض الآخر من النوع A. وخلص العلماء الذين درسوها إلى أنها حصلت على جزء من دمها من شقيقها التوأم في الرحم ، بما في ذلك الجينوم في خلايا دمه.

يبدو أن الكيمرية ، كما أصبحت معروفة مثل هذه الظروف ، كانت نادرة لسنوات عديدة. قالت الدكتورة ليندا راندولف ، طبيبة الأطفال في مستشفى الأطفال في لوس أنجلوس ، وهي مؤلفة مراجعة عن الكيمرية نُشرت في المجلة الأمريكية للوراثة الطبية في يوليو: "لكن يمكن أن يكون الأمر أكثر شيوعًا مما أدركناه".

يمكن أن ينتهي الأمر بالتوائم مع إمداد مختلط من الدم عندما يحصلون على المغذيات في الرحم من خلال نفس مجموعة الأوعية الدموية. في حالات أخرى ، قد تندمج بيضتان مخصبتان معًا. قد تمر هذه المخلوقات الجنينية المزعومة بالحياة بسعادة غير مدركة لأصولها.

اكتشفت إحدى النساء أنها كانت مجرد وهم في سن 52. وفي حاجة إلى زرع كلية ، تم اختبارها حتى تجد تطابقًا. أشارت النتائج إلى أنها لم تكن أماً لاثنين من أطفالها الثلاثة. اتضح أنها نشأت من جينومين. أحد الجينوم أدى إلى ظهور دمها وبعض بيضها حملت بيوض أخرى جينوم منفصل.

يمكن للنساء أيضًا اكتساب الجينوم من أطفالهن. بعد ولادة الطفل ، قد يترك بعض الخلايا الجنينية في جسم أمه ، حيث يمكن أن تنتقل إلى أعضاء مختلفة ويتم امتصاصها في تلك الأنسجة. قال الدكتور راندولف: "من المحتمل جدًا أن تكون أي امرأة حامل مجرد وهم".

في كل مكان نظرتم

عندما بدأ العلماء في البحث عن الكيميرات بشكل منهجي - بدلاً من انتظار ظهورهم في اختبارات طبية محيرة - وجدواها في نسبة عالية بشكل ملحوظ من الناس. في عام 2012 ، أجرى علماء كنديون عمليات تشريح لأدمغة 59 امرأة. ووجدوا خلايا عصبية بها كروموسومات Y في 63 بالمائة منهم. من المحتمل أن الخلايا العصبية تطورت من خلايا نشأت في أبنائها.

في المجلة الدولية للسرطان في أغسطس ، أفاد يوجين ديموليا من معهد دانا فاربر للسرطان في بوسطن وزملاؤه أن الخلايا الذكرية يمكنها أيضًا اختراق أنسجة الثدي. عندما بحثوا عن كروموسومات Y في عينات من أنسجة الثدي ، وجدواها في 56 بالمائة من النساء اللائي تم فحصهن.

قبل قرن من الزمان ، اكتشف علماء الوراثة طريقة واحدة يمكن للناس من خلالها اكتساب جينومات جديدة. كانوا يدرسون "حيوانات الفسيفساء" ، وهي مخلوقات نادرة ذات بقع غريبة الألوان من الفراء. لم ترث الحيوانات جينات هذه البقع من والديها. بدلاً من ذلك ، أثناء الأجنة ، اكتسبوا طفرة في خلية جلدية تنقسم لإنتاج رقعة ملونة.

الفسيفساء ، كما أصبحت هذه الحالة معروفة ، كان من الصعب دراستها على البشر قبل عصر تسلسل الحمض النووي. يمكن للعلماء فقط اكتشاف الحالات التي كانت فيها الطفرات والتأثيرات كبيرة.

في عام 1960 ، وجد الباحثون أن أحد أشكال اللوكيميا ناتج عن الفسيفساء. تتحور خلية الدم تلقائيًا أثناء انقسامها ، وتنقل جزءًا كبيرًا من كروموسوم إلى آخر.

أضافت الدراسات اللاحقة دعمًا لفكرة أن السرطان هو نتيجة طفرات في خلايا معينة. لكن العلماء لم يكن لديهم فكرة كبيرة عن مدى انتشار حالات الفسيفساء خارج السرطان.

“We didn’t have the technology to systematically think about them,” said Dr. Christopher Walsh, a geneticist at Children’s Hospital in Boston who recently published a review on mosaicism and disease in Science. “Now we’re in the midst of a revolution.”

Benign Differences

The latest findings make it clear that mosaicism is quite common — even in healthy cells.

Dr. Urban and his colleagues, for example, investigated mutations in cells called fibroblasts, which are found in connective tissue. They searched in particular for cases in which a segment of DNA was accidentally duplicated or deleted. As they reported last year, 30 percent of the fibroblasts carried at least one such mutation.

Michael Snyder of Stanford University and his colleagues searched for mosaicism by performing autopsies on six people who had died of causes other than cancer. In five of the six people they autopsied, the scientists reported last October, they found cells in different organs with stretches of DNA that had accidentally been duplicated or deleted.

Now that scientists are beginning to appreciate how common chimerism and mosaicism are, they’re investigating the effects of these conditions on our health. “That’s still open really, because these are still early days,” Dr. Urban said.

Nevertheless, said Dr. Walsh, “it’s safe to say that a large proportion of those mutations will be benign.” Recent studies on chimeras suggest that these extra genomes can even be beneficial. Chimeric cells from fetuses appear to seek out damaged tissue and help heal it, for example.

But scientists are also starting to find cases in which mutations in specific cells help give rise to diseases other than cancer. Dr. Walsh, for example, studies a childhood disorder of the brain called hemimegalencephaly, in which one side of the brain grows larger than the other, leading to devastating seizures.

“The kids have no chance for a normal life without desperate surgery to take out half of their brain,” he said.

Dr. Walsh has studied the genomes of neurons removed during those surgeries. He and his colleagues discovered that some neurons in the overgrown hemisphere have mutations to one gene. Two other teams of scientists have identified mutations on other genes, all of which help to control the growth of neurons. “We can get our hands on the mechanism of the disease,” said Dr. Walsh.

Other researchers are now investigating whether mosaicism is a factor in more common diseases, like schizophrenia. “This will play itself out over the next 5 or 10 years,” said Dr. Urban, who with his colleagues is studying it.

Moving Cautiously

Medical researchers aren’t the only scientists interested in our multitudes of personal genomes. So are forensic scientists. When they attempt to identify criminals or murder victims by matching DNA, they want to avoid being misled by the variety of genomes inside a single person.

Last year, for example, forensic scientists at the Washington State Patrol Crime Laboratory Division described how a saliva sample and a sperm sample from the same suspect in a sexual assault case didn’t match.

Bone marrow transplants can also confound forensic scientists. Researchers at Innsbruck Medical University in Austria took cheek swabs from 77 people who had received transplants up to nine years earlier. In 74 percent of the samples, they found a mix of genomes — both their own and those from the marrow donors, the scientists reported this year. The transplanted stem cells hadn’t just replaced blood cells, but had also become cells lining the cheek.

While the risk of confusion is real, it is manageable, experts said. “This should not be much of a concern for forensics,” said Manfred Kayser, a professor of Forensic Molecular Biology at Erasmus University in Rotterdam. In the cases where mosaicism or chimerism causes confusion, forensic scientists can clear it up by other means. In the Austrian study, for example, the scientists found no marrow donor genomes in the hair of the recipients.

For genetic counselors helping clients make sense of DNA tests, our many genomes pose more serious challenges. A DNA test that uses blood cells may miss disease-causing mutations in the cells of other organs. “We can’t tell you what else is going on,” said Nancy B. Spinner, a geneticist at the University of Pennsylvania, who published a review about the implications of mosaicism for genetic counseling in the May issue of Nature Reviews Genetics.

That may change as scientists develop more powerful ways to investigate our different genomes and learn more about their links to diseases. “It’s not tomorrow that you’re going to walk into your doctor’s office and they’re going to think this way,” said Dr. Lupski. “It’s going to take time.”


Project Report on DNA

An exclusive project report on DNA. This project report will help you to learn about: 1. Introduction to DNA 2. Constituents of DNA 3. Molecular Structure 4. Forms 5. DNA as the Genetic Material 6. DNA Content 7. Unique and Repetitive DNA.

  1. Project Report on Introduction to DNA
  2. Project Report on the Constituents of DNA
  3. Project Report on the Molecular Structure of DNA
  4. Project Report on the Forms of DNA
  5. Project Report on DNA as the Genetic Material
  6. Project Report on DNA Content
  7. Project Report on Unique and Repetitive DNA

Project Report # 1. Introduction to DNA:

The chromosomes are made up of two types of macromolecules — proteins and nucleic acids. The nucleic acids are of two types, viz. deoxyribonucleic acid (DNA) and ribonucleic acid (RNA). DNA and RNA are chain-like macro-molecules that function in the storage and trans­fer of genetic information.

They are major com­ponents of all cells. DNA is found predominant­ly in the nucleus while RNA is predominant in cytoplasm. DNA is the genetic material of most organisms including many viruses. Some viruses,’ however, have RNA as their genetic material.

Deoxyribonucleic acid (DNA) is found in the cells of living organisms except plant viruses. DNA is double stranded but in some cases like bacteriophages (e.g., φ x 174) the DNA is single stranded and remains coiled and enclosed in a protein coat. DNA may be circular in bacteria, spirally coiled and un-branched threads in mito­chondria and plastids of eukaryotic cells.

Project Report # 2. Constituents of DNA:

Deoxyribonucleic acid is a long chain poly­mer (polynucleotide) composed of monomeric units, called nucleotides. Each nucleotide is composed of a nucleoside (a sugar and a base) and a phosphate group.

Chemical analysis of highly purified DNA have shown that it is made of four kinds of monomeric building blocks each of which con­tains three types of molecules :

The phosphoric acid (H3ص4) in the nucleic acid is called phosphate (Fig 4.1). Phosphoric acid has three reactive hydroxyl (-OH) groups of which two are involved in forming sugar phosphate backbone of DNA. The phosphate makes a nucleotide negatively charged.

DNA contains a five carbon sugar, hence it is a pentose sugar (Fig. 4.1). Since one oxygen atom at the 2′ carbon is missing, hence it gets its name 2′-deoxyribose. Four of the five carbon atoms plus a single oxy­gen atom forms a five-membered ring. The fifth carbon atom is outside the ring and forms a part of a -CH2 group.

Different types of hetero­cyclic nitrogen containing ring compounds are found in the structure of DNA. They are called simply as bases because they can combine with H^ in acidic solution. They are also referred to as nitrogenous bases due to presence of nitrogen.

The bases are of two types mainly — Pyrimidine and Purine.

Pyrimidine bases are made up of a six-membered pyrimidine ring which is similar to the benzene ring except that it contains nitrogen in place of carbon at the positions 1 and 3. Pyrimidine bases are of 2 types — thymine and cytosine (Fig. 4.1), commonly abbreviated as T and C respectively.

Purine is a derivative of pyrimidine. It consists of a pyrimidine ring and a five- membered imidazole ring (having nitrogen at 7 and 9 positions) which are fused together at 5 and 4 positions. There are two purine com­pounds namely – adenine (A) and guanine (G) (Fig. 4.1).

In addition to the four common bases (A, T, G, C), certain other unusual bases of purine and pyrimidine derivatives, called rare or minor bases, occur in small amounts in DNA of some organisms.

In some viruses, uracil occurs in place of thymine in DNA. The T-even phages contain 5-hydroxy- methyl-cytosine in place of cytosine. These modifications protect the viral DNA from degra­dation by the host cell endonuclease. Other rare bases in DNA are 5-methyl-cytosine, N 6 -methyl- adenine, N 2 -methyl-guanine, etc.

Molar Ratio of Nitrogenous Bases in DNA (Chargaff Rules, 1955):

(i) The purine and pyrimidine components occur in equal amounts in a DNA molecule.

(ii) The amounts of adenine (A) is equivalent to the amount of thymine (T) and the amount of cytosine is equivalent to that of guanine (G).

(iii) In DNA, A + G / T + C value is always one or nearly one.

(iv) The base ratio A +T/G + C may vary in the DNA of different groups of organisms but is constant for particular species. Therefore, this ratio has been used to identify the DNA from a particular species.

Project Report # 3. Molecular Structure of DNA (Watson and Crick’s Model):

In 1953 Watson and Crick postulated a three dimensional working model of DNA, i.e., double helix structure of DNA based on the X-ray data of Wilkins and base-equivalence observed by Chargaff.

A base combined with a sugar molecule is called a nucleoside. When deoxy­ribose sugar binds with base, it makes deoxyribonucleoside. Obviously, in DNA four different nucleosides are found.

A nucleotide is derived from a nucleoside by addition of a molecule of phosphoric acid. The phosphate molecule is linked with sugar molecule at carbon number 5 or at carbon number 3 (Fig. 4.2).

The nucleotides in DNA are of 4 types:

(iv) Deoxyguanylic acid (Fig. 4.3, Table 4.1).

A number of deoxyribonucleotides are covalently linked one by one to form a polynucleotide chain, i.e., deoxyribonucleotide monomer units are united through the formation of phosphodiester bonds (a diester bond is one which involves two ester bonds). Fig. 4.4.

Watson and Crick suggested that in a DNA molecule, there are two such polynucleotide chains which are coiled about one another in a spiral.

The two polynucleotide strands are held together in their helical configu­ration by hydrogen bonding between bases in opposing strands, the resulting base pairs being stacked between the two chains perpendicular to the axis of the molecule like the steps of a spiral stair case (Fig. 4.5).

The base-pairing is specific adenine is always paired with thymine, and guanine is always paired with cytosine (Fig. 4.6). Thus, all base-pairs consist of one purine and one pyrimidine.

The specificity of base-pairing results from the hydrogen-bonding capacities of the bases in their normal configurations. In their most common structural configurations, adenine and thymine form two hydrogen bonds, guanine and cytosine form three hydrogen bonds (Fig. 4.7).

The two strands of DNA double helix are thus said to be complementary (not identical). This property, that is complementarity of the two strands, makes DNA uniquely suited to store and transmit genetic information. The base-pairs in DNA are stacked 3.4 Å apart with 10 base-pairs per turn (360°) of the double-helix.

The sugar- phosphate backbones of the two complementary strands are antiparallel, that is, they have oppo­site chemical polarity.

As one moves unidirectionally along a DNA double helix, the phos­phodiester bonds in one strand go from a 3′ car­bon of one nucleotide to a 5′ carbon of the adjacent nucleotide, whereas those in complemen­tary strand go from a 5′ carbon to a 3′ carbon. This opposite polarity of the complementary strand is very important in considering the mechanism of replication of DNA.

The high degree of stability of DNA double helices results in part from the large number of hydrogen bonds between the base-pairs and in part from the hydrophobic bonding between the stacked base-pairs. The planar sides of them are relatively nonpolar and thus tend to be water insoluble (hydrophobic).

This hydrophobic core of stacked base-pairs con- tributes considerable stability to DNA molecules present in the aqueous protoplasm’s of living cells.

Project Report # 4. Forms of DNA:

The DNA molecules exhibit a considerable amount of conformational flexi­bility. It can exist in A, B, C, D and Z forms (Table 4.2). B form (B-DNA) is the structure proposed by Watson & Crick and is the native conformation of DNA in solution.

It consists of a right-handed antiparallel double helix of sugar-phosphate backbone, with purine-pyrimidine base-pairs roughly perpendicular to the axis of the helix. The tilt of base-pairs of the helix is 6.3°. One turn of the helix consists of 10 base-pairs. The rise of the helix per base pair is 3.37 Å.

A form (A-DNA) has 11 base pairs. The base pairs are considerably tilted from the axis of the helix. The axial rise is 2.56Å. The helix observed under conditions of dehydration and high con­centrations of salt is wider and shorter than B- helix, the distinction between the major and minor grooves are reduced.

C form (C-DNA) results by reduction of hydration of the B form below 66% with excess of salt still present. The size of helix of C form DNA is greater than Å type of DNA but is sma­ller than B-DNA. It is about 31 Å. There are 9.33 base pairs per turn. The axial rise of base pairs is 3.32 Å with a tilting of about 7.8°.

D form (D-DNA) and E form (E-DNA) are found rarely as extreme variants. In case of D- form there are 8 base pairs per turn of helix. An axial rise of base pairs is 3.03 Å with tilting of about 16.7°.

In case of E-form, there are 7.5 base pairs per turn of helix. Z form (Z-DNA) is an unique left-handed (Fig. 4.8) double helical form with a zig-zag (Fig. 4.9) sugar-phosphate backbone in antiparallel organization. This DNA has been called Z-DNA.

Project Report # 5. DNA as the Genetic Material:

Transformation Experiment:

Transformation experiment was initially conducted by F. Griffith in 1928 (Fig. 4.21). The injected a mixture of two strains of Pneumococcus (Diplococcus pneumo­niae) into mice. One of these two strains, S III was virulent and other strain R II was non-virulent (causing no infection).

Heat-killed virulent S III strain when injected, showed that infectivity after heat killing is lost. The mice injected with a mixture of R II (living) and S III (heat killed) died and virulent Pneumococcus could be isolated from these mice. This phenomenon was described as transformation.

O. T. Avery, C. M. Macleod and M. McCarthy repeated Griffith’s experiment in an in vitro system in order to identify the transforming prin­ciple responsible for converting non-virulent into virulent type and reported their results in 1944 (Fig. 4.22). Virulence in Pneumococcus depends on a polysaccharide capsule which is present in viru­lent strain S III and is absent in non-virulent strain R II.

The cells of non-capsulated type – Rll were treated with an extract of DNA from capsulated strain S III. A few cells of S III type could be iso­lated from the mixture.

This phenomenon of transferring characters of one strain to another by using a DNA extract of the former is called transformation. When the extract was treated with DNAse (an enzyme which destroys DNA) this transforming ability was lost. Proteases (enzymes which destroy pro­teins) did not affect the transforming ability. These experiments thus indicated that DNA and not the protein, is the genetic material.

Hershey-Chase Experiment:

Additional direct evidence indicating that DNA is the gene­tic material was published in 1952 by A. D. Hershey and M. Chase. The experiment showed that genetic information of a particular bacterial virus (bacteriophage T2) was present in DNA. Bacteriophage T2 infects the common colon bacillus E. coli (Fig. 4.23).

The basis for Hershey-Chase experiment is that DNA contains phosphorus but no sulphur, whereas proteins contain sulphur but no phos­phorus.

Thus, Hershey and Chase were able to specifically label either (1) the phage DNA by growth in a medium containing radioactive iso­tope of phosphorus 32 P, in place of the normal isotope 31 P, or (2) phage protein coats by growth in a medium containing radioactive sulphur 35 S, in place of the normal isotope 35 S (Fig. 4.24).

When T2 phage particles labelled with 35 S were mixed with E. coli cells for a few minutes and were then subjected to shearing forces by placing the infected cells in a warring blender, it was found that most of the radioactivity (and thus the proteins) could be removed from the cells without affecting progeny phage production.

When T2 phage in which DNA was labelled with 32 P were used, essentially all radioactivity was found inside the cells, that is, it was not subjec­ted to removal by shearing in a blender (Fig. 4.25).

The sheared off phage-coats were separated from the infected cells by low-speed centrifugation which pellets (sediments) cells while leaving phage particles suspended. The results indicated that DNA of the virus enters the host cell, where­as protein coat remains outside the cell.

Since progeny viruses are produced inside the cell, Flershy and Chase’s results indicated that the genetic information directing the synthesis of both the DNA molecules and protein coats of the progeny viruses must be present in the parental DNA. Moreover, progeny particles were shown to contain some of the 32 P, but none 35 S.

Project Report # 6. DNA Content:

Large variation in DNA content among species of the same genus as well as among genera of the same family has been observed. This wide range of variation in the nuclear DNA contents among species within a genus may be partly attributed to differences in chromosome numbers.

However, species at the same ploidy level and with the same chromosome number may either show little or ‘no variation (e.g., Hordeum, Avena, etc.) or may exhibit many-fold differences (e.g., Lathyrus, Vicia, Helianthus, Crepis, Allium, etc.). This inter specific variation may be continuous or discontinuous.

Intra- specific variation in DNA content has also been reported in recent years, so that the variation of DNA among genotypes is a rule rather than an exception. This variation has sometimes been used to explain mechanism of evolution of spe­cific groups.

In general, the huge difference in DNA amount not necessarily correlated with the nature and status of the organism, is principally due to the repetitive DNA sequences present in higher amount. In the plant system, nearly 70- 80% of the DNA in the cereals is repetitive and only a fraction of the DNA controls the structural genes for qualitative characters.

In fact, the com­parison of the genomes of different plant species ranging from algae to angiosperms show marked variation in the C value.

The haploid un-replicated DNA content of an individual is described as its C value. C value is nearly of 600-fold difference within the angiosperms alone, ranging from 0.2 pg in the crucifer – Arabidopsis thaliana to 127pg in Fritillaria assavrica, a liliaceous species. This paradoxical situation in C value termed as C value paradox is principally attri­buted to repetitive DNA content.

In human, of the 3 billion base pairs which constitute the entire genome, only about 50000 genes are supposed to be present. More than 40% of the DNA is highly repetitive. In general, only a fraction of the total amount of DNA codes for structural proteins and enzymes, the rest are repeats – noncoding or coding for non-specific-effect.

Project Report # 7. Unique and Repetitive DNA:

The chromo­somes of prokaryotes contain DNA molecule with unique (non-repeated) base-pair sequences, i.e., each gene which is a linear sequence of few thousand base-pairs, present only once in the genome. If prokaryotic chromosomes are broken into many short fragments, each fragment will contain a different sequence of base-pairs.

In higher organisms on the other hand, the unique DNA sequences which are principally responsible for qualitative characters are present in much lower amount than that of the repetitive sequences. Such unique sequences are present in the chromosomes of higher organism in between repetitive sequences, controlling enzyme-protein.

The chromosomes of eukaryotes in general are very complex. Certain base sequences are repeated many times in the haploid chromosome complement, sometimes as many as million times. DNA containing such repeated sequences, called repetitive DNA, often representing a major component of the eukaryotic genome.

Types of Repetitive DNA:

The discovery of multiple copies of similar DNA sequences in chromosomes noted by Crick is a major event in the study of chro­mosome research. These repeats may be highly homogeneous, as in satellite DNA sequences in Xenopus, or may be moderate or minor in nature.

These sequences may also be inverted as in palindromes. In the chromosome structure, the highly homogeneous repeats may be tandem located in one locus in cluster form, whereas minor or moderate repeats may be interspersed located in intercalary positions or terminal. In tandem repeats, each sequence arranged adja­cent to the other forming monomeric unit.

Tandem repeats are of two types — similar repeats and complex combinations of different repeats, interspersed repeats are highly scattered, i.e., dispersed throughout the genome along with other sequences. Dispersed repeats include mobile elements such as long interspersed nucleotide element (LINE), short interspersed nucleotide element (SINE), long terminal repeats (LTR).

Repeats may be microsatellites (simple sequence repeats), minisatellites, satellites.

Size of Repetitive DNA:

The length of repetitive sequences may vary from simple sequence repeats of di-, tri-, tetra- or hexanucleotides to nucleosome repeats of 180 bp and up to 10000 bp or more in rDNA repeats.

كمية Repetitive DNA:

The demonstration of the repeated sequences accounts, to a great extent, for the huge amount of DNA, noted in the different organisms. In higher organisms only little amount of the DNA represents structural genes contai­ning unique, the rest being amplification of non-coding sequences or repeats.

In the biologi­cal system, as a whole, the nuclear DNA content varies amongst the organisms without any con­comitant increase in the number and structure of genes.

The importance of repetitive DNA sequences can be judged from the very fact that in the human system almost 40% of DNA is repetitive in nature. In several plant species, as a rule 72-75% of DNA is repetitive whereas in Drosophila only 50% constitutes the sequences.

Location of Repetitive DNA:

Repetitive DNA sequences are present throughout the chromosomes including in centromere and telomeres (also may be pericentromeric and sub-telomeric), introns, nucleo­lar organizing regions, segments of heterochro­matin.

In general, in the entire chromosome structure, normally highly repeated or homo­geneous repeats are located in one locus, e.g., secondary constriction or centromere and mode­rate, minor repeats are interspersed throughout. Highly homogeneous repeats have been located in ribosomal RNA (5S, 18S, 5.8S, 25S) gene loci and are mostly AT-rich.

A characteristic repeat (GGGGATT) found at the telomeres. Accessory (B) chromosomes which are heterochromatic in nature, rich in highly repeated sequences. Large portion of cereal genome is with interspersion of short repeats. Presence of repetitive sequence in introns, in transposons and in flanking regions of replicon has been noted.

Origin of Repetitive DNA:

The mechanisms suggested for origin of repeated sequences include salutatory replication, unequal crossing over, transposition including insertion. Repeated sequences are sus­ceptible to change resulting from amplification, translocation, deletion and mutation leading to novel genomic configuration. Sequences in new environments may undergo patterning and amplification, leading to new repeat families.

Functions of Repetitive DNA:

Several non-specific functions involving cell-nuclear size and volume, chromo­some cycle, generation time, duration of meiosis, chromatin folding have often been attributed to repeated sequences.

Role of interspersed repeats has been sug­gested for repair synthesis, regulation of chromo­some structure in folding during pairing, acting as initiation points in replication, gene expre­ssion through methylation, gene conversion and compression.

Function attributed to palindromic repeats at different levels of protein synthesis includes recognition systems, both at DNA and RNA levels, involving deletion and translocation, cleavage sites, termination of transcription, bind­ing of regulatory proteins and attachment of chromosomes with each other for information transfer.

Intron repeats facilitates alternate splicing or reshuffling of exons and inter-genic conversion, permit dispersion and promote genetic diversity through mobility. Accessory chromosome repeats in plants are associated with adaptation in different environmental set up.

Significance of Repetitive DNA:

Some of the simple sequence repeats can serve as good markers. Certain tandem repeated sequences may be unique to a particular species. Their distribution and copy number help in differentiating various linkage groups in the chromosome complement.

DNA fingerprinting and molecular hybridization involving repeats have immense potential in documentation and analysis of biodiversity, and tracing the trends in evolution. The sequence, location and frequency of short tandem repeats (STR), which is common in plants’ genome, have role in determining phylogenetic status of species.

Detection of Repeats Tm and Cot Value:

For detection of repetitive DNA, the double stranded DNA is first denatured by heating into single stranded DNA which is accompanied with increase in optical density (hyperchromicity).

The single stranded DNA is then allowed to cool slowly to cause re-association between the com­plementary sequences into double stranded DNA which accompanies decrease in optical density (hypochromicity). Tm is the temperature at which 50% re-association is achieved.

The formation of double stranded DNA is actually measured over different values of a parameter which is described as Cot value (conc. x time). If solution of different DNA concentrations is to be compared, same Cot value can be achieved by altering the time allowed for re-association.

For DNA sample with high proportion of repeti­tive DNA, re-association will be faster and higher degree of re-association achieved at lower Cot values.

Localization of Repeats:

For localization of repetitive DNA, chromosome banding and molecular in situ hybridization (ISH) techniques are being applied.

Differential banding patterns of chromosomes, usually observed at specific regions on particular levels, were initially developed for the analysis of human chromo­some segments.

These bands are made visible through low and high intensity regions under the fluorescence microscope or as differentially stained areas under the light microscope. The methods were then extended first to different ani­mals and later to plant chromosomes.

The protocol for molecular hybridization, that is, denaturation at the cytological level, if followed by renaturation and staining with diffe­rent dyes, particularly Giemsa, gives intensely positive reaction at similar segments of chromo­somes which otherwise show repetitive DNA.

Obviously such treatment is capable of revealing repetitive segments in chromosomes. This ban­ding, following denaturation-renaturation and Giemsa staining, is termed G-banding.

Earlier, Caspersson and his colleagues had recorded differential fluorescence of different chromosome segments following staining with various fluorochromes (quinacrine) and observa­tion under the ultraviolet microscope and had successfully employed it in formulating a band­ing pattern analysis of the human karyotype.

Such bands were referred to as Q-bands. Other fluorochromes produce banding patterns as well, e.g., Hoechst 33258 similar to Q and ethidium bromide the reverse.

These banding patterns are unique for each chromosome like fingerprints. The bands are generally consistent for a taxon except for minor variations. A number of other chemicals can also produce bands either identical with or different from the fluorescent ones, based on different principles.

Such differential banding patterns, usually observed at specific regions on particular chromosomes, are being increasingly used for the identification of chromosomes.

The chromosome band nomenclature, adopted at the Paris Conference in 1971, recog­nized the following types of banding in human chromosomes (Fig. 4.26A):

By quinacrine staining and fluores­cence.

By staining techniques using Giemsa and related stains after appropriate pre- treatment.

R-bands or banding reverse to Q-bands:

By staining with Giemsa after heating to 87°C.

For constitutive heterochromatin, demonstrated by the denaturation-re-association technique.

Produced by enzymic digestion, as classified by Lejeune (1973), show woolen and shrunken regions corresponding to the dark and faint regions of G-banding. The same nomenclature can be applied to banding patterns observed in other eukaryotic chromosomes.

Other banding patterns of chromosomes include:

The centromeric and telomeric segments show bands after treatment in barium hydroxide, incubation and staining in ‘Stains All’ (4, 5, 4′, 5′-dibenzo-3, 3′-diethyl-9-methyl-thi- acarbocyanine bromide).

At nucleolus-organizing regions, possibly due to acidic proteins.

With orcein staining, mainly for plant chromosomes both intercalary and centro­meric heterochromatin show bands. All the above methods of banding bring out clearly the differentiation of chromosome seg­ments which can easily be analysed under the microscope. This technique permits identifica­tion of chromosome segments with specific molecular complexity such as repeat sequence.

The comparison of banding pattern between different genotypes, altered and unaltered, can localize the segments which have undergone alterations. The importance of banding can be judged by the very fact that, R-banding that is the reverse banding has been utilized for mapping of gene sequences in human chromosome.

In Situ Hybridization (ISH: FISH & GISH):

Besides the chromosome banding, for localiza­tion and mapping of different segments of chro­mosomes and gene loci at the microscopic level, application of molecular hybridization in situ is now widely adopted (Fig. 4.26B).

In situ hybri­dization (ISH) principally uses probe sequences, tagged with radioisotopes or fluorescent com­pounds (or a chemical reporter). The initial step is denaturation of the target which is followed by hybridization with probe of the complementary sequences to undergo re-annealing or pairing.

The complementary sequences of the probe bind selectively at the target site. The hybridized sites are localized either through autoradiography or immune-fluorescence as well as counter staining with specific stains detected cytologically. The in situ hybridization technique was developed ini­tially by Pardue and Gall and later modified by different authors.

The fluorescent in situ hybridization (FISH) is the most powerful technique at present, through which the target loci at the chromosome is hybridized with complementary probe sequence, tagged with fluorescent compound. There are two approaches, namely direct or indi­rect, of FISH technique in plant chromosome.

In the indirect method, the probes are tagged with reporter molecule, such as biotin, digoxigenin and finally they are located by fluorochrome conjugated antibodies such as avidin.

The main principle of this method is to make the probe- target sequence as antigenic so that, it can be detected through antibody. The common fluo­rochromes are FITC (fluorescein-isothiocyanate) as well as rhodamine. In the direct method, the probe is directly labelled by fluorochrome- labelled antibodies. The direct labelling of fluorochrome with the probe is the rapid method of ensuring good resolution.

Due to lack of karyomorphological markers, metaphase chromosome analysis cannot distin­guish parental genomes in hybrids. If ISH tech­nique is applied with total genomic probes where the plant has multi-genomic constitution, the parental chromosome can be directly identi­fied in the hybrids, such as Triticum and Secale in Triticale.

Thus method of total genome in situ hybridization is otherwise termed as GISH (genomic in situ hybridization) technique.

Since its first demonstration in identification of parental genomes in hybrid between Hordeum chilense and Secale africanum by Schwarzacher et al., the technique has been extensively applied to elucidate ancestry of hybrids and polyploids. GISH remains a very effective tool in genome identification, their orientation and in establishing genomic relationships between species.

The use of GISH in meiosis helps in understanding inter-genomic homologies as well as in elucidating the possible transfer of chromo­some segments through inter-genomic recombi­nation.

The FISH technique, using different colour combinations by different probes, is now being applied to detect simultaneously different genomes, or chromosome segments by extension of the technique – otherwise termed as multi­-colour FISH. This method has been used to dis­tinguish three genomes in hexaploid wheat and to detect several translocation sites and insertions in polyploid species of Triticum and Aegilops.

The multi-colour FISH technique is now regarded as a powerful tool for gene mapping as well as detection of abnormalities, including insertion and breakage points with chromosome specific or genome specific dispersed probes. The term chromosome painting is used in FISH technique where chromosome specific dispersed probes are used to detect the location of comple­mentary target sequences in the complement.

The FISH technique in recent years has further been modified to locate single copy or tandem sequences, utilizing primer mediated extension and amplification in situ by PGR method. The application of this method lies also in confirma­tion of location of foreign gene at the chromo­some level in transgenic individuals.


Author Affiliations

From the Departments of Neuropediatrics (M.S., C.H.), Pediatric Radiology (T.R.), and Neonatology (W.K.), Charité, University Medical Center Berlin, Berlin the Departments of Neurology (K.R.W.) and Molecular Biology and Genetics (S.-J.L.), Johns Hopkins University School of Medicine, Baltimore the Department of Cardiovascular and Metabolic Diseases, Wyeth Research, Cambridge, Mass. (L.E.S., J.F.T.) and the Institute of Physiological Chemistry, Martin Luther University, Halle-Wittenberg, Germany (T.B.).

Address reprint requests to Dr. Schuelke at the Department of Neuropediatrics, Charité, University Medical Center Berlin, Augustenburger Platz 1, D-13353 Berlin, Germany, or at [email protected] .


Scientists find gene mutation linked to exfoliation syndrome, most common cause of glaucoma

A team of researchers from the Agency for Science, Technology and Research's (A*STAR) Genome Institute of Singapore (GIS) and Bioprocessing Technology Institute (BTI), as well as Singapore Eye Research Institute (SERI), have identified a genetic mutation (functionally defective CYP39A1 gene) associated with exfoliation syndrome, the most common cause of glaucoma. The findings could pave the way for future research on the cause of exfoliation syndrome and potential cures. Their research was published in Journal of the American Medical Association (JAMA) on 24 February 2021.

Exfoliation syndrome is a systemic disorder characterised by abnormal protein material that progressively accumulates in the front of the eye. This disorder is the most common cause of glaucoma, and a major cause of irreversible blindness.

In this study, the scientists sequenced all protein encoding genes of more than 20,000 participants from 14 countries across Asia, Europe, and Africa, including more than 1,200 Singaporeans. They observed that people with exfoliation syndrome are twice as likely to carry damaging mutations in the gene encoding for the CYP39A1 protein, an enzyme which plays an important role in the processing of cholesterol. Further extended analyses suggest that defective CYP39A1 function is strongly associated with increased risk of exfoliation syndrome.

Although exfoliation syndrome is the most common cause of glaucoma, its origin is shrouded in mystery because it is not known where the abnormal protein deposits (exfoliative material) originate, and how the disease comes about. Answers to these questions could provide approaches to design and develop an effective treatment. The current findings point to the important role of cholesterol processing in the exfoliation syndrome disease process. As cholesterol is found abundantly in all cells, disruption to how cholesterol is processed due to defective CYP39A1 activity could adversely impact their normal functions. In particular, this study discovered that epithelial cells in the front of the eye responsible for filtering the blood supply to produce the clear fluid known as aqueous humour that bathes and nourishes other cells in the eye, were most affected by the CYP39A1 gene mutation. Disruption to the gene function can compromise the filtering function of epithelial cells and lead to leakage of exfoliative material from the blood into the eye.

Prof Patrick Tan, Executive Director of GIS, said, "This is a ground-breaking study that could facilitate future research efforts aimed at restoring defective CYP39A1 function and inhibiting the formation of exfoliation material in the eye as treatments for exfoliation syndrome and glaucoma."

Prof Aung Tin, Director of SERI and Deputy Medical Director of SNEC, said, "This is a major eye disease, affecting over 70 million people worldwide, which causes a lot of visual morbidity and blindness, not only from glaucoma but also due to complications related to cataract surgery. This study was notable for involving many centres from many different countries around the world, but led from Singapore. The study findings are very exciting as we found a new pathway for the disease which opens up possibilities for new treatments."

Prof David Friedman, the Albert and Diane Kaneb Chair in Ophthalmology at Harvard University and Director of the Glaucoma Service at the Massachusetts Eye and Ear Infirmary, Boston, commented, "Very exciting work. The researchers have identified rare gene variants that results in disrupted cholesterol homeostasis and transport that will open the door to novel therapeutics. Having studied over 20,000 individuals, the study demonstrates the power of studying rare variants to detect disease-causing genes in complex conditions." Prof Friedman was not involved in the study.


شاهد الفيديو: هذه الخدعة سوف تغير لون عينيك !! مجربة و فعالة (كانون الثاني 2022).