معلومة

هل يختلف تركيز الكالسيتريول في الدم في أوقات مختلفة من اليوم؟


بالنظر إلى أن عمر النصف للكالسيتريول قصير نسبيًا عند البالغين ، فمن الممكن أن يكون تركيز المصل في أوقات مختلفة من اليوم مختلفًا إذا تم إنتاجه بكميات مختلفة في أوقات مختلفة من اليوم. هل هذا هو الحال أم أن المستوى ثابت نسبيًا على مدار اليوم ولا يتبع إيقاعًا يوميًا؟


يتم إنتاج الكالسيتريول ، أو 1،25-ديهيدروكسي فيتامين د ، في الكلى بواسطة 25-هيدروكسي فيتامين D-1α-هيدروكسيلاز من سلائفه ، 25-هيدروكسي فيتامين د.

يبلغ نصف عمر الكالسيتريول في البلازما حوالي 6 ساعات. يتم تنظيمه بإحكام. يتضمن هذا التنظيم حلقة تغذية مرتدة سلبية على تركيبته الخاصة وعبر تأثير مثبط على تخليق الهرمون الجاردي السماوي ، والتحكم في التأثيرات النهائية (فوسفور البلازما ، والكالسيوم ، و FGF-23 وغيرها).

25-OH-D ، المادة الأولية ، لها عمر نصف في البلازما يبلغ حوالي 2-3 أسابيع ، وباستثناء حالات النقص المزمن أو الحالات المرضية الأخرى ، فهي متوفرة بكثرة لإنتاج الكالسيتريول المناسب. لهذا السبب ، من غير المحتمل ، على سبيل المثال ، أن تنتشر التغيرات اليومية في التعرض لأشعة الشمس أو المدخول الغذائي وصولاً إلى إنتاج المستقلب النشط.

يمكن العثور على الصورة والمراجعة الجيدة لفيتامين د في مقالة NEJM هذه

نطاقات المراجع في مختبري وفي دليل لانج للاختبارات التشخيصية لا تتضمن أي اقتراحات تفسيرية للبلازما أو المصل 1 ، 25-ديهيدروكسي فيتامين د (كالسيتريول) في أوقات مختلفة من اليوم. والجدير بالذكر ، مع ذلك ، أن هذا الاختبار لا يتم إجراؤه سريريًا في كثير من الأحيان. يتعلق الأمر بشكل أساسي بالحالة التي يكون فيها المريض يعاني من ارتفاع نسبة الكالسيوم وانخفاض الهرمون الجارعي ولم يتم العثور على ورم خبيث.

على الرغم من هذا (النطاقات المرجعية لا تميز بين أوقات اليوم) ، فقد يكون هناك إيقاع يومي ضمن هذا النطاق. تُظهر الهيئات التنظيمية والتأثيرات النهائية للكالسيتريول إيقاعًا يوميًا ، كما هو موضح في هذه الدراسة الكلاسيكية لعام 1972:


مستويات السكر في الدم الطبيعية للبالغين المصابين بداء السكري

عادة ، يفرز البنكرياس الأنسولين عند ارتفاع نسبة السكر في الدم ، أو "جلوكوز الدم" - بعد تناول وجبة ، على سبيل المثال. يشير ذلك إلى أن جسمك يمتص الجلوكوز حتى تعود المستويات إلى وضعها الطبيعي.

ولكن إذا كنت مصابًا بداء السكري ، فإن جسمك لا ينتج الأنسولين (داء السكري من النوع 1) أو لا يستجيب له بشكل طبيعي (داء السكري من النوع 2). يمكن أن يؤدي ذلك إلى ارتفاع نسبة السكر في الدم لفترة طويلة جدًا. مع مرور الوقت ، يمكن أن يؤدي ذلك إلى تلف الأعصاب والأوعية الدموية ويؤدي إلى أمراض القلب ومشاكل أخرى.

إذا كنت مصابًا بداء السكري ، فقد يطلب منك طبيبك تتبع نسبة السكر في الدم عن طريق اختباره في المنزل باستخدام جهاز خاص يسمى جهاز مراقبة جلوكوز الدم أو جهاز قياس سكر الدم بالمنزل. يأخذ عينة صغيرة من الدم ، عادة من طرف إصبعك ، ويقيس كمية الجلوكوز فيها.

اتبع تعليمات طبيبك حول أفضل طريقة لاستخدام جهازك.

سيخبرك طبيبك متى وكيف يتم فحص نسبة السكر في الدم. في كل مرة تقوم فيها بذلك ، قم بتسجيله في دفتر ملاحظات أو أداة عبر الإنترنت أو في أحد التطبيقات. يمكن أن يؤثر الوقت من اليوم والنشاط الأخير ووجبتك الأخيرة وأشياء أخرى على ما إذا كانت القراءة مصدر قلق لطبيبك. لذا حاول تسجيل المعلومات ذات الصلة مثل:

  • ما الدواء والجرعة التي تناولتها
  • ماذا أكلت ، عندما أكلت ، أو ما إذا كنت صائماً
  • ما مقدار ومدى شدة ونوع التمرين الذي كنت تمارسه ، إن وجد

سيساعدك ذلك أنت وطبيبك على معرفة كيفية عمل علاجك.

يمكن أن تؤدي الإدارة الجيدة لمرض السكري من النوع 1 والنوع 2 إلى تأخير أو منع المضاعفات التي تؤثر على عينيك وكليتيك وأعصابك. يضاعف مرض السكري من خطر الإصابة بأمراض القلب والسكتة الدماغية أيضًا. لحسن الحظ ، فإن التحكم في نسبة السكر في الدم سيقلل من احتمالية حدوث هذه المشكلات.

ومع ذلك ، فإن التحكم الصارم في نسبة السكر في الدم يعني وجود فرصة أكبر لانخفاض مستويات السكر في الدم ، لذلك قد يقترح طبيبك أهدافًا أعلى.

مصادر

الأكاديمية الأمريكية لأطباء الأسرة: "مراقبة مستوى السكر في الدم."

المعهد الوطني للسكري وأمراض الجهاز الهضمي والكلى: "مقدمات السكري ومقاومة الأنسولين".

مينسينج ، سي. مرجع مكتب تعليم الإدارة الذاتية لفنون وعلوم السكري ، الطبعة الثانية ، الرابطة الأمريكية لمعلمي مرض السكري ، 2011.

جمعية السكري الأمريكية: "معايير الرعاية الطبية لمرضى السكري - 2014".


هدفك هو الجمال - الحلقة 48 (مع نسخة): كل مستحضرات العناية بالبشرة الجديدة التي أختبرها وأستخدمها (وأحبها): محب للأحياء ، و Earthwise ، و In Fiore ، و Agent Nateur ، وآخرون

الغرض الخاص بك هو الجمال يجلب لك مراجعات ونقدًا لمنتجات التجميل البيئية / العضوية والفاخرة والمتخصصة ، فضلاً عن المناقشة الفكرية حول الجمال والصناعات الصحية البديلة. يستضيف هذا البودكاست ، الذي تستضيفه صحفية التجميل المستقلة وعالمة الاجتماع الحاصلة على درجة الدكتوراه ، مرسيدس لايسون ، سبب اختيار الناس للجمال كمهنة أو شغف من خلال مقابلات مع مؤسسي العلامات التجارية ومحترفي التجميل والمدونين / المؤثرين والمبدعين. تتوفر حلقات حصرية من هذا البودكاست على Patreon.com/lamouretlamusique ، ويمكن العثور على محتوى فيديو الجمال البيئي لمرسيدس لمدة 6 سنوات على Youtube.com/lamouretlamusique/videos.

الحلقة 48: كل ​​مستحضرات العناية بالبشرة الجديدة التي أختبرها وأستخدمها (وأحبها): Biophile، Earthwise، In Fiore، Agent Nateur، et plus

إنها مهمة صعبة ولكن ... ها أنا أقوم بذلك. اختبري دائمًا مستحضرات جديدة للعناية بالبشرة! لم تكن هناك محادثة مخصصة للعناية بالبشرة هنا على البودكاست أو على YouTube في غضون شهرين جيدين ونتيجة لذلك ، لدينا الكثير لتغطيته اليوم. استقر لمدة ساعة من الدردشة المتعمقة حول منتجات التجميل البيئية.

ملاحظات الحلقة:
تمت مناقشة المنتجات -
منظف ​​بلسم إنلايت https://bit.ly/3pP3Ahp
منظف ​​أملي بالم https://bit.ly/3kQ8uaq
أملي سليب بالم https://bit.ly/3flk5Nm
أملي سليب ميست https://bit.ly/2IMOqZL
زيت مقاتل الحرية الحقيقي + مجاني https://bit.ly/36PhAiI
بلسم أركانا للتنظيف https://bit.ly/36XZA5R
في Fiore Transparence https://bit.ly/2HkjkaW
في Fiore Vitale https://bit.ly/3pQnhWb
في Fiore Raffermissant Fleur https://bit.ly/2IYIRHo
Earthwise Imhotep & # 8217s قناع الوجه بلسم (لامور بخصم 10٪) https://bit.ly/3pMzXNZ
Earthwise Resiliency (LAMOUR بخصم 10٪) https://bit.ly/2AWuX4O
جوهر البيوفيل https://bit.ly/3fv0Tx7
مصل البيوفيل https://bit.ly/3nLRHXI
زيت بيوفيلي https://bit.ly/36Uuj3F
كريستينا هولي x ماري فيرونيك https://bit.ly/3pNRDJ2
5YINA Moonlight Pearl Detox Mask https://bit.ly/38YVaOJ
علاج 5YINA لليدين https://bit.ly/333OcUU
يوم ليبار للعناصر الحرير https://bit.ly/3fj5pyl
رانافات إمبريال جلو https://bit.ly/3pMzOdp
منظف ​​المراسم من رانافات https://bit.ly/3fkp3dB
الوكيل ناتور هولي (المياه) https://bit.ly/3pY8WY2
وكيل نيتور للتطهير https://bit.ly/35Nqcac
عامل تنظيف حمض اللاكتيك من عامل ناتور https://bit.ly/2ITTPxC
الوكيل ناتور هولي (سي) تنقية فيتامينات الوجه https://bit.ly/36YFwA6
ديسمبر Boxwalla Beauty Box https://bit.ly/3lTYm1Q

ابحث عن مرسيدس:
انضم إلى مجتمع L’Amour et la Musique Patreon للوصول إلى حلقات حصرية من Your Purpose is Beauty ، إلى جانب محتوى فيديو خاص بالجمال مدته سنتان ونصف.

اشترك في L’Amour et la Musique على Youtube
تابع L’Amour et la Musique على Instagram
زيارة موقع L’Amour et la Musique على الويب
إلهام L’Amour البصري على Pinterest

للاستماع والاشتراك ، ما عليك سوى البحث عن "هدفك هو الجمال" على منصتك المفضلة. حلقات جديدة كل يوم إثنين (أول يوم اثنين من كل شهر عبارة عن حلقة حصرية من Patron-Exclusive ، متاحة مقابل 3 دولارات شهريًا)
هدفك هو الجمال على Apple Podcasts: https://apple.co/36oCxPT
هدفك هو الجمال على Goodle Podcasts: https://bit.ly/35l7Xp1
هدفك هو الجمال على Spotify: https://spoti.fi/2ZPU94Q
غرضك هو الجمال على Stitcher: https://bit.ly/2QqCLAO
هدفك هو الجمال على Pocket Casts: https://pca.st/ki27eqe5

نظرة عامة

02:15 - مستحضرات العناية بالبشرة الجديدة التي أختبرها (انتقل إلى القسم)

51:35 - المحتوى القادم والأفكار الختامية (انتقل إلى القسم)

نقل الملفات الصوتية

مرحبًا بك مرة أخرى في حلقة أخرى من هدفك هو الجمال. أعتقد أن هذه الحلقة 48. آمل ألا أكون مخطئًا في ذلك. لقد توقفت عن البث العام للبودكاست لمدة ثلاثة أسابيع على ما أعتقد ، لذا أشكركم على العودة للاستماع. لقد كانت فترة راحة أطول قليلاً مما كنت أنوي. دائمًا ما يكون أول يوم اثنين من كل شهر حلقة بودكاست حصرية لـ Patreon ، لذلك قمت بنشر شيء ما في الثاني من نوفمبر. لقد كان منتجًا واضحًا / مزعجًا ، كان عبارة عن بعض منتجات العناية بالبشرة ومعظمها مكياج. لذا ، هناك & # 8217s لمدة ساعة من محادثة المنتج في Patreon.com/lamouretlamusique ، جنبًا إلى جنب مع جميع حلقات البودكاست الحصرية الأخرى I & # 8217 التي تم إجراؤها هذا العام. لكن انتهى بي الأمر بشكل غير متوقع بأخذ إجازة لمدة أسبوعين. كنت أعلم دائمًا أنني سأأخذ يوم الإثنين الثاني من شهر نوفمبر إجازة لأنني وكافيه تزوجنا في تكساس. (ضحكات خافتة) قليلا من الخلفية الدرامية هناك. لقد هربنا بالفعل منذ عامين ولكن لم يكن لدينا احتفال أو اعتراف عام باتحادنا مع الأصدقاء والعائلة. لذلك كان هناك الكثير وراء ذلك ، كما يمكنك أن تتخيل ، القيام بشيء من هذا القبيل خلال هذه الأوقات. أخطط لعمل بعض المحتوى حول حفل الزفاف ، سواء الجوانب المرئية منه مثل شعري ، والمكياج ، واللباس ، والإكسسوارات ، ثم عناصر الزفاف مثل الأزهار والكعكة. ثم أرغب أيضًا في مشاركة بعض الأفكار حول التجربة ، ما تعلمته ، كيف كانت. ولكن كما قد لا يفاجئك ، فمن المحتمل أن يكون كل شيء على Patreon. والسبب في ذلك هو - أولاً وقبل كل شيء ، إنها & # 8217s مجرد تجربة شخصية للغاية وأنا & # 8217m شخص خاص للغاية ، على الرغم من أنني كنت على وسائل التواصل الاجتماعي لفترة طويلة. بشيء من هذا القبيل ، مع عائلتي ، أنا & # 8217m فقط خاص حول ذلك. ولكي أكون صادقًا معك ، أشعر فقط أن هناك الكثير من الأشخاص الذين يبدون على إنستغرام ويوتيوب. وهو & # 8217s شخصي جدًا بالنسبة لي. لذا فهو شيء أشعر براحة أكبر في مشاركته مع مجتمع أصغر من الناس.

لكني لا أريد أن أتحدث عن أي من ذلك اليوم. لا أريد تقديم مقدمة طويلة كبيرة مع الكثير من الإعلانات. أريد فقط أن أتحدث عن المنتجات. لذلك اليوم ، سنتحدث عن جميع مستحضرات العناية بالبشرة الجديدة التي كنت أختبرها ، وهي & # 8217s كثيرًا. وأعتقد أنه & # 8217s كثيرًا لأنني لم أتحدث عن العناية بالبشرة منذ فترة. ظهرت مجموعة من الأشياء الجديدة خلال هذا الجزء الأول من شهر نوفمبر بينما كنت أختتم حفل الزفاف والسفر ثم أعود وأحاول نوعًا ما إعادة المعايرة بعد تلك التجربة المكثفة. لكنني & # 8217 كان لدي مجموعة من الأشياء على عداد الاختبار الخاص بي وأريد التحدث عنها.

اليوم ، سنتحدث قليلاً عن Biophile ، والذي أعتقد أنه اكتشاف Beauty Heroes الذي لا يزال متاحًا في نوفمبر ، لم يكن لديّ فرصة لتصوير مراجعة على YouTube له. أعتقد أنني أخطط لمجرد إجراء مراجعة مجمعة أخرى لعشاق Biophile مع اكتشاف أبطال الجمال لشهر ديسمبر ، أو قد أفعل شيئًا مختلفًا حيث أقوم بعمل روتين للعناية بالبشرة وأراجعها بشكل مستقل / منفصل لأنني أعرف بالفعل ما هو أبطال الجمال لشهر ديسمبر سيكون كذلك ولن يتزاوج بشكل جيد مع اكتشاف Biophile. أشعر حقًا أنني أريد أن أعطيها مراجعة أكثر تخصصًا. لذلك لن يخرج # 8217s في الوقت المناسب لتلتقط الصندوق. لكنني & # 8217 سأتحدث قليلاً عن ذلك هنا اليوم. لديّ حزمة علاقات عامة كبيرة من وكيل Nateur والتي ظهرت وسأشارك بعض الأفكار حول هذه العلامة التجارية ، لأنه إذا كنت تتابعني لبعض الوقت ، فهناك القليل من الخلفية الدرامية هناك. مؤسس الوكيل ناتور هو إلى حد ما شخص مثير للجدل في جمال أخضر. وفي الواقع ، كنت قد اقترحت كخيار استطلاع فيديو حصري للمستفيد هذا الشهر - لأنني أضع كل شهر استطلاعًا لثلاثة أو أربعة خيارات للفيديو ويصوت الأشخاص في هذا المستوى على Patreon على الفيديو الذي يريدون مني القيام به ، ثم أعده على مدار الشهر وأنشره في نهاية الشهر. ولذا كان أحد خيارات استطلاع الفيديو ، أعتقد أنني أطلقت عليه عنوانًا مثل "هل أغير رأيي بشأن بعض العلامات التجارية؟" الوكيل ناتور و Living Libations مثالان. لقد كانت الوصيفة ، وحصلت على ثاني أكبر عدد من الأصوات ، لذلك أعتقد أنني سأفعل ذلك على الأرجح كحلقة بودكاست في وقت ما ، ربما من أجل Patreon ولكننا سنرى & # 8217.

حصلت أيضًا على حزمة علاقات عامة سخية وجميلة بشكل رائع من Ranavat ، والمنتج الجديد بالنسبة لي هو إطلاقها حديثًا - أقولها لأن ميشيل رانافات هي الشخص الذي يقف وراء العلامة التجارية ، والذي كان هنا في البودكاست. حلقة رائعة. تحدثنا كثيرًا عن عصا كانسا ، فقط أوصي بشدة بالاستماع إليها. أطلقت منتجًا جديدًا يسمى Imperial Glow Facial Polish ، لذلك أريد أن أخبرك عن ذلك. لديّ بضعة أشياء جديدة حول Earthwise ، جديدة في Fiore ... أعني ، هناك الكثير من الأشياء هنا. لذلك دعونا نبدأ & # 8217s.

05:14
هل استمتعتِ بأن هدفك هو الجمال؟ يمكنك فتح حلقات حصرية من هذا البودكاست من خلال زيارة Patreon.com/lamouretlamusique. مقابل 3 دولارات شهريًا ، يمكنك الوصول إلى حلقة حصرية واحدة يتم نشرها في أول يوم اثنين من كل شهر. تتلقى رابط موجز RSS خاص لإضافته إلى مشغل البودكاست الذي تختاره أو يمكنك الاستماع مباشرة على Patreon. في هذه الحلقات الحصرية ، أشرح موضوعات أكثر شخصية ، يحتمل أن تكون مثيرة للجدل ، أو مثيرة للتفكير تلائم المجتمع الحميم. إذا كنت & # 8217 مهتمًا بالمزيد ، فهناك مستويات أخرى من الدعم تتضمن مقطع فيديو شهريًا حصريًا يستند إلى استطلاع تم إنتاجه لمجتمع Patreon ، ومراسلات فردية قائمة على الفيديو ، ومقاطع فيديو Live Get Ready With Me للماكياج وإجراءات العناية بالبشرة ، وعلم التنجيم للجمال وقراءات الزهرة من منظور كلاسيكي. تدعم أموال Patreon بشكل مباشر إنتاج هذا البودكاست ، بالإضافة إلى محتوى L’Amour الآخر. شكرًا جزيلاً لاختيارك الاستماع إلى Your Purpose Is Beauty. والآن نعود إلى حلقة اليوم & # 8217s.

حسنًا ، لقد تناولت للتو رشفة من شاي البابونج. لقد قمت بتخمير بعض براعم البابونج السائبة من Mountain Rose Herbs لأنني ، كالعادة ، أجلس للتسجيل في ساعة المساء ، لذلك أتناول الشاي. دعونا نتعمق في كل هذا. أريد أن أبدأ ببعض العينات التي كنت أختبرها & # 8217ve. لذلك في الواقع كل هذا جاء من بعض رعاة L’Amour. أعتقد أنني تحدثت عن - خلال Petit Conseil ، وهو سؤال وجواب فردي ، أسئلة وأجوبة شهرية أقوم بها مع أشخاص على مستوى آخر على Patreon - كنت أقوم بعمل Petit Conseil مع شخص ما. كنا نتحدث عن أعتقد أن منظفات الوجه وكنت أصرح بحبي لمنظف Inlight Balm Cleanser. وأوصتني ، في الواقع ، بمنظف Amly Balm ، وكنت مثل ، "يا إلهي ، لم أفكر في Amly منذ فترة طويلة." تم تهجئة & # 8217s A-M-L-Y. إنها & # 8217s علامة تجارية بريطانية وقد تم إطلاقها في البداية منذ بضع سنوات حتى الآن. أريد أن أقول ربما 2016 ، ربما 2017؟ لقد أطلقوا بضباب وجه وكان يُطلق عليه اسم Silver Rich Face Mist وكان رائعًا للغاية. لقد مررت بزجاجة أو زجاجتين ولم أفكر بصدق في العلامة التجارية منذ ذلك الحين. وأنا لا أعني ذلك بطريقة سيئة. أشعر فقط أنه & # 8217s - كما نعلم ، الجمال الأخضر مفرط التشبع وأشعر أن انتباهي ينجذب دائمًا في اتجاهات مختلفة. لذلك عندما ذكرت أملي لي ، كنت مثل ، "أوه ، لقد قاموا & # 8217 بتوسيع النطاق." يقومون الآن بعمل منظف بلسم ، لديهم رذاذ ، لديهم العديد من المنتجات التي لم يستخدموها من قبل. لذلك أرسلت لي بسخاء هذه العينات من Amly Balm Cleanser و Amly Sleep Balm و Amly Sleep Mist.

لذلك أنا & # 8217 لقد حاولت هذه الأشياء وانطباعي هو أنها & # 8217re معطرة للغاية بطريقة لا أتذكرها حقًا. إنه يذكرني تقريبًا ربما مثل نوع من منتجات Sisley وأنا & # 8217 لم أستخدم مستحضرات Sisley للعناية بالبشرة أو La Mer ، ولكن لسبب ما ، التجربة تشبه ذلك إلى حد ما. المنتجات كبيرة جدًا ، لكنها عطرة جدًا حقًا. اعتقدت أن منظف البلسم كان لطيفًا وسببًا آخر أن هذا المستفيد أوصاني به هو أنه لا يستحلب ، وهو ما يزداد صعوبة وأصعب في العثور على منظفات الزيت والبلسم التي لا تستحلب وتشطف ، حيث أنت فقط احصل على تجربة تطهير الزيت التقليدية حيث تقوم بإزالته بقطعة قماش دافئة. إذن هذا هو ذلك. ما زلت أفضل منظف Inlight Balm Cleanser قليلاً ولكني أعتقد أن هذا خيار رائع حقًا.

الآن كانت الضربة من هذا الثلاثي الصغير بالنسبة لي حقًا بلسم النوم. لقد قمت بعمل روتين عدة مرات باستخدام Sleep Mist ، والذي أعتقد أنه لطيف ، لكن مرة أخرى ، رائحته قوية جدًا. لكن بلسم النوم ... لقد أحببت حقًا نسيج هذا. لقد ذكرني قليلاً بتجربتي الحبيبة بلسم Lepaar Beauty Balm. مرة أخرى ، عطرة جدًا ، لكنها مجرد بلسم زيتي جدًا. شعرت أنها كانت خطوة نهائية لطيفة أو ربما استخدمتها كخطوة وحيدة للعناية بالبشرة بعد تطهير مزدوج ثم تصدرتها بالضباب ، وهي إحدى الطرق المفضلة لدي لتجربة البلسم ومعرفة نوع ما بشرتي تتفاعل معها. لكنه أيضًا يجعله يشبه اللمسة النهائية اللطيفة للجلد. إذا كنت تأخذ القليل من أصابعك وتضغط عليه على عظام الخد أثناء النهار ، فهذه طريقة أخرى مفضلة أحب استخدام المسكنات. لكن نعم ، كان بلسم النوم حقًا المفضل لدي من بين هؤلاء الثلاثة وأعتقد أنه سيكون منظف المسكنات.

حسنًا ، ثم أرسل لي راعٍ جميل آخر هذه الحقيبة السخية من العديد من العينات. كانت هناك بعض عينات Wabi Sabi هناك ، وبعض EvolvH ، لقد أرسلت لي بعض شوكولاتة Chocolita ، والتي أصبحت الآن مجرد علامة تجارية مفضلة ومدهشة من الشوكولاتة. لقد اشتريت مؤخرًا مجموعة كاملة من الصناديق ، وسأتحدث عنها أكثر عندما أقوم بعمل أفضل 2020 للجمال ونمط الحياة. لكن اثنين من الأشياء التي أردت أن أذكرها لكم هنا اليوم أنني كنت أختبرها من مجموعة العينات التي أرسلتها إليّ وهما Free + True Face Oil وأعتقد أنه & # 8217s واضحًا Arcana Cleansing Balm.

حسنًا ، Free + True Oil - أعتقد أنه & # 8217s يسمى Freedom Fighter - لقد جاء في صندوق Clean Beauty Box من ، على ما أعتقد ، خلال الصيف. Clean Beauty Box هو أحد منافسي Beauty Heroes و Boxwalla. كان يطلق عليهم اسم فن المواد العضوية ، إذا كان أي منكم يتذكرها. أعتقد أنها & # 8217s نفس الشركة. لقد استقبلت زوجين في البداية وبعد ذلك - لا أعرف. أنا - لسبب ما ، أنا فقط - لا أحب الاسم ، "صندوق الجمال النظيف." (ضحكات خافتة) لكني لا أعرف ، يبدو التنظيم جيدًا ، على ما أعتقد ، مما رأيته & # 8217 من بعض الناس.حسنًا ، زيت مقاتل الحرية. انظر ، الآن أنا & # 8217m أجد صعوبة في شم رائحتها لأن بلسم أملي منتشر في يدي بالكامل ورائحته قوية جدًا.

إذن هنا & # 8217s ما أقوله & # 8217 عن Free + True. لذلك اكتشفت هذه العلامة التجارية من خلال صندوق Beauty Heroes في وقت سابق من هذا العام. كان كريم ماما باشا للوجه ومصل الجسم النبوي. هذان هما من اكتشافاتي المفضلة للمنتجات هذا العام ، مثل Best of Beauty 2020 ، سيتم تسليط الضوء عليهما في معرض Beauty Heroes القادم الذي أقوم به. ومع ذلك ، فقد جربت أيضًا بعض الأشياء الأخرى من Free + True وأنا & # 8217 كنت محبطًا جدًا. لذا ، كما تعلمون ، هل أعتبر أن هذه العلامة التجارية قد تعرضت للضرب أو الفشل؟ لا أعرف & # 8217t. لذا فقد مررت بوعاء كامل من منظف بلسم Moonlight Milk Balm. لقد تمكنت من استخدامه ولكن يجب أن أقول ، لم أستمتع حقًا بالمنتج كثيرًا للعديد من الأسباب التفصيلية التي لن أدخلها هنا. أنا & # 8217 سأتحدث عنها في الفراغات القادمة ، على الأرجح.

لذا فإن Free + True Oil ، و Freedom Fighter Oil ، أعتقد أنه & # 8217s على ما يرام. أنا & # 8217m ليس كل هذا المكسرات حول الرائحة. أعني ، أن رائحته تشبه رائحة نبي الجسد إلى حد ما ، لكن لسبب ما ، أحبها على جسدي وليس بالضرورة على وجهي. إنه نوع من الحلوى ، ورائحة الحلوى الحلوة ، مثل رائحة زيت الفواكه. لا أعرف & # 8217t. أنا شخصياً أفضل استخدام شيء مثل Earthwise Ruby ، ​​على سبيل المثال ، والذي سأعتبره مشابهًا إلى حد ما لهذا. كلاهما لهما نفس اللكمات الطازجة في زيت الوجه. كان نسيج هذا لطيفًا. أعني ، أعتقد أن الجودة ، حتى من المنتجات التي لم تحقق لي نجاحًا كبيرًا مثل Balm Cleanser وهذا الزيت ، الجودة رائعة حقًا. لقد كان & # 8217s فقط يخرجون من الحديقة بالنسبة لي كما تفعل ماما باشا وجسد النبي. هذه المنتجات استثنائية للغاية. لذلك يتعين علي & # 8217d تجربة المزيد من العلامة التجارية للحصول على منظور أكثر شمولاً. لذا نعم ، أردت أن أذكر ذلك.

الآن بلسم Arcana Cleansing Balm. هذا خط جديد تحمله Beauty Heroes وقد جربت أولاً هذا المنظف المسكن - إنه مستحلب ، لذلك سأقول ذلك - لقد استخدمت هذا كتطهير ثانٍ. في المرة الأولى التي استخدمتها فيه ، استخدمته كتطهير ثانٍ. (ضحكات خافتة) أدرك أن هذا قد يبدو محيرًا بعض الشيء. وشطفته في الحمام ، وكنت نوعًا ما مثل ، "حسنًا. مثل ، إنه & # 8217s بخير. أنا & # 8217m لا أشعر بقوة بطريقة أو بأخرى ". ثم آخر مرة اختبرتها فيه ، والتي كانت في وقت سابق من هذا الأسبوع ، استخدمتها كخطوتي الأولى فقط. لقد استخدمته نوعًا ما - كان لدي ، لا أتذكر حتى إذا كنت أضع المكياج. ربما كنت أرتدي القليل من المكياج أو مجرد مرطب ملون. لذلك ذهب مباشرة ، كما تعلمون ، إلى بشرة نهاية اليوم وقمت بتدليكه. ثم قمت بتحويله إلى نوع من البلسم اللبني الذي سيتحول إلى القليل من الماء ، دعه يجلس على الجلد لبضع دقائق ، ثم شطفته بالماء الدافئ في الحوض. وعندما ذهبت لتجفيف بشرتي ، لاحظت أن الماء كان مثل الخرز على بشرتي لأن المنظف في الواقع يترك وراءه القليل من الفيلم الذي أحبه. أدرك الآن أن بعض الناس يريدون شعورًا كأنه ملمس مستحلب بالكامل ونظيف بالشطف. على سبيل المثال ، سوف يمنحك منظف الحليب Free + True Moonlight ذلك. سوف يمنحك مظهرًا نهائيًا نظيفًا تمامًا وليس صارخًا ، ولكنه سيتحول إلى مستحلب تمامًا.

الآن استحلاب وشطف بلسم Arcana Cleansing Balm لم يكن كذلك وبطريقة أحببتها حقًا ، و & # 8217s - وفي آخر مرة استخدمته ، فكرت ، "الآن هذا هو منظف بلسم مستحلب يمكنني أن أتخلف عنه ، "لأنه لا يزال يترك الرطوبة ورائه ، فإنه يترك ملمسًا ولمسة نهائية رائعة حقًا للبشرة ، حتى لو كنت ستستخدمه كمنظف لمرة واحدة. لقد شعرت أنه نظف بشرتي بدرجة كافية ، حتى أنه ترك القليل من البقايا ورائي. لذلك أنا - الحجم الكامل لهذا أصبح الآن موجودًا في قائمة أمنياتي. لقد أعجبتنى حقا. الرائحة معتدلة للغاية ، تشبه رائحة نوع من النباتات الخضراء الطازجة. واللون مثل الجير الصامت. إنه & # 8217s مثل لون اليشم الباهت ، أعتقد أنني سأقول ، مع القليل - إنه & # 8217s مثل اللون البني والأخضر البني الفاتح. حقا أحب ذلك. ولقد سمعت للتو أشياء جيدة عن هذه العلامة التجارية لدرجة أنني أشعر بالفضول بالتأكيد لتجربة المزيد منها.

حسنًا ، دع & # 8217s نتحدث عن In Fiore بسرعة. إنهم موجودون حاليًا ، وأعتقد أنه في الوقت الذي ستسمعون فيه أن هذا سيظل قائماً ، صفقة التسوق المبكرة ليوم الجمعة الأسود. لقد كانت واحدة من العلامات التجارية الأولى التي أتبعها على أي حال للإعلان عن عرض التسوق في العطلة. أعتقد أنهم & # 8217re سيقومون ببعض الأشياء في ديسمبر أيضًا. لكن عادةً ، على الأقل مما أتذكره العام الماضي ، وقد استفدت بالفعل من هديتهم مع الشراء يوم الجمعة الأسود الماضي ، كان لديهم صفقة بدأت يوم الجمعة السوداء واستمرت في منتصف ديسمبر ، كما أريد أن أقول. هذا هو ما كنت أستعد له هذا العام. ثم فجأة في بريدي الوارد قبل أسبوعين ، مثل بداية تشرين الثاني (نوفمبر) ، رأيت ، "نحن نفعل الأشياء بشكل مختلف هذا العام" ومثل "هنا & # 8217s لدينا صفقة العطلة." لذلك لم أكن مستعدًا تمامًا. كنت بالفعل على الحياد إلى حد ما. أعني ، أنت تعرف ما أشعر به تجاه In Fiore. إنهم & # 8217 كواحد من المفضلين لدي تمامًا - أنا معجب بهذه العلامة التجارية كثيرًا ، وأحبها حتى أقاصي الأرض والعودة ، لكني & # 8217m غارقة جدًا في المنتج في الوقت الحالي. وما زلت أمتلك المنتجات التي اشتريتها خلال الصيف في الهدية مع عملية الشراء التي فعلوها ولم أكن حتى اقتحامها. لذا فإن ما سأخبركم عنه اليوم & # 8217s لأنني أخرجتهم أخيرًا من الصناديق ووضعتهم على الغرور لبدء الاستخدام.

كنت أستخدم - ما زلت في الواقع أستخدم زجاجة ضخمة من In Fiore Botanical Water. إذا كنت & # 8217 قد استخدمت في أي وقت مضى In Fiore Botanical Waters ، فإنها تدوم لفترة طويلة. أنا & # 8217 لقد أملك خاصتي لمدة عام ونصف. الشيء الجميل في المياه النباتية ، أنها & # 8217re جزء من خط صنع في اليابان ، لذا فإن تاريخ انتهاء الصلاحية بعيد تمامًا. أعتقد أنهم & # 8217 جيدة لمدة سنتين إلى ثلاث سنوات. لذلك بالتأكيد قدر معقول من الوقت لاستخدام المنتج ، لكن نعم ، ما زلت أستخدم المياه النباتية والهدية التي تم شراؤها خلال الصيف كانت بالحجم الكامل لجوهر فيتالي تونينج فلورال. لذا فهذه هي العلامة التجارية المصنوعة منزليًا في فيوري سان فرانسيسكو ، في حين أن المياه النباتية هي جوهر وجزء من خط الإنتاج الياباني. وأيضًا خلال الصيف التقطت زجاجة من In Fiore Raffermissant Fleur. هذا جزء من خط صنع في اليابان وهو مصل. إنه مشابه من بعض النواحي لـ Sauvetage ، الذي كنت قد التقطته في موسم العطلات الماضي ومررت بزجاجة كاملة ، لقد أحببته حقًا. إنه & # 8217s مثل مصل SOS للبشرة. لكنني بدأت للتو في استخدام Raffermissant Fleur وأرسلت بالفعل Julie Elliot - مؤسسة In Fiore ، التي أتواصل معها عبر وسائل التواصل الاجتماعي من وقت لآخر - أرسلت لها رسالة وكنت مثل ، "لقد بدأت للتو في استخدام Raffermissant Fleur و مررت بزجاجة كاملة من Sauvetage ، لقد أحببتها حقًا ، لكن Raffermissant Fleur يشعر بأنه أكثر انسجامًا معي ". لذلك كانت تساعدني نوعًا ما في تمييز الاختلافات بين الاثنين ، وبشكل أساسي ، فإن Raffermissant Fleur يعمل على زيادة الدفء والدورة الدموية للجلد ، وهو ما لاحظته بالفعل على الفور ، وسنرى كيف ستتحقق مع مرور الوقت. لقد لاحظت نوعًا أكثر من لون بشرتي منذ استخدام هذا ، لكن نسيج المصل فخم للغاية ، بينما شعرت أن نسيج Sauvetage كان نوعًا ما يشبه النهاية الجافة ، إذا كان ذلك منطقيًا. مثله يمتص وهذا يرطب البشرة بشكل جيد للغاية لكنه يترك الجلد قماشًا محايدًا تمامًا ، حيث أشعر أن Raffermissant Fleur أكثر امتلاءً قليلاً. لذلك هناك & # 8217s هذه الاختلافات الدقيقة بين المنتجات.

لذلك بدأت للتو في استخدام Vitale Toning Floral Essence ، والذي هو نوع من ، كما تعلمون ، يحل محل أي مسحوق حبر في الروتين. أحبها. لقد استخدمته وإيقافه على مر السنين و # 8217 سيكون تغييرًا رائعًا للسرعة من المياه النباتية ، التي أحببتها حقًا ولكن - في الواقع ، تعتبر المياه النباتية منتجًا رائعًا للعناية بالبشرة في فصل الشتاء لأنها & # 8217re مرطب للغاية. هم & # 8217re ينعم جدا للجلد. بينما بالنسبة لي ، يعتبر Vitale أكثر - إنه & # 8217s أكثر تنوعًا قليلاً. أعتقد أنه & # 8217s أكثر انتعاشًا قليلاً ، فهو يشعر بمزيد من التركيز على الأعشاب وما شابه ، نوعًا ما مثل أنه يحتوي على المزيد من الدعم العشبي ، في حين أن المياه النباتية حقًا نوعًا ما مثل نوع البشرة المثالية والكمال. التكنولوجيا فيها.

لذا ، نعم ، أردت أن أذكر أنني & # 8217m باستخدام هذين المنتجين الجديدين من In Fiore ، ولكن لأي شخص مهتم بتجربة In Fiore ، كنت قد وعدت بأنني سأفعل - حسنًا ، لدي مجموعة فارغة في Fiore لأنني & # 8217ve كنت أستخدم قدرًا كبيرًا من In Fiore خلال العام الماضي ، لذلك لدي بعض الفراغات. كنت سأقوم بتقديم مقدمة للعلامة التجارية لأنني ، كما تعلم ، أقوم بعمل Petit Conseils كل شهر على Patreon ، ودائمًا ، كل شهر ، أحصل على شخصين على الأقل يريدون مقدمة عن In Fiore. أو يخبرونني ما هي مخاوف بشرتهم وما قد أوصي به من العلامة التجارية لأنني جربت ، كما تعلمون ، الكثير من العلامة التجارية في هذه المرحلة. لذلك اعتقدت أنه سيكون من المفيد عمل مقطع فيديو حول هذا وكنت أخطط للقيام بذلك في الوقت المناسب لبيع الجمعة السوداء. والآن بعد أن & # 8217 يفعلون ذلك مبكرًا ، أنا فقط - أنا & # 8217m مثل ، "هل سأحصل على وقت؟" لا أعرف & # 8217t. أنا & # 8217m في منتصف العديد من المشاريع الأخرى. سأبذل قصارى جهدي. ولكن في النهاية سأفعل ذلك - وآمل أن أحصل عليه في موسم الأعياد هذا فقط ، مقطع فيديو على In Fiore للناس.

دع & # 8217s ننتقل إلى ما ثبت أنه أكثر اكتشافات الجمال عمقًا وجديدًا لعام 2020. لفة الأسطوانة ، أو ربما تعرف بالفعل ما هو: Earthwise Beauty. ليست علامة تجارية جديدة ولكنها جديدة بالنسبة لي هذا العام. لقد بدأت أخيرًا في تجربة منتجاتهم في شهر مارس ، على ما أعتقد ، بعد - أعني ، لا أعرف حتى عدد السنوات التي سألني فيها الأشخاص عن العلامة التجارية ، وأخبروني عن العلامة التجارية ، وأخبروني أنهم يعتقدون أنني سأحب العلامة التجارية. وها أنا ذا كل هذا الوقت لاحقًا ، أخيرًا أصبح الوقت مناسبًا لتجربتهم وأكون ، مثل ، مجرد تحول حقيقي في حياتي الجمالية بسبب ذلك. لذا فإن المنتجين الجديدين اللذين اختبرتهما من خلالهما هما قناع Ava & # 8217s الذي تم إطلاقه حديثًا. أطلق عليه & # 8217s قناع الوجه بلسم إمحوتب ، وهو عبارة عن مسحوق - أعتقد أنهم يصفونه بأنه مثل مسحوق الطين المسحوق. لذلك كنت أحاول ذلك ، ثم حاولت أيضًا تجربة مصل مرونة الوجه الخاص بهم ، والذي كان خارج المخزون معظم هذا العام حتى ، على ما أعتقد ، قبل شهر. لقد تغير مورد الصبار الخاص بهم. لذلك علمت أن هناك مشكلة في عدم إنتاجه لمعظم هذا العام ، وكان لها علاقة بالحصول على تناسق التبلور الصحيح للصبار في هذا المنتج. لذلك أفكر في المرونة - لذا فهي تأتي في جرة ، مثل كيفية ظهور أقنعةهم وبلسمهم ، لكنه في الحقيقة نوع من المصل السائل ، الذي يسهل اختراقه. في الواقع ، أتساءل عما إذا كان & # 8217s - يجب أن يكون لزجًا جدًا للذهاب إلى المضخة ، لكنني أعتقد أن هذا مجاملة لشيء مثل Nap في Meadow ، وهو مصل آخر يعتمد على الألوة. إنه & # 8217s في موزع مضخة. لقد كان لدي تطور كامل مع هذا المنتج. لقد تحدثت عن ذلك بشكل مكثف للغاية في فيديو جوائز A Night for Green Beauty 2019 الذي نشرته على YouTube الشهر الماضي. مشروع ضخم بالنسبة لي ، استغرق الأمر ستة أشهر ، وربما أكثر ، لاكتساب واختبار كل شيء وأيضًا لإيجاد الوقت لتصوير مثل هذا النوع من الختام الملحمي لمشروع طويل الأجل ، ولكن مشروع قيم حقًا ، وكان أيضًا واحدًا من الأسباب التي دفعتني إلى أن أكون مثل ، "حسنًا ، سأحاول Earthwise" لأن Nap in the Meadow كان أحد هذه المنتجات الحائزة على جوائز. لقد قمت بالفعل بتفصيل تجربتي معها هناك لأنها لم تكن & # 8217t واضحة جدًا. في البداية ، اعتقدت أنه لم يكن & # 8217t سيعمل من أجلي بسبب محتوى الزيت العطري العالي والآن أنا & # 8217 م على الزجاجة الثانية؟ نعم ، أعتقد أنني بدأت للتو بزجاجتي الثانية ، لكنني مررت بزجاجة كاملة منها خلال الأشهر الستة الماضية أو نحو ذلك.

لذا فإن المرونة يمكن أن تأخذ مكانًا ، على ما أعتقد ، من قيلولة في المرج. أشعر - بالنسبة لي ، أفضل القيلولة في المرج في الصباح والمرونة في المساء. لم أتمكن من تخصيص وقت كافٍ للمرونة حتى أكون قادرًا على ذلك ، لأشعر نوعًا ما كيف تميزت عن غيرها من الأمصال Earthwise. مثل ، أنا في الأساس بحاجة إلى مزيد من الوقت معها. أتمنى لو كان في مضخة لأنني في النهاية اضطررت إلى غمس ملعقة في هذا. كان هذا ، على ما أعتقد ، مصل Carrot A Day Face Serum من Earthwise ، والذي كان بمثابة المنتج الأكثر مبيعًا بالنسبة لهم. إنه & # 8217s نوع جدا من نطاط مصل هلام. يبدو - أعتقد أن ما سأقوله ، فقط انطباعاتي الأولية التي استخدمتها هنا وهناك على مدار الزوجين الماضيين ، على ما أعتقد ، ربما في الشهر الماضي كنت أستخدمه هنا وهناك. إنه يترك الجلد متماسكًا أكثر من شيء مثل قيلولة في المرج ، وأعتقد أنه مع استخدام مخصص - لكن انظر ، قيلولة في المرج تفعل هذا أيضًا ، والذي أشعر بنوع من الأهداف لفرط التصبغ ويعمل على تحقيق التوازن لون البشرة. سأقول إنني أفضل تجربة القيلولة في المرج ، تمامًا مثل الرائحة وغير ذلك. إن رائحة المرونة هي أنها نوع من المرارة في الواقع ، والتي أعتقد أنها مثيرة للاهتمام حقًا. إنه يشبه نوعًا ما من مادة قابضة حادة - إنه ليس شمرًا حقًا ولكنه يشبه نوعًا ما يشبه القليل من الفلفل ، وهو قابض قليلًا. لذا ، نعم ، بالتأكيد ملف تعريف مثير للاهتمام حقًا للرائحة ، متميز جدًا عن المنتجات الأخرى التي صنعوها ، وأنا أتطلع إلى دمج هذا بطريقة أكثر تخصصًا في روتيني.

لذا فإن قناع الوجه ، قناع الوجه بلسم إمحوتب. بادئ ذي بدء أحب المرجع المصري. أعتقد - كنت سأقول إنني أشعر أن الكثير من الناس لديهم اهتمام بمصر القديمة عندما يكون الأمر كذلك ، هذا & # 8217s فقط كوني غريب الأطوار ، لكنني أشعر - أعلم أن آفا لها صلة بمصر ، ونعم ، إنها & # 8217s مجرد فترة تاريخية مثيرة للاهتمام للغاية. إذن هذا هو القناع الثالث في نطاق Earthwise. لديهم أيضا إله الشمس و Catharsis. ولقد استخدمت هذا مرة واحدة بعد بخار الوجه. لقد أثار القليل من الاحمرار في بشرتي ، لكن Catharsis تفعل ذلك أيضًا ، مما يخبرني أنه لا يمكنني تركه على بشرتي طالما فعلت. يمكنني العيش لمدة 30 و 35 دقيقة ، وفي الواقع ، أعتقد أن Sun God - حسنًا ، سأقول فقط Sun God & # 8217s المفضل لدي ، لكن Catharsis هو المفضل كقناع تطهير ثانٍ ، اشطفه في دش. إنه منشط للبشرة سريع المفعول. إنه يشبه تأثير الفيتامينات المتعددة أو مثل نوع التسريب من فيتامين IV على الجلد في مثل هذا الوقت القصير مع قدر ضئيل جدًا من الجهد. لذا فإن قناع الوجه بلسم إمحوتب. مرة أخرى ، أحتاج إلى استخدامه أكثر ، وأعتقد أنني & # 8217 م سأقوم بتجربته ، أكثر شبهاً بـ Catharsis من Sun God ، مما يعني أنني لن أتركه على بشرتي لأكثر من 5 إلى 10 دقائق و سأقوم نوعًا ما بمعايرة الوقت للعثور على تلك النافذة المثالية التي أحصل عليها من التأثيرات الغذائية ، وتأثيرات التوضيح ، وتأثيرات التطهير العميق ، وتأثيرات التجديد. اممم ، مرة أخرى ، هي & # 8217s تشبه المرونة. أشعر أنني بحاجة إلى مزيد من الوقت لتحديد موقعه ضمن النطاق الأوسع ، لأن منتجات Earthwise الأخرى التي أستخدمها منذ مارس / آذار ، لذلك أمضيت وقتًا أطول معهم. لكن نعم ، أردت أن أخبركم يا رفاق أن هؤلاء كانوا أيضًا في قائمة انتظار الاختبار. وأيضًا للتذكير فقط ، يمكنك دائمًا توفير 10 ٪ على طلب Earthwise Beauty الخاص بك أو في Pacific Northwest Essences ، وهي شركة Ava & # 8217s الشقيقة للزهور. يمكنك فقط استخدام الكود "Lamour" ، L-A-M-O-U-R. إنه & # 8217s متعدد الاستخدامات ، لذا فهو ليس مجرد شيء لمرة واحدة يمكنك استخدامه عدة مرات كما تريد على أي عدد تريده من المنتجات ، وخصم 10٪ ، وآمل أن تجد هذا مفيدًا إذا كنت & # 8217re تتطلع لاستكشاف العلامة التجارية.

لذا أشعر الآن أنه يجب أن نتحدث عن Biophile - والذي ، إذا كان لا يزال متاحًا كاكتشاف مربع من خلال Beauty Heroes هذا الشهر في اليوم الذي أنشر فيه هذا ، فسوف أقوم بتضمين رابط لك أدناه للاشتراك ، إذا كنت & # 8217re مهتم. يمكنك القيام بشهر - تمامًا مثل صندوق شهر واحد مع Beauty Heroes الآن ، وهذا خيار. حسنًا ، Biophile هي علامة تجارية للعناية بالبشرة تركز على التخمر. هناك & # 8217s ثلاثة منتجات في المجموعة والمنتجان الموجودان في الصندوق هما Bio Shroom Rejuvenating Serum و Root Bionic Refining Essence. ثم المنتج الثالث الذي يقومون به - ليس في العلبة ولكنه متاح على موقع Beauty Heroes - هو Bio Barrier Nourishing Oil. لذلك من المفترض أن يتم تطبيقها بترتيب الجوهر والمصل والزيت. أتيحت الفرصة لسفراء علامة Beauty Heroes لإجراء مكالمة تعليمية حول العلامة التجارية. يقولون ذلك ، "على عكس أي شيء في السوق ، يجمع Biophile بين قوة التخمير الحيوي والطبيعة لإنشاء مستحضرات العناية بالبشرة المستدامة المؤيدة للميكروبيوم والتي تعمل".

لذا أعتقد أن محبي الحياة يعني "عاشق الحياة" ، وأعتقد أن هذه علامة تجارية مثيرة للاهتمام وأيضًا وقت ممتع لهذا النوع من العلامات التجارية ، أو حقًا هذا النوع من فلسفة العناية بالبشرة. لذلك لأي منكم يعرف ، على سبيل المثال ، تعاون ماري فيرونيك وكريستينا هولي للعناية بالبشرة. أشعر أن هذه هي المرة الأولى حقًا - وأعتقد أنهم خرجوا بذلك قبل عامين أو ثلاثة أعوام ، وربما أكثر كما نعلم ، أفقد مسار الوقت. لكن هذه كانت المرة الأولى التي شعرت فيها وكأنني بدأت في سماع هذا المنظور حول العناية بالبشرة أو هذا التركيز على ميكروبيوم الجلد وحماية أو استعادة الحاجز الواقي ، مما يخلق حاجزًا صحيًا للجلد أو عباءة حمضية. أعني ، إنهم & # 8217re نوعًا ما متصلون ، أليس كذلك؟ لأن ميكروبيوم الجلد مسؤول عن حاجز البشرة وأشياء من هذا القبيل. ومن المثير للاهتمام ، كما نرى - أعني ، لا أريد بالضرورة أن أسميها اتجاهًا ، لكن هذه الأفكار التي تظهر في مجتمع الجمال البيئي أو الأشخاص المتحمسين جدًا للعناية بالبشرة. بدأت أرى هذا الاتجاه نحو التنصل بشكل أساسي من جميع أنواع العناية بالبشرة وكوني بسيط للغاية. أفكر على سبيل المثال ، جيسيكا ديفينو ، التي & # 8217s صحفية تجميل. تكتب الكثير عن بساطتها للعناية بالبشرة. تستخدم كمية قليلة جدًا من المنتجات على وجهها ، مثل عسل مانوكا وماء الورد وزيت الجوجوبا ، ومع ذلك فهي مراسلة تجميل. (ضحكات خافتة) لذا ، كما تعلمون ، لا أعرف كيف تربيع تلك الفلسفة مع أي اختبار تحتاج إلى القيام به. لذلك أشعر أن هذا منظور يتجذر أكثر فأكثر.إنه & # 8217s ، كما تعلمون ، نوعًا من منظور مناهض للرأسمالية. إنه & # 8217s إعادة تعريف منظور معايير الجمال. إنه & # 8217s تقديرًا لوجهة نظرنا البيولوجية ، تقريبًا مثل الاستصلاح. لذلك أعتقد أن هناك & # 8217s هناك الكثير وهذا & # 8217s لماذا عندما اكتشفت أن هذا سيكون اكتشاف Beauty Heroes ، اعتقدت ، نعم ، هذا & # 8217s ، إنه مثير للاهتمام حقًا. واعتقدت أيضًا أنه كان تغييرًا لطيفًا في السرعة بعد صناديق Pai و One Love Organics ، وهي عبارة عن جمال أخضر واضح جدًا ، كما تعلمون ، وقدامى المحاربين المجربين والحقيقيين في هذه الصناعة. ثم تحصل على Biophile ، وهو شيء جديد ومثير للاهتمام للغاية. والتجربة حقًا سلسة جدًا ولذا أعتقد أنها ستجذب الأشخاص من هذا النوع - أعني ، بصراحة ، تجربة استخدام المنتجات ليست ضجة على الإطلاق ولا ضجة. وبصراحة ، كان هذا نوعًا ما شعرت به تجاه منتجات كريستينا هولي وماري فيرونيك أيضًا. إنهم & # 8217 ليسوا كثيرًا ، أعني - يبدو الأمر سيئًا أن نقول إنهم & # 8217re ليسوا مثيرون للغاية ، لكنني لا أعني ذلك بطريقة سيئة على الإطلاق. & # 8217s ما يمكن قوله عن المنتجات التي قد لا تكون براقة ولكنها تدعم حقًا علم الأحياء الخاص بك ولبشرتك. وفي الواقع ، أعتقد أن Biophile ، من حيث الخبرة ، أكثر إثارة للاهتمام قليلاً من منتجات Kristina Holey التي جربتها ، والتي يجب أن أقول أنني أحبها حقًا أيضًا. لكنهم لا يعطونني ذلك "je ne sais quoi" الذي أبحث عنه أحيانًا في المنتجات التي تقدمها لي علامة تجارية مثل In Fiore ، على سبيل المثال أن علامة تجارية مثل Inlight أو Earthwise تعطيني ، على سبيل المثال. لكنني أعتقد أنه كنوع من إعادة ضبط الجلد أو SOS للجلد ، فإن منتجات Kristina Holey / Marie Veronique رائعة.

Biophile هي - هذه المنتجات التي أرغب في الالتزام باستخدامها حصريًا لبضعة أسابيع ، مثل AM و PM ، وأرى نوعًا ما ما ألاحظه. هذا & # 8217s في الواقع ما أوصت به جيني من Beauty Heroes أن نفعله جميعًا ، هذا نعم ، كما قد يكون من الصعب وضع كل شيء آخر جانبًا عندما تكون & # 8217 مدونًا أو صحفيًا أو ما لديك ، ولكن هذا حقًا محاولة جديرة بالاهتمام مع بيوفيلي. لقد تم وضعي - أقوم بهذا الروتين صباحًا ومساءً ، كما تعلمون ، مرة أخرى ، نوعًا ما هنا وهناك ، نوعًا من الطريقة التي اختبر بها منتجات Earthwise. الجوهر ، الذي سيكون الخطوة الأولى ، لديه بعض خصائص التقشير ، لذا فهو ليس منتجًا أريد الإفراط في استخدامه. لكنني سأقول إنني سأستخدمه ربما ثلاث مرات في الأسبوع ، في حين أن مصل Bio Shroom Rejuvenating Serum والزيت الذي سأستخدمه كل يوم ، على الأرجح. إنهم يعملون بشكل جميل معًا. إنها حقًا تجربة سلسة. أقوم بمضختين من الجوهر ، دع ذلك يغرق بسرعة كبيرة ، مضخة المصل ومضخة الزيت. إنه & # 8217s فقط - أحب كيف يتلاءمون جميعًا معًا كثلاثي. وأعتقد أنه & # 8217s لطيف حقًا في الصباح. أشعر أن ذلك يكفي & # 8217s في المساء ، على الرغم من أننا لسنا في نهاية فصل الشتاء ولكن هنا في شيكاغو ، لذلك سأحتاج إلى مزيد من الوقت. سأقول إن مدة الصلاحية ، كما علمت ، تبلغ حوالي ثلاثة أشهر. لذلك إذا كنت & # 8217re من عشاق المنتجات ولديك الكثير من الأشياء حولك ، فأنت تريد التأكد من أن هذه الأشياء ستحصل على الأولوية لمدة ثلاثة أشهر ، على ما أعتقد. أم ، وسأفترض أن كمية المنتجات التي يقدمونها لك جيدة ربما سأقول ثلاثة إلى أربعة أشهر ، اعتمادًا على كيفية استخدامها.

لدي شيء واحد يمكن أن أخبرك به من 5Yina ، ومع ذلك ، لم تتح لي الفرصة بعد لتجربته ولكني & # 8217 سأذكره هنا. إنه & # 8217s قناع علاج 5Yina Moonlit Pearl لإزالة السموم. لذلك أعتقد أن هذا هو منتج 5Yina الذي تم إطلاقه حديثًا. إنه & # 8217s للغاية - يا إلهي ، تنبعث منه رائحة شجرة عيد الميلاد - إنها & # 8217s رشيقة للغاية ورائحة الصنوبر. إنه & # 8217s أسود فحم لزج وسميك - أعني ، يمكنك سكبه. إنه & # 8217s قناع فضفاض إلى حد ما. يذكرني ربما قليلاً من قناع Naturallogic Detox Hydration ولكنه أقوى بكثير من الرائحة ، وأنا أخشى إلى حد ما استخدامه لمجرد الرائحة القوية. وأنا دائمًا متردد قليلاً مع أقنعة فحم التخلص من السموم ، فهم يميلون إلى إعطائي مظهر "لقد امتصت الحياة منك للتو". لقد تحدثت عن هذا عندما راجعت مربع Boxwalla لشهر أكتوبر الذي كان يعرض قناع Naturallogic ، إذا كنت تريد أن تسمع عن ذلك. بالتأكيد سأجرب منتج 5Yina هذا. عموما أنا أحب العلامة التجارية. لقد استخدمنا في الواقع علاج اليد الذي كان منتجًا آخر تم إطلاقه حديثًا نسبيًا لهم. إنه بلسم كثيف جدًا ، لذلك لا تريد حقًا استخدامه ثم تفضل الكتابة على الكمبيوتر أو أي شيء آخر ، ولكنه لطيف حقًا كما هو الحال في المساء قبل النوم. لذلك سأحاول 5Yina Moonlit Pearl. سوف ابقيك على اطلاع.

هذا - أعتقد تقنيًا أنني أعتبره منتجًا للعناية بالبشرة. سائل ليبار Elemental Day Silk 12٪ غير نانو الزنك. لقد عرضت هذا - في الواقع ، أعتقد أنني نشرت للتو حول هذا الموضوع على Instagram ، وأنا & # 8217ve كنت أختبره في البث المباشر الخاص بي ، استعد معي على Patreon. لقد أعجبتنى حقا. سأقول أنه & # 8217s ربما لن يكون للجميع. & # 8217s سيكون مشابهًا للواقي الشمسي المرطب جدًا أو SPF ، مثل Kari Gran 365 ، مثل Honua Malu ، مثل Solara Daily - أعتقد أنه يطلق عليه Time Traveler. يجب أن تعجبك بشيء يبدو أثقل قليلاً على البشرة ، يكون مرطبًا للغاية ، ويترك القليل من البقايا. لم & # 8217t لاحظت أي يلقي بيضاء علي. انها تخرج بيضاء تماما. أم ، هذا هو نوع المرطب / SPF الهجين الذي أعتقد أنك لن ترغب في استخدامه إلا في الخريف والشتاء. لدي شعور بأنه سيتعرق ويذوب بشرتك إذا استخدمته في الطقس الحار ، لكنه مغذي للغاية للبشرة. إذن نحن الآن & # 8217 قد مررنا بهذا الانتقال الموسمي ، على الأقل هنا في شيكاغو حيث أعيش. كل شيء أكثر جفافاً وأشعر أن بشرتي جافة قليلاً في الصباح ، لذلك أحتاج إلى شيء لإخمادها. لذلك من المحتمل أن أتخلى عن زيت أو بضع قطرات من الزيت ثم أقوم بعمل أربع إلى خمس مضخات من هذا ، وهذا النوع من المرطب و SPF في واحد وأنا حقًا أحب ذلك ولكن مع تلك التحذيرات.

حسنًا ، ملمع الوجه من رانافات إمبريال جلو. حسنًا ، أولاً وقبل كل شيء ، دع & # 8217s نتحدث عن كيفية قيام Ranavat للتو بإعادة تصميم العلامة التجارية أو إعادة تصميم العبوات. ليس حقًا إعادة تسمية لأن العلامة التجارية هي نفسها في الغالب ولكنها أعادت تصميم بعض العبوات لمنتجاتها ، مثل Radiant Rani Brightening Saffron Serum. أعني ، أنت & # 8217re فقط ستذهب - هذا هو الوقت الذي أتمنى فيه أن يكون لدي عنصر مرئي لمشاركته معك لأنه عليك أن تذهب بصريًا لترى المربعات التي تبدو عليها هذه المنتجات ونوعها التجربة مثل. هذا هو مستوى Kjaer Weis. هذا في مستوى Fiore. يبدو الأمر وكأنك تفتح قطعة مجوهرات باهظة الثمن أو مثل ساعة أو كشيء مميز حقًا. إنهم هؤلاء - يا إلهي. الظل الأخضر لهذه الصناديق - بالإضافة إلى اللون الأزرق اللازوردي الذي أتحدث عنه دائمًا - هذا النوع من الصياد الأخضر ... يا إلهي ، هذا يجعلني أضعف في الركبتين. إنه & # 8217s حقًا ، رائع حقًا. لذا فإن Radiant Rani & # 8217s في زجاجة جديدة. لقد تحدثت عن هذا وأظهرت هذا في الواقع في فيديو unboxing الذي نأمل أن يتم عرضه على YouTube في الوقت الذي تسمع فيه هذا ، لذلك سأضع ذلك في شريط الوصف لك إذا كنت تريد أن تذهب بصريًا لترى كل هذه الأشياء .

لذلك كان ملمع الوجه هو الشيء الوحيد الذي لم أجربه & # 8217t. مقشر جسدي ، يحتوي على حبيبات أرز مطحونة جيدًا ، على ما أعتقد ، و & # 8217s في مثل قاعدة كريم. من المفترض أن تستخدمه مرة إلى ثلاث مرات في الأسبوع. الآن أنت تعرف كيف أشعر تجاه المقشرات الجسدية. إنهم & # 8217 لا يحبونني. إنهم دائمًا ما يجعلون بشرتي حمراء ، حتى أكثرها رقة. مثل أحدث ما جربته ، لكنني جربته من قبل ، هو مقشر باي جوجوبا كوكوي. مثل ، إنه & # 8217s بخير. إنه & # 8217s لطيف جدًا ، لكنني كنت مثل ، لا أعرف ، إنه & # 8217s لا يشبهني حقًا. لم أعد أقوم بأي تقشير جسدي بعد الآن. إنه يجعل فكي أحمر حقًا ، أنا فقط - بشرتي بشكل عام لا تعجبه & # 8217t. لكن كما تعلم ، سأجرب أي شيء مرة واحدة على الأقل لـ L’Amour ، مع وجود استثناءات. مثل ، لن أحاول EGF ، لكن سأحاول مقشرًا جسديًا. لذلك - في الليلة الماضية ، قمت بكمية كبيرة جدًا من هذا ، مثل ملعقة صغيرة ، وكان قوامه كريميًا ويشعر في الواقع بأنه مشابه جدًا لقاعدة كريم Ceremon Cleanser ، وهو منتج آخر مفضل بالنسبة لي لعام 2020 ، مثل الاكتشاف المفضل. كان في Beauty Heroes في وقت مبكر جدًا من العام ، على ما أعتقد في يناير أو فبراير ، وقد أحببته. وفي الواقع ، كان هذا هو ما دفعني للتواصل مع ميشيل لجعلها تشارك في البودكاست ، لأنني فقط تذكرت كيف أعتقد أن الكثير من منتجاتها مميزة. لذلك عملت بلطف شديد على بشرتي. جزيئات التقشير متناثرة جدًا ، لذا لا يوجد الكثير منها ، إذا كان ذلك منطقيًا. مثل ، تركيز جزيئات التقشير ضئيل ، على الأقل في أول تطبيق لدي. وهم & # 8217 صغيرة جدًا ، لكنهم متينون جدًا. لقد حاولت للتو وصف هذا لشخص آخر ، لذلك سأحاول بذل قصارى جهدي. لذا لا يوجد الكثير منهم ، لكنهم يشعرون - كما لو كانوا مختلفين عن كرة الجوجوبا الدقيقة ، التي تشعر - كما تعلم ، إذا جربتهم ، فإنهم يشعرون بنوع من الإسفنجي والصدق ، مثلهم & # 8217re لا تفعل الكثير حقا. (ضحكات خافتة) لكن هذا ، يمكنني بالتأكيد أن أشعر بقليل من متانة جسيم التقشير. وكنت لطيفًا جدًا. كانت التجربة رائعة حقًا ، لأنها تشبه نوعًا ما منظف المراسم بالإضافة إلى القليل من الجرأة ، بشكل أساسي. تركته على بشرتي لبضع دقائق ، مثل ، مشابه جدًا لكيفية استخدام Earthwise Catharsis. تركته على الجلد ، قفز في الحمام ، ثم قمت بشطفه بعد بضع دقائق. خرجت من الحمام وأنا أمزح معك ، ليس هناك أثر للاحمرار على بشرتي ، وليس أثرًا للتهيج ، في الواقع. ويمكن أن يكون صدفة.

كما تعلم ، لا أريد أن أكون متفائلًا بشكل مفرط بأن شيئًا ما قد بدأ أخيرًا في مساعدة فكي pilaris ، أو الوردية الوردية الفكية ، مثل ، لا أعرف حتى ما هو ، فخط الفك الخاص بي أصبح أحمر اللون ويبدو وكأنه لدي تصبغ في تلك المنطقة. إنه & # 8217s يتعلق ، على ما أعتقد ، بالتحولات الهرمونية بعد الولادة وما إلى ذلك. لكنها & # 8217s مزعجة وتغضب كثيرًا في الواقع بسبب المنتجات. لكن أعني ، سأكون مرتبكًا إذا لم يكن أفضل ما نظر إليه منذ شهور. هناك منتج آخر سأقوله يساعده كثيرًا وهو Earthwise Tigris. أيا كان ، كما تعلم ، كل ما تستخدمه في ذلك يبدو أنه يعمل جيدًا جدًا للبشرة الملتهبة ، على الأقل بالنسبة لي. في الواقع نسيت الاسم. أعتقد أنه كان & # 8217s spikenard أحد المكونات التي تستخدمها والتي ركزت عليها نوعًا ما على الشعور بأن هذا هو ما كان يحدث فرقًا بالنسبة لي. ولكن على أي حال ، كانت التجربة الأولى إيجابية للغاية مع Ranavat Facial Polish ، لكنني سأضطر بالتأكيد إلى مواصلة الاختبار لمعرفة ما إذا كان احمرار خط الفكي أقل ، كما تعلمون ، في المكان الذي أمضيه في الدورة الشهرية. يعني ، هذا يعتمد على أشياء كثيرة. واعد جدًا حتى الآن ، على الرغم من ذلك.

الآن دعونا # 8217s تنتهي حلقة اليوم & # 8217s مع هذه المنتجات وكيل ناطر. لقد تم إرسالي مؤخرًا - لم أستقبل في الواقع الوكيل ناتور للعلاقات العامة من قبل. لقد تلقيت بعض الأشياء من خلال Beauty Heroes. ومع ذلك ، لم يعد Beauty Heroes يحمل العميل Nateur. هذه العلامة التجارية - أعني ، أنجزت واحدًا أو اثنين - أعتقد أن أحد مقاطع الفيديو السابقة عن العميل ناتور. لقد راجعت صندوق Beauty Heroes ، وأنا & # 8217m أحاول حتى أن أتذكر ما قلته عنه لأن الكثير من الأشخاص لا يستخدمون هذه العلامة التجارية بشكل انعكاسي لأن الشخص الذي يقف وراء العلامة التجارية ، Jena Covello ، هو نوع من الاستقطاب والمثير للجدل شخص. الآن لا أقول هذا على الإطلاق - إنه & # 8217s ليس شيئًا سلبيًا. أعتقد أنها & # 8217s مجرد حقيقة وأعتقد أنها ستقول الشيء نفسه عنها أيضًا. لديها - آه ، الكثير من المعتقدات السياسية على حسابها الخاص. ، لذلك ليس تحت إدارة العميل ناطر ، ولكن ، كما تعلمون ، هي وجه العلامة التجارية والأشياء. لذلك هناك & # 8217s الكثير من الأشخاص الذين يعارضون ذلك وفازوا & # 8217t يشترون العلامة التجارية بسبب ذلك. مرة أخرى ، أريد أن أقوم بقليل من التحقيق الأعمق والتكشف العميق والتفكير بنفسي في ذلك. بالتأكيد ، في انتخابات عام 2016 ، لاحظت بعض الأشياء التي شعرت في ذلك الوقت بعدم اليقين بشأنها ، وأعتقد أنني سأقول ذلك. لكن لدي فقط ، كما تعلمون ، أفكار مختلفة - مختلفة. وأعتقد أن ما سأشاركه هنا هو - لا أعرف ، مثل ، هل يمكنني الخروج وأقول إنني أعتقد أنه & # 8217s ليس من المقبول تجريد الأشخاص الذين يفكرون بشكل مختلف عنك من إنسانيتهم؟ انظر ، أعني ، أعرف أن الكثير من الناس يريدون أن يكون لديهم هذا الخط المتشدد في الرمال ، بغض النظر عن أي شيء ، فهم لن يحترموا أبدًا مؤيد ترامب ، لأنه يجب أن يكون لديك نوع من الأساس للأخلاق والأخلاق و أن هؤلاء الأشخاص لا يعرضون ذلك. مثل ، أنا أعرف الحجج. لقد جئت من خلفية ليبرالية وتقدمية بقدر ما يمكنك الحصول عليها ، لكنني منزعج بشدة من رؤية هذا السلوك. أعني ، بغض النظر عما تعتقده ، أعتقد أن هناك الكثير من التلاعب وهناك & # 8217s الكثير من التشويه. وأعني ، مجرد القدرة على التحمل والاستماع فعليًا للآخرين هو شيء لا يفعله الناس ، وأنا فقط ، لا أستطيع دعم كل هذه المنشورات والأشياء التي رأيت الناس يتحدثون عنها ، كيف المحافظون أو أن مؤيدي ترامب ليسوا بشرًا. وليس لدي حتى كلمات توضح مدى الخطأ الذي أعتقده ، بالنسبة لي شخصيًا. ولن أخبر شخصًا آخر ، كما تعلمون ، أن & # 8217s يعملون من خلال أي قضية هم & # 8217s يفعلون ذلك - أعني ، فقط - فقط ، هذا & # 8217s موقفي الشخصي ، وأنا لا أعرف حتى إذا كانت Jena Covello - (ضحكة خافتة) كما تعلم ، أعتقد أنها لا تصوت في الواقع. على كل حال. (يضحك) أنا & # 8217m دائمًا أحب ، "يا إلهي ، هل أريد حقًا الدخول في كل هذا؟" المناخ حول مشاركة أي نوع من الآراء حول هذه الأشياء مخيف فقط. إنه & # 8217s ، من المخيف جدًا أن تقول ما تعتقده الآن أو أن تفكر فيه أو حتى أن يكون لديك فكرة ربما لم تكن فكرة نهائية ، إنه شيء تراقبه ، إنه شيء تفكر فيه . إنه شيء أنت & # 8217re تنمو وتتطور حوله ، وهناك & # 8217s مثل عدم وجود مساحة أو تسامح أو أي شيء للقيام بذلك. لذلك كان لديّ منظور متطور لهذه العلامة التجارية حيث نمت وتطورت كشخص.

لذلك لدي بعض منتجاتها لتجربتها ، ولم أعارض أبدًا تجربة منتجاتها في الماضي. في الواقع ، أعتقد أن العميلة ناتور كانت في صندوق التخلص من السموم وكانت تلك هي المرة الأولى التي جربت فيها هولي أويل ، وهو ما أعتقده - لقد خرجت لأول مرة بمزيلات العرق ولكن منذ عدة سنوات بدأت العلامة التجارية ، ثم خرجت بزيت الوجه هذا المسمى بـ Holi Oil ، وهو شخصيًا أكثر من اللازم على وجهي ، على الأقل في الوقت الحالي ، لكني أحبه في الواقع كزيت عطري. لذلك أنا آخذ قطارة ممتلئة وفركها كما هو الحال على ذراعي في بداية اليوم ، وهو أمر رائع حقًا لذلك. مرة أخرى ، كثيرًا جدًا على وجهي. لا يعمل مزيل العرق & # 8217t مع كيمياء جسدي. لا تعجبني الطريقة التي يتفاعل بها ، وأشعر في الواقع أن رائحته أسوأ من B.O. عندما أرتديه. لكن مزيل العرق شخصي للغاية وأنا أعرف الكثير من الأشخاص الذين يحبونه تمامًا. لذا فإن المنتجات التي تم إرسالها إلي هي هولي (الماء) ، وزيت تنظيف الوجه ، ومنظف حمض اللاكتيك لتفتيح البشرة ، وهولي (سي) ، وهو منتج مسحوق فيتامين سي ، بالإضافة إلى زيت هولي ومزيل العرق ، الذي - لا أعرف ، لا يشطف تمامًا ، إنه & # 8217s إلى حد ما ، على ما أعتقد ، على غرار اللمسة النهائية التي يتركها مرهم Arcana Cleansing Balm. لن يجرد الجلد تمامًا ، وهو ما أعتقد أنه رائع حقًا.

منظف ​​Lactic Acid Brightening Cleanser - سأقول ، منتجاتها قوية وأعتقد أنني أفضلها - شخصيًا ، لأنني أشبه بنوع البشرة الحساسة - لذلك أفضل المنتجات التي ليست بنفس القوة. لكنني أعتقد أنها تصمم الكثير من صيغتها للعناية بالبشرة بعد مثل ، الصيدلة الأوروبية للعناية بالبشرة ، لذا فهي شديدة التركيز. في الواقع ، منظف Lactic Acid Brightening Cleanser هو شيء يمكنني استخدامه ربما مرة واحدة في الأسبوع كحد أقصى ، وربما مرتين في الأسبوع كتطهير ثانٍ. يعطيني لمسة نهائية مماثلة لمنظف One Love Organics Vitamin A ، الذي تحدثت عنه في مكان ما مؤخرًا. لا أتذكر أين ... أوه ، أعتقد في مراجعة Beauty Heroes المجمعة لـ Pai و One Love Organics ، تحدثت بإيجاز عن منظف فيتامين أ. لقد & # 8217 يرون تقشيرًا لي شخصيًا. بالنسبة لشخص آخر ، قد يكون الأمر وكأنه لا توجد مشكلة. ينصح باستخدام زيت التطهير في الواقع كتطهير ثانٍ بعد Lactic Acid Cleanser لإعادة ترطيب البشرة. ولكن إذا كنت ترتدي المكياج ، فستحتاج إلى استخدام زيت التنظيف أولاً. لذلك ، أشعر تقريبًا أن الطريقة التي يدافع بها عن ذلك هي بمثابة تطهير ثلاثي إذا كنت ترتدي المكياج. لذلك إذا كنت تضعين المكياج وتحتاجين إلى إزالة مكياج / خطوة SPF ، فستفعلين زيت تطهير الوجه ، ثم ستستخدمين Lactic Acid Cleanser ، ثم ستنتهي بزيت التطهير ، الذي يشبه نوعًا ما قليلا كثيرا ، أليس كذلك؟ خاصة إذا كنت & # 8217re تقوم برش الماء مع كل هؤلاء. لكن الجودة والخبرة رائعة حقًا. أنا أحب أنهم & # 8217re في موزعات المضخات ، حقًا سهل الاستخدام.

مياه هولي هي نوع من أنواع هجين الحبر / الجوهر. لم أستخدمه سوى بضع مرات ، لذا سأضطر إلى تقديم تقرير مرة أخرى ، لكنه & # 8217s هو حبر الهيالورونيك واللؤلؤ والورد. استخدمته هذا الصباح على زيت للوجه واعتقدت أنه لطيف للغاية. العبوة على هذا لطيفة حقًا. إنها مثل زجاجة زجاجية بيضاء طويلة متجمدة ، أنيقة للغاية وشعور بالثقل والرفاهية. الآن هولى (C). (يضحك) هذا المنتج يخيفني. لم أحاول ذلك & # 8217t. ولكن مما رأيته على الإنترنت ، فقد كان & # 8217s قويًا. إنه & # 8217s مسحوق فيتامين C قوي ، تم تصميمه مرة أخرى بعد ، على ما أعتقد ، العناية بالبشرة في الصيدلة الأوروبية ، وهو & # 8217s مثل نسبة مئوية أعلى مما قد نستخدمه عادة هنا في الولايات المتحدة. لكنني أعتقد أيضًا أنها مصدر الكثير من مكوناتها من أوروبا ، لذا أعتقد أن الجودة كما أعتقد ، كما قلت ، أعتقد أنها جيدة حقًا. مسحوق فيتامين سي & # 8230 أعرف أن ناشط العلامة التجارية ، ناشط العلامة التجارية أليسون كالاواي ، اعتاد صنع مسحوق فيتامين سي ، الذي جربته وكان مكثفًا بعض الشيء بالنسبة لي ، لكنني تمكنت من رؤية الجاذبية.ومن ثم ، أعتقد أن النباتات الحقيقية تستخدم مسحوق فيتامين سي. لقد أصبحوا & # 8217t يتمتعون بشعبية كبيرة. أعتقد أن العلامة التجارية Jillian Dempsey قامت أيضًا ببعض البودرة مثل الخلطات والفكرة وراء ذلك أنها & # 8217s طازجة في كل مرة تخلط فيها دفعة فيتامين سي. أنا لم & # 8217t نظرت في الصيغة الدقيقة لهذا المسحوق. أحتاج إلى ثم سأحاول ذلك وأرى كيف أفعل. أعتقد أنه & # 8217s شيء تحتاج إلى استخدامه بانتظام لرؤية نتائج جيدة. من الناحية التاريخية ، يجفف فيتامين سي بشرتي دائمًا ، فيتامين سي الاصطناعي الآن هذا الإصدار الجديد الذي يستخدمه الجميع ، على الأقل في وضع معلق ، كما هو الحال في الصيغة السائلة ، Tetra-C - على سبيل المثال ، ماذا & # 8217s في Lil Fox Haute ج - أنا أعمل جيدًا مع وأعتقد أن الكثير من الناس يفعلون ذلك ، لذلك إذا كنت تعاني من التقشر والجفاف وقليلًا من رد الفعل على فيتامين سي في الماضي ، يبدو أن Tetra-C يعمل حقًا للأشخاص. لكن نعم ، أنا فضولي بالتأكيد لتجربة هولي (C). وهي تنادي - نسيت. لديها هذا التجميع ، على ما أعتقد ، لنقول & # 8217s ، من - أعتقد أنها تسميها "هولي تريو" ، حيث & # 8217 ثانية الحبر ، والألوان (C) ، والزيت ، وهو - أعتقد أنها تأتي مجمعة أو تعبئتها معًا.

حسنًا ، أنا & # 8217m أحب البدء في فقدان القوة بعد 53 دقيقة من التسجيل وبدأت أفقد كلماتي ولا أجد الكثير من المعنى ، لكنني سأجرب منتجات وكيل ناتور هذه بشكل مطول. إذا كنت & # 8217re مهتمًا ، يمكنك القدوم إلى Patreon لتسمعني أشرح لماذا لا أعتقد أننا يجب أن نحرم الأشخاص الذين يفكرون بشكل مختلف عما نفكر فيه من إنسانيتهم. وأختتم أيضًا هذه الحلقة بالقول إنني & # 8217m أيضًا اختبر مؤخرًا صندوق Boxwalla لشهر ديسمبر ، والذي يضم منتجين من Blüh Alchemy ، وهو عبارة عن إعادة صياغة لمصل Multi C وزيت الجسم الذي تم إطلاقه حديثًا ، والذي استخدمته مرة واحدة وأعتقد أنها & # 8217s استثنائية ورائعة جدًا. ثم مرهم كامل الحجم من Live Botanical يسمى Sanctuary Barrier Balm ، والذي استخدمته مرة واحدة. لذلك أنا بحاجة إلى تجربة هذه الأشياء أكثر. سأقوم بعمل حلقة بودكاست مستقلة كاملة لمراجعة الصندوق وسأقوم أيضًا بمراجعة مربع الشعر ذي الإصدار المحدود الذي يظهر فيه أنطونين.

هل يمكنك أن تقول إن الأشياء كانت مشغولة للغاية من حيث المنتج هنا؟ هناك الكثير مما يحدث. ولكن من الممتع دائمًا إجراء هذا النوع من الحديث ، كما تعلمون ، مثل ما هو الجديد والمثير ، الذي أختبره ، وبعد ذلك يمكنني الحصول على مقياس منك لما أنت مهتم حقًا بسماع المزيد بعيد المدى على. مثل ، هل تريد مني أن أجري اختبار التفاني بيوفيلي؟ هل تريد حقًا سماع هذا الشرح عن الوكيل ناتور والمنتجات؟ و ... من المفيد بالنسبة لي أن أحصل على هذا النوع من التعليقات منك حتى أتمكن من معرفة المكان الذي يجب أن أركز عليه انتباهي ، سواء في البودكاست أو في الفيديو أو ما تريد رؤيته تجريبيًا. وبعضكم يريد نوعًا ما أن يرى كل ذلك (يضحك) ، وهو ما أحصل عليه أيضًا ، لأنه من الممتع رؤية جميع الجوانب المختلفة للمنتج وتجربة المنتج ، على ما أعتقد ، من فتح العبوة إلى الانطباع الأول إلى روتين المراجعة للمراجعة النهائية فارغة. مثل ، دورة حياة تجربة المنتج ، أعني ، مثل لماذا نحن هنا ، أليس كذلك؟ لأنه & # 8217s - أعتقد أنه & # 8217s رفع المستوى وأعتقد أن هذا & # 8217s ما ، كما تعلمون ، يربطنا جميعًا هنا بكوننا مهتمين جدًا بمنتجات التجميل.


مقدمة

كان هناك اهتمام مستمر بكل من علم الأحياء والتطبيقات العلاجية المحتملة للخلايا الشبيهة بالخلايا الجذعية البالغة من نخاع العظام ، 1-17 يشار إليها إما بالخلايا الجذعية الوسيطة أو الخلايا اللحمية النخاعية (MSCs). كانت الخلايا الجذعية السرطانية من نخاع عظام الإنسان والفئران هي الأكثر تميزًا على نطاق واسع ، ويرجع ذلك جزئيًا إلى أنه من السهل نسبيًا عزلها من خلال تمسكها بالبلاستيك ويمكن توسيعها على نطاق واسع في الثقافة. أيضًا ، يمكن أن تتمايز الخلايا MSCs البشرية والفئران إلى أنماط ظاهرية متعددة للخلايا ، بما في ذلك العظام والدهون والغضاريف والعضلات والظهارة والأسلاف العصبية المبكرة.

الفئران MSCs أكثر صعوبة بكثير للعزل من نخاع العظام والتوسع في الثقافة من MSCs الإنسان أو الفئران. 10 على عكس الخلايا MSCs البشرية والفئران ، غالبًا ما تتلوث مزارع MSCs الفئران (mMSCs) بواسطة أسلاف المكونة للدم التي تتكاثر في الثقافات. يمكن استخدام الاستنفاد المناعي لإزالة السلائف المكونة للدم ، 10 ولكن حتى بعد النضوب المناعي ، تتوسع الثقافات بشكل ضعيف ، على ما يبدو لأنها تتراكم كميات كبيرة من المصفوفة خارج الخلية. حدت ميزات mMSCs هذه إلى حد كبير من القدرة على اختبار الخلايا في العدد الكبير من النماذج الجينية المثيرة للاهتمام والمتاحة الآن كفئران معدلة وراثيًا.

في التجارب التي أجريت هنا ، قمنا بتطوير بروتوكول جديد لعزل وتوسيع mMSCs. تم توسيع mMSCs المعزولة على نطاق واسع وأظهرت تعدد الإمكانات للتمايز بين الخلايا الدهنية والخلايا المعدنية. تشترك mMSCs المعزولة من 5 سلالات فطرية في عدد من الخصائص ، مثل النمو السريع من المستعمرات المشتقة من خلية مفردة إذا كانت مطلية بكثافة منخفضة. ومع ذلك ، تفاوتت معدلات نمو mMSCs من السلالات الخمس بما يصل إلى 7 أضعاف ، واختلفت الخلايا في متطلبات الوسائط لنمو الخلايا الأمثل. بالإضافة إلى ذلك ، تباينت mMSCs في ملامحها من الحواتم السطحية.


نتائج

النمط الظاهري لإجهاض الأزهار والبذور بعد الظلام المستمر

كبرنا A. thaliana Col-0 في فترة ضوئية طويلة (16 ساعة من الضوء / 8 ساعات من الظلام ، إشعاع 165 ميكرومترmol m −2 s −1) حتى يكون لديهم ما لا يقل عن اثنين من SL متطور بالكامل ، ونقلهم إلى ظلام مستمر ثم نقل مجموعات من 6-8 نباتات مرة أخرى إلى دورة الضوء والظلام بعد 1 ، 2 ، 3 ، 4 ، 5 ، 6 أو 7 أيام (تسمى DT1 و DT2 و DT3 و DT4 و DT5 و DT6 و DT7 ، على التوالي) (الشكل 1 أ). تم تسجيل النمط الظاهري المرئي بعد 14 يومًا من إعادة النباتات إلى دورة الضوء والظلام. بقيت مجموعة تحكم من نباتات NT في دورة الضوء والظلام. لم تُظهر النباتات المعالجة بالظلام نمطًا ظاهريًا مرئيًا بعد علاج مظلم لمدة يوم واحد ، ولكنها أظهرت إجهاضًا هائلاً للزهور و SL على MS بعد معالجة داكنة لمدة يومين أو أكثر (أقواس بيضاء في DT2 ، DT3 ، DT4 ، DT5 ، نباتات DT6 و DT7 ، الشكل 1 ب). نتج عن ذلك نمط ظاهري `` جزء مكشوف '' على الجذع الزهري ، مع SL مطور بالكامل أسفل منطقة الإجهاض ، و'جزء مكشوف 'به العديد من SL الصغيرة أو المجهضة والزهور ، ومنطقة في الجزء العلوي من الجذع مع عادي SL والزهور. يشير وجود SL العادي فوق الجزء العاري إلى أن قمة الجذع استعادت قدرتها على بدء وتنمية الزهور والبذور بعد نقلها مرة أخرى إلى دورة الضوء والظلام. تم قياس النمط الظاهري عن طريق حساب عدد الأزهار المجهضة و SL على MS (الشكل 1 ج ، الجدول 1). لم تكن هناك عمليات إجهاض بعد يوم واحد من الظلام ، بمعدل 23 عملية إجهاض بعد يومين من الظلام وارتفاع بطيء يصل إلى 25-30 عملية إجهاض بعد 7 أيام من الظلام. تم تطوير نمط ظاهري مماثل عندما أجريت التجربة مع نباتات أقدم بعد أن تطورت فروع النبتة الجانبية (معلومات داعمة الشكل. S1) ، ومع نباتات نمت في فترة ضوئية مدتها 12 ساعة (التجربة 2 في الشكل 1 ج والجدول 1).

اسم العلاج ظروف النمو علاج او معاملة النمط الظاهري الكمي (عدد السيليك المجهض على الجذع الزهري الرئيسي) الذي تم تسجيله بعد 14 يومًا من الشفاء.
يوم 1 2 أيام 3 أيام 4 أيام 5 ايام 6 أيام 7 أيام
1 (ليلة ممتدة 1) 16 ساعة فاتحة / 8 ساعات داكنة الظلام 0.0 23.0 24.8 27.2 26.2 30.0 33.8
2 (ليلة ممتدة 2) 12 ساعة فاتحة / 12 ساعة داكنة الظلام 0.0 29.2 25.4 26.6 30.3 29.6 30.3
3 (تثبيت غير C) 16 ساعة فاتحة / 8 ساعات داكنة 4 ميكرومترمول م −2 ث −1 ضوء 0.0 18.8 23.4 28.1 29.6 28.6 28.0
4 (تثبيت غير C) 16 ساعة فاتحة / 8 ساعات داكنة 45 جزء في المليون (CO2) 0.0 5.1 22.6 اختصار الثاني. اختصار الثاني. اختصار الثاني. اختصار الثاني.

تم التحقيق في التطور الزمني للنمط الظاهري "الجزء العاري" من خلال وضع علامات ، كل يوم ، على الزهور التي وصلت إلى المرحلة 13 (عندما تفتح براعم الزهور وتظهر البتلات ، سميث وآخرون. 1990) ، بدءًا من يوم واحد قبل المعالجة المظلمة وتستمر حتى 7 أيام بعد إعادة النباتات إلى دورة الضوء والظلام (الشكل 2 المعلومات الداعمة ، الشكل S2). تشكلت الأزهار الأربعة التي وصلت إلى المرحلة 13 في الأيام الأخيرة قبل العلاج الداكن والأزهار الثلاثة التي وصلت إلى هذه المرحلة في وقت مبكر من العلاج الداكن SL ضعيفًا بشدة. في الأيام الأولى التي أعقبت العودة إلى دورة الضوء والظلام ، بدأ الجذع في النمو مرة أخرى ، ولكن جميع الزهور التي ظهرت خلال الأيام الخمسة الأولى بعد النقل أجهضت قبل المرحلة 13 أو تشكلت ضعف شديد في SL. وهكذا ، فإن SL المجهض مشتق من الزهور التي كانت مرئية في بداية العلاج ومن الزهور غير الناضجة التي لم تظهر في وقت العلاج الداكن. من 6 أيام فصاعدًا ، شكلت الأزهار التي مرت خلال المرحلة 13 SL طبيعيًا (معلومات داعمة الشكل S2). كانت بذور SL التي تطورت قبل المعالجة المظلمة وكذلك البذور من SL التي تطورت بعد التعافي من العلاج الداكن قابلة للحياة وقادرة على الإنبات (المعلومات الداعمة الشكل S3).

النمط الظاهري لإجهاض الأزهار والبذور بعد انخفاض أو انخفاض ثاني أكسيد الكربون2 العلاجات

سألنا عما إذا كان إجهاض الأزهار والبذور يحدث استجابةً للعلاجات الأقل تطرفًا والتي تمنع تثبيت صافي التمثيل الضوئي للـ C ولكنها تتجنب فرض الظلام الدامس. في التجربة 3 ، نمت النباتات في ظروف طويلة اليوم وتم نقلها إلى إضاءة منخفضة جدًا (4 ميكرومترمول م −2 ث -1) لمدة 1-7 أيام. هذا مناسب لإشارات الكريبتوكروم أو فيتوكروم (شينومورا وآخرون. 2000 كاسال وآخرون. 2014) ولكن تحت نقطة تعويض الضوء لعملية التمثيل الضوئي (

15 ميكرومترمول م −2 ث −1 ، البيانات غير معروضة). في التجربة 4 ، نمت النباتات في فترة ضوئية طويلة وتم نقلها إلى ثاني أكسيد الكربون منخفض2 جو مشابه ل CO2 نقطة التعويض

50 جزء في المليون (البيانات غير معروضة) لمدة 1-3 أيام في نظام إضاءة غير متغير. أسفرت كلتا المعالجات عن نمط ظاهري لإجهاض البذور مشابه لتلك التي لوحظت في ظل الظلام المستمر (الشكل 1 ج ، الجدول 1 المعلومات الداعمة ، الشكل S4) مع نفس الهضبة 25-30 SL المجهض. بالمقارنة مع الظلام المستمر ، كان هناك ضوء طفيف (منخفض جدًا) أو يوم واحد (منخفض ثاني أكسيد الكربون2) التأخير في الوصول إلى هذه الهضبة.

تكشف هذه التجارب معًا أنه في النباتات المزروعة لمدة طويلة لا يوجد إجهاض للزهور أو البذور عندما يتم منع التمثيل الضوئي لمدة يوم واحد ، ولكن حوالي 23 SL يُجهض عند منع التمثيل الضوئي لمدة يومين. بعد هذا الإجهاض الضخم الأولي ، يؤدي إطالة العلاج الداكن إلى زيادة صغيرة وتدريجية في عدد حالات SL المجهضة. يُشتق SL المجهض من الزهور التي ظهرت قبل أو أثناء العلاج الداكن ومن الزهور غير الناضجة التي ظهرت بعد نهاية العلاج الداكن. الأهم من ذلك ، يتم الحفاظ على النسيج الإنشائي لمدة 7 أيام على الأقل من العلاج الداكن ويستأنف تكوين الزهور الوظيفية و SL بعد العودة إلى دورة الضوء والظلام.

التوطين الخلوي لناقل أوكسين PIN1 في النسيج الإنشائي القمي

تشير الهضبة القريبة في العدد الإجمالي للـ SL المجهض من يومين فصاعدًا إلى أن بدء ظهور الأزهار الأولية الجديدة قد تم إيقافه. للحصول على مزيد من المعلومات حول الأحداث في النسيج الإنشائي الزهري ، قمنا بالتحقيق في موقع بروتين ناقل أوكسين PIN1 وشدة الإشارة من مستشعر أوكسين DII-VENUS.

دورات بروتين PIN1 بطريقة مستمرة بين الإندوسومات وغشاء البلازما (Geldner وآخرون. 2003) وعادة ما يتبنى التوزيع القطبي الذي يرتبط بإنشاء تدرجات أوكسين وإنشاء وتطوير بدائل جديدة (Benkova وآخرون. 2003 Friml وآخرون. 2003 رينهاردت وآخرون. 2003). لقد حققنا في استجابة SAM الإنجابية للعلاج الداكن بواسطة في الجسم الحي رصد التغييرات في التوطين الخلوي لـ PIN1-GFP في SAMs المجهرية ، باستخدام التصوير المجهري متحد البؤر (الشكل 3 أ ، ب). تم تحديد PIN1-GFP بشكل رئيسي في غشاء البلازما في SAM في محطات التحكم (الشكل 3 أ). ومع ذلك ، بعد يومين من الظلام (الشكل 3 ب) أو العلاج بالضوء الخافت (غير موضح) ، تم تعديل توزيع PIN1-GFP ، حيث ظهر في الغالب في حجرات دائرية كبيرة داخل الخلايا والتي يُفترض أنها حجرات فراغية (الشكل 3 ب) ، بالإضافة إلى توطين غشاء البلازما.

وقد لوحظت إشارة GFP في فجوات للنباتات المعالجة بالظلام بسبب ضعف تدهور GFP (Tamura وآخرون. 2003). لذلك أجرينا مزيدًا من التجارب لاستبعاد احتمال أن نمط الاستيعاب الداخلي لـ PIN1-GFP في النباتات المعالجة بالظلام لم يكن قطعة أثرية بسبب تغير استقرار GFP. لهذا الغرض ، تم إجراء تحديد مناعي كامل جبل PIN1 (الشكل 3 ج ، د). أظهرت الصور شبه الكمية لبروتين PIN1 الداخلي أنه في نباتات التحكم ، تم توزيع PIN1 بطريقة قطبية في SAM بأعلى مستويات في بدايات جديدة (الأسهم البيضاء ، الشكل 3 ج) كما لوحظ سابقًا (Reinhardt) وآخرون. 2003). في طبقات الإزهار ذات اللون الداكن ، تم تغيير توزيع بروتين PIN1 نوعًا وكميًا ، مما يُظهر توزيعًا أكثر تجانسًا في SAM و primordia الأزهار ، مع مستوى أعلى عالميًا في جميع أنحاء النسيج الإنشائي. على المستوى الخلوي ، ظهر PIN1 في أنماط نقطية ، على أو تحت غشاء البلازما ، لكنه حافظ على توطين قطبي (الشكل ثلاثي الأبعاد).

لتحليل ما إذا كان التحديد الخلوي الخلوي لـ PIN1 له تأثير على مستوى وتوزيع auxin ، قمنا بفحص الإشارة من جهاز استشعار DII-VENUS auxin الحيوي. يتحلل البروتين الصناعي DII-VENUS بسرعة وبشكل خاص استجابةً للأوكسين (Brunoud وآخرون. 2012). على الرغم من أننا لاحظنا بعض التباين من نبات إلى آخر (دعم المعلومات الشكل S5) ، إلا أن المعالجة المظلمة أدت إلى زيادة عالمية ملحوظة في إشارة مضان DII-VENUS في جميع أنحاء النسيج الإنشائي. كانت الحدود الدنيا المحلية لمواقع بدء الزهور التي تميز علامات التألق أقل وضوحًا من تلك الموجودة في عنصر التحكم. لوحظت أقوى زيادة عند الحدود بين الزهور الناشئة و SAM (الأسهم البيضاء ، الشكل 3f) وكذلك في الزهور الأكثر تطورًا (الأسهم البيضاء المتقطعة ، الشكل 3f). يشير هذا إلى أن مستويات الأوكسين قد انخفضت نتيجة العلاج ، وهو ما يمكن أن يرتبط بخلل في تحديد موقع PIN1.

حالة التمثيل الغذائي نبات الأرابيدوبسيس thaliana قبل تطبيق العلاجات التي تحد من الكربون

قمنا بعد ذلك بالتحقيق في المستويات والتوزيع المكاني لاحتياطيات C ، بدءًا من التغييرات اليومية في اليوم السابق للمعالجة المظلمة. لقد حصدنا ستة أنسجة: قمة الإزهار بما في ذلك الزهور المفتوحة (IF) ، و SL ، و MS ، والفروع الجانبية (LB) ، وأوراق الكولين (CL) و RL (الشكل 4 أ). تم تحديد الكمية النسبية والإجمالية للكربوهيدرات غير الهيكلية (النشا والسكروز والجلوكوز والفركتوز) والأحماض العضوية (مالات وفومارات) والأحماض الأمينية الكلية ومحتوى البروتين الكلي عند الغسق (نهاية اليوم ، ED) والفجر ( نهاية الليل ، EN) (الشكل 4 ب - ط ، مجموعة بيانات المعلومات الداعمة 1) يتم توفير النسب بين القيم عند الغسق والفجر في جدول المعلومات الداعمة S3. بالإضافة إلى ذلك ، تم استخدام تلطيخ اليود لتوفير معلومات نوعية حول التوزيع المحلي للنشا (المعلومات الداعمة ، الشكل S6).

عند الغسق ، تم العثور على أكبر محتوى من النشا في CL (الشكل 4 ب) ، حوالي ضعف المحتوى الموجود في RL في هذه الدراسة والذي تم الإبلاغ عنه سابقًا بالنسبة للوريدات التي تنمو نباتيًا Col-0 في فترات ضوئية طويلة (Haedrich وآخرون. 2012 سولبيس وآخرون. 2014). لم يكن هناك فرق كبير بين محتوى النشا عند الغسق والفجر في CL أو RL (جدول المعلومات الداعمة S3). يتناقض هذا مع النباتات ذات اليوم القصير ، حيث يكاد يكون النشا قد استنفد عند الفجر (انظر القسم الخاص بالمقدمة). كان محتوى النشا في IF و SL و MS و LB مشابهًا لمحتوى RL عند الغسق ولكنه أظهر انخفاضًا كبيرًا عند الفجر (الشكل 4 ب ، جدول المعلومات الداعمة S3). أكد تلطيخ اليود أن النشا كان لا يزال مرتفعًا عند الفجر في CL و RL (معلومات داعمة الشكل S6) وكشف عن وجود احتياطيات النشا المحلية عند الفجر في هياكل أزهار معينة بما في ذلك الخيوط (F) ، والبويضات (O) ، و pedicels (P) والأنماط (S) وفي النسيج الإنشائي الزهري (المعلومات الداعمة الشكل S6b-ii-iii). في حالة SL ، أظهرت السيقان والجدران السيليكية استنفادًا قويًا للنشا ، ولكن تطوير البذور احتفظ بالنشا عند الفجر (المعلومات الداعمة الشكل S6b-iv). أظهر محتوى النشا في CL و RL تباينًا كبيرًا من نبات إلى آخر. أظهر محتوى النشا في IF و SL و MS و LB تباينًا أقل بين النباتات.

كان سكروز ثنائي السكاريد للنقل أكبر بثلاثة أضعاف في IF و SL منه في الأجزاء الأخرى من اللقطة (الشكل 4 ج). أظهرت مستويات السكروز في IF و SL انخفاضًا طفيفًا ولكن ملحوظًا أثناء الليل. كان هناك أيضًا انخفاض معنوي في السكروز أثناء الليل في MS ، وبشكل أضعف ، في LB ، بينما لم ينخفض ​​السكروز بشكل ملحوظ أثناء الليل في CL و RL. كانت مستويات السكريات الأحادية والجلوكوز والفركتوز أعلى في SL ، ومرتفعة نسبيًا في IF و LB ، ومنخفضة في MS و RL و CL ، ولم تظهر فرقًا كبيرًا بين الغسق والفجر في أي من هذه الأعضاء (الشكل . 4 د ، هـ ، على التوالي). كان إجمالي محتوى السكر (السكروز بالإضافة إلى الجلوكوز والفركتوز) أقل بكثير من النشا في RL و CL ولكنه مشابه أو أكبر من النشا في IF و SL (قارن جدول المعلومات الداعمة S4 الشكل 4 ب مع الشكل 4 ج-هـ).

كان Malate مرتفعًا في IF و SL ، حيث كان المحتوى بنفس ترتيب السكريات الفردية (الشكل 4f). كانت مستويات الفومارات في أعلى مستوياتها في LB و MS و SL ، مع مستويات أقل في CL و RL و IF (الشكل 4g). لا توجد فروق كبيرة في مستوى الأحماض العضوية بين الغسق والفجر. كان إجمالي محتوى الأحماض الأمينية مرتفعًا جدًا في IF ، وأقل في SL وأقل بكثير في الأعضاء الأخرى (الشكل 4 ح). لم تظهر مستويات الأحماض الأمينية تغيرات كبيرة بين الغسق والفجر.

كان محتوى البروتين الكلي أعلى في IF ، وأقل في SL و LB و CL وأدنى في MS و RL (الشكل 4i). لم يكن هناك فرق معنوي في محتوى البروتين بين الغسق والفجر. المحتوى العالي من البروتين في IF يتفق مع أن الأزهار أعضاء نشطة في التمثيل الغذائي وتنمو. في حين أن محتوى البروتين في CL يشبه ذلك الموجود في وريدات النمو النباتي Col-0 (Gibon وآخرون. 2009 سولبيس وآخرون. 2014) ، كان معدل R من النباتات المزهرة أقل بمقدار الضعف مقارنة بالنباتات الأصغر سنًا. في الأوراق ، تشارك نسبة كبيرة من البروتين الكلي في عملية التمثيل الضوئي (Evans 1989). يشير المحتوى المنخفض من البروتين في RL للنباتات المزهرة مقارنةً بـ SL إلى أن RL لديها معدل أقل من التمثيل الضوئي ، مما قد يفسر جزئيًا محتوى النشا المنخفض.

باختصار ، عندما ينمو نبات الأرابيدوبسيس في فترة ضوئية طويلة في مرحلة التكاثر ، فإنه يستهلك جزءًا فقط من احتياطياته من الكربون أثناء الليل. ومن المثير للاهتمام ، أن أكبر استنفاد للنشا يكون في الأحواض التناسلية ، بما في ذلك IF ، بينما يظل النشا مرتفعًا عند الفجر في CL و RL. ومع ذلك ، فإن IF و SL تحافظ على احتياطيات النشا المحلية وتحتوي أيضًا على احتياطيات كبيرة من السكريات الذائبة والأحماض الأمينية والمالاتية عند الفجر.

حالة التمثيل الغذائي بعد علاج طويل في الظلام أو الضوء الخافت لمدة يومين

قمنا بعد ذلك بالتحقيق في استجابة احتياطيات C بعد نقلها إلى الظلام. نظرًا لأن الإجهاض بالزهور والسيليك لم يحدث في اليوم الأول واستقر تقريبًا بحلول اليوم الثالث ، فقد اخترنا اليوم الثاني لتحليلات مفصلة (الشكل 5 أ-ح ، مجموعة بيانات المعلومات الداعمة 1). تم تلخيص التغيير النسبي لكل مستقلب ونسيج في جدول المعلومات الداعمة S5. تم استخدام تلطيخ اليود لاكتساب نظرة ثاقبة حول التغييرات المحلية في تخصيص النشا (الشكل 6 أ-ط-السابع ، ب-ط-السابع).

انخفض النشا في جميع الأنسجة (الشكل 5 أ) ، مع حدوث أكبر انخفاض نسبي (حوالي عشرين ضعفًا) في IF (جدول المعلومات الداعمة S5). يمكن أيضًا ملاحظة الانخفاض الكبير في IF في الأقسام الملطخة باليود (الشكل 6). تم استنفاد احتياطيات النشا في النسيج الإنشائي والنورات الصغيرة جدًا (قارن الشكل 6a-ii ، iii مع الشكل 6b-ii ، iii). احتفظت احتياطيات النشا F و P و S عند الفجر ولكن ليس بعد المعالجة المظلمة (قارن الشكل 6 أ-الرابع مع الشكل 6 ب-4). ومع ذلك ، تم الاحتفاظ ببعض النشا في بتلات (بي) (الشكل 6 ب-الرابع). كان الانخفاض العام في النشا في SL أقل دراماتيكية (الشكل 5 أ جدول المعلومات الداعمة S5). كشفت الدقة المكانية التي يوفرها تلطيخ اليود عن استجابات ملحوظة تعتمد على الأنسجة. في حين أدى العلاج الداكن لمدة يومين إلى اختفاء النشا من السيقان والجدران وبعض بذور SL الصغيرة جدًا (الشكل 6 أ-ت ، ب) ، كانت بعض البذور التي كانت تتطور قبل بدء العلاج الداكن قادرة على الاحتفاظ بها النشا (انظر العلامات النجمية البيضاء في الشكل 6 ب-ت). تم أيضًا تقليل النشا بشكل كبير في LB و MS (الشكلان 5 أ و 6 أ-ط ، ب- ط جدول المعلومات الداعمة S5). بشكل غير متوقع ، على الرغم من انخفاض ثمانية أضعاف وخمسة أضعاف في النشا في CL و R بعد يومين من الظلام ، إلا أنها لا تزال تحتوي على كميات كبيرة من النشا (في المتوسط)

15 ميكرومترمول ج6 مكافئات g −1 FW). كان هناك تباين كبير من نبات إلى آخر في نشا الأوراق في هذا الوقت ، مع وجود بعض النباتات التي تحتوي على نسبة عالية من النشا والبعض الآخر يحتوي على القليل جدًا من النشا (البيانات غير معروضة). كشف تلطيخ اليود عن إعادة تعبئة تفضيلية لاحتياطيات النشا من الأوراق الصغيرة. في الأوراق القديمة ، تم استنفاد النشا في المناطق المحيطة بالأوردة الوسطى والأوردة الرئيسية ولكن غالبًا ما بقي في مناطق الأوراق الهامشية (الشكل 6 ب-السادس ، السابع).

أدى العلاج الداكن إلى انخفاض كبير في السكروز في جميع الأنسجة ، باستثناء LB (الشكل 5 ب ، جدول المعلومات الداعمة S5). انخفضت مستويات السكروز بشدة (ستة أضعاف) في مرض التصلب العصبي المتعدد. من حيث القيمة المطلقة ، كانت أعلى مستويات السكروز في النباتات المعالجة بالظلام في IF و SL. أدى العلاج الداكن إلى انخفاض كبير في الجلوكوز والفركتوز في معظم الأنسجة ، مع انخفاض كبير بشكل خاص (حوالي عشرة أضعاف) في IF و SL (الشكل 5 ج ، د جدول المعلومات الداعمة S5). نتيجة لذلك ، أدى العلاج الداكن إلى زيادة نسبة السكروز: hexoses في IF و SL (قارن الشكل 5 ب مع الشكل 5 ج ، د).

أدى العلاج الداكن إلى انخفاض طفيف في malate في IF ، وزيادة في malate في SL وعدم حدوث تغيير كبير في أجزاء أخرى من النبات (MS ، LB ، CL و RL) (الشكل 5 هـ) ، انخفاض كبير في فومارات في IF و SL و LB ، ولكن ليس في الأنسجة الأخرى (الشكل 5f) ، وزيادة ملحوظة في إجمالي مستويات الأحماض الأمينية في جميع الأنسجة (الشكل 5 ح). أظهرت الأحماض الأمينية في IF و SL ، والتي كانت أعلى بالفعل من الأنسجة الأخرى في دورة الضوء والظلام ، زيادة كبيرة بشكل خاص بعد يومين من الظلام (ثلاثة أضعاف وأربعة أضعاف ، على التوالي). المستوى العام للأحماض الأمينية في IF و SL (حوالي 110 و 70 ميكرومتركان mol g −1 FW ، على التوالي الشكل. 5h) أكبر بخمسة أضعاف وثلاثة أضعاف مما كان عليه في CL أو R بعد يومين من الظلام (الشكل 5 ساعات) وحوالي عشرة أضعاف أكبر من CL و R في دورة الضوء والظلام (الشكل 4 ح. ). يحتوي LB أيضًا على مستويات عالية نسبيًا من الأحماض الأمينية بعد يومين من الظلام. كشف التنميط عن المستقلب أن Asn والأحماض الأمينية الصغيرة مثل Val و Leu و Ile و Phe و Tyr قدمت أكبر مساهمة في زيادة إجمالي الأحماض الأمينية في الظلام (دعم مجموعة بيانات المعلومات 2). يعد تدهور البروتين لإفراز أحماض أمينية ثانوية استجابة شائعة لتجويع C (Gibon وآخرون. 2006 Usadel وآخرون. 2008 روباجليا وآخرون. 2012 ايزومي وآخرون. 2013 بيلكنجتون وآخرون. 2015). لم يلاحظ أي تغيير كبير في البروتين الكلي بعد العلاج الداكن (الشكل 5 ز). ومع ذلك ، نظرًا لأن محتوى البروتين أعلى بكثير من محتوى الأحماض الأمينية ، فقد تكون الكمية المتدهورة صغيرة جدًا بحيث لا يمكن اكتشافها.

يظهر إجمالي C في النشا والمستقلبات القابلة للذوبان في الشكل 5i. في حين أن إجمالي C ينخفض ​​أثناء المعالجة المظلمة في جميع الأعضاء ، كان الانخفاض أقل في LB (15٪) ، IF (20٪) ، MS (30٪) و SL (40٪) مقارنة بـ CL (74٪) و RL (65٪) (الشكل 5i مجموعة بيانات المعلومات الداعمة 3). بعد يومين من العلاج الداكن ، تحتوي أنسجة الحوض التناسلية مثل IF و SL و LB على احتياطيات C مضاعفة أكثر من أنسجة المصدر مثل CL و RL. تصبح هذه الصيانة التفضيلية لاحتياطيات C في الأعضاء التناسلية أكثر إثارة للإعجاب (ثلاثة أضعاف تقريبًا) إذا تم استبعاد النشا في أنسجة الأوراق القديمة من الحساب.

في تجربة أخرى ، استخدمنا تلطيخ اليود لتوفير تحليل زماني ومكاني أكثر تفصيلاً لحذف النشا في IF خلال أول يومين من العلاج المظلم (دعم المعلومات الشكل S7). تم استنفاد احتياطيات النشا من أجزاء مختلفة من IF ، وخاصة الأنثرات ، تدريجياً مع استمرار العلاج الداكن ، ووصلت إلى مستويات منخفضة بعد يوم واحد من العلاج الداكن (انظر العلامات النجمية السوداء في دعم المعلومات الشكل S7).

باختصار ، أثناء النمو التناسلي في الفترات الضوئية الطويلة ، يحتفظ نبات الأرابيدوبسيس باحتياطيات كبيرة من النشا والسكريات في نهاية الليل في أنسجة المصدر والمصارف الإنجابية. خلال علاج مظلم لمدة يومين ، يتم استنفاد النشا والسكريات بشدة في أحواض التكاثر ، بما في ذلك الأمشاج والأنسجة الحاملة للأمشاج في الزهور والبذور في SL الصغيرة جدًا. ومع ذلك ، تشير ثلاث ملاحظات إلى حالة أكثر تعقيدًا من المجاعة الشديدة لـ C: أولاً ، تظل مستويات الأحماض العضوية مرتفعة نسبيًا وترتفع الأحماض الأمينية في الأحواض التناسلية ثانيًا ، ملخصة C في المستقلبات الوسيطة أثناء المعالجة المظلمة كانت أعلى في أنسجة الحوض التناسلي منها في المصدر الأنسجة ، وثالثًا ، بقيت كميات كبيرة من النشا في الأوراق القديمة.

مستويات الدهون في البذور

قمنا بقياس TAG في NT وعالجنا SL لتحديد ما إذا كان محتوى الدهون المخزن يتأثر بالمعاملة الداكنة (الشكل 5j مجموعة بيانات معلومات الدعم 4). أظهر TAG انخفاضًا كبيرًا مزدوجًا في SL للنباتات المعالجة (الشكل 5 ي مجموعة بيانات المعلومات الداعمة 4). يرجع هذا الانخفاض بشكل أساسي إلى الانخفاض في الأنواع الأكثر وفرة (52-C و 54-C ، المعلومات الداعمة الشكل S8). قمنا أيضًا بقياس الفئات الرئيسية الأخرى من الجليسيروليبيدات (دعم المعلومات الشكل S9 ، مجموعة بيانات المعلومات الداعمة 4). أدى العلاج الداكن إلى انخفاض في أحادي الجالاكتوزيلدياسيل جلسرين (MGDG) و digalactosyldiacylglycerol (DGDG) و diacylglycerol (DAG) وزيادة في فوسفاتيديليثانولامين (PE) و phosphatidylinositol (PI) (المعلومات الداعمة الشكل S9).

يتم تكوين TAG بكميات صغيرة في أوراق التشيخ ، حيث تعمل كمخزن أثناء إعادة تعبئة دهون الغشاء (Kaup وآخرون. 2002 سلوكومب وآخرون. 2009 ترونكوسو بونس وآخرون. 2013). أظهر TAG انخفاضًا طفيفًا غير مهم في RL (الشكل 5 ي). أدى العلاج الداكن أيضًا إلى انخفاض DAG ولكن ليس في أي جليسيروليبيدات أخرى في الأوراق (المعلومات الداعمة الشكل S9).

الأعراض الجزيئية للحد من الكربوهيدرات في أعضاء المصدر والمغسلة

لتقديم المزيد من الأدلة على أن IF تصبح مستنفدة لـ C أثناء المعالجة المظلمة ، استخدمنا qRT-PCR للتحقيق في وفرة النسخ لثلاثة جينات يتم تحفيزها بشدة بعد استنفاد النشا والسكريات في نباتات نبات الأرابيدوبسيس التي تنمو نباتيًا (الشكل 7) ATL8 (At1g76410) ، KMD4 / KFB50 (At3g59940) و OLEOSIN7 (At5g56100) (Bläsing وآخرون. 2005 أوسونا وآخرون. 2007 جراف وآخرون. 2010). ATL8 هو بروتين من نوع C3HC4 RING بإصبع الزنك والذي يتم التعبير عنه بشكل رئيسي في الشباب SL (Serrano وآخرون. 2006 ). KMD4 / KFB50 يشفر بروتين Kelch F-box KISS ME DEADLY4 ، والذي تم الإبلاغ عنه مؤخرًا لاستهداف إنزيم مسار shikimate الرئيسي لإنزيم فينيل ألانين أمونيا-لياز للتحلل (Zhang وآخرون. 2013) وتنظيم إشارات السيتوكينين عبر تدهور منظمات الاستجابة من النوع B (Kim وآخرون. 2013). Oleosins هي بروتينات هيكلية في أجسام الدهون التي تخزن TAG. يستخدم TAG كوسيط تخزين قصير الأجل للدهون المنبعثة من الثايلاكويدات أثناء دوران الغشاء وإعادة التشكيل والشيخوخة (Kaup وآخرون. 2002 سلوكومب وآخرون. 2009 ترونكوسو بونس وآخرون. 2013 ).

كشفت تحليلات qRT-PCR عن زيادة قوية في وفرة نصوص المراسلين الثلاثة منخفضة السكر بعد يومين من العلاج الداكن في IF (الشكل 7 أ) و RL (الشكل 7 ب). أشارت مقارنة الردود إلى أن الزيادة النسبية في وفرة النصوص كانت كبيرة على الأقل (KMD4) أو أكبر (ATL8 و OLEOSIN7) في IF مقارنة بـ RL.

لتوفير مزيد من المعلومات حول التوطين المكاني لنصوصهم ، قمنا بالتحقيق في تعبير ATL8 و KMD4 بواسطة RNA في التهجين الموضعي (الشكل 7 د). ATL8 تم التعبير عنها عند مستويات منخفضة فقط في IF عند الفجر في محطات التحكم (الشكل 7d-i-iii). في النباتات ذات اللون الداكن ، أظهر تعبيرًا عاليًا في الأنسجة الوعائية للقدم (V في الشكل 7-d-iv) ، حيث طور anthers (A في الشكل 7d-v) ، بويضات غير مخصبة (O في الشكل 7 د- السادس) والصمامات (L في الشكل 7d-vi). KMD4 أظهر تعبيرًا منخفضًا عند الفجر في نباتات NT (الشكل 7d-vii و viii و ix) وتعبيرًا قويًا في anthers (A في الشكل 7d-xi) ، والزهور الصغيرة (F في الشكل 7d-x) ، وبداية الأزهار (P في الشكل 7d-x) ، SAM (M في الشكل 7d-x) ، الحاجز (S في الشكل 7d-xi) ، البويضات غير المخصبة (O في الشكل 7d-xi ، xii) ، وصمة العار (T في الشكل 7d-xii) والصمامات (L في الشكل 7d-xii) في النباتات المعالجة بالظلام.

تنظيم نسخ السكروز في أعضاء المصدر والمغسلة

لقد بحثنا أيضًا في مستويات النسخ للبروتينات التي تشارك في نقل السكروز. SUC2 يقوم بترميز مُشاهد السكروز- H + الذي يشارك في التحميل النشط للسكروز في مركب الخلية المصاحبة لعنصر منخل اللحاء (Riesmeier وآخرون. 1994 Ludewig & Flügge 2013). تُسهل ناقلات تدفق السكروز المكتشفة حديثًا SWEET11 و SWEET12 تصدير السكروز إلى Apoplast قبل امتصاصه النشط في اللحاء بواسطة SUC2 (Chen وآخرون. 2012). أدى العلاج الداكن إلى زيادة كبيرة في سويت 11 و سويت 12 وفرة النسخ وزيادة صغيرة ولكنها كبيرة في AtSUC2 وفرة النسخ في IF (المعلومات الداعمة الشكل S10a). يتناقض هذا مع RL ، حيث أدى العلاج الداكن إلى انخفاض طفيف ولكنه مهم في SUC2 وفرة النص وليس هناك تغيير كبير في سويت 11 أو سويت 12 وفرة النسخ (المعلومات الداعمة الشكل S10b). تشير هذه النتائج إلى أن العلاج الداكن يؤدي إلى التنظيم النسخي لسعة نقل السكروز في IF ولكن ليس في RL.

صلاحية الجاميت

دفعتنا ملاحظة أن جينات الجوع C تم تحفيزها بشكل كبير في الأنثرات والبويضات إلى التحقق مما إذا كانت قابلية بقاء الطور المشيجي الذكري أو الأنثوي ضعيفة. لقد درسنا قابلية بقاء الطور المشيجي الذكري عن طريق الفحص المجهري وتلطيخ الإسكندر التفاضلي لحبوب حبوب اللقاح من أزهار النباتات المعالجة ، بعد 3 أيام من مرحلة التعافي. أظهرت حبوب اللقاح فقدان الشكل الدائري النموذجي ، وعلامات تحلل البلازما وفقدان التلوين الأرجواني التفاضلي للسيتوبلازم (الشكل 8 أ-ب). يتناقض هذا مع النمط الظاهري القابل للحياة لحبوب حبوب اللقاح من أزهار NT (الشكل 8 أ-ط). أظهر تلطيخ اليود أن حبوب اللقاح من النباتات المعالجة تحتوي على نشا أقل (الشكل 8 ب -2) من حبوب اللقاح من نباتات NT (الشكل 8 ب-ط). تم تقييم قابلية بقاء الطور المشيجي الأنثوي عن طريق التلقيح المتبادل مع حبوب اللقاح القابلة للحياة من النباتات المانحة للشفافية الشمالية. عندما تم إخصاء أزهار نباتات NT وتلقيحها يدويًا بحبوب اللقاح من النباتات المعالجة ، لم يتم تكوين SL (المعلومات الداعمة ، الشكل S11a). عندما تم إخصاء الأزهار التي ظهرت بعد 3 أيام من التعافي من العلاج الداكن ثم تلقيحها بحبوب اللقاح من الزهور غير المعالجة ، تم تطوير SL (دعم المعلومات الشكل S11b).

نستنتج أن الأمشاج الذكورية ضعيفة بشدة بسبب تقييد C. على الرغم من أن البويضات غير المخصبة أظهرت أعراض الجوع C (الشكل 7d-vi ، 7d-xi ، 7d-xii) ، لا تتأثر قابلية البقاء على قيد الحياة بشكل لا رجعة فيه.

تأثير الحد من الكربوهيدرات على نمو الأزهار

نظرًا لاستنفاد النشا وتم إحداث نسخ من علامات الجوع C في العديد من الهياكل المنفصلة ، مثل القشرة والحاجز والأنسجة الوعائية (الشكل 7 د) ، قمنا بفحص ما إذا كانت المعالجة الداكنة قد غيرت تطور هذه الأعضاء. للقيام بذلك ، قمنا بتشريح الكؤوس والبتلات من زهور المرحلة 13 (سميث وآخرون. 1990) من النباتات المعالجة بالظلام بعد 3 أيام من مرحلة الاسترداد ومقارنة الهيكل مع تلك الموجودة في زهور المرحلة 13 من نباتات التحكم. أظهرت الزهور من النباتات المعالجة باللون الداكن ما يلي: (1) ضعف استطالة خيوط السداة (العلامات النجمية الحمراء ، الشكل 8 ج -1) مع طول الشعيرة بشكل ملحوظ (ص & lt 0.001) انخفض إلى أقل من 50٪ من تلك الموجودة في نباتات NT (الشكل 8c-ii) (2) النمط الظاهري لتفكك العضو الآخر المتأخر (العلامات النجمية البيضاء ، الشكل 8 ج -1) و (3) زيادة طفيفة ولكنها مهمة في طول المدقة (العلامات النجمية الخضراء ، الشكل 8c-i ، ii). كانت هذه الأنماط الظاهرية التنموية غائبة في المرحلة 13 من الزهور من النباتات المعالجة بالظلام التي تم فحصها في اليوم السابع من الانتعاش (المعلومات الداعمة الشكل S12) ، بعد يوم تقريبًا من إنتاج الأزهار من النباتات المعالجة حبوب اللقاح الوظيفية والتلقيح الذاتي (معلومات داعمة) التين S2 و S3). وبالتالي ، لا يؤثر تقييد C على تطور المشيمة فحسب ، بل يؤثر أيضًا على تطور الهياكل الزهرية المشاركة في تكوين الأمشاج.

تأثير تجويع الكربون على تطور السيليك

درسنا بعد ذلك تأثير العلاج الداكن على نمو ونضج SL الموجود مسبقًا. للقيام بذلك ، اخترنا أول أربعة SL على جذع خمسة نباتات داكنة وخمسة نباتات تحكم. تم قياس طول SL عند الفجر مباشرة قبل بدء المعالجة المظلمة (النقطة الزمنية BT ، الشكل 8 د) ، في نهاية الدورة 24 ساعة الأولى والثانية من علاج مظلم لمدة يومين (نقطتا الوقت T1 و T2 ، الشكل 8 د) وعند الفجر خلال الأيام الستة الأولى من مرحلة الاسترداد (1AT ، 2AT ، 3AT ، 4AT ، 5AT و 6AT ، الشكل 8 د). وصل SL في محطات التحكم إلى متوسط ​​طول نهائي يبلغ حوالي 16 مم (مؤامرة رمادية من الماس في الشكل 8 د). أظهر SL من النباتات المعالجة بالظلام استجابتين ، اعتمادًا على حجمها في بداية العلاج الداكن. شوهدت استجابة واحدة لـ SL الكبيرة ، حيث أظهروا تثبيطًا طفيفًا للنمو أثناء المعالجة المظلمة وعندما عادوا إلى دورة الضوء والظلام ، بعد تأخير قصير ، تعافوا ووصلوا إلى نفس حجم نباتات NT (المعالجة الداكنة بطول كامل SL ، المربعات السوداء DTF في الشكل 8 د). شوهدت الاستجابة الثانية لـ SL الأصغر والأقل نضجًا حيث أظهروا تثبيط نمو لا رجعة فيه بحوالي 40 ٪ (ص & lt 0.01) ، يصل إلى أقصى حجم سيليكي يبلغ حوالي 10 مم (معالجة داكنة قصيرة SL ، DTS مثلثات سوداء في الشكل 8 د).

لقد بحثنا أيضًا في النمط الظاهري الفسيولوجي والتشريحي لـ SL الذي طور نمطًا ظاهريًا للإجهاض بين اليوم الأول (1AT) واليوم الخامس (5AT) من التعافي من العلاج المظلم (الشكل 8 هـ). كل هذه SL قد خفضت الطول. كشف الفحص الدقيق عن ثلاثة أنواع من أحداث الإجهاض. النوع الأول كان SL الذي يحتوي على مزيج من البذور والبذور المجهضة (الشكل 8e-ii). إنها تتوافق مع SL الأقدم في الشكل 6b-v ، حيث يكون النشا مرئيًا في بعض البذور غير الناضجة وليس في بذور أخرى. كانت هذه SL في قاعدة قسم الجذع العاري ، مما يشير إلى أنها كانت في طور التطوير عندما تم فرض العلاج الداكن. من المفترض أن بعض البذور الصغيرة نجت والبعض الآخر تم إجهاضه أثناء العلاج الداكن. قد يفسر هذا انخفاض طول السيليك في الشكل 8 د. النوع الثاني كان SL الذي لا يحتوي على أي بذور وفيه كانت بقايا المدقات أو الأنثرات غير مرئية أو كانت متدهورة للغاية (الشكل 8e-iii). تتوافق هذه مع SL في منتصف قطعة الساق العارية ويفترض أنها تم تلقيحها بالفعل قبل المعالجة المظلمة وتم إجهاضها مبكرًا في تطور البذور. كان الحدث الثالث هو الزهور المجهضة (الشكل 8e-iv). كانت تقع في الجزء العلوي من قطاع "الجزء العاري" ، ويفترض أنها تتوافق مع النورات الأصغر في الوقت الذي تم فيه فرض العلاج الداكن.

باختصار ، فإن الإجهاض المتوازي الهائل بعد يومين من الظلام يرجع إلى عدة عوامل بما في ذلك ضعف شديد في بقاء الطور المشيجي الذكري ، وضعف نمو الزهرة ، بالإضافة إلى إجهاض البذور الفردية في SL الصغيرة جدًا.

النمط الظاهري لإجهاض الأزهار والبذور في النباتات المزروعة في ظروف طبيعية منخفضة الكربون

سألنا بعد ذلك عما إذا كان إجهاض البذور والزهور يحدث استجابة للعلاجات الأقل شدة. للقيام بذلك ، قمنا أولاً بإخضاع النباتات التي تنمو في فترة ضوئية طويلة لضوء منخفض ممتد (20 ميكرومترmol m −2 s −1) العلاج. يسمح هذا الإشعاع بمعدل منخفض من التمثيل الضوئي. أظهرت هذه النباتات نمطًا ظاهريًا "الجزء العاري" ، على الرغم من أنها تطورت بشكل أبطأ مما كانت عليه في الظلام أو في الإضاءة المنخفضة جدًا وكانت أقل حدة ، حيث استقرت عند حوالي 14 SL المجهض لكل نبات (الشكل 9 أ جدول المعلومات الداعمة S6). أشار فحص الصور إلى أن العدد الأقل من SL المجهض كان بسبب تكوين SL أكثر قابلية للحياة في الأيام الأولى من العلاج المظلمة والشفاء المبكر.

قمنا أيضًا بفحص النباتات التي تنمو في فترة ضوئية مدتها 8 ساعات (الشكل 9 ب). في هذه النباتات ، لاحظنا النمط الظاهري التلقائي "للجزء العاري" ، والذي تطور أيضًا على LB (الشكل 9 ب). أصبح النمط الظاهري أكثر وضوحًا بعد علاج مظلم لمدة يومين (دعم المعلومات الشكل S13). في كثير من الأحيان ، ولكن ليس دائمًا ، يتعافى الرأس ويشكل SL ، ويلخص بصريًا النمط الظاهري لـ "الجزء العاري" الذي شوهد بعد معالجة مظلمة في فترات ضوئية طويلة.

أجرينا مزيدًا من التجارب للتحقق مما إذا كانت شدة النمط الظاهري للإجهاض التلقائي في السيقان الزهرية المختلفة مرتبطة بمستوى C في IF (الشكل 10 المعلومات الداعمة ، الشكل S14). تم تصوير الأزهار الرئيسية لعشرة نباتات عمرها 95 يومًا ، ثم تم حصاد IF في 3 ساعات بعد الفجر. لقد صنفنا أولاً درجة النمط الظاهري المرئي 1 التي تم إعطاؤها للنورات التي تم إجهاضها بشدة 5 إلى النورات غير المجهضة مع 2 و 3 و 4 تمثل أنماطًا ظاهرية وسيطة ذات شدة متناقصة (الشكل 10 أ المعلومات الداعمة الشكل S14 أ). ثم قمنا بقياس النشا والسكروز والجلوكوز والفركتوز في IF (المعلومات الداعمة الشكل S14b). كانت شدة النمط الظاهري للإجهاض مترابطة عكسيًا (ص 2 = 0.5, ص- القيمة & lt 0.05) بالمبلغ الإجمالي لاحتياطيات الكربون في IF (الشكل 10 ب ، ج). ثانيًا ، استخدمنا تلطيخ اليود للتحقيق في مستويات النشا في IF للنباتات المزروعة في يوم قصير في 91 و 112 و 121 يومًا بعد البذر (الشكل.11 التينين الداعمين للمعلومات S15 و S16). كما رأينا بالفعل في تجارب الشكل 10 والمعلومات الداعمة الشكل S14 ، خلال هذا الوقت ، ظهر LB وطور العديد منهم نمطًا ظاهريًا "مقطعًا مكشوفًا" (معلومات داعمة الشكل S15). مقارنة بالنباتات التي يبلغ عمرها 91 يومًا ، في نباتات عمرها 112 و 121 يومًا ، انخفضت مستويات النشا في IF عند الفجر ، و 3 ساعات في فترة الضوء وعند الغسق (الشكل 11a-ii ، b-ii ، الدعم) معلومات التين. S16). وشمل ذلك انخفاضًا في النشا عند النسيج الإنشائي الزهري (الشكل 11 أ -3 ، ب -3).


مناقشة

كما أوضحنا في هذه الدراسة ، فإن التركيزات العالية من المحليات غير الغذائية تحفز النوم في الذباب المتضور جوعاً. الدراسات السابقة من قبل كين وآخرون. ذكرت أن تركيز منخفض من السكرالوز (1 ملم) لا يمكن أن يدفع النوم 21. استنسخنا نتائجهم ووجدنا أن هناك حاجة إلى تركيز أعلى للنوم (سوب. الشكل 4). على الرغم من أن 1 ملي مولار من السكرالوز كان كافياً للحث على استجابات تمديد خرطوم (PER) في الذباب ، إلا أنه لم يكن كافياً للحث على النوم. لا نعرف الآلية الدقيقة للاختلاف ، لكن الخصائص المؤقتة للملاحظتين مختلفة تمامًا. PER عبارة عن اختبار يتم إكماله خلال فترة زمنية قصيرة جدًا مثل بضع ثوانٍ ، بينما تتطلب مراقبة النوم بضعة أيام. نشك في أن مستشعرات الحلاوة بحاجة إلى التنشيط باستمرار للحفاظ على النوم. يمكن للذباب تناول المحليات غير الغذائية عالية التركيز والبقاء داخل أجسامهم لفترة من الوقت لتنشيط الخلايا العصبية المحسّسة الحلوة. نظرًا لأنه يتم تخفيفها عند تناولها ، فإن التركيزات العالية مطلوبة لاستجابة حلاوة طويلة. في دراستنا ، تسبب الجوع في فقدان النوم ولكن نشاط اليقظة لم يتغير (الشكل 1 د) ، والذي يختلف عن العمل السابق مثل Murakami وآخرون. ، الذي وصف زيادة نشاط اليقظة عن طريق الجوع 34. لا نعتبر الاختلاف أمرًا بالغ الأهمية لأن الظروف التجريبية مختلفة تمامًا مثل بقعة الذباب والجنس والحالة الغذائية. بينما كنا نعد هذه المخطوطة ، وانغ وآخرون. نشر اكتشافًا مثيرًا للاهتمام مفاده أن إضافة السكرالوز إلى النظام الغذائي التقليدي عزز تناول الطعام وفرط النشاط ويقلل من النوم 35. استخدموا 2.5٪ سكرالوز (63 ملم) مع 5.4٪ سكروز (حوالي 160 ملم) ، وبدأ تناول الطعام في الزيادة 3 إلى 4 أيام بعد التغذية بالسكرالوز. ووجدوا أيضًا أن NPF يلعب دورًا مهمًا. على الرغم من اختلاف الظروف التجريبية ، إلا أن نتائجهم تشير أيضًا إلى أن التركيز العالي للسكرالوز قد يكون مطلوبًا للتغييرات السلوكية.

أدى الجوع إلى إطالة نوبة يقظة واحدة ، وتقصير نوبة نوم واحدة ، وخفض عتبة الاستيقاظ. يشير هذا إلى أن الذباب يستخدم وقتًا أطول للعثور على الطعام ، ويستيقظ مبكرًا للعثور على الطعام. المحليات الصناعية ، وهي حلوة ولكنها ليست مغذية ، تقصر نوبة اليقظة ، مما يؤدي إلى زيادة النوم الكلي. لكنهم لم يعكسوا تقصير نوبة نوم واحدة وانخفاض عتبة اليقظة. يشير هذا إلى أن الذباب ربما خدع بالحلاوة وبدأ في النوم ، لكنهم يستيقظون مبكراً لأنهم لم يشبعوا حقًا. من ناحية أخرى ، لم يستطع السوربيتول تحفيز النوم الفوري ، ولكن بمجرد أن بدأوا في النوم ، نام الذباب لفترة أطول مما كانت عليه عندما كانوا جائعين.

معالجة المعلومات المختلفة للحلاوة وقيمة المغذيات في ذبابة الفاكهة تم وصفه بطرق مختلفة. اكتشف فوجيتا وتانيمورا أن الذباب قادر على تعلم ربط الرائحة بالسوربيتول على الرغم من أن السوربيتول لم يحفز PER 26. كما أظهروا أن كمية السوربيتول المتناولة كانت أكثر من كمية الماء وحده ، لكنها كانت أقل بكثير من كمية الجلوكوز. وجد بيرك وواديل أيضًا أن أرابينوز تسبب في حدوث ذاكرة ارتباطية قصيرة الوقت إلى مستوى يكافئ تقريبًا مستوى السكروز ، لكنها فشلت في إحداث ذاكرة طويلة المدى (24 ساعة) 25. كما أظهروا أن إضافة السوربيتول ، الذي لا يحفز الذاكرة طويلة المدى في حد ذاته ، إلى ذاكرة الأرابينوز القوية بشكل ملحوظ طويلة المدى ، مما يشير إلى أهمية كل من الحلاوة والتغذية. أشارت الدراستان إلى ذلك ذبابة الفاكهة تحسس المكونات الغذائية بشكل مستقل عن الحلاوة. كشفت الدراسات الحديثة أن الخلايا العصبية الأوكتوبامين والدوبامين في جسم الفطر (MB) تتوسط في الذكريات قصيرة وطويلة المدى 36. يُقترح أن الخلايا العصبية العنقودية PAM المحددة تحفز الذاكرة قصيرة المدى ، والخلايا العصبية PAM-α1 تحفز الذاكرة طويلة المدى. نظرًا لأن النوم والذاكرة مرتبطان ارتباطًا وثيقًا ، فقد تنظم معلومات الذوق الحلو النوم عبر الخلايا العصبية الدوبامينية في MB.

يتم إدراك الحلاوة من خلال العديد من مستقبلات الذوق 37. يتم التعبير عن مستقبلات الذوق في أعضاء مختلفة بما في ذلك اللافتة والجس الفكي والساقين 38 ، وتلك التي يتم التعبير عنها في الساقين مهمة في الاختيار الفوري للأذواق 39. تعتبر Gr5a و Gr61a و Gr43a و Gr64a-f مهمة في الإحساس بالحلاوة 31 ، و Gr64a أكثر حساسية للسكروز من Gr5a 37. أنماط التعبير عن هذه الخلايا العصبية متنوعة أيضًا. Gr5a معبر عن العصبونات بشكل رئيسي إلى مركز العقدة تحت المريء (SOG) بينما Gr43a و Gr64a يعبران عن الخلايا العصبية إلى الجانب الظهري منه 38. تفعيل Gr66a كان التعبير عن الخلايا العصبية كافياً لتحريض الذاكرة البغيض 25. في هذه الدراسة ، تفعيل Gr43a و Gr64a يزيد التعبير عن الخلايا العصبية من النوم بشكل ملحوظ في الذباب الجائع. نظرًا لاختلاف حساسية Gr5a و Gr64a اختلافًا كبيرًا ، تشارك أنواع مختلفة من الخلايا العصبية الذوقية في تنظيم النوم في الذباب. عندما يتم التعبير عنها في الدماغ ، Gr43a يُذكر أنه مستشعر للفركتوز ويعمل كمستشعر للمغذيات 32. حددنا أن الكوليني Gr43a كانت الخلايا العصبية المعبرة مهمة للتوسط في النوم ، ولكن Gr43a التعبير عن الخلايا العصبية في الدماغ ليست خلايا كولينية. تشير نتائجنا إلى أن مستقبل الذوق ، Gr43a ، له دور ليس فقط في استشعار التغذية ، ولكن أيضًا في تنظيم النوم.

ومن المثير للاهتمام أن الاستجابة للإحساس الحلو تتغير تبعًا لظروف الشبع للحيوان المضيف. تنتقل معلومات التذوق إلى الخلايا العصبية من الدرجة الثانية التي تربط الخلايا العصبية الحسية الأولية بمنطقة الدماغ العليا 40. عندما تتضور جوعًا ، تبدأ الحيوانات في إطعام السكريات وابتلاعها ولكنها لا تفعل ذلك عندما تكون ممتلئة. استخدام NP1562-GAL4، حدد Kain و Dahanukar خلية عصبية إيجابية من الدرجة الثانية تربط الخلايا العصبية ذات المستشعر الحلو بمركز الهوائي الحسي والميكانيكي (AMMC). قمع تثبيط هذه الخلايا العصبية من الدرجة الثانية PER الناجم عن الحلاوة الفورية. يابيسي وآخرون. حددت الخلايا العصبية من الدرجة الثانية المسماة IN1 ، والتي تدمج معلومات الحلاوة مع إشارات الجوع 42. يربط IN1 في الغالب بـ Gr43a و Gr64a للتعبير عن الخلايا العصبية ولكن ليس بها Gr5a معربا عن الخلايا العصبية. قد يكون هذا مشابهًا لهذه الدراسة التي أظهرت أن تثبيط Gr43a و Gr64a كان التعبير عن الخلايا العصبية أكثر فعالية من تلك الموجودة في Gr5a معربا عن الخلايا العصبية.

أظهرت الدراسات الحديثة ذلك ذبابة الفاكهة يمكن لطفرات الببتيدات الشبيهة بالأنسولين (DILPs) أن تقلل من النوم وقد انخفض التعبير عن DILP2 في الذباب الجائع 43. من المعروف أيضًا أن الهرمون المستجيب للمغذيات ، CCHamide-2 (CCHa2) ، ينظم التعبير عن بعض DILPs وإطلاقها. قد تكون هذه DILPs ، والمنظمين مثل CCHa2 ، مصدر معلومات حول المذاق الحلو ، وتنظم معلومات النوم والمغذيات وتتوسط عتبة الاستثارة.

كمسألة فنية ، دراسات سابقة مثل كين وآخرون. وصف أن انخفاض النوم بسبب الجوع لوحظ في الليلة الأولى من الجوع ، أي 12 إلى 24 ساعة بعد الجوع 21. لم يظهر المخزون الذي استخدمناه أي تغيرات في النوم والنشاط الحركي خلال اليوم الأول والليل من الجوع ، وبدأ نومهم ينخفض ​​بعد 24 إلى 36 ساعة من الجوع. لا نعرف السبب الدقيق لهذا الاختلاف البالغ 12 ساعة ، ولكن نظرًا لأن ذباب التحكم لدينا يظهر عددًا أقل من النشاط الحركي ونومًا أطول في المتوسط ​​من الذباب من المختبر الآخر (البيانات غير معروضة) ، نشك في أنهم أكثر مقاومة للمجاعة. قد يكون هناك عامل آخر هو الظروف الغذائية السابقة قبل بدء الجوع. لقد قمنا بتربية الذباب على طعام تقليدي ثم احتفظنا بها على 150 ملي مولار من السكروز لمدة يوم واحد تقريبًا ، ولكن في الدراسات السابقة ، تم إبقاء الذباب على طعام تقليدي قبل المجاعة مباشرة. نظرًا لخصائص سلالة التحكم لدينا ، قمنا بتحليل البيانات من اليوم الثاني للمجاعة ، عندما أظهر الذباب تأثيرًا واضحًا للمجاعة.


هل يختلف تركيز الكالسيتريول في الدم في أوقات مختلفة من اليوم؟ - مادة الاحياء

شكراً لك دين نيومان أه أريد فقط أن أبدي بعض التعليقات أه ، هناك شيئان يقدمان بعض التعليقات ، حول غاري وأه قدم له لوحة. آه ، لم أكن موجودًا لأعرف أه ، ويرنر باخمان ، لكن يمكنني أن أتخيل ، بمعرفة مسيرته المهنية ومعرفة أن مهنة غاري التي يجب أن تكون موجودة ، كانت هناك بعض أوجه التشابه بين الاثنين. يجب أن أتخيل أن باخمان ، كان شخصًا طموحًا للغاية وديناميكيًا عندما بدأ ، ولا شيء يمكن أن يمنعه من تحقيق أهدافه وأعتقد أنه يمكننا جميعًا أن نقول نفس الشيء ، أه غاري. أه الشيء الآخر الذي أردت التعليق عليه هو ، التشابه بين طريقة باخمان ، أه يختار بلا خوف مجموعة متنوعة من مشاكل البحث ، لقد عمل على كل شيء بدءًا من البنسلين ، كما قال دين نيومان إلى المتفجرات. أه غاري له صفات متشابهة أه وإه مقاربات ولكن أتمنى ألا تعمل على أي متفجرات على الأقل ليس في مبنى الكيمياء الجديد. أه لكن غاري يجمع بشكل فريد أعتقد مجموعة متنوعة من التخصصات أه التقليدية والمضي قدمًا في اه الاتجاهات المستقبلية للعلم. وأه بالتأكيد كان له تأثير هائل على القسم الآخر - قسمنا ، أه في مجال البيولوجيا الكيميائية منذ البداية ساعدنا في توجيهنا إلى هذا الاتجاه أه. لا أعرف إلى أين سيقودنا بعد ذلك. آمل أن يكون هذا أمرًا جيدًا. لذا غاري أود أن أقدم لك هذه اللوحة. باسم قسم أه الكيمياء.

أنا ، آمل ألا يكون الأمر مجنونًا. شكرا لك دين نيومان البروفيسور مارينو على مقدماتك اللطيفة جدا. إنه لشرف عظيم لي اليوم أن أكون أول أستاذ باخمان _ أه أستاذ الكيمياء ومرة ​​أخرى ، أود أن أشكرك دين نيومان ، أعضاء الكلية أعضاء الإدارة على هذا التميز. لقد ارتبطت قدرتي على إنجاز الأشياء في ميشيغان - لأكون صريحًا تمامًا - ارتباطًا وثيقًا بمجموعتين من الأفراد وقبل أن أبدأ اليوم أود فقط أن أعترف بهم وأشكرهم. أم الأول ، هو مجموعتي البحثية ، التي كان أعضاؤها في الماضي والحاضر على حد سواء ، هو عملهم الجاد ، مهارتهم ، تفانيهم ، قدرتهم على أخذ ما قد يُنظر إليه في كثير من الأحيان على أنه أفكار بعيدة المنال وتحويلها إلى واقع. وفي الحقيقة هذا هو ما نحن هنا اليوم حقاً لتكريمه. وثانيًا ، أود أن أشكر زملائي في كل من قسم الكيمياء بكلية الطب ، ولا سيما زملائي في الكيمياء البيولوجية ، وأقسام الطب الباطني وأقسام p- علم الأمراض ، لتهيئة بيئة تتيح البحث العلمي متعدد التخصصات والبحث التعاوني حقًا يمكن أن تزدهر أعتقد حقًا أن هذا أمر خاص بميشيغان ، وهو حقًا ، ربما ، أحد أكثر الأشياء متعة وأحد الأسباب التي تجعلني متحمسًا كل يوم أتيت إلى العمل. لذا ما علي فعله في الوقت المتبقي ، هو في الواقع إخباركم عن مجال ثالث من البحث ، شيء ما كان يدور حوله ، آه على مدى السنوات الأربع الماضية - لم يتم نشر أي من هذا ، وبعد ذلك. بعد وصولي إلى ميشيغان ، بدأت القراءة عن مجموعة من الاضطرابات أو الأمراض المعروفة باسم اضطرابات المناعة الذاتية. والنموذج الأولي لاضطراب المناعة الذاتية هو الذئبة. الآن مرض الذئبة هو مرض يصيب ما يصل إلى مليون شخص في الولايات المتحدة وكندا ، وهو يصيب بشكل أساسي الشابات في سنوات الإنجاب. ولأسباب لا نعرفها عن الأمريكيين الأفارقة ، على سبيل المثال ، معدل الإصابة بمرض الذئبة أعلى بكثير مقارنة بالأجناس الأخرى ، أه ، والأجناس الأخرى ، ونحن في الواقع لا نفهم الأساس الجزيئي أو مسببات مرض الذئبة ، لكننا هل تعلم أنه يصيب البشر مرضًا يتميز بفترات من التوهجات والهفوات. وفي الواقع ، يمكن لبعض العوامل الهرمونية والبيئية ، مثل ضوء U-V ، أن تحرض على توهج هذا المرض. الآن يمكن أن تكون مظاهر مرض الذئبة خفيفة للغاية مثل التهاب المفاصل ، ويمكن أن تتطور إلى مضاعفات أكثر خطورة مثل التهاب الأوعية الدموية أو التهاب الأوعية الدموية ، وفي مرضى الذئبة الشديدة سيصابون بما يعرف بالتهاب الكلية أو التهاب الكلية الكبيبي وهذا هو التهاب الكلى. يتحدث حوالي خمسين بالمائة من جميع مرضى الذئبة عن التهاب الكلية هذا ، ويموت ما يقرب من خمسة وعشرين أو نصف هؤلاء تقريبًا في غضون عشر سنوات من التشخيص. أحد الأشياء التي تميز مرض الذئبة هو فرط نشاط الجهاز المناعي وزيادة عدد الخلايا الليمفاوية أو الخلايا المناعية في الأعضاء المحيطية. وأحد هذه الأنواع من الخلايا هي الخلايا البائية والخلايا البائية هي الخلايا التي تنتج الأجسام المضادة. وبعض الأجسام المضادة التي يتم إنتاجها في مرض الذئبة ترتبط بمجموعة كاملة من البروتينات المختلفة والجزيئات الكبيرة المختلفة. تتراوح بين الأحماض النووية ومجمعات بروتين الحمض النووي ، لربط الأنسجة في الخلايا وحتى البروتينات. ومع ذلك ، فإن مرض الذئبة هو الحالة الوحيدة المعروفة للإنسان على الأقل حيث يمكن للمرء أن يولد أجسامًا مضادة لـ D-N-A مزدوج تقطعت بهم السبل ولهذا السبب ، يعد هذا في الواقع علامة تشخيصية جيدة جدًا تصل إلى حوالي سبعين بالمائة من الدقة. علاوة على ذلك ، فإن هذه الأجسام المضادة لكل من D-N-A التي تقطعت بهم السبل المزدوجة والمفردة هي في الواقع العوامل الممرضة في التهاب الكلى هذا. إنها العوامل الجزيئية إذا كنت ستسبب ذلك - تلف الكلى والالتهابات التي تؤدي إلى المراضة والوفيات المرتبطة بهذا المرض. ويظهر هنا رسم كاريكاتوري يصور كيف يحدث هذا ، بصفتي كيميائيًا عضويًا ، كان علي أن أتعلم مكان كليتيك ، ساعدني الفنان في (M-C). وداخل كليتيك توجد بُنى تحتية تُعرف باسم الكبيبات وهذه ، ببساطة هي أجهزة ترشيح حتى يدخل الدم هنا ، أه من خلال هذا الترشيح الأنبوبي الشعري يتم إزالة النفايات هنا ، يدخل الدم ، أه يخرج الدم من خلال هذه الشرايين الصادرة. وعلى سطح هذا الغشاء أثناء عملية الدورة الدموية ، يمكن لمجمعات الأجسام المضادة D-N-A أن تترسب على هذا الغشاء ، فهو غني بهذا الغشاء الغني بالكولاجين 4 والكولاجين 4 an- و D-N-A لهما تقارب غير محدد للغاية. وبعد أن تترسب هذه الأجسام المضادة هناك ، يمكنها تجنيد المكملات والجزيئات الالتهابية الأخرى ، وتؤدي إلى استجابة التهابية موضعية. ولإعطائك فكرة عما أتحدث عنه ، هذا مقطع عرضي من الكبيبة ، هذا هو الكبيبة الصحية ، وله هيكل دائري نسبيًا ، هذه النقاط الحمراء الصغيرة هنا هي خلايا الدم الحمراء ، ويمكنك رؤية بعضها مفتوحًا مساحة الشعيرات الدموية ، وفي الكبيبة المريضة مليئة بالأجسام المضادة ، فهي مليئة في الواقع ليس فقط بخلايا الدم الحمراء ولكن هذه خلايا التهابية ، تسمى كريات الدم البيضاء متعددة الأشكال وهي في الواقع كلية مختلة وظيفيًا. تتركز العلاجات الحالية لمرض الذئبة على علاجات غير محددة. تكمن مشكلة علاج هذا المرض في أنه لا يمكن تحديد المجموعة الفرعية من الخلايا الليمفاوية المسببة للمرض أو الخلايا الليمفاوية المسببة للأمراض أو الخلايا الممرضة ، والخلايا البائية والتائية. لذلك ليس لدينا طريقة لاستهداف الخلايا المسببة للمرض ، وبالتالي فإن العلاجات تشمل عوامل قتل الخلايا غير النوعية. على سبيل المثال ، تستخدم الستيرويدات ومضادات الالتهاب للأمراض الخفيفة ، وتستخدم العوامل أو الجزيئات السامة للخلايا التي تقتل الخلايا في حالات الذئبة الشديدة. والمشكلة هي أن هذه العوامل السامة للخلايا ليس لها خصوصية مرة أخرى ، لذلك يتم قتل كل من الخلايا الطبيعية وخلايا المرض. والعلاج الحالي أو بالأحرى أفضل علاج لهذا ، آه لالتهاب الكلية الذئبي هو هذا الجزيء سيكلوفوسفاميد وأنا أعرض ذلك هنا لمجرد ، أه الكثير من البروتوكولات ، من أجل الاستخدام الآمن لهذا المرض تم تطويرها هنا في ميشيغان في قسم أمراض الروماتيزم بواسطة جوان ماكجوان ديفيد فوكس وآخرون. لكني أعتقد أن الكيميائيين في الجمهور يمكنهم رؤية أن هذا عامل ثنائي الألكلة ، وهذا سم خطير حقيقي. لذلك من الواضح أن هناك حاجة إلى علاجات أفضل ، وكان الهدف من البحث الذي بدأ منذ حوالي أربع سنوات هو تحديد المركبات التي يمكن أن تتحكم في مرض الذئبة دون الآثار الجانبية للسميات الخام وتثبيط المناعة ، مما يحد من الأنظمة العلاجية الحالية. الآن ، كيف تفعل هذا؟ حسنًا ، نظرًا لعدم وجود أهداف للأدوية ، فقد كان النهج الذي استخدمناه حقًا شقين. أولاً ، نستخدم تقنية تُعرف بالكيمياء التوافقية حيث يمكن تصنيع مجموعات كبيرة جدًا من الجزيئات ويفترض أن يتم فحصها بسرعة إلى حد ما. هذا مهم جدًا هنا ، لأننا في الحقيقة لم نكن نعرف ما الذي كنا نبحث عنه. لم يكن لدينا حقًا عقار مرشح رئيسي للبناء عليه. والجزء الثاني المهم هنا هو العرض. ما قررنا البحث عنه هو الجزيئات التي يمكن أن تقتل الخلايا. ونأمل أن نكون قادرين على تحديد نوع لديه بعض الخصوصية أو الانتقائية للمرض المسبب للخلايا الليمفاوية ، في مرض الذئبة. هذان الجزيئان الآخران اللذان ستراهما هنا هما علاجات واعدة لن يكون لدي وقت لمناقشتهما اليوم ، لكنهما في الواقع في تجارب إكلينيكية ، الآن لمرض الذئبة.

الجزيء الذي حددناه والذي سأطلق عليه لهذا الحديث فقط B-Z وسأشرح لك ما هذا في ثانية ، لديه قدرة عميقة على قتل الخلايا. إذاً ها هي بعض الخلايا السليمة التي تنمو في المزرعة ويتم معالجتها بعنصر تحكم مذيب ، وها هي الخلايا التي تم علاجها بـ B-Z. ويضفي هذا BZ شكلاً من أشكال موت الخلايا يُعرف باسم موت الخلايا المبرمج ، وهو شكل مبرمج مسبقًا لموت الخلايا ، وهو نوع منظم (نوع) من موت الخلايا وهذا الشكل حيث تتفجر الخلايا ، ثم تنتشر الخلايا. يحدث تكاثف الكروماتان ، وهو سمة مميزة جدًا في هذا الشكل من موت الخلايا ، بخلاف موت الخلايا غير المحدد الذي يُسمى غالبًا بالنخر. إذن هنا هيكل BZ. B-Z هو البنزوديازيبين. تحتوي البنزوديازيبينات عادةً على جزيئات مثل الديازيبام أو الفاليوم ، أه وكلونيزيبام التي ربما يكون معظمنا على دراية بها بشكل أو بآخر. يختلف هذا الجزيء عندئذٍ عن هذه القطعة الكبيرة هنا ، وهي غير موجودة هنا وفي الحقيقة لأن هذه القطعة الكبيرة عبارة عن قطعة ، هل هناك واحد يجعل الخصائص السامة للخلايا هي الجانب المعاكس للخصائص السامة للخلايا ولكن الأهم من ذلك أنها تلغيها جميع الخصائص المهدئة للفاليوم. فلماذا نستخدم البنزوديازيبينات؟ اممم ، انها حقا ذات شقين.أول مكتبات كبيرة من البنزوديازيبينات ، كانت متاحة في أوائل التسعينيات بشكل أساسي من خلال العمل الرائد لجون إيلمان في جامعة كاليفورنيا في بيركلي ، وفي الواقع في وقت واحد في مجموعة أه في Parke-Davis آه بقيادة مايك بافيا ، الذي طورت تكنولوجيا الكيمياء التوافقية. السبب الثاني لاختيارنا البنزوديازيبينات ، هو أنه بالإضافة إلى الفاليوم ، أو بالإضافة إلى الخصائص المهدئة ، فإن للبنزوديازيبينات مجموعة واسعة من الاستخدامات الطبية ، كما يطلق عليها الكيميائيون الطبيون الهياكل المميزة. ومن ثم فإن تحديد البنزوديازيبين ذي الخصائص السامة للخلايا المفيدة سيحدد علاقة نشاط بنية جديدة وعائلة من الجزيئات التي لا تحتوي عمومًا على العديد من الآثار الجانبية غير المحددة.

لذلك ، بينما هذا المركب يقتل. يقتل الخلايا في الثقافة لا توجد نماذج ثقافة جيدة جيدة أو نماذج خارج الجسم الحي لمرض الذئبة وعلم أمراض الذئبة. لذلك استلزم ذلك في وقت مبكر جدًا في هذا المشروع أن نبدأ التجارب على الحيوانات. والأولى ، تم إجراء المجموعة الأولى من التجارب التي أجريناها على نموذج فأر لمرض الذئبة يُعرف باسم MRL LPR m- uh ، وهو نموذج الذئبة وقد تم إجراء هذه التجارب بواسطة طالب دكتوراه في الطب في المختبر جيف باريت أوم بالتعاون مع زميل زميل في أمراض الروماتيزم ثراك باي الذي يعمل مع بروس جونسون ، وراي سميث أيضًا في قسم أمراض الروماتيزم ، وما فعلناه هو أننا أخذنا ، مجموعة صغيرة نسبيًا من الفئران الصغيرة وعالجناهم بهذا البنزوديازيبين ، التركيز أعطيناه آه ، تركيزًا دائريًا ، كان أه كان له - ذلك ، كان له نشاط مشابه للتركيزات التي استخدمناها في المختبر وسنتحدث قليلاً عن ذلك لاحقًا. وما لاحظناه كان تأثيرًا محددًا جدًا - أن هذا البنزوديازيبين له نشاط محدد جدًا على الخلايا التائية فقط داخل الطحال. حسنا؟ تعد الخلايا التائية جزءًا من التأثير المناعي للخلايا الليمفاوية. وعلى وجه الخصوص ، تركز هذا التأثير على الخلايا الليمفاوية C-D-four-positive ، ومجموعة خاصة من الخلايا الليمفاوية ، والمعروفة باسم الخلايا التائية السلبية المزدوجة. لم يؤثر هذا المركب على عدد الخلايا البائية أو الخلايا التائية C-D-الثمانية أو أي من المكونات غير اللمفاوية الأخرى التي يتكون منها الطحال. لذلك كان هذا في الواقع مشجعًا للغاية. ولكن الأهم من ذلك ، أن هذا البنزوديازيبين عندما نجري هذه التجربة جنبًا إلى جنب في الحيوانات المناعية الطبيعية ليس له أي تأثير على الإطلاق على تكوين الجهاز اللمفاوي أو الجهاز المناعي في الحيوانات العادية. وهذا هو نوع الانتقائية الذي كنا نبحث عنه في الواقع. عامل يمكن أن يؤثر على الخلايا الليمفاوية الذاتية دون التأثير على الخلايا الليمفاوية الطبيعية. لذلك أدى ذلك إلى فرضية واضحة مفادها أن جرعات هذه الفئران لفترة طويلة من الزمن قد يحسن المرض عن طريق إزالة الخلايا التائية بشكل انتقائي. وهي مهمة لأن الخلايا التائية في هذه الحيوانات هي العوامل الممرضة لمرض الذئبة. أنها تساعد في دفع استجابة المناعة الذاتية. لذا اختبر جيف هذه الفرضية ، ويتم عرض التصميم التجريبي هنا. لدينا مجموعة من الفئران - لا مزحة ، لقد احتفظنا بها في المركز الطبي ، وليس لدينا فئران تدور حول مبنى الكيمياء. بدأنا في تناول جرعاتهم في سن مبكرة نسبيًا ، ونظرنا إلى شدة المرض بالنسبة للفئران التي خضعت للسيطرة ، ونريد تقييم هذه الفئران لمعرفة مدى جودة عمل الكلى ، عملنا في نظرنا في أنسجة الكلى إلى تكوين الجهاز المناعي المناعي ، وما إذا كان هذا المركب p- هذا المركب بعد الجرعات الطويلة له أي تأثير سام عام أم لا.

إذن ، كيف يمكن للمرء أن يقيس الفعالية في هذا النوع من الدراسة جيدًا ، إحدى الطرق التي قمنا بها هي قياس كمية البروتين في البول. عندما تفشل كليتك ، فإنها تفرز البروتين ويمكن في الواقع أن يكون من السهل نسبيًا قياسه بواسطة مقياس صغير. ويمكنك أن ترى هنا أنه كدالة للوقت ، فإن الفئران التي تتلقى البنزوديازيبين تبقى بصحة جيدة نسبيًا أو خالية من الأمراض ، في حين أن الفئران الضابطة تصاب بالمرض بشكل تدريجي وهناك فرق إحصائي جيد جدًا ، وإحصائي كبير بين العلاج والسيطرة مجموعة. لقد قمنا أيضًا بقياس علامة أخرى غير محددة إذا صح التعبير ، أم من وظائف الكلى وهذا يعرف باسم نيتروجين اليوريا في الدم ، أم هذا كل ما قلته هو علامة على وظيفة الكلى وأي رقم يزيد عن ثلاثين ملليغرام لكل ديسيلتر هو دلالة على الضائقة الكلوية ، ويمكنك أن ترى أن الفئران التي عولجت بقيت في صحة جيدة نسبيًا حيث أصيبت الفئران التي لم يتم علاجها بالمرض. وهذا النوع من تدابير m- إذا كنت ترغب في تأكيد وظائف الكلى ، عن طريق الأنسجة. هذا مثال على الكبيبة- الكبيبة التمثيلية من هذه الفئران الضابطة. كل هذه الخلايا الزرقاء هنا هي خلايا التهابية. هذه الكبيبة في الحقيقة متندبة عليها وقد حدث بالفعل نخر أه وتصلب. والفئران التي تلقت البنزوديازيبين مع عدم امتلاكها بالضرورة للتشكل الكبيبي المثالي ، ظلت في الواقع سليمة نسبيًا ويمكنك أن ترى أن هناك بنية جيدة هنا توجد خلايا الدم الحمراء ، وهناك فرق مهم إحصائيًا عند المقارنة جميع الفئران الضابطة لجميع الفئران المعالجة بالبنزوديازيبين. لذلك كان هذا في الواقع مشجعًا للغاية. شيء آخر انبثق من هذه الدراسة لم نتوقعه. معروض هنا ، فهذه الفئران MRL L LPR هي في الواقع نماذج للمناعة الذاتية الجهازية المعممة وتطور جميع أنواع الأمراض. واحد منها هو الروماتيزم - الروماتيزم مثل التهاب المفاصل. في الواقع هذا هو أحد النماذج الأولى لالتهاب المفاصل الروماتيزمي. وما أريكم إياه هنا هما عينتان أه ، عينتان من العظام مأخوذة من الكفوف الخلفية أه من حيوانات التحكم والمعالجة ، لذلك هذا اللون الوردي هنا هذا اللون الوردي الغامق ، هو عظم ، هذا هو الغضروف ، وكل هذه الخلايا أنت تعلم أن هذه الخلايا الأرجوانية التي يمكنك رؤيتها أيضًا هي خلايا التهابية. وفي الواقع ، يمكنك أن تبدأ في رؤية الخلايا الالتهابية تتغذى على الغضروف المفصلي وهذه بداية تآكل العظام. أممم ، على النقيض من ذلك ، نرى الآن أن الفئران المعالجة بالبنزوديازيبين لديها التهاب طبيعي نسبيًا أو قليلًا نسبيًا في الواقع هنا ، هذا هو نفس القدر الذي نطلق عليه المصطلح التقني لهذا التهاب الغشاء المفصلي كمية الخلايا الالتهابية التي تتسلل إلى مساحة المفصل طبيعية نسبيًا. لذلك كان هذا تأثيرًا إضافيًا وعلى الرغم من أنه ليس لدي الوقت لمناقشته اليوم ، فقد أظهرت التجارب التي أجريت مع المتعاونين في الواقع نشاط هذا المركب في عدد من النماذج المهمة جدًا لأمراض الالتهابات. الآن أعتقد أن أحد الأسئلة ، النوع المهم من الأسئلة المالية ، هل هذا - هل هذا سام؟ هل هذا سيكون أفضل - من المحتمل أن يكون أفضل من السيكلوفوسفاميد؟ لذلك أجرينا تحليلاً كاملاً للحيوانات جميع الأعضاء وجميع أجهزة الأعضاء الرئيسية في هذه الحيوانات. ونجد أن هذا النوع من المظهر العام للفئران لا يتغير. تعداد الدم الكامل حتى لا تنخفض الخلايا اللمفاوية الجائلة أه ، وربما الأهم من ذلك أن العلاج طويل الأمد لا يؤثر على نخاع العظام ، حسنًا؟ تولد الكثير من خلاياك المناعية أو جميعها تقريبًا m- (matafluisis) داخل نخاع العظام ، والعديد من العوامل السامة للخلايا وعوامل السرطان تقضي على نخاع العظام. في واقع الأمر ، سيكلوفوسفاميد ، إذا كان المرء سيخضع لعلاج نخاع العظام ، فستبدأ بجرعات عالية جدًا من سيكلوفوسفاميد للقضاء على نخاع العظام. ومما يثلج الصدر أن هذا المركب ليس له أي تأثير على الإطلاق. بحيث كانت هذه نتيجة مهمة بشكل خاص ، أمّا نحن - لقد ألقينا نظرة على الأنسجة - من خلال التشريح المرضي في جميع الأعضاء غير اللمفاوية ، وجميع أنظمة الأعضاء الرئيسية بما في ذلك الدماغ ، ولا يوجد أي شيء على الإطلاق ، والتشوهات ، وأه من الأشياء الأخرى التي كان متاحًا لنا ، ألق نظرة على وظائف الكبد ، هذا في الواقع يستخدم ، مختبرات علم الأمراض السريرية في المستشفى ، هذا المركب لا يؤثر على وظائف الكبد. وبشكل إجمالي ، لم نلاحظ أي دليل على أي سمية خلوية ضارة.

لذا ، دعنا ندخل قليلاً حول كيفية حدوث ذلك. وهناك الكثير من البيانات في هذه الشريحة ولكن أريد التركيز فقط على شيئين. أولاً ، ألقينا نظرة على كمية هذه الأجسام المضادة المسببة للأمراض في الدورة الدموية ، وفي الفئران المعالجة ، كانت مستويات هذه الأجسام المضادة أقل إحصائيًا من الفئران الضابطة. والمثير للاهتمام أن هذا يحدث ، في الخلفية التي يكون فيها الجسم المضاد طبيعيًا ومستويات الأجسام المضادة إذا لم تتغير. لذلك ، هذا يعني وجود تأثير انتقائي. الشيء الثاني المهم هنا هو تمامًا كما لاحظنا على المدى القصير في هذه الدراسة التي مدتها أسبوع واحد والتي أوضحت لك في وقت مبكر ، أن العلاج طويل الأمد بهذا المركب لا يقلل أيضًا من الخلايا التائية ، أليس كذلك؟ ولذا فإن السؤال هو ، كيف يمكن أن يحدث هذا ما هو المميز في هذه الخلايا التائية التي من شأنها أن تسمح بتقليصها بشكل انتقائي؟ لذلك كنت بحاجة إلى تعلم شيء ما والمجموعة التي احتجناها لتعلم شيئًا عن بيولوجيا الخلايا التائية. إذن ، ها هي حياة الخلية التائية وموتها. عندما تستريح الخلايا التائية ، إذا صح التعبير ، فإنها لا تتكاثر ، ويمكن أن تصادف مستضدًا وترتبط هذه المستضدات بشيء ما ببروتين على سطح الخلية التائية المعروفة باسم مستقبل الخلايا التائية. وبمجرد تكوين هذا المستقبل ، يتم تكوين مركب المستضد تصبح الخلية التائية نشطة. وهذا هو الدافع - أن التنشيط يؤدي إلى ، بداية عدد من مسارات نقل الإشارة المهمة ، التي تؤدي إلى حالة التكاثر ، حسنًا؟ الآن هذا المستضد هنا يمكن أن يكون فيروس الأنفلونزا. حسنًا ، يمكن أن يكون ببتيدًا من فيروس الإنفلونزا ، ويمكن أن يكون هذا لقاء بين خلية تائية ومستضد ، يمكن أن يساعد في محاربة العدوى. بعد أن تنتهي العدوى ويختفي المستضد ، قد تموت هذه الخلية التائية من خلال موت الخلايا المبرمج ، أو قد تنتقل بالفعل إلى خلية ذاكرة لمساعدتنا ، أو تذكر أو مساعدة جهاز المناعة على تذكر هذا - كيف تبدو هذه العدوى ، وهذا مفيد في مكافحة العدوى إذا تمت مصادفة نفس العامل الممرض مرة أخرى. دعنا نتظاهر بأن هذا المستضد الآن ليس فيروس أنفلونزا ولكنه ربما بروتين على سطح أنسجة القلب. حسنًا ، الآن لا نريد أن يحارب نظام المناعة أنسجة القلب ، أعتقد أن هذا واضح ، لذا فقد طور الجهاز المناعي آلية للتسامح والتسامح المحيطي إذا أردت ، لإيقاف أو قتل الخلايا التائية بشكل أساسي ، حسنًا ، التي تتعرف على الذات أو المستضدات الذاتية. كما هو موضح في الأعلى ، يمكنك أن تتخيل أنه سيتم تقديم أنسجة القلب دائمًا إلى الجهاز المناعي بتركيز عالٍ لأنها تستمر طوال الحياة. وعادة ما يؤدي هذا إلى هذا اللقاء الثاني مع مستضد فإنه سيحفز عملية تعرف باسم موت الخلايا الناجم عن التنشيط. الآن في هذه الفئران ، هذه العملية معيبة بسبب طفرة في بروتين يعرف باسم Fas. هذا غير مهم في الوقت الحالي أو في السياق الكبير هنا. لكن السبب في أنني ذكرت هذا هو أنه في الواقع يبدو أننا نقتل هذه الخلايا. حسنًا ، هذا المركب قادر على قتل هذه الخلايا وقد أدى إلى فرضية أن العلاج بالبنزوديازيبين يمكن أن ينقذ الخلل في موت الخلايا الناجم عن التنشيط الموجود في هذه الحيوانات. وهكذا أصبح جيف باريت وتوني جاكارتي الذي كان وقتها زميلًا في المختبر الآن أستاذًا مساعدًا في قسم أمراض النساء والتوليد. أود أن أقول إنني الكيميائي العضوي الوحيد الذي يعمل طبيبًا نسائيًا في مختبره ، لقد اختبرت ذلك بالفعل ، واختبرت هذه الفرضية والنتائج معروضة هنا. لذلك قمنا بعزل الخلايا التائية من حيوانات M-R-L ، وقمنا بتحديها مرتين باستخدام مستضد. عرض طيب لإشارة التحفيز لدينا. وبسبب هذا الخلل في المنتج ، تسبب هذا التنشيط في موت الخلايا بسبب طفرة في هذا البروتين Fas هذه الخلايا لا تموت ، وهذا موضح هنا باللون الأخضر. أم كعنصر تحكم وكمرجع ، تم أيضًا استخدام خلايا BALB / c T ولدى الفئران BALB / c وظيفة مناعية طبيعية ، لذلك فهي ليست معيبة في موت الخلايا الناجم عن التنشيط ، وفي الواقع ، فقط عن طريق التنشيط ، ستموت هذه الخلايا متأخر، بعد فوات الوقت. ومع ذلك ، يمكن إنقاذ هذا الخلل في الخط الأخضر عند إضافة البنزوديازيبين. في الواقع ، يبدو أن التنشيط يحسس الخلايا اللمفاوية التائية لهذا المركب بحيث يمكن قتلها بشكل انتقائي. ومرة أخرى ، يُظهر هذا الخط إنقاذ هذا العيب. لذلك نحن سعداء بهذا. لقد بدأنا في تطوير الفهم الجزيئي لآلية جزيئية لعلاج محتمل. لكن المشكلة تكمن في الذئبة ، هناك حقًا - على الرغم من أن الفئران M-R-L هي نموذج جيد لمرض الذئبة ، إلا أنها ليست نموذجًا رائعًا لمرض الذئبة. إنهم في الحقيقة ليسوا النموذج الوحيد لمرض الذئبة. وربما يكون أقدم نموذج لمرض الذئبة هو نموذج N-Z-B N-Z-W لمرض الذئبة. هذا ، تم تطوير نموذج الذئبة عن طريق تزاوج الفئران السوداء النيوزيلندية مع الفئران البيضاء النيوزيلندية للحفاظ عليها في نهاية المطاف بعد جولات متتالية من التكاثر ، لتطوير هذا النمط الظاهري للمناعة الذاتية d- uh ، وعرض الحيوانات N-Z-B N-Z-W. وهكذا نيل براون آخر طالب دكتوراه في الطب في المختبر بالتعاون مع روزاليند سلون عالمة أبحاث في قسم علم الأمراض تحت إشراف كينت روبرتسون وبيتر كاس ، أه قرروا النظر في تأثير هذا المركب في هذا النموذج الحيواني من مرض الذئبة وأي دواء موجود في السوق في مرض الذئبة يجب أن يمر عبر كل من نموذج MRL هذا ونموذج NZB لمرض الذئبة. لذلك في هذا النموذج المرضي يشبه إلى حد بعيد المرض البشري ، تموت الإناث ، أه في حوالي ثمانية أشهر من العمر ، ويمكن للمرء أن يرى التغيرات في الكلى في وقت مبكر من حوالي أربعة أشهر من العمر. لذلك أجرينا نفس النوع من الدراسة ولكن على مجموعة أكبر بكثير من الحيوانات ، لإلقاء نظرة على التأثير على وظائف الكلى مرة أخرى وأنسجة الكلى وما إلى ذلك. والمهم أن أذكر قبل أن أكمل هنا هو أنه على عكس النموذج الأول الذي ناقشته ، فإن الخلايا البائية هي اللاعبين المهمين هنا. هذا هو مرض سائد الخلايا البائية. وهكذا في الواقع ، إذا كنت ستعرف ما إذا كنا قد أخذنا أو البنزوديازيبين وقلنا انظر ، ها هي هذه ، فئران M-R-L الخلايا التائية هي المهيمنة ، اذهب واقتل ذاهب واقتل الخلايا التائية واترك كل شيء آخر بمفرده. ثم قال انظر ، الآن دعنا نذهب إلى نموذج NZB هذا ، فقط اقتل الخلايا B واترك كل شيء آخر بمفرده ، نريد أن نرى ما إذا كان هذا المركب لديه القدرة على فعل ذلك. ومرة أخرى ، الأمر ممتع للغاية. لذا أريكم مرة أخرى ، هذه الحالة هي نسيج أكثر قليلاً ، لذا تبدو الفئران الضابطة مرة أخرى مشابهة جدًا لتلك ، إحدى الشرائح المبكرة التي أظهرتها لك من أجل الكبيبة المريضة. هذا هو ، شريحة التألق المناعي ، حيث نقوم بالفعل بالمسح بحثًا عن الجلوبيولين المناعي المترسب فقط أو أو الجسم المضاد ، يمكنك أن ترى أن الكبيبة الخاصة به بالكامل ، مضاءة ، و C-3 هو علامة للالتهابات النشطة تكملة المكون الثالث وأنت يمكن أن نرى مرة أخرى الالتهاب ، ورواسب الأجسام المضادة ، وهذا ينعكس في التشكل الكلي لهذه الكبيبة ، ويبدو أن الأنسجة التمثيلية من الفئران المعالجة بالبنزوديازو تبدو طبيعية تقريبًا. هناك القليل جدًا من رواسب الأجسام المضادة ، والقليل جدًا من الالتهاب النشط ، ومرة ​​أخرى ، يتم الحفاظ على هذا التشكل الكبيبي.

حتى الآن السؤال ، في الانتقائية. سأريكم المزيد من علم الأنسجة ، الآن لا أريد أن أتحدث - الآن نحن لا نتحدث عن أنسجة الكلى ، ولكن هذه مقاطع عرضية فعلية من الطحال. الآن ، في الطحال ، تحدث تفاعلات الأجسام المضادة في الهياكل الموضحة هنا باللون البني الفاتح المعروف باسم المراكز الجرثومية. في المراكز الجرثومية يتم تنشيط الخلايا البائية ، وفي هذه الخلايا البائية المنشطة يتم تكوين أجسام مضادة عالية الانجذاب لطفرة جسدية. هذه المراكز الجرثومية محاطة بمنطقة أخرى من الخلايا البائية وهذه المنطقة الأخرى من الخلايا البائية غير نشطة. حسنا؟ لذلك لدينا قسمان مختلفان ، في جوهرهما مقصورتان مختلفتان للخلية B هنا. وفي حيوانات N-Z-B هذه المراكز الجرثومية تتوسع بشكل مرضي. هذا هو المكان الذي تصنع فيه الأجسام المضادة السيئة. ويمكنك أن ترى أنه بعد العلاج ، هناك عدد قليل جدًا من هذه المراكز الجرثومية الموجودة في الواقع في هذا المقطع العرضي المعين لا يوجد أي منها. حسنًا ، وفي الواقع ، في ظل الظروف العادية حيث لا توجد استجابة مناعية نشطة تحدث في الفأر أو فيك أو فيك ، لا توجد مراكز جرثومية ، ويمكن اعتبار هذا أمرًا طبيعيًا. وفي الواقع ، إذا أضفنا كل هذا وأجرى تحليل للصور ، فإن المراكز الجرثومية تتقلص في الحجم والعدد بنحو خمسين بالمائة بالنسبة إلى عنصر التحكم. وهناك العديد من الآليات التي يمكن من خلالها أن يحدث هذا الإنتاج ، لكننا نفضل أن يكون لدينا الدليل ، الجزء الأيمن الذي سأمر به في ثانية ، يفضل القتل المباشر للخلايا داخل الجراثيم المراكز. لذلك هذا مركز جرثومي ملطخ هنا باللون الأحمر والأخضر خلايا ميتة. ويمكنك أن ترى أنه في المجموعة الضابطة ، يموت عدد قليل جدًا من الخلايا المركزية الجرثومية ، ولكن في الفئران المعالجة ، هناك العديد من الخلايا الميتة أو الخلايا المحتضرة داخل هذه المراكز الجرثومية. وماذا بعد

يمكننا اقتراح نموذج. من أجل تحسين المرض ، من حيث أنه تم إثباته مسبقًا ، من الثابت في الواقع أن الأجسام المضادة المسببة للأمراض تتطور في المراكز الجرثومية ، ويتم تنشيط هذه الخلايا البائية داخل المراكز الجرثومية كثيرًا بالطريقة التي تم بها تنشيط الخلايا التائية في النموذج السابق ، وسنقوم بذلك لنفترض أن البنزوديازيبين قادر على أن يؤدي إلى تحسن المرض الذي أظهرته ، عن طريق التقليل الانتقائي للمنشطات ، وربما مجرد التفاعل التلقائي إذا كنت ستفعل الخلايا البائية. وبعد ذلك فقط لتلخيص هذا ، النتائج من هاتين المجموعتين من التجارب على الحيوانات. أنه في أحدث هذه الحيوانات NZB التي أوضحت لك أننا نقتل الخلايا البائية ، في البيانات لم أظهِر لك أن ذلك يؤدي إلى انخفاض مباشر في عيارات الأجسام المضادة (في الطبقات الخلفية) وهذا يؤدي إلى انخفاض في العضو النهائي تلف. أممم في حيوانات M-R-L نقتل الخلايا التائية C-D-four-positive T ، ومن خلال عملية غير مباشرة تؤدي إلى ، أه انخفاض في الخلايا B مما يؤدي إلى انخفاض في الأجسام المضادة الذاتية وتلف العضو النهائي. لذلك لدينا في الواقع عامل قادر على القتل بشكل انتقائي أو يظهر انتقائية واضحة للخلايا الليمفاوية الموسعة بشكل مرضي في نموذجين من مرض الذئبة. الآن ، الاعتراف. إدراك أن العوامل السامة للخلايا ، مفيدة في مجموعة متنوعة ، في مجموعة متنوعة من الأمراض المختلفة أه توني جاكارتي ، في الواقع استخدم هذا البنزوديازيبين لدراسة تأثيره على ورمين صلبين ، نموذجين من الأورام الصلبة. وبصفته طبيبًا في أمراض النساء ، فهو مهتم - كان مهتمًا بسرطان المبيض ، وأه ، من خلال جهد تعاوني أه أه أصبحنا مهتمين بالورم الأرومي العصبي.لذا فإن سرطان المبيض هو رابع سبب رئيسي لوفيات النساء بسرطان الموت ، وخمسين في المائة على الأقل من المرضى هم من النساء الشابات ، والمشكلة مع هذا المرض هي أنه بدون أعراض في مراحله المبكرة وعندما يظهر ، معدل البقاء على قيد الحياة في المرحلة المتأخرة منخفض جدًا (في) مرضه المتقدم. أه الورم الأرومي العصبي هو الشكل الأكثر شيوعًا للورم خارج القحف ، وهو السرطان عند الأطفال ، ومتوسط ​​عمر البقاء على قيد الحياة حوالي اثنين وعشرين شهرًا. وبسبب إنتاج البروتينات ومنتجات الجينات التي تؤدي إلى بقاء الخلية ، فإن أدويتنا الحالية غير فعالة حقًا ضد هذا المرض. ولذا أريد فقط أن أعرض عليك بعض البيانات الأولية. لذا فإن أول شيء أردنا القيام به هو إلقاء نظرة على ومعرفة ما إذا كان هذا المركب في الواقع يمكن أن يقتل الخلايا السرطانية. وما أريكم إياه هنا في هذا الجزء من الشكل ، أم هو عقار راسخ لعلاج السرطان أه سيسبلاتين. وهذه خلايا سرطان المبيض ويمكنك أن ترى أن التركيز العلاجي وهذا سيسبلاتين تم الحصول عليه في الواقع من أنبوب I-V لمريض في مركز السرطان هنا. ام هذا هو السيسبلاتين فعال جدا في قتل ، في قتل سرطان المبيض. ومع ذلك ، يمكن أن ينشأ نوعان من المقاومة في هذه الخلايا السرطانية ، أحدهما يعرف باسم طفرات P أو P-50-three الخالية ، والآخر هو الإفراط في التعبير عن بروتينات البقاء في هذه الحالة B-C-L-X-long. وفي الحقيقة هاتين الحيلتين المقاومة للسرطان تجعل السيسبلاتين غير فعالين وتحتاج إلى سيسبلاتين تقريبًا بالتركيز هنا لقتل هذه الخلايا للأسف التي ستقتل أه المريض أيضًا. أممم ، ولكن المثير للإعجاب هو أن هذا البنزوديازيبين ، لا يهتم على الإطلاق بهذه الطفرات ، وترى منحنى استجابة جرعة لطيفًا ، وفي الواقع أن BZ قادر على قتل كل من هاتين السلالتين المقاومتين أيضًا مثل سلالة الوالدين من النوع البري. ونخطط لإجراء تجارب هذا الصيف لاختبار ذلك في نموذج حيواني لسرطان المبيض. وذهبنا إلى أبعد من ذلك بقليل ، في الورم الأرومي العصبي ، مرة أخرى تمكنا من إظهار فعالية جيدة من حيث الاستجابة للجرعة في قتل هذه الخلايا في المختبر ، وفي نموذج من الورم الأرومي العصبي ، وقد أجريت هذه التجارب بالتعاون مع فاليري كاسيل مختبر ، أم في قسم طب الأطفال هنا ، أننا ذات مرة ، تم تلقيح الأورام في فئران جديدة وتم تكوين الأورام ، وأن هذا البنزوديازيبين قادر على تقليل معدل نمو الورم إلى مستوى - مدى ذو دلالة إحصائية. وهذا التخفيض بخمسة أضعاف مشابه جدًا لما يراه المرء ، مع الإيتوبوسيد وهو العلاج الحالي للورم الأرومي العصبي. لذلك نود أيضًا هذا الصيف أن نوسع هذه الدراسات إلى مجموعة أكبر من الفئران. وبعد ذلك ، في الختام ، أريد أن أتحدث قليلاً عن كيفية عمل ذلك. لذلك ، هناك حقًا مجموعتان من الأسئلة أو على الأقل لقد درسنا مجموعتين من الأسئلة ، فيما يتعلق بآلية عمل هذا الوكيل. لذا فإن الأول هو أنني قدمت بيانات تفيد بأن البنزوديازيبين يبدو انتقائيًا ضد مجموعات الخلايا الليمفاوية الموسعة مرضيًا. ويثير السؤال السؤال الحقيقي هل يغير هذا البنزوديازيبين وظيفة المناعة الطبيعية؟ هل هذا عامل مناعة؟ وفي الحقيقة استطعنا أن نجيب - آه_ الجواب على السؤال لا. أه ليس هناك ما يكفي من الوقت لاستعراض جميع البيانات ، ولكن إذا أجرى المرء سلسلة من التجارب فعليًا ، فسنأخذ الفئران العادية ونستمر في تناولها بالبنزوديازيبين ، ثم نتحدىها باستخدام مستضدات محددة للخلايا البائية أو التائية. المستضدات الخاصة بالخلية لا يوجد تغيير في عيار الجسم المضاد الذاتي. لذلك يبدو هذا العامل حقًا انتقائيًا لاستجابة المناعة الذاتية. والسؤال الآن ، بما أننا اقترحنا أن حالة تنشيط الخلايا الليمفاوية تعدل نشاط هذا المركب ، فكيف يحدث هذا ، ولماذا تكون الخلايا المنشطة أكثر حساسية؟ الآن ، بالنسبة لعدد قليل من طلاب الكيمياء اثنين إلى عشرة هنا ولزملائي العضويين ، نشعر بالراحة في رسم الأسهم ، كما تعلمون حتى نعرف أين توجد الإلكترونات. وهكذا عندما يكون هناك كيميائي عضوي ، ف- يقترح مشكلة آلية نحب أن نفكر فيها على المستوى الذري. إن بيولوجيا الخلية هي ، تمامًا ، آه ، لا تفكر تمامًا على هذا المستوى ، وفي الحقيقة نحن ننظر إلى أشياء مثل هذه ، وهذه هي النظرة المبسطة لموت الخلايا. آه ، هذا ما تعرفه للكيميائي العضوي الذي يحب أن يعرف مكان كل ذرة في جزيء ، هذه مشكلة مخيفة للغاية. وقد استثمرنا قدرًا هائلاً وهائل من الجهد خلال العام الماضي أو نحو ذلك لتوضيح آلية عمل هذا المركب أو لدراسة آلية هذا المركب ، وهكذا ، في حين أن هذه شريحة معقدة نسبيًا كما تعلمون العديد من المسارات البديلة ، قررنا ، ربما اتباع نهج أكثر عقلانية. سألنا ، ما هي بعض العلامات والإشارات الشائعة في موت الخلايا المبرمج للخلايا البائية؟ موت الخلايا المبرمج أو موت الخلايا الليمفاوية التي تشمل الكينازات والفوسفاتازات وأنواع الأكسجين التفاعلية مثل جذور الهيدروكسيل ، والتغيرات في مستويات الكالسيوم داخل الخلايا يمكن أن تؤدي إلى موت الخلايا المبرمج للخلايا البائية ، والميتوكوندريا في الواقع هي منظمات مركزية لموت الخلايا وبقاء الخلية ، وكاسبيسات هي البروتياز التي في الواقع ، إذا رغبت في موت الخلية ، فإن البروتياز الذي يشق البروتينات الأخرى في الخلايا ، وأخيراً التعبير عن الجينات التي تؤدي إلى أن المنتجات الجينية نفسها هي نفسها منفذي موت الخلايا كلها جزء من هذه الآلية. ولإظهار نظرة مبسطة للغاية ونظرة مكثفة للغاية لما يحدث ، عندما يعالج المرء الخلايا ، وهذه خلايا غير نشطة مع البنزوديازيبين ، هناك تغيير عميق في الأكسجين التفاعلي ، وهناك زيادة في الأكسجين التفاعلي ، وبناءً على بياناتنا ، نعتقد أن هذا هو الأكسيد الفائق. حسنًا ، وهناك اثنان حددناهما وهذا حقًا عمل مرة أخرى لجيف باريت وتوني جاكارتي ، لقد حددنا مسارين لموت الخلايا. الأول هو ما أسميه إصابة غير محددة حيث تؤدي أنواع الأكسجين التفاعلية إلى بيروكسيد الدهون ويؤدي المسار المستقل للميتوكوندريا إلى النخر. أثناء حدوث ذلك ، هناك مسار آخر لموت الخلايا ، حيث تؤدي أنواع الأكسجين التفاعلية إلى زيادة الكالسيوم داخل الخلية ، يليها تنشيط كاسباس ، وإطلاق عوامل موت الخلايا المبرمج من الميتوكوندريا ، وهذا تغيير في إمكانات غشاء الميتوكوندريا والتي يسمح بحدوث ذلك ، وسيؤدي في النهاية إلى موت الخلايا. الطريقة الوحيدة الآن لمنع هذا أو تثبيط هذا المركب ، هي فيتامين E وهو مضاد للأكسدة ، أو مع T-bath وهو مركب بورفيرين المنغنيز الذي يعتقد أنه يتفاعل مع الأكسيد الفائق على وجه التحديد. يمكن لهذين النوعين من مضادات الأكسدة البحث عن أو إخماد أنواع الأكسجين التفاعلية التي ينتجها هذا البنزوديازيبين. لقد أظهرنا أيضًا أن مثبطات الكاسبيسات ، يمكنها منع تغيرات الكالسيوم ، ويمكن أن تمنع تنشيط الكاسبيز ، لكنها لا تؤدي إلى بقاء الخلية. لذلك إذا قمت بإيقاف هذا الذراع من مسار موت الخلية ، فإن هذا الذراع يتولى زمام الأمور. لذا فهذه هي الآلية الأساسية إذا كنت تريد نسخة مبسطة للغاية ، لما يحدث فقط في استجابة خلايا اه تجاه البنزوديازيبين. الآن السؤال هو لماذا الخلايا المنشطة أكثر حساسية؟ ولأذكرك فقط بما أعنيه لماذا تكون الخلايا المنشطة أكثر حساسية ، ولماذا تموت الخلايا البنية الفاتحة هذه ، وأثناء تجنيب هذه الخلايا البائية الداكنة وهناك في الواقع خلايا تي أخرى ، أه داخل هذا منطقة. حسنا؟ وبينما قمنا بعمل قدر معقول من العمل في نماذج حيوانية أه من خلال تنشيط أجهزتهم المناعية والنظر إلى الانتقائية ، فإن معظم العمل في الواقع تم في المختبر. واحتجنا إلى إنشاء نموذج في المختبر ، وهذا النموذج ، يستخدم هذا النموذج نوع aa من الخلايا B لأول مرة في المختبر من قبل عمر توما الذي كان طالب دكتوراه في الطب في الصيف الماضي وسينضم إلى المختبر ، أه هذا الصيف من خلال برنامج الدراسات العليا في علم المناعة فأخرج نموذج (رومالوس) ثم أجرى التجارب التالية مع توني وجيف. الآن على هذا المحور ، البنزوديازيبين والمحور Y هو خلايا ميتة. واه ، ربما كان علي أن أذكر هذا سابقًا ، لقد كتبت هنا بوضوح شديد تركيز البنزوديازيبين الواضح. قد يلاحظ بعض من محبي الكيمياء الطبية أن الخمسينيات من القرن الماضي هنا ضعيفة نسبيًا. ومع ذلك ، فإن هذا المركب أه يرتبط بحدود تسعة وتسعين وثمانية وتسعين في المائة ، أه تسعة وتسعين فاصل خمسة في المائة بألبومين المصل والتركيز الفعال للبنزوديازيبين الخالي من f-f في المحلول هو في الواقع في نطاق نانومولار. لذلك أعتقد أن الفاعلية الجوهرية لهذا المركب هي في الواقع أكبر بكثير مما يراه المرء في هذه الظروف مع ارتفاع الألبومين في الدم. لذلك ، في الخلايا غير النشطة وغير النشطة في هذه الحالة ، نتعامل الآن مع الخلايا البائية ، هناك استجابة جرعة لطيفة يتم إنشاؤها ، مثل زيادة تركيز البنزوديازيبين ، مما يؤدي إلى زيادة موت الخلايا. ومع ذلك ، في الخلايا المنشطة هناك استجابة جرعة مختلفة وهذه خلايا نشطة ويتم تنشيطها بطريقتين مختلفتين ، هذه الطرق الوحيدة التي يتم تنشيطها بها غير مهمة إلى حد ما الآن. والمثير للاهتمام هو أن هناك نوعين مختلفين في المقارنة ، هذه المجموعات من الخطوط مع هذا الخط ، هناك نوعان من أنظمة التركيز المتميزة التي يمكن ملاحظتها. عند تركيزات البنزوديازيبين التي لها نشاط ضئيل أو معدومة ، في الخلايا غير النشطة ، هناك قتل عميق للخلايا في الخلايا المنشطة. لدرجة أنه في بعض التركيزات ، ربما تزيد عشرين ضعفًا من الخلايا أو تزيد بمقدار عشرين ضعفًا في موت الخلايا. عندما يصل المرء إلى تركيزات عالية جدًا من البنزوديازيبين ، لا يهم ما إذا كان محفز التنشيط هذا موجودًا أم لا ، فإنك تحصل على نفس القدر من موت الخلايا. لذلك نقترح أو ما نعتقد أنه سيحدث في الحيوانات ، هو أن الانتقائية مشتقة من العمل في التراكيز ، في هذا النظام. الآن لماذا هذه الخلايا المنشطة أكثر حساسية؟ ويمكن للمرء أن يقترح اثنين اثنين ، لسببين. من الممكن ، هذا التنشيط ، حسنًا وهذا ، التنشيط من خلال مستقبل الخلية B و B-C-R ، هو في الأساس مقبض الصوت. إنه يحضر المسار الذي عرضته لك قبل شريحتين أو ثلاث شرائح ، فقط يعزز مسار موت الخلية. في الواقع ، لقد أظهرنا في الخلايا غير النشطة أن هناك تناظرًا بين كمية أنواع الأكسجين التفاعلية المنتجة ومقدار موت الخلايا. كلما زاد عدد R-O-S ، زاد موت الخلايا. من الممكن أيضًا أن يؤدي التحفيز من خلال B-C-R إلى مسار مختلف لموت الخلية. ولذلك ألقينا نظرة على هذا وكل من هذه الفرضيات أو كل من هذه الاحتمالات ، لذلك فهذه بيانات من مقياس التدفق الخلوي. تم تحضين الخلايا مع جزيء ثنائي هيدرو إيثيديوم يراقب أنواع الأكسجين التفاعلية. وهذه الخضراء عبارة عن مجموعة من الخلايا ، هناك عشرين ألف نقطة فعلية هنا أو عدد كبير من النقاط ، آه يبدو أنها متجمعة معًا ثم تحصل على نوع من هذا ، نمط متغلب ، هذه الخلايا الحمراء هنا تفعل ليس لديها أكسجين تفاعلي ، فهذه الخلايا الخضراء تفعل أ- وفقط مع خمسة من البنزوديازيبين الميكرومولار ، وثمانية وثلاثين بالمائة من الخلايا ، تحافظ على الأكسجين التفاعلي الإيجابي. وفي الواقع في ظل هذه الظروف ستبقى هذه الخلايا على قيد الحياة وهذا لا يكفي لقتل الخلايا. الآن إذا كان التحفيز يعمل ببساطة كعنصر تحكم في مستوى الصوت ، فربما توقعنا أنه ربما كان هناك عدد أكبر من خلال بعض البيولوجيا الجديدة التي لم يتم وصفها بعد ، فربما يؤدي تحفيز BCR إلى ظهور الأكسجين التفاعلي بالتزامن مع هذا البنزوديازيبين . لكن هذا ليس صحيحًا. وفي الحقيقة فإن بياناتنا أكثر اتساقًا ، مع مسار بديل.

لذلك عند وجود تركيز عالٍ جدًا من البنزوديازيبين سواء كانت إشارة التنشيط هذه موجودة أم لا ، يحدث موت الخلايا عن طريق النخر من خلال بيروكسيد الدهون. ومع ذلك ، عند هذا التركيز المنخفض للبنزوديازيبين الذي في حالة عدم وجود إشارة تنشيط ليس سامًا للخلايا ، فإن أنواع الأكسجين التفاعلية تؤدي الآن إلى تدفق الكالسيوم ، وقد أظهرنا أن هناك انتقال الكالسيوم من خارج الخلية إلى داخل الخلية ، وهناك تنشيط كاسباس مرة أخرى تغيير في الميتوكوندريا ، وفي هذه الخطوة هنا ، هناك تعبير جيني يحدث وهو مهم لمرحلة التنفيذ لاحقًا ، حتى أربع وعشرين ساعة. لذلك يختلف هذا المسار اختلافًا جوهريًا. ستلاحظ أنه على عكس الخلايا غير النشطة حيث تكون مضادات الأكسدة فقط وقائية ، فإن إزالة الكالسيوم خارج الخلية في هذه الحالة بجزيء يعرف باسم (بكتا) هو أيضًا وقائي ضد الموت الكلي للخلايا ، مثل تثبيط الكاسبيسات وتثبيط تخليق البروتين. الآن بينما ليس لدي الوقت اليوم للخوض في هذا ، فقد تعلمنا في الواقع القليل جدًا عما يحدث في هذا السهم. على سبيل المثال ، ليس لدينا فقط جزيئات مثل فيتامين E التي يمكن أن تمنع أو يمكنها إخماد الجذور أو أنواع الأكسجين التفاعلية التي يتم إنتاجها ، فنحن نعرف بالفعل كيفية إيقاف تشغيله تمامًا من مصدره ونعتقد أننا نفهم أين تتقاطع أنواع الأكسجين التفاعلية مع مسار BCR ، والمسار المحفز ليؤدي إلى هذه ، آلية الخلية التي أظهرتها هنا. إذن ، فقط للختام ، قمنا بتعريف البنزوديازيبين المؤيد للاستماتة الذي يحدد علاقة نشاط بنية جديدة للبنزوديازيبينات ، وقد أظهرنا أن هذا الجزيء سيمنع التهاب الكلية الذي يعد أحد أهم نقاط النهاية سريريًا في الذئبة في اثنين من أفضل النماذج الحيوانية لمرض الذئبة ، وأن هذا المركب له تأثيره في الحيوانات دون أي من الآثار الجانبية الضارة التي قد تحدث في العلاجات. ويتم تشكيل الانتقائية عن طريق التنشيط وإشارة R-O-S. ومرة أخرى هذا مهم لأنك إذا تذكرت أنني ذكرت في وقت مبكر ، فإن الجهاز المناعي في كل من مرضى الذئبة البشرية وهذه الحيوانات مفرط النشاط ، لذا فإن هذا البنزوديازيبين يستغل في الأساس الفيزيولوجيا المرضية الطبيعية لتحقيق انتقائية فريدة. وهكذا ، نحاول حاليًا تحديد الهدف الخلوي وفي الواقع في الصيف الماضي ، أم ، كاتي روبرتسون ، أخرى ، أه جامعية. طالب دكتوراه دكتوراه متناوب يقوم بعمل المختبر مرة أخرى من خلال برنامج الدراسات العليا في علم المناعة ، ربما في واحدة من أكثر جهود التناوب البطولية قد أظهر التوطين الخلوي لهذا المركب وصنع تحقيقات بيوتينيليتيد ولديه بالفعل شرائط على الهلام لذلك نأمل في الواقع أن يكون لدينا هذا المستقبل سريع جدًا ، بالتعاون الآن مع بيل راولز ، نحاول تحسين الديناميكا الدوائية لهذا المركب ، أه لتحسين مستوى الذوبان ، ونأمل ، فقط بالطريقة التي تسير بها الأمور ، في غضون بضع سنوات في الخارج نود أن نكون في التجارب البشرية. لذا ، أود ، فقط أن أعترف مرة أخرى بالأشخاص الذين قاموا بهذا العمل ، في الواقع إذا لم يكن هناك برنامج دكتوراه في الطب هنا في ميشيغان فلن يكون هناك هذا لأنني لن أتمكن من تقديم هذا العمل لك. أه جيف باريت نيل براون الذي هو في الواقع الآن آه ، في سنته الثالثة في الأجنحة ، وتوني جاكارتي ، الذي يعمل الآن أستاذًا مساعدًا في OB GYN ، أجرى جميع الدراسات التي أظهرتها لك ، كاتي وعمر ، تقريبًا نبدأ الآن في اختيار حمل الشعلة إذا أردت ، آه جيني بيرنهاردت كريستين ماكجريجور تعمل جوان دايموند تانيا ستيفنسون وأوتو تيش في الواقع على مشروع الذئبة الآخر ، واه يتضمن الأجسام المضادة ومن ثم يدرس نيل ستار وبيل جاردنيك فعلاً ، هل هذا صحيح- ص- ص- عمل طي RNA. ومرة أخرى أنا محظوظ لأن لدي القدرة على التعاون مع هؤلاء الأفراد هنا في ميشيغان وجون إلمان في بيركلي. ثم أخيرًا

أود أن_ انظر من هناك ، هذا أنت. هذا صحيح ، أود أن أشكر زوجتي راشيل على لطفها ودعمها المحب وتفهمها للزوج الذي يعود في الساعة الثامنة إلى مكتبه خمس ليالٍ في الأسبوع ، وإلى هانا وجيريمي. لست متأكدًا من هانا إذا كنت متعبًا في هذه الصورة أم أنك تحاول أن تبدو أه خمسة في السادسة عشرة. ولكن على أية حال ، أشكركم جميعًا على حضوركم اليوم ، عميد نيومان ، الأستاذ مارينو ، أنا متأكد من أن بعضكم لديه أسئلة ، هل يمكنك توجيهها مباشرة إلى البروفيسور جليك من فضلك.

مايكل سؤالين جاري د- د- هل الكيمياء الفراغية مهمة على الإطلاق في ذلك المركب؟ ربما ثلاثة أسئلة_ هل لها خصائص مهدئة؟ وربما في أفضل الثلاثة على الأقل one_ h- كيف انتقلت من مكتبة Ellman في هذا إلى ، نعم ، في هذا المسار؟ لذا فإن السؤال الأول هو ، الكيمياء الفراغية غير مهمة. هناك بعض مضادات الانتقائية بتركيزات منخفضة التي د- كل ما يخبرك هو أنك تنظر إلى ترابط نقطتين بدلاً من ترابط ثلاثي النقاط. حسنًا السؤال الثاني ، آه لا. لا توجد خصائص مهدئة على الإطلاق. يمكننا إعطاء سبعمائة ملليغرام لكل كيلوغرام في اليوم لمدة شهر والفئران لا تغفو. وبعد شهر بدأوا في الموت ولكن هذا لهؤلاء منكم ، هذا كثير من المركب. ثم السؤال الأخير هو أننا قمنا بالفعل بفحص المكتبة ، لقد قمنا بالفعل بفحص المكتبة بحثًا عن عدد من الخصائص المختلفة ، كانت السمية الخلوية في الواقع واحدة منها ، وحددنا ، هذا كجزيء له ملف تعريف انتقائي فريد. وفي الحقيقة نحن نوعًا ما ، لقد كنا محظوظين جدًا من نواح كثيرة. ث- ح- لماذا نتعامل مع مكتبة؟ كان هذا عندما بدأ هذا العمل ، لم يكن هناك الكثير من المكتبات المتاحة ، لقد كنت أنا وجون في مؤتمر N-S-F في زورق معًا وبدأنا الحديث. وهذا ما أدى في الواقع إلى هذا التعاون المحدد. لكن البنزوديازيبينات ونوعًا ما ، التحوط من رهاننا كما ذكرت سابقًا ، لديهم كل أنواع الأنشطة ، إنهم حقًا هياكل مميزة يقومون بكل أنواع الأشياء. وكنا نحاول نوعًا ما استخراج الذهب ، وهو منجم ذهب راسخ لمعرفة ما إذا كان بإمكاننا العثور على المزيد من الذهب. أو نوع آخر من الذهب. لقد ذكرت في البداية أن الحلقة (النفثالين) لها تأثير كبير على كيفية عمل الكاشف هل اختبرت بدائل أخرى بدلاً من ذلك؟ لذلك إذا وضعت ، إذا وضعت النيتروجين (xx) (التكافؤ) فإنه يلغي تقريبًا كل نشاط المركب. أه بينما إذا قمت بالذهاب من نافثيل ألانين إلى فينيل ألانين فإنك ستلغي خمسين بالمائة من مجموع الخمسين بالمائة من النشاط. إذن أحد الأشياء التي سنعمل عليها مع بيل ، أه هل أه استكشاف حقيقي وشامل أه للتنوع الذي هو (xx) بوب؟ ط- هل هي مادة طبيعية؟ لا تفعلها؟ نعم ، الكثير منها. غاري ، آه ، لقد تحدثت عن أه ، مقارنة المركب الخاص بك مع السيسبلاتين في سرطان المبيض والسيسبلاتين لديه نطاق ضيق للغاية من حيث نوع الخلايا الجذعية من سرطان الخصية والمبيض. ما هو اتساع هذا؟ من الواضح أن الآليات يجب أن تكون مختلفة. لذلك في المختبر ، أو في زراعة الخلايا ، هذا المركب يقتل أي شيء. أم السؤال هو ما هو النموذج المناسب للحكم ، ومدى الفعالية وأعتقد حقا أن هؤلاء في التجارب على الحيوانات. لدينا د- لدينا ، تم إعطاؤنا الخلايا ، أم ، آه ، في جميع أنواع السرطانات التي جربناها تقريبًا ، قمنا بفحص جميع الأورام اللمفاوية ، ولم نذهب إلى الكثير من الأورام الصلبة ، لكننا نظرنا إلى ناقضات العظم التي أعطاها لنا الناس وقالوا ، لا شيء يقتل هذه الخلايا ، أعني تركيز حمض الهيدروكلوريك ، أعني أنه لن يقتل الخلايا. لذا أعتقد أن ما يحدث هو أننا منخرطون في جزء فريد للغاية ومهم للغاية من آلية موت الخلية وهذا يؤدي إلى هذه الاستجابات التي هي حقًا النقطة التي نشرك فيها هذه الآلة يتحايل بشكل أساسي على جميع آليات المقاومة العادية. لذلك أعتقد أنه يحتوي على مجموعة واسعة من قابلية التطبيق ، ومدى فائدته حقًا سيعتمد على الانتقائية في نماذج مختلفة وأعتقد ، فائدة هذا المركب_ لذلك هناك بعض الأسباب ، لماذا يمكن النظر إلى الخلايا السرطانية نوعًا ما الخلايا الليمفاوية المنشطة هناك الكثير من أوجه التشابه وأعتقد أن هذا مرتبط بالسبب الذي يجعلنا نرى فعالية تلك النماذج. حسنًا ، كيف يتم حفظ ذلك جيدًا أو آه ، في نماذج أخرى سيكون حقًا قيد التجربة ولكنه سيتطلب حقًا تجارب حيوانية لا أعتقد أن ثقافة الخلية ستكون مفيدة. فعل ، هل قلت أن الكالسيوم يأتي إلى الخلية من الخارج ، أم أن الميتوكوندريا يأتي من الميتوكوندريا ، نفاذية الميتوكوندريا (الانتقال.) لا ، ليس الأمر كذلك ، نعم.لا نعتقد أنه يأتي من الميتوكوندريا لأن الكالسيوم يحدث قبل حدوث تغيرات التدرج ، لذلك نراقب تغيرات التدرج في الميتوكوندريا باستخدام DIOC-six أو مع JC-one ، ولم نقم بتشغيل انتقال النفاذية و ، يمكن للكالسيوم أن يمنع استجابة الكالسيوم بطبقات أساسية خارج الخلية. لقد أوضحنا أيضًا أن المركب لا يعمل بشكل مباشر في المتاجر الحساسة (xx) أو المتاجر الحساسة (xx) التي عادةً ما تكون ، عند تحريرها ، تقوم بتنشيط قنوات الكراك وتؤدي إلى التدفق. لذلك نعتقد أن هذه هي القناة اللمفاوية الجديدة لاستقبال الكالسيوم. وهكذا سيكون هناك - أنا- هناك تريمن- هناك بيولوجيا الكالسيوم المثيرة للاهتمام التي لم يكن لدي وقت لأتصفحها ، هناك تغييرات عميقة في الكالسيوم والتي ستكون في الواقع مفيدة للغاية ، أه لتكون قادرًا على دراسة هذه ربما أعمل مع شخص لديه مجسات الكالسيوم أحادية الخلية أه ذاك أه

هناك سؤال هناك هل يرتبط أو يمنع ديسميوتاز الفائق؟ لم ننظر إلى ديسموتاز الأكسيد الفائق حتى الآن ، على الرغم من أنني لا أعتقد أنه SOD لأن مستوى استجابة الـ على سبيل المثال ، معدل تغيير ROS ومدى تغيير ROS عميق جدًا لدرجة أنه غير نموذجي حقًا لما يتوقعه المرء لمستويات الخلفية من SOD. لذلك لا أعتقد أن هذا كل شيء ولكن هذا احتمال رسمي. إنه ث - نعتقد أنه يعتمد في الواقع على العمل الذي لا يمكنني الخوض فيه الآن ، أم أنه من المحتمل أن يكون مرتبطًا بأكسيداز NADPH. نعم وهكذا قلت أن هناك بعض المكتبات التي أخذت منها هذا. اممم ، ما- ماذا يوجد في هذه المكتبة؟ ما تحتويه هذه المكتبة بالذات ألف وستمائة وتسعة وخمسون نوعًا من البنزوديازيبينات ، والتي تختلف ، حسب مكان حلقة النافثيل ألانين هذه ، وأين يوجد الكلور وأين توجد مجموعة الهيدروكسيل. لذلك كانت هذه المركبات ، lemme show you I didn't show my، one slide،

شريحة الكيمياء الاندماجية الخاصة بي ، ولكن هذه المكتبة - كانت هذه المكتبة ، كان علي أن أظهر هذا. تم تشكيل هذه المكتبة بطريقة التوليف المتوازي وهو ما يسمى الانقسام والتوليف البركاني. حيث يمكنك أن تتخيل ، مجموعة متنوعة من مواد البداية المختلفة ، دعنا نقول كرة حمراء ، كرة زرقاء ، كرة خضراء مختلطة معًا ، ووضعها في هذه القوارير الثلاثة ، ويحدث التفاعل الكيميائي في كل منها ولدي كرة صفراء كرة زرقاء كرة زرقاء مختلفة وكرة حمراء ، بمخاليط مختلفة ، تقوم بدمجها وتقسيمها وتشكيل تفاعل كيميائي آخر عن طريق تغيير المكونات التي يتكون منها البنزوديازيبين الذي تصنعه ، والبنزوديازيبينات المختلفة. ثم نقوم بفحصها بحثًا عن مجموعة متنوعة من الأشياء المختلفة.

هل هناك أسئلة أخرى للبروفيسور جليك. حسنًا إن لم يكن الأمر يقع أه علي نيابة عنك أه أن أشكر أه غاري غليك على حديث كان من الواضح أنه مليء بالاهتمام العلمي للحكم من أسئلتك ، طُلب من قاعدة خبرات أكبر إلى حد ما من خبراتي وأيضًا إلى أه ، أشكره على القيام بهذا العمل المهم أه سواء كنا علماء أم لا ، أي منا لديه أي اتصال مع أفراد مصابين بمرض الذئبة ، سيفهم ما هو بحث أه مهم هذا أه لبعض إخواننا البشر شكرا جزيلا لك غاري على محاضرة رائعة. اشكرك.


نتائج

تختلف EOCs و ECFCs شكليًا ونمطًا ظاهريًا

كانت تقنيات الاستزراع المختلفة مطلوبة لتوليد كل نوع فرعي من EPC. تم إنشاء EOCs من PBMCs المستزرعة لمدة 7 أيام على ألواح مغلفة بالفيبرونيكتين بينما تم الحصول على ECFCs بعد فترات استزراع أطول (2-4 أسابيع) على ألواح مغلفة بالكولاجين. يختلف التشكل الملاحظ لكل نوع فرعي من الخلايا اختلافًا كبيرًا. تشكل EOCs مجموعة غير متجانسة من الخلايا المستديرة والممدودة بينما تشكل ECFCs طبقة أحادية تشبه الحصاة ذات المظهر المتجانس (الشكل 1 أ). تعرض EOCs شخصية خلية بطانية غير ناضجة لأنها لا تزال تشبه مجموعة PBMC التي تستمد منها بعد 7 أيام من الثقافة. من ناحية أخرى ، يبدو أن ECFCs تكتسب نمطًا ظاهريًا شبيهًا بطانيًا يشبه HUVECs. علاوة على ذلك ، فإن خلايا EOC هي خلايا قصيرة العمر لا تعيش في الأيام السبعة الماضية في حين أن ECFCs هي خلايا شديدة التكاثر يمكن تمريرها والاحتفاظ بها في الثقافة لعدة أشهر (لا تظهر البيانات). تربط كل من EOCs و ECFCs Ulex-lectin واستوعبت DiI-Ac-LDL ، وكلاهما من خصائص الخلايا البطانية (الشكل 1 ب).

توصيف EOCs و ECFCs المشتقة من PBMC. أ صور مجهرية ضوئية تمثيلية لـ EOCs و ECFCs مأخوذة بتكبير × 10 باستخدام مجهر ضوئي مقلوب. تعرض EOCs مجموعة غير متجانسة من الخلايا المستديرة والممدودة على فبرونيكتين بعد 7 أيام من الثقافة. تُظهر ECFCs مجموعة متجانسة تشكل طبقة أحادية الطبقة شبيهة بالحصى على الكولاجين بعد 21 يومًا من الثقافة. ب صور مجهرية متحد البؤر تمثيلية تُظهر تلطيخًا ثلاثيًا لـ EOCs و ECFCs لامتصاص DiI-Ac-LDL (أحمر) ، رابط Ulex-lectin (لون أخضر) و TO-PRO-3 تلطيخ نووي (أزرق) مأخوذ بتكبير 63 ×. ج صور مجهرية ضوئية تمثيلية تُظهر إمكانات تكوين الهيكل الشبيه بالأنبوب لـ EOCs و ECFCs مقارنةً بـ HUVECs على سطح Matrigel المأخوذة بتكبير 10 × باستخدام مجهر مقلوب

إمكانية تكوين أنبوب EOCs و ECFC

نظهر أن EOCs و ECFCs مختلفة وظيفيًا أيضًا. لا تشكل EOC هياكل شبيهة بالأنبوب ، في حين أن ECFCs ، على غرار HUVECs ، تشكل أنابيب جيدة التنظيم على Matrigel (الشكل 1 ج).

EOCs وتعبير علامة سطح الخلية ECFC

تواصل EOC التعبير عن علامات سطح خلية الكريات البيض ووحيدات الخلايا CD45 و CD14 ، على التوالي ، بعد 7 أيام من الثقافة ، في حين تفقد ECFCs هذه العلامات طوال عملية التمايز. علاوة على ذلك ، تعبر EOC بقوة عن العلامة المولدة للأوعية VEGFR2. على عكس EOCs ، تعبر ECFCs عن علامة الخلية السلفية CD34 وعلامة الخلية البطانية CD144. أظهرت جميع مجموعات الخلايا تعبيرًا موحدًا عن جزيء التصاق الخلايا البطانية الصفائح الدموية CD31 (الشكل 2).

التعبير عن علامات سطح الخلية بواسطة EOCs و ECFCs. تحليل التدفق الخلوي لملف تعريف تعبير علامة سطح الخلية لـ EOCs (رمادي) و ECFCs (أبيض) مقارنة بـ PBMCs (أسود) و HUVECs (الرمادي الداكن) باستخدام أجسام مضادة أحادية النسيلة مترافقة مع PE للفأر ضد CD14 و CD45 و VEGFR2 و CD34 و CD144 و CD31. الرسم البياني يمثل البيانات المتوسطة ± SEM للنسبة المئوية لتعبير علامة سطح الخلية (ن ≥ 3)

تمنع EOCs و ECFCs تراكم الصفائح الدموية

من أجل فهم تأثير EPCs على الصفائح الدموية بشكل أفضل ، سعينا إلى التحقيق في تأثير كل نوع فرعي من EPC على تراكم الصفائح الدموية. نوضح أن كلاً من EOCs و ECFCs والمواد الطافية الخاصة بها تمنع تراكم الصفائح الدموية ، مقارنةً بـ PBMCs (الشكل 3). ومع ذلك ، لاحظنا زيادة كفاءة المواد الطافية في تثبيط تراكم الصفائح الدموية مقارنةً بعينات الخلايا الخاصة بها لكل من EOCs و ECFCs. نقترح أن هذا قد يكون بسبب إطلاق العوامل النشطة في الأوعية التي تلعب دورًا مهمًا في تراكم الصفائح الدموية. علاوة على ذلك ، أظهرنا أن ECFCs أكثر كفاءة في تثبيط تراكم الصفائح الدموية من EOCs.

تأثير PBMCs و EOCs و ECFCs على تراكم الصفائح الدموية. أ آثار تمثيلية لتكدس الصفائح الدموية. تم تحضين الصفائح الدموية باستخدام وسيط EGM-2 كامل (تحكم) أو في وجود 4 × 10 6 / مل من خلايا PBMC و EOC و ECFC أو المواد الطافية الخاصة بها لمدة 5 دقائق عند 37 درجة مئوية قبل بدء التجميع مع 1 ميكروغرام / مل من الكولاجين. ب الرسم البياني يمثل البيانات المتوسطة لتجميع الصفائح الدموية في المئة ± SEM (ن ≥ 3, ** ص & lt 0.01 مقابل التحكم)

تطلق ECFCs المزيد من NO و PGI2 من EOCs

لفهم زيادة كفاءة ECFCs مقارنةً بـ EOC في تثبيط تراكم الصفائح الدموية ، قمنا بمقارنة ملفات تعريف تعبير NOS و COX في EOCs و ECFCs و PBMCs و HUVECs. وجدنا أن ECFCs ، على غرار HUVECs ، تعبر بشكل أساسي عن eNOS و iNOS و COX-1 ، ولكن بدرجة أقل COX-2. في المقابل ، لا تعبر EOCs بشكل أساسي عن NO و PGI2 إنتاج الإنزيمات (الشكل 4 أ). باستخدام تقنيات المقايسة المناعية الإشعاعية وتقنيات قياس الفلور ، قمنا بتقييم PGI2 و NO الإصدار ، على التوالي. وجدنا أن EOCs تطلق كميات قليلة من NO (60 pmol) و PGI2 (300 بيكوغرام / مل) في حين أن ECFCs ، على غرار HUVECs ، تطلق مستويات أعلى بكثير من NO (90 pmol) و PGI2 (5000 بيكوغرام / مل) (الشكل 4 ب ، ج). يمثل التعبير الأعلى عن إنزيمات NOS و COX في ECFCs المستويات الأعلى بشكل ملحوظ من NO و PGI2 التي تطلقها هذه الخلايا مقارنة بـ EOCs.

التعبير عن NOS و COX وإطلاق NO و PGI2 بواسطة EOCs و ECFCs. أ اليسار: ملف تعريف تعبير البروتين NOS و COX في PBMCs و EOCs و ECFCs و HUVECs. تم تحليل اللطخات التمثيلية لمحللات الخلية من أجل eNOS و iNOS و COX-1 و COX-2 بواسطة SDS-PAGE. حق: الرسم البياني يمثل متوسط ​​البيانات ± SEM المعبر عنها كوحدات عشوائية للكثافة الضوئية للبقع على اليسار (ن ≥ 3) (ب, ج) طاف من 4 × 10 6 / مل PBMCs و EOCs و ECFCs و HUVECs تم تقييمها من أجل PGI2 تم إطلاقه عن طريق المقايسة المناعية الراديوية لـ 6-keto-PGF التركيز (pg / mL) (ب) وللإطلاق عن طريق مقايسة النترات / النتريت الفلورومترية لتركيز النترات (pmol) (ج). تمثل الرسوم البيانية متوسط ​​التركيز ± SEM للنترات و PGI2 (ن ≥ 3, *ص & lt 0.05 مقابل PBMCs ، ***ص & lt 0.001 مقابل PBMCs)


ورق BPA منخفض الجرعة في علوم السموم به عيوب قاتلة ويجب سحبه # 038. يثير أيضًا شكوكًا حول نزاهة مرفق حيوانات المختبر الفيدرالي

تم توسيع هذا الإصدار بشكل كبير لمعالجة اقتراحات مراجعة الأقران من العديد من الباحثين البارزين. أولئك الذين ساعدوا في تحسين هذه الورقة والذين يرغبون في عدم ذكر أسمائهم لأن البيانات والآراء المباشرة وغير الدقيقة المعبر عنها هنا قد تتسبب في التمويل أو القضايا السياسية أو غيرها من القضايا غير المرغوب فيها.

ومع ذلك ، نحن ممتنون للغاية لمساعدتهم ومساعدتهم وتشجيعهم.

الرجاء النقر فوق هذا الارتباط للحصول على نسخة .pdf من هذا المنشور.

أصبح Bisphenol A (BPA) موجودًا في كل مكان تقريبًا في بيئتنا ويمكن العثور عليه في العديد من المنتجات المختلفة ، بما في ذلك البلاستيك في زجاجات المياه وزجاجات الأطفال والورق الحراري للطابعات وحتى في مواد منع التسرب الخاصة بالأسنان والأجهزة الطبية بما في ذلك أكياس السوائل الوريدية والعلاج الكيميائي وأنابيب (26،27،28،29،30،31).

تم نشر آلاف الدراسات التي تفحص مستويات BPA وغيرها من العوامل المسببة لاضطرابات الغدد الصماء الموجودة في البيئة إلى جانب الآليات والمسارات التي قد تتخذها تلك المواد الكيميائية للتأثير على الكائنات الحية أو الإضرار بها ، ومع ذلك ، هناك جدل كبير بشأن الآثار الصحية السلبية لذلك. - ما يسمى بالتعرض "للجرعة المنخفضة".

دراسة حديثة نشرت في المجلة علوم السموم، ذكرت كأهدافها الرغبة في المساعدة في إلقاء الضوء على مجموعة الأدلة المتضاربة. لسوء الحظ ، هذه الدراسة ، & # 8220Toxicity Evaluation of Bisphenol A التي يديرها Gavage إلى جرذان SPRAGUE-DAWLEY من يوم الحمل 6 حتى يوم ما بعد الولادة 90 (1) & # 8220 معيبة قاتلة.

الدراسة (1) بواسطة Delclos وآخرون.، خلص إلى أن الجرعات المنخفضة من BPA ليست ضارة. ومع ذلك ، لا يمكن تبرير هذا الاستنتاج علميًا بالتجربة التي أجريت. تعاني هذه الدراسة من العديد من الأخطاء الجسيمة بما في ذلك القبول النهائي للمؤلفين (1) انتهاك إحدى القواعد التجريبية الأساسية للطريقة العلمية: فقد تلوث الأشخاص الضابطة بالمادة الكيميائية التي يتم تقييمها.

بالإضافة إلى ذلك ، بينما يدعي مؤلفو الدراسة أنه ليس لديهم أي فكرة عن مصدر تلوث BPA (1) ، فإن فحص الورقة والفهم الحالي للعلم يشير إلى العديد من سبل التلوث الواضحة والراسخة والتي كان يجب أخذها في الاعتبار في أي تصميم وإجراء تجربة دقيقة.

سوف تستكشف هذه الرسالة عددًا من هذه المصادر ونتائجها بمزيد من التفصيل أدناه ، ولكنها تستحق النظر في هذه المرحلة في أن مصدر تلوث محتمل يمكن أن يعرض نتائج التجارب الجارية في البرنامج الكبير للغاية متعدد الوكالات المعروف باسم Consortium Linking Academic. وإحصاءات تنظيمية بشأن سمية BPA (CLARITY-BPA).

اختبار المخاوف من تلوث الحيوانات CLARITY-BPA

ديكلوس وآخرون. يذكر أن حيوانات الاختبار في تجربتهم تم الحصول عليها من مستعمرة تكاثر NTP (1). إذا كان الأمر كذلك ، فقد يكون للضوابط الملوثة أهمية أيضًا لعشرات المحققين المشاركين في CLARITY-BPA.

"CLARITY-BPA هو جهد تعاوني بين NTP و NIEHS بدعم من إدارة الغذاء والدواء لإجراء دراسة إرشادية حول سمية القوارض المزمنة في الفترة المحيطة بالولادة على BPA (95)."

تم تصميم البرنامج لاستقصاء "الشكوك العلمية حول التأثيرات الصحية لـ BPA لإبلاغ عملية صنع القرار التنظيمي بشكل أفضل. ... يتكون اتحاد CLARITY-BPA من موظفي NCTR و NIEHS و NTP و 12 من الحاصلين على منح خارج أسوار (95). "

يتم إجراء الدراسة المتوافقة مع المبادئ التوجيهية الأساسية في المركز الوطني لأبحاث السموم التابع لإدارة الأغذية والعقاقير (NCTR) ، ويجب على محققي CLARITY-BPA ، سواء مع الحكومة في الجامعات ، استخدام الفئران من مستعمرة NTP للتكاثر (95).

يثير المصدر غير المعروف لتلوث عناصر تحكم BPA مسألة ما إذا كانت الحيوانات في مستعمرة تكاثر NTP يتم رصدها بانتظام بحثًا عن BPA وغيرها من مسببات اضطرابات الغدد الصماء.

إن أخذ عينات من السكان بشكل مستمر ومنتظم بواسطة NTP من شأنه أن ينبه المربين إلى التلوث المحتمل. قبل إطلاق سراحهم ، من شأن أخذ العينات على دفعات أن يضمن للمحققين المستقبلين نقاء حيوانات الاختبار الخاصة بهم.

من غير المعروف ما إذا كانت مستعمرة تربية NTP لديها بروتوكولات مراقبة مطبقة تراقب حيوانات الاختبار بشكل كاف وتؤكد للمحققين أن موضوعات الاختبار غير ملوثة ومناسبة للتجربة.

تتراكم الأخطاء التي يمكن تجنبها

بالإضافة إلى خطأ التلوث ، فشلت الدراسة في تراكم أخطاء جسيمة أخرى:

  • التلوث المحتمل من المركبات الأخرى المسببة لاضطرابات الغدد الصماء
  • التأثيرات المركبة غير المعروفة للضغوطات
  • استخدام الحقن الفموي الذي يسبب ضغوطات غير كيميائية
  • استخدام الحقن الفموي الذي يفشل في إعادة امتصاص مادة BPA المناسبة
  • سلالة الفئران غير المناسبة
  • سوء اختيار مقاييس النتائج
  • عدم استخدام العلم الحالي في أبحاث BPA و Endocrine Disruptor Compound (EDC)
  • ادعاء خاطئ بأن BPA عبارة عن إستروجين "ضعيف"
  • عدم تحديد المصدر (المصادر) الخارجية المعروفة لتلوث بيسفينول أ
  • عدم تحديد المصدر (المصادر) الخارجية المعروفة والنشاط الاستروجين للمعدات والإمدادات
  • عدم قياس مستويات BPA في أي من الحيوانات باستثناء مجموعة الاختبار في نهاية التجربة
  • عدم قياس مركبات الاستروجين الخارجية الأخرى في حيوانات الاختبار
  • استخدام تزقيمية الفم
  • فحص السمية بشكل خاطئ عندما يكون التوقيت مشكلة أكبر
  • عدم تضمين الكشف عن التعارضات

الضوابط الملوثة

يتم تعريف التحكم السلبي أو الساذج على أنه مجموعة من الوحدات التجريبية التي لم يتم تطبيق أي علاج تجريبي عليها ، ولا تمتلك أي جودة من شأنها أن يكون لها تأثير على نتائج الدراسة. في الدراسة التي أجريت تحت المجهر (1) ، لكي تكون عنصر تحكم سلبي حقيقي ، يجب أن تكون جميع الحيوانات خالية من أي مادة BPA أو غيرها من المواد المسببة لاضطرابات الغدد الصماء في أجسامها والتي تتفاعل مع BPA أو تتصرف بطريقة مشابهة. لسوء الحظ ، لم يتم ذلك ، مما جعل جميع النتائج التجريبية الأخرى غير صالحة (117). ذكرت الورقة نفسها أن:

"تم الكشف عن BPA-glucuronide في مصل الدم من المركبات والحيوانات الساذجة الضابطة بمستويات مماثلة لتلك التي تم اكتشافها في الحيوانات التي تناولت جرعات 2.5 ميكروغرام من BPA / كجم من وزن الجسم / يوم. إن وجود BPA-glucuronide ، الذي يتكون من استقلاب aglycone BPA في الجسم ، في مصل حيوانات الضبط يعني تعرض الحيوانات غير المقصود لـ BPA بدلاً من تلوث عينات المصل بعد أخذ العينات. لم يتم تحديد مصدر هذا التعرض بشكل نهائي. وبالتالي ، فإن مجموعة جرعة 2.5 ميكروغرام من BPA / وزن الجسم / يوم لا يمكن تمييزها عن مجموعتي المراقبة السلبيتين ". (1)

ينتهك هذا الاكتشاف تلقائيًا إحدى أهم وظائف عنصر التحكم ، حيث لم يعد بإمكان الباحثين تحديد ما إذا كانت الجرعة المنخفضة من BPA لها تأثير على نقاط النهاية المحددة الموضحة في الورقة (2،38) ، نظرًا لأن جميع الفئران ، حتى كانت عناصر التحكم السلبية المفترضة ملوثة بـ BPA قبل التجربة.

إذا لم تكن هناك اختلافات في مجموعة الجرعات المنخفضة من BPA والمجموعة الضابطة ، فمن المستحيل التوصل إلى نتيجة مفادها أن الجرعات المنخفضة من BPA ليس لها أي تأثير على الفئران في حالة عدم وجود تحكم ساذج حقيقي يمكن مقارنته في المجموعة. المركز الأول (2،38،39،40). بالإضافة إلى ذلك ، بدون مقارنة عنصر تحكم إيجابي (أي عنصر تحكم تمت معالجته بـ BPA ، في هذه الحالة ، يُعرف أنه يعزز التأثيرات الضارة) ، يكون من الصعب تحديد ما إذا كانت النتيجة السلبية حقيقية ، أو ما إذا كانت خاطئة سلبي (3،35،39).

التأثيرات المركبة غير المعروفة للضغوطات

لغرض هذا وغيره من الاختبارات الخاصة باضطرابات الغدد الصماء ، لن يكون من الضروري فقط التأكد من أن الضوابط لم تتلوث بالمادة التي يجري التحقيق فيها ، ولكن أيضًا لوجود عوامل أخرى معطلة للغدد الصماء.

أثارت العديد من الدراسات الحديثة المشكلات المربكة الناتجة عن تفاعلات غير معروفة معادية ، ناهضة ، تآزرية والتي قد تحجب التأثيرات من مركب واحد قيد الدراسة (96،97،98،99).

أقر المعهد الوطني لعلوم الصحة البيئية (NIEHS) بهذه المشكلة. في خطتها الإستراتيجية للفترة 2012-2017 ، ذكرت NIEHS أن حل تأثيرات التفاعلات الناتجة عن توليفات عوامل الإجهاد الكيميائية وغير الكيميائية كان أولوية عالية (100).

إن تضمين NIEHS للضغوط غير الكيميائية يتحدث أيضًا عن الإجهاد الناجم عن التزقيم والذي ينتج عنه إفرازات هرمونية قد تغير تأثيرات مركب مدروس مثل BPA.

استخدام الحقن الفموي الذي يسبب ضغوطات غير كيميائية

بالإضافة إلى التأثيرات المتعلقة بالتركيزات الداخلية لـ BPA أو غيرها من المركبات النشطة بجرعات منخفضة ، يمكن أن يؤدي التزقيم إلى إنتاج هرمونات التوتر وتغيير التوازن الداخلي لحيوانات الاختبار (101،102،103،104). دراسة حديثة جدًا متعلقة بـ BPA وجدت "إمكانية التأثير بالتزقيم في التعبير الجيني في الدماغ النامي" (105).

قد يؤدي تغيير توازن الغدد الصماء لحيوانات الاختبار من خلال إجراءات التجربة مع نتائج غير معروفة أو ملتبسة إلى ظهور ظواهر غير مرغوب فيها مع إمكانية التأثير على النتائج الإجمالية للتجربة. قد يكون هذا مهمًا في الحالات التي تكون فيها التركيزات ذات الصلة من الهرمونات والمركبات المدروسة نشطة في تركيزات النانو أو البيكو.

استخدام الحقن الفموي الذي يفشل في إعادة امتصاص مادة BPA المناسبة

ديكلوس وآخرون. استخدمت الدراسة الجرعات بالتزقيم الفموي للفئران الحوامل أثناء التجربة (1). وجدت الدراسات الحديثة في أبحاث BPA أن طريقة التزقيم عن طريق الفم قد تكون تقنية غير مناسبة لـ BPA وتجارب EDC الأخرى ، حيث أن هذه الطريقة لا تمثل بدقة عملية الابتلاع والامتصاص الفعلية من قبل القوارض والبشر (16،17،18،83 ، 85).

على وجه التحديد ، "اعتمدت معظم الدراسات السابقة على طريقة التزقيم ، حيث يتم توزيع BPA بالتساوي في القناة الهضمية. هذه ليست الطريقة التي يدخل بها الطعام إلى أجسامنا. نحن نمضغه ، ونحركه في أفواهنا ، ويتفاعل مع العديد من الأسطح & # 8211 لساننا ووجنتك ، إلخ & # 8211 قبل أن يدخل المعدة ". (16). بعبارة أخرى ، فإن استخدام طريقة التزقيم يشير إلى أنه لا ينبغي أن يكون هناك أي مادة BPA غير مستقلب في الدم بعد التعرض ، ولكن وجدت العديد من الدراسات أنه يوجد في الواقع (16،17،83،84).

في دراسة باستخدام نموذج الكلاب ، قارن الباحثون طرق تزقيم BPA مقابل طرق التعرض تحت اللسان ، ووجدوا أن امتصاص BPA في الجسم كان أعلى بشكل ملحوظ باستخدام طرق تحت اللسان مقارنة بتقنيات التزقيم (17) على وجه التحديد ، مستويات BPA في الكلاب كانت الأجسام أعلى بشكل ملحوظ في تلك الكلاب التي تلقت علاج BPA تحت اللسان مقارنة بمستويات BPA في تلك الكلاب التي تتلقى BPA من خلال التزقيم. خلصت الدراسة إلى أن مادة BPA يتم امتصاصها بشكل أكثر كفاءة وسرعة من خلال الغشاء المخاطي للفم ، مما يؤدي إلى ارتفاع مستويات BPA في الجسم بشكل أكبر من استخدام طرق التزقيم (17).

هذا يعني أن الدراسة التي تستخدم التزقيم تؤدي إلى مستويات BPA في أجسام الأشخاص الذين تم اختبارهم والتي تكون أقل بكثير مما ستكون عليه في سيناريو "العالم الحقيقي" مثل الامتصاص تحت اللسان وبالتالي فإن الاستنتاجات التي يتم الحصول عليها ستكون غير دقيقة. وقد وجدت دراسات مماثلة في نموذج الفئران نتائج مماثلة ، في أن التعرض لـ BPA من خلال استهلاك نظام غذائي معالج بـ BPA يؤدي إلى مسار أكثر طبيعية للتعرض مقارنة بالتطعيم الفموي (18،86).

سلالة الفئران غير المناسبة

لقد وجد أن هناك أنواعًا واضحة واختلافات خاصة بالسلالة في الحساسية لمركبات الاستروجين المختلفة و EDCs (4،5،41 ، 42،44،45) ، لذلك باستخدام نموذج حيواني ثبت أنه يستجيب للمركب (ق) المعنية أمر بالغ الأهمية لتفسيرات دقيقة للنتائج. على وجه التحديد ، اعتمادًا على سلالة الفئران المستخدمة ، تم العثور على نتائج تجارب مماثلة مختلفة بشكل ملحوظ.

يبدو أن السلالات المختلفة من الفئران لديها حساسيات متفاوتة للمركبات ذات الأنشطة الاستروجينية المختلفة ، على سبيل المثال مع فئران Charles River Sprague-Dawley ، وقد وجدت الدراسات أنها غير حساسة جدًا لـ BPA ومركبات الاستروجين الأخرى ، وبالتالي فإن استخدامها في دراسات الجرعات المنخفضة هو غير مناسب ولا يمثل كيفية عمل المركبات في سلالات أو أنواع أكثر حساسية (4،5،6،43،44،45) في دراسة FDA الحالية قيد المراجعة ، اختاروا استخدام جرذان Sprague-Dawley كنموذج حيواني (1) ).

وفقًا لنتائج تحليل تلوي واحد لجميع منشورات BPA حتى نهاية عام 2004 ، وجدت 90٪ من المقالات البحثية التي تمت مراجعتها من قبل الأقران والممولة من الحكومة آثارًا عكسية للتعرض لـ BPA (5). ملاحظة جانبية: اكتشف التحليل التلوي نفسه في المقالات البحثية الممولة من الصناعة حول BPA ، وجد 0٪ أي آثار سلبية للتعرض لـ BPA ، مما يثير المزيد من العلامات الحمراء (5).

مع الأخذ في الاعتبار فقط المقالات البحثية التي تمت مراجعتها من قبل الأقران الممولة من الحكومة ، عندما تمت إزالة تلك الدراسات التي استخدمت فئران Charles River Sprague-Dawley من التحليل التلوي ، زاد عدد الدراسات التي وجدت آثارًا ضارة للتعرض لـ BPA من 90٪ إلى 96٪ (5). تشير هذه القفزة إلى استخدام الأنواع المناسبة في تجارب BPA ، حيث إن بعض السلالات (بما في ذلك جرذان Charles River Sprague-Dawley) ليست حساسة بما يكفي لتعكس بدقة ما يمكن أن يحدث في النموذج البشري (6).

سوء اختيار مقاييس النتائج

عيب آخر في دراسة FDA هو أنهم اختاروا التركيز بشكل أساسي على التأثيرات السامة للتعرض لـ BPA على مجموعة من مقاييس النتائج التشريحية التي ثبت أنها غير مقبولة وغير ممثلة لـ BPA أو التعرض الآخر لـ EDC على مر السنين (6،7) . يتمثل جزء كبير من المشكلة في أن الدراسات التي تجريها الوكالات الفيدرالية مطلوبة لاتباع إرشادات منظمة التعاون الاقتصادي والتنمية (OECDG) ، والتي تتطلب غالبًا استخدام اختبارات متعددة الأجيال للوقوف في محكمة قانونية إذا لزم الأمر (6).

تكمن مشكلة أنظمة الاختبار متعددة الأجيال في OECDG في أنها تستخدم طرق اختبار قديمة ومقاييس النتائج التي لا تلتقط بالكامل تأثيرات التعرض لـ BPA ، وتتجاهل تمامًا الأساليب الحديثة ومقاييس النتائج مثل التعبير الجيني ومثيل الحمض النووي أو المسارات الخلوية أو علم التخلق (6،7).

على وجه التحديد ، تجاهلت دراسة إدارة الغذاء والدواء الأمريكية العلم الحالي الذي يشير إلى أن مثيلة الحمض النووي والتأثيرات اللاجينية الأخرى جنبًا إلى جنب مع التداخل مع مسارات الإشارات الخلوية هي المسؤولة عن الظواهر البيولوجية الأكثر صلة التي تؤثر على السمنة (47 ، 48 ، 49) ، السرطان (50 ، 51 ، 52) ، ومرض الزهايمر ومرض # 8217 (53،54،55) وأمراض أخرى يروج لها BPA و EDCs الأخرى (56،57،58،59،60).

بما في ذلك دراسة FDA قيد المراجعة ، تركز هذه الأنواع من الدراسات بشكل أساسي على القياسات التشريحية والملاحظات المرضية الإجمالية ومقاييس النتائج العيانية الأخرى (1). منذ تسعينيات القرن الماضي ، كانت هناك تحسينات كبيرة في طرق بحث BPA و EDC ، مع إدراك أن طرق OECDG القديمة التي تم إنشاؤها في الخمسينيات من القرن الماضي ليست حساسة بدرجة كافية لاكتشاف آثار التعرض لجرعات منخفضة من BPA و EDCs الأخرى. . ومع ذلك ، لا تزال الوكالات التنظيمية الفيدرالية تصر على اتباع البروتوكولات القديمة التي تم إنشاؤها قبل التحسينات في فهمنا لتعرض BPA و EDC على تدابير أكثر حساسية (مثيلة الحمض النووي ، ومسارات الإشارات الخلوية ، وما إلى ذلك) (7،61 ، 62).

عدم استخدام العلم الحالي في أبحاث BPA و EDC

على الرغم من أن أنظمة الاختبار المستندة إلى OECDG لا تعكس بدقة مخاطر الصحة العامة الضارة من BPA أو حالات التعرض الأخرى لـ EDC ، فإن النتائج والقرارات التنظيمية الفيدرالية لا تزال تستند إلى تلك الدراسات التي تستخدم أساليب OECDG ولا تستند إلى مئات الدراسات الأكاديمية التي تستخدم المزيد التقنيات الحديثة ووجدت بشكل كبير آثارًا ضارة لـ BPA و EDCs الأخرى على مختلف جوانب صحة الإنسان (6،7،26،46،61،62،63،64).

نشرت كل من إدارة الغذاء والدواء الأمريكية وهيئة سلامة الأغذية الأوروبية في السنوات الأخيرة معلومات توضح أن استنتاجاتهم المتعلقة بسلامة بيسفينول أ تستند فقط إلى نتائج عدد صغير من الدراسات التي تتبع إرشادات منظمة التعاون الاقتصادي والتنمية ، مع تجاهل مشورة الخبراء وأبحاث أكثر من 700 مقال أكاديمي راجعه الزملاء اعتبارًا من عام 2006 (6،7). منذ ذلك الوقت ، كان هناك العديد من المئات من المقالات التي توضح الآثار الضارة على الصحة العامة لـ BPA و EDCs الأخرى ، بينما تستمر إدارة الغذاء والدواء والوكالات التنظيمية الفيدرالية الأخرى في تجاهل هذا الدليل الجبلي والرد بتجاربهم الخاصة سيئة التصميم والخروج من- علم اللمس (6،7،26،46،61،62،63،64).

ادعاء خاطئ بأن BPA عبارة عن إستروجين "ضعيف"

كان يعتقد في الأصل أن BPA هو مركب استروجين ضعيف نسبيًا ، وهناك أدلة متزايدة على أن BPA هو مركب استروجين قوي مثل الهرمونات الطبيعية مثل استراديول (5 ، 32 ، 36). بعبارة أخرى ، ما كان يُعتقد أنه حميد نسبيًا ، يمكن أن يتسبب BPA في الواقع في مشاكل كبيرة على المستويات الموجودة حاليًا في البيئة بما في ذلك على سبيل المثال لا الحصر السرطان وانخفاض هرمون التستوستيرون وانخفاض حركة الحيوانات المنوية والإجهاض والعيوب الخلقية (23 ، 33،34،35،37).

في التحقيق بواسطة Delclos وآخرون.، ذكر المؤلفون أن "التأثيرات التي يسببها BPA تتداخل جزئيًا مع تلك التي يسببها EE2 استراديول ، بما يتوافق مع النشاط الاستروجين الضعيف المعروف لـ BPA "(1). في حين أن هذا قد يكون الفهم مبكرًا جدًا في الأبحاث المتعلقة بـ BPA (65،66،67) ، فقد تم إجراء قدر كبير من الأبحاث منذ ذلك الحين والتي تدحض هذا الادعاء "الضعيف". في الواقع ، وجدت العديد من الدراسات الآن أن مادة BPA يمكن أن تثير نشاطًا شبيهًا بالإستروجين والذي ثبت أنه قوي مثل ، إن لم يكن أقوى ، من EE2، الآليات التي تختلف عن كفاءة الطاقة "التقليدية"2 المسارات (8،9،68،69،70).

على وجه التحديد ، وجدت الدراسات الحديثة أن BPA يعزز الاستجابات السريعة جدًا ، حتى عند الجرعات المنخفضة ، عبر "مسارات الإستروجين غير التقليدية" وتنشيط العديد من مسارات إشارات التنبيغ المختلفة في أنواع الخلايا المختلفة والتي عندما ينتج عنها مجتمعة تأثيرات أكبر تتعلق بالجينات. التعبير الناجم عن عمل هرمون الاستروجين (8،9،10،71،72).

عدم تحديد المصدر (المصادر) الخارجية المعروفة لتلوث بيسفينول أ

العلف: أحد المصادر المحتملة لتلوث BPA في الفئران في هذا والعديد من الدراسات البحثية الأخرى من EDC هو النظام الغذائي المحدد أو العلف الذي يتم توفيره للحيوانات. أقرت ورقة إدارة الغذاء والدواء نفسها بهذا الجزء من المعلومات وذكرت أنه "نظرًا لأنه يُعتقد أن العديد من تأثيرات BPA تحدث من خلال التداخل مع مسارات إشارات الإستروجين ، فقد تم استخدام نظام غذائي خالٍ من الصويا والبرسيم ومستويات غذائية من فيتويستروغنز جينيستين ودايدزين بالإضافة إلى BPA ".

في الواقع ، تحتوي معظم علف القوارض التجاري على فيتويستروغنز جينيستين ودايدزين ، والتي تظهر تقاربًا قويًا مع مستقبلات هرمون الاستروجين بيتا وقد ثبت في بعض الأحيان أنها أقوى من تأثيرات الاستروجين البيئية مثل DDT و BPA (11 ، 12 ، 73 ، 74). أكدت الدراسات أن العلف نفسه هو الذي يمكن أن ينشط مستقبلات هرمون الاستروجين نتيجة لمركبات الاستروجين في العلف ، وأنه لا يرجع إلى استقلاب الطعام في الأمعاء (21،75،76).

بينما كانوا حريصين على اختيار نظام غذائي مناسب لتقليل محتوى الاستروجين النباتي في وجبات القوارض أثناء التجربة ، فقد فشلوا في مراعاة النظام الغذائي الذي تلقته الفئران قبل بدء التجربة. في ورقة إدارة الغذاء والدواء الأمريكية ، ذُكر أنه "أثناء تواجدهم في مستعمرة التكاثر ، تم الحفاظ على [المربين] مع سدودهم على حبيبات العلف المشععة من NIH-41" من مختبرات هارلان (1).

قادمة مباشرة من موقع Harlan Laboratories ، لا يبدو أن النظام الغذائي NIH-41 خالي من الاستروجين النباتي. وعلى وجه التحديد ، فإن أفضل وصف "للوجبات الغذائية 2014 و 2016 و 2019 و 2020X على الرغم من أنها ليست" مجانية "تمامًا هو نظام غذائي يحتوي على الحد الأدنى من الاستروجين النباتي. عادةً ما يكشف الاختبار ربع السنوي لهذه الحميات عن الايسوفلافون (فيتويستروغنز من فول الصويا) عن مستويات تتراوح من أقل مما يمكن اكتشافه إلى 20 جزء في المليون. بالنسبة لبعض المنظور ، تحتوي معظم وجبات القوارض التقليدية على 200 إلى 500 جزء في المليون من الايسوفلافون. تعتبر الحميات الغذائية ذات الحد الأدنى من الاستروجين النباتي مثل 2014 و 2016 و 2019 و 2020 X مقبولة عمومًا للدراسات التي تثير القلق من فيتويستروجين. " (13)

بعبارة أخرى ، لا يبدو أن المعاهد الوطنية للصحة -41 من مختبرات هارلان هي أحد الأنظمة الغذائية ذات الحد الأدنى من الاستروجين النباتي ، مما يشير إلى أنه قبل التجربة ، كانت الفئران في المنشأة التي استخدمتها دراسة إدارة الغذاء والدواء ، في الواقع ، معرضة لمجموعة من فيتويستروجين على على أساس يومي ، مما يشير إلى مصدر محتمل لتلوث الفئران قبل التجربة. بعد الاتصال مباشرة بمختبرات هارلان حول المعاهد الوطنية للصحة -41 ، أكدوا أن هذا العلف المعين يحتوي على منتجات قائمة على الصويا (5٪ كسبة فول الصويا بالإضافة إلى 2٪ زيت الصويا) ، مما يؤكد إمكانية التعرض الخارجي للإستروجين النباتي قبل الاختبار ( 25،77).

فيما يتعلق بالغذاء التجريبي ، في حين تم الإبلاغ عن خلوه من فيتويستروغنز جينيستين ودايدزين ، أفاد باحثو إدارة الغذاء والدواء أيضًا بأنه يحتوي على "مستويات BPA أقل من متوسط ​​الفراغات التحليلية". (1) على الرغم من أنها تتحكم في بعض فيتويستروغنز في علف الحيوانات ، تم العثور على BPA نفسها في النظام الغذائي وبالتالي فهي مساهم محتمل في تلوث الفئران أثناء التجربة (3،25،77).

أخيرًا ، بما أن الأبحاث الحديثة قد أشارت إلى أن عمر النصف لـ BPA قد يكون أطول مما كان يعتقد في البداية (6،14،78) ، فإن المستويات المنخفضة من BPA في العلف يمكن أن تكون مشكلة أكثر مما افترض باحثو إدارة الغذاء والدواء الأمريكية.

عدم تحديد المصدر (المصادر) الخارجية المعروفة لـ BPA والنشاط الاستروجين للمعدات والإمدادات

استخدام أقفاص بولي سلفون: بالإضافة إلى العلف ، هناك العديد من المصادر الخارجية الأخرى لهرمون الاستروجين التي تعرضت لها الفئران قبل وأثناء التجارب من قبل باحثي إدارة الغذاء والدواء.
على وجه التحديد ، يتم إغراق حيوانات المختبر بمصادر محتملة لـ BPA والتعرض الآخر لـ EDC ، بما في ذلك الفراش والأقفاص وزجاجات المياه والماء والمنظفات المطهرة (6،11،79،80،81). وفقًا لباحثي إدارة الغذاء والدواء ، تم إيواء فئرانهم في أقفاص بولي سلفون. بينما أشاروا إلى أن المعدات المستخدمة كانت "منخفضة BPA" وأن المستويات تمت مراقبتها بانتظام ، لم يكن من الواضح ما هي هذه القيم في الواقع.

تستخدم كريات البولي سلفون بشكل شائع في العديد من أنواع المعدات لكل من البحث والطب. في الواقع ، وجدت إحدى الدراسات التي ركزت على أجهزة تحليل الدم في الكلى أن كريات polysulfone ، وهي مكونات رئيسية لآلات جهاز غسيل الكلى ، تتسرب بكمية كبيرة من BPA في البيئة (15،82).

عند دمجها لإنشاء الجهاز النهائي ، لا يبدو أن مادة البولي سلفون تتسرب بقدر كبير من مادة BPA كما فعلت عندما تكون في شكل الحبيبات ، ومع ذلك ، فمن الممكن بعد التعرض الطويل الأمد للمرضى الذين يحتاجون إلى استخدام مطول لهذه المعدات القائمة على polysulfone أن يتعرضوا بشكل عكسي. المتضررة (15،82).

أخيرًا ، كان هناك فشل من جانب باحثي إدارة الغذاء والدواء في اختبار النشاط الاستروجين لجميع هذه المصادر الخارجية المحتملة لهرمون الاستروجين. من الواضح أنهم لم يكونوا على اتصال بالحالة الحالية لبحوث EDC ، حيث كانوا أكثر حرصًا في اختبار محتوى الإستروجين لكل شيء اتصلت به الفئران قبل وأثناء التجربة ، حيث وجدت العديد من الدراسات تباينًا كبيرًا في مصادر التلوث المحتمل من مادة EDC التي يجب تقليلها قدر الإمكان في تجارب BPA وغيرها من تجارب EDC.

فشل في قياس مستويات BPA في أي من الحيوانات باستثناء مجموعة الاختبار في نهاية التجربة

من خلال عدم قياس مستويات BPA لأي من الحيوانات منذ البداية ، وقياس مستويات BPA فقط في نهاية التجربة ، لم يتم إعطاء أي اعتبار للمستويات الفعلية لـ BPA في الحيوانات. بدون وجود نقطة بداية للمقارنة بها ، يكاد يكون من المستحيل استخلاص أي استنتاجات بناءً على ما شوهد في النهاية (38). إذا كان الباحثون قد اختبروا الحيوانات في البداية ، لوجدوا أن جميع الحيوانات ملوثة بـ BPA ، حتى الضوابط ، وعند هذه النقطة يمكن إجراء بعض التعديلات على البروتوكول.

بالإضافة إلى ذلك ، فإن الفشل في قياس مستويات BPA في حيوانات الاختبار يجعل من المستحيل قياس (على عكس التقدير) تركيزات المصل وعلاقتها المحتملة بالتأثيرات أو ما إذا كانت الطريقة المستخدمة لإدارة BPA (التزقيم الفموي) قد تكون معيبة.

فحص السمية بشكل خاطئ عندما يكون التوقيت مشكلة أكبر

كانت إحدى المشكلات التي ابتليت بها أبحاث BPA و EDC المبكرة هي فحص هذه المركبات من حيث سميتها ، بينما أظهر التقدم في هذا النوع من الأبحاث أن توقيت التعرض أكثر أهمية بشكل ملحوظ من السمية البسيطة وحدها. تعمل السمية الخلوية على مستوى أكثر خشونة حيث يمكن ملاحظة موت الخلايا وخللها بسهولة. تعمل اضطرابات الغدد الصماء على مستوى مستقبلات الهرمونات (105 ، 107-110) وتظهر أيضًا تأثيرات جينية قابلة للقياس (111-113) ، وتؤثر على التعبير الجيني (114،115).

بمعنى آخر ، قد لا يكون لمستوى معين من التعرض لـ BPA لشخص بالغ تأثير كبير ، بينما إذا تعرض نفس المستوى من BPA لجنين نامٍ في نقطة محددة جدًا أثناء تطوره ، يمكن أن تكون سلسلة الأحداث المتتالية & # 8220programed & # 8221 في الجنين الذي يمكن أن يتطور إلى مشاكل صحية كبيرة في وقت لاحق من الحياة (4،22،23،24،87،88).

هناك أيضًا دليل في الأدبيات على أن نظام الغدد الصماء لدى البالغين قادر على الحفاظ على نوع من التوازن ، أو تنظيم بيئة متوازنة ثابتة ، وبالتالي قد لا يكون حساسًا لتأثيرات التعرض لـ EDC كما لو كان يمر بمرحلة البلوغ ، حالة من التدفق الهرموني الملحوظ ، أو التطور الجنيني ، وكلاهما ثبت أنهما أكثر حساسية تجاه BPA والتعرض الآخر لـ EDC في تلك الأوقات المحددة (4،24،89،90،91،92).

يعد اختيار نموذج قديم مثل & # 8220toxicity & # 8221 غير مناسب عندما يكون التوقيت هو الأكثر أهمية في تحديد الآثار الضارة لـ BPA والتعرض الآخر لـ EDC.

بشكل ملحوظ ، اجتاز عقار ثاليدومايد اختبار السمية التقليدي ولكنه تسبب في واحدة من أبرز الكوارث الصيدلانية في التاريخ (116).

أحد الدروس المهمة المستفادة من كارثة الثاليدومايد يتعلق بتوقيت التعرض لأن BOA وغيره من المواد الكيميائية السائلة التي يمكن أن تؤثر على الهرمونات ، لا سيما في التطور كما يتضح في الرسم البياني التالي ، أدت تأثيرات الدواء إلى تأثيرات ضارة مختلفة جدًا اعتمادًا على وقت التعرض.

الدرس الذي يجب تعلمه هو أن تقييم المركبات المسببة لاضطرابات الغدد الصماء يحتاج إلى تجاوز اختبارات السمية التقليدية. يجب اختباره على مجموعة متنوعة من التركيزات ذات الصلة وتقييمها بدقة على فترات زمنية مختلفة من التعرض باستخدام أكثر الاختبارات حساسية الممكنة

عدم الكشف عن تضارب المصالح

تضارب المصالح ، على الرغم من أنه يبدو قصيرًا وغالبًا ما يكون لاحقًا لبعض الباحثين ، فهو جزء مهم من عملية النشر. حتى إذا لم يكن هناك تضارب في المصالح ، فمن مصلحة الباحث تقديم هذه المعلومات. قد يؤثر وجود تضارب في المصالح سلبًا على نتائج الدراسة المعنية ، مما يؤدي إلى إبطال الاستنتاجات المقدمة (19،93،94).

من خلال الكشف عن أي تضارب ، أو الإشارة & # 8220none & # 8221 إذا حدث ذلك ، يتم تقديم معلومات مهمة للقارئ حتى يتمكن من إصدار حكمه الخاص على شرعية وموضوعية نتائج الباحث و # 8217s و الاستنتاجات (20،93،94). إن عدم الكشف عن تضارب المصالح يلقي نظرة متشككة على صحة الدراسة بأكملها حتى عندما يتم إجراء التجربة بشكل صحيح.

الاستنتاجات

بالنظر إلى عدد حالات الفشل ، من الصعب رؤية كيف يمكن تصحيح هذه الورقة ، خاصةً مع مجموعة بيانات ملوثة. البديل الوحيد هو إعادة تنفيذها مع تصحيح الإخفاقات ومجموعة جديدة وصالحة من البيانات.

الاستنتاج الآخر الوحيد الذي يمكن استخلاصه من دراسة بها الكثير من العيوب المعيقة والواضحة والتي يمكن تجنبها هو أن الهيئات التنظيمية التابعة للحكومة الأمريكية بحاجة إلى رفع معاييرها لتتوافق مع معايير المعاهد الوطنية للصحة.

لدى المعاهد الوطنية للصحة ثلاثة مستويات صارمة من التدقيق تتضمن مراجعة الأقران: قبل منح المنح ، يتم تقييم كفاءة المحققين كما هي وتصميم التجربة والنتائج المناسبة واستخدام أحدث التقنيات العلمية والمخبرية (7). يتبع ذلك مراجعة الأقران بعد التحقيق ، والنشر في المجلات التي راجعها النظراء والجهود المبذولة لمتابعة الدراسة مع تكرار النتائج وتحديثها. يجب الإعلان عن تضارب المصالح.

إعلان تضارب المصالح

ليس لدى لويس بيرديو ولا ريبيكا ل. ييمانز أي تضارب في المصالح يجب الإفصاح عنه. يزعمون أنهم قادرون على التحدث بحرية دون المخاطرة بتمويل المشروع لأنه ليس لديهم منح أو تعويض من أي شكل من أي مصدر ، سواء كان خاصًا أو عامًا.

(1) Delclos، KB، Camacho، L.، Lewis، SM، Vanlandingham، MM، Latendresse، JR، Olson، GR، Davis، KJ، Patton، RE، da Costa، ​​GG، Woodling، KA، Bryant، MS، Chidambaram ، M.، Trbojevich، R.، Juliar، BE، Felton، RP، and Thorn، BT 2014. تقييم السمية لـ Bisphenol A الذي يتم إعطاؤه بالتزقيم لفئران Sprague-Dawley من يوم الحمل 6 حتى يوم ما بعد الولادة 90. علوم السموم دوى: 10.1093 / Toxsci / kfu022

(2) جونسون ، P.D. ، و Besselsen ، D.G. 2002. الجوانب العملية للتصميم التجريبي في البحوث الحيوانية. مجلة ILAR (معهد أبحاث حيوانات المختبر) 43 (4): 202-206.

(3) فوم سال ، ف.س. ، رختر ، س.أ. 2005. أهمية الضوابط المناسبة ، والأعلاف الحيوانية ، والنماذج الحيوانية في تفسير نتائج دراسات الجرعات المنخفضة من Bisphenol A. بحوث العيوب الخلقية 73: 140-145.
(4) Vandenberg، LN، Colborn، T.، Hayes، TB، Heindel، JJ، Jacobs، Jr.، DR، Lee، DH.، Shioda، T.، Soto، AM، vom Saal، FS، Welshons، WV، زويلر ، آر تي ، ومايرز ، جي بي 2012. الهرمونات والمواد الكيميائية المعطلة للغدد الصماء: تأثيرات الجرعات المنخفضة واستجابات الجرعات غير الرئوية. مراجعات الغدد الصماء 33: 0000-0000.

(5) vom Saal، F.S.، and Hughes، C. 2005. تُظهر الأدبيات الجديدة الشاملة المتعلقة بآثار الجرعة المنخفضة من Bisphenol A الحاجة إلى تقييم مخاطر جديد. آفاق الصحة البيئية 113(8): 926-933.
(6) هانت ، با ، سوسيارجو ، إم ، روبيو ، سي ، وهاسولد ، تي جيه. 2009. تجربة BPA: كتاب تمهيدي لتحليل التأثيرات البيئية على تكاثر الثدييات. بيولوجيا التكاثر 81: 807-813.
(7) Myers، JP، vom Saal، FS، Akingbemi، BT، Arizono، K.، Belcher، S.، Colborn، T.، Chahoud، I.، Crain، DA، Farabollini، F.، Guillette، Jr.، LJ، Hassold، T.، Ho، S.، Hunt، PA، Iguchi، T.، Jobling، S.، Kanno، J.، Laufer، H.، Marcus، M.، McLachlan، JA، Nadal، A.، Oehlmann، J.، Olea، N.، Palanza، P.، Parmigiani، S.، Rubin، BS، Schoenfelder، G.، Sonnenschein، C.، Soto، AM، Talsness، CE، Taylor، JA، Vandenberg، LN، Vandenbergh و JG و Vogel و S. و Watson و CS و Welschons و WV و Zoeller و RT 2009. لماذا لا يمكن لوكالات الصحة العامة الاعتماد على الممارسات المختبرية الجيدة كمعيار لاختيار البيانات: حالة Bisphenol A. منظورات الصحة البيئية 117(3): 309-315.

(8) Alonso-Magdalena، P.، Ropero، AB، Soriano، S.، García-Arévalo، M.، Ripoll، C.، Fuentes، E.، Quesada، I.، and Nadal، A. 2012. Bisphenol- يعمل الأستروجين كإستروجين قوي عبر مسارات محفزة بهرمون الاستروجين غير الكلاسيكي. علم الغدد الصماء الجزيئية والخلوية 355: 201-207.

(9) Hugo، E.، Brandebourg، TD، Woo، JG، Loftus، J.، Alexander، JW، and Ben-Jonathan، N. 2008. Bisphenol A عند الجرعات الملائمة بيئيًا يثبط إطلاق adiponectin من الأنسجة الدهنية البشرية المكتشفة والخلايا الشحمية . الصحة البيئية توقعات - وجهات نظر 116 (12): 1642-1647.

(10) Watson، C.S.، Bulayeva، N.N.، Wozniak، AL، and Finnerty، C.C. 2005. الإشارات من الغشاء عبر مستقبلات هرمون الاستروجين- α: الإستروجين ، الزينوإستروجين ، و فيتويستروغنز. منشطات 70: 364-371.

(11) Thigpen، J.E.، Setchell، K.D.R.، Saunders، H.E.، Haseman، J.K.، Grant، M.G.، and Forsythe، D.B. 2004. اختيار النظام الغذائي المناسب للقوارض لبحوث اختلال الغدد الصماء ودراسات الاختبار. مجلة ILAR 45(4): 401-416.

(12) شيلبي ، M.D. ، Newbold ، R.R. ، Tully ، D.B. ، Chae ، K. ، and Davis ، V.L. 1996. تقييم المواد الكيميائية البيئية لهرمون الاستروجين باستخدام مزيج من في المختبر و في الجسم الحي المقاييس. منظورات الصحة البيئية 104(12): 1296-1300.

(14) Stahlhut، R.W.، Welshons، W.V.، and Swan، S.H. 2009. تشير بيانات Bisphenol A في NHANES إلى فترة نصف عمر أطول من المتوقع ، أو تعرضًا كبيرًا غير غذائي ، أو كليهما. آفاق الصحة البيئية 117(5): 784-789.

(15) هايشيما ، واي. ، هاياشي ، واي ، ياجامي ، ت. ، وناكامورا ، أ. 2001. شطف بيسفينول-أ من محللات الدم المكونة من راتنجات بولي كربونات وبولي سلفون. مجلة بحوث المواد الطبية الحيوية58(2): 209-215.

(16) Barrett، J.R. 2013. الحجة الشفوية: النتائج تحت اللسان تتحدى الافتراضات الرئيسية حول التعرض لـ BPA. آفاق الصحة البيئية 121 (8): A257.

(17) Gayrard، V.، Lacroix، MZ، Collet، SH، Viguié، C.، Bousquet-Melou، A.، Toutain، PL.، and Picard-Hagen، N. 2013. التوافر البيولوجي العالي لـ Bisphenol A من التعرض تحت اللسان . آفاق الصحة البيئية 121(8): 951-956.

(18) Sieli، PT، Jašarević، E.، Warzak، DA، Mao، J.، Ellersieck، MR، Liao، C.، Kannan، K.، Collet، SH، Toutain، PL.، vom Saal، FS، and Rosenfeld، CS 2011. مقارنة بين تركيزات مصل Bisphenol A في الفئران المعرضة ل Bisphenol A من خلال النظام الغذائي مقابل التعرض عن طريق الفم. منظورات الصحة البيئية 119(9): 1260-1265.

(19) Van McCrary، S.، Anderson، CB، Jakovljevic، J.، Khan، T.، McCullough، L.B.، Wray، N.P.، and Brody، B.A. 2000. مسح وطني لسياسات الكشف عن تضارب المصالح في البحوث الطبية الحيوية. مجلة نيو إنجلاند الطبية 343 (22): 1621-1626.

(20) Sass، J. 2009. سياسات الإفصاح الفعالة والعملية: ورقة NRDC حول ورشة العمل لتحديد العناصر الرئيسية لسياسات الكشف عن مجلات العلوم الصحية. تقرير مجلس الدفاع عن الموارد الوطنية. https://www.nrdc.org/health/disclosure/files/disclosure.pdf؟origin=publication_detail تم الوصول إليه في 02/23/2014.

(21) Ciana، P.، Brena، A.، Sparaciari، P.، Bonetti، E.، Di Lorenzo، D.، and Maggi، A. 2005. الأنشطة الاستروجينية في النظم الغذائية الخالية من الإستروجين للقوارض. طب الغدد الصماء 146 (12): 5144-5150.

(22) ماركي ، سي إم ، كومبس ، ماجستير ، سونينشين ، سي ، وسوتو ، إيه إم. 2003. تطور الثدييات في بيئة متغيرة: التعرض لمضادات الغدد الصماء يكشف عن المرونة التطورية للأعضاء المستهدفة لهرمون الستيرويد. التطور والتطوير 5(1): 67-75.

(23) ماركي ، سي. 2005. الآثار طويلة المدى لتعرض الجنين لجرعات منخفضة من xenoestrogen Bisphenol-A في الجهاز التناسلي للأنثى. بيولوجيا التكاثر 72: 1344-1351.

(24) مارتي ، إم إس ، كارني ، إي دبليو ، أند رولاندز ، جي سي 2011. اضطراب الغدد الصماء: وجهات نظر تاريخية وتأثيرها على مستقبل اختبار السموم. علوم السموم 120 (S1): S93-S108.
(25) مواصفات المعاهد الوطنية للصحة: ​​مواصفات النظام الغذائي المشع للقوارض ذات الصيغة المفتوحة 41 المعاهد الوطنية للصحة. 2000. http://www.ors.od.nih.gov/sr/dvr/drs/nutrition/Documents/SpecsDiets/41.pdf تم الوصول إليه في 02/24/2014.

(26) فاندنبرغ ، إل إن ، هاوزر ، آر ، ماركوس ، إم ، أوليا ، إن ، ويلشونز ، دبليو في. 2007. تعرض الإنسان لمادة ثنائي الفينول أ (BPA). علم السموم التناسلية 24: 139-177.

(27) Nam، S.H.، Seo، Y.M.، Kim، M.G. 2010. Bisphenol انتقال من زجاجة الأطفال المصنوعة من البولي كربونات مع الاستخدام المتكرر. الغلاف الكيميائي 79: 949-952.

(28) Biedermann، S.، Tschudin، P.، and Grob، K. 2010. نقل بيسفينول أ من ورق الطابعة الحرارية إلى الجلد. الكيمياء التحليلية والتحليلية الحيوية 398: 571-576.

(29) Ehrlich، S.، Calafat، A.M.، Humblet، O.، Smith، T.، and Hauser، R. 2014. التعامل مع الإيصالات الحرارية كمصدر لتعرض بيسفينول أ. جاما 311(8): 859-860.

(30) كلوكوس ، د. ، بانديس ، ن ، وإلياديس ، ت. 2013. في الجسم الحي إطلاق bisphenol-A من حفرة الأسنان ومانعات التسرب الشقوق: مراجعة منهجية. مجلة طب الأسنان 41: 659-667.

(31) Duty، SM، Mendonca، K.، Hauser، R.، Calafat، AM، Ye، X.، Meeker، JD، Ackerman، R.، Cullinane، J.، Faller، J.، and Ringer، S. 2013. المصادر المحتملة للبيسفينول أ في وحدة العناية المركزة لحديثي الولادة. طب الأطفال 131(3): 483-489.

(32) شارب ، ر. 2010. هل حان الوقت لإنهاء المخاوف بشأن التأثيرات الاستروجينية لـ Bisphenol A؟ علم السموم 114(1):1-4.

(33) Benachour، N.، and Aris، A. 2009. التأثيرات السامة للجرعات المنخفضة من Bisphenol-A على خلايا المشيمة البشرية. علم السموم والتطبيقية علم الأدوية 241: 322-328.

(34) LaPensee، E.W.، Tuttle، T.R.، Fox، S.R.، and Ben-Jonathan، N. 2009. Bisphenol A عند جرعات نانومولار منخفضة يمنح المقاومة الكيميائية في مستقبلات هرمون الاستروجين إيجابية وخلايا سرطان الثدي السلبية. آفاق الصحة البيئية 117(2): 175-180.

(35) vom Saal، F.S.، and Welshons، W.V. 2006. تأثيرات كبيرة من التعرض الصغير. II. أهمية الضوابط الإيجابية في أبحاث الجرعات المنخفضة على بيسفينول أ. البحوث البيئية 100: 50-76.

(36) Seidlová-Wuttke، D.، Jarry، H.، Christoffel، J.، Rimoldi، G.، and Wuttke، W. 2005. تأثير بيسفينول أ (BPA) ، ثنائي بيوتيل فالات (DBP) ، بنزوفينون -2 ( BP2) ، procymidone (Proc) ، و linurone (Lin) على الأنسجة الدهنية ، مجموعة متنوعة من الهرمونات والمتغيرات الأيضية: مقارنة لمدة 3 أشهر مع تأثيرات استراديول (E2) في الفئران التي تم استئصال البيض (ovx). علم السموم 213: 13-24.

(37) Baldi، E.، and Muratori، M. 2013. الأضرار الجينية في الحيوانات المنوية البشرية. التقدم في الطب التجريبي وعلم الأحياء 791. 195 ص.

(38) كوكس ، D.R. ، وت. ، ريد ، ن. 2000. نظرية تصميم التجارب. Monographs on Statistics and Applied Probability، 86. Boca Raton: Chapman & amp Hall / CRC Press.

(39) هانسون ، إن 2011. استخدام البيانات البيولوجية من الدراسات الميدانية مع مواقع مرجعية متعددة كأساس للإدارة البيئية: مخاطر الإيجابيات الكاذبة والسلبيات الكاذبة. مجلة الإدارة البيئية 92: 610-619.

(40) vom Saal، F.S.، Richter، CA، Mao، J.، and Welshons، W. 2005. علف الحيوانات التجارية: التباين في نشاط الإستروجين وتأثيراته على وزن الجسم في الفئران. بحوث العيوب الخلقية (الجزء أ) 73: 474-475.

(41) Wiklund، J. طب الغدد الصماء 111(4): 1140-1149.

(42) Wiklund، J. طب الغدد الصماء 109(5): 1700:1707.

(43) دييل ، بي ، شميدت ، إس ، فولمر ، جي ، جانينج ، بي ، أبمير ، إيه ، ميشنا ، إتش ، بولت ، إتش إم ، وديجين ، جي. 2004. الاستجابات المقارنة لثلاث سلالات من الفئران (DA / Han و Sprague-Dawley و Wistar) للعلاج بالإستروجين البيئي.

(44) بروسيا ، إل جيه ، روبرتس ، سي إس ، لوبيز ، جي تي ، بيجسبي ، آر إم ، ودينلاخت ، جي آر 2009. الاختلافات بين السلالات في تطور تقيح الرحم بعد العلاج بالإستروجين للفئران. مجلة الجمعية الأمريكية لحيوانات المختبر 48(5): 517-520.

(45) Geis، R.B.، Diel، P.، Degen، GH، and Vollmer، G. 2005. تأثيرات genistein على التعبير عن الجينات الكبدية في سلالتين من الفئران (Sprague-Dawley and Wistar). رسائل علم السموم 157: 21-29.

(46) ريشتر ، سي.أ. 2007. في الجسم الحي آثار بيسفينول أ في دراسات القوارض المختبرية. علم السموم التناسلية 24(2): 199-224.

(47) ديك ، كي جيه ، نيلسون ، سي بي ، تسابروني ، إل ، ساندلينج ، جي كي ، آيسي ، دي ، واهل ، إس ، ميدوري ، إي ، مورانج ، بي ، جاجنون ، إف ، جراليت ، إتش ، والدنبرجر ، M.، Peters، A.، Erdmann، J.، Hengstenberg، C.، Cambien، F.، Goodall، AH، Ouwehand، WH، Schunkert، H.، Thompson، JR، Spector، TD، Gieger، C.، Trégouët، DA، Deloukas، P.، and Samani، NJ 2014. مثيلة الحمض النووي ومؤشر كتلة الجسم: تحليل على مستوى الجينوم. المشرط. DOI: 10.1016 / S0140-6736 (13) 62674-4.

(48) ميلاغرو ، إف آي ، مانسيغو ، إم إل ، دي ميغيل ، سي ، ومارتينيز ، ج. 2013. العوامل الغذائية والتعديلات فوق الجينية ونتائج السمنة: التقدم ووجهات النظر. الجوانب الجزيئية للطب 34: 782-812.

(49) Sales، L.B.، Kamstra، J.H.، Cenijn، P.H.، van Rijt، L.S.، Hamers، T.، and Legler، J. 2013. آثار المواد الكيميائية لاضطراب الغدد الصماء على في المختبر مثيلة الحمض النووي العالمية وتمايز الخلايا الشحمية. علم السموم في المختبر 27: 1634-1643.

(50) Coppedè، F. 2014. المؤشرات الحيوية اللاجينية لسرطان القولون والمستقيم: التركيز على مثيلة الحمض النووي. رسائل السرطان 342(2): 238-247.

(51) كوليس ، إم ، كويروس ، إيه سي ، بيكمان ، آر ، ومارتين سوبيرو ، ج. 2013. مثيلة الحمض النووي داخل الجين في تنظيم النسخ ، التمايز الطبيعي والسرطان. Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - آليات تنظيم الجينات 1829(11): 1161-1174.

(52) Towle، R.، Truong، D.، Hogg، K.، Robinson، W.P.، Poh، CF، ad Garnis، C. 2013. التحليل العالمي لتغيرات مثيلة الحمض النووي أثناء تطور سرطان الفم. أورام الفم 49: 1033-1042.

(53) Furuya، TK، Silva، PNO، Payāo، SLM، Bertolucci، PHF، Rasmussen، LT، De Labio، RW، Braga، ILS، Chen، ES، Turecki، G.، Mechawar، N.، Mill، J. ، وسميث ، ماك 2012. تحليل تعبير SNAP25 mRNA ومثيل الحمض النووي المعزز في مناطق الدماغ لمرضى مرض الزهايمر. علم الأعصاب 220: 41-46.

(54) Coppieters، N.، Dieriks، B.V.، Lill، C.، Faull، R.L.M.، Curtis، M. علم الأعصاب للشيخوخة 35(6): 1334-1344.

(55) Mastroeni، D.، Grover، A.، Delvaux، E.، Whiteside، C.، Coleman، P.D.، and Rogers، J. 2010. التغيرات اللاجينية في مرض الزهايمر: التناقص في مثيلة الحمض النووي. علم الأعصاب للشيخوخة 31(12): 2025-2037.

(56) سكينر ، إم كيه ، مانيكام ، م ، وجيريرو بوساغنا ، سي 2011. الإجراءات الجينية عبر الأجيال من اضطرابات الغدد الصماء. علم السموم التناسلية 31(3): 337-343.

(57) Guerrero-Bosagna، C.، Covert، T.R.، Haque، M.، Settles، M.، Nilsson، E.E.، Anway، M.D.، and Skinner، M.K. 2012. الوراثة فوق الجينية عبر الأجيال لمرض ظهور البالغين بفينكلوزولين الناجم عن الفأر وما يرتبط به من العلامات الحيوية اللاجينية للحيوانات المنوية. علم السموم التناسلية 34(4): 694-707.

(58) Collotta، M.، Bertazzi، PA، and Bollati، V. 2013. Epigenetics and pesticides. علم السموم 307: 35-41.

(59) Kundakovic، M.، and Champagne، FA 2011. المنظور اللاجيني للتأثيرات التنموية للبيسفينول أ. الدماغ والسلوك والمناعة 25(6): 1084-1093.

(60) م.ب. and Janssen، C.R. 2014. علم التخلق في سياق السمية البيئية. بحوث الطفرات / علم السموم الوراثي والبيئة الطفرات 764-765: 36-45.

(61) vom Saal، FS، Akingbemi، BT، Belcher، SM، Birnbaum، LS، Crain، DA، Eriksen، M.، Farabollini، F.، Guillette، Jr.، LJ، Hauser، R.، Heindel، JJ، Ho، SM، Hunt، PA، Iguchi، T.، Jobling، S.، Kanno، J.، Keri، RA، Knudsen، KE، Laufer، H.، LeBlanc، GA، Marcus، M.، McLachlan، JA، Myers ، JP، Nadal، A.، Newbold، RR، Olea، N.، Prins، GS، Richter، CA، Rubin، BS، Sonnenschein، C.، Soto، AM، Talsness، CE، Vandenbergh، JG، Vandenberg، LN، Walser-Kuntz و DR و Watson و CS و Welshons و WV و Wetherill و Y. و Zoeller و RT 2007. Chapel Hill bisphenol بيان إجماع لفريق الخبراء: تكامل الآليات ، والآثار في الحيوانات وإمكانية التأثير على صحة الإنسان عند مستويات التعرض الحالية. علم السموم التناسلية 24: 131-138.

(62) Crain، DA، Eriksen، M.، Iguchi، T.، Jobling، S.، Laufer، H.، LeBlanc، GA، and Guillette، Jr.، LJ 2007. علم الأحياء المقارن. علم السموم التناسلية 24: 225-239.

(63) Keri، R.A.، Ho، S.M.، Hunt، P.A.، Knudsen، K.E.، Soto، A.M.، and Prins، GS 2007. علم السموم التناسلية 24: 240-252.

(64) Wetherill، Y.B.، Akingbemi، BT، Kanno، J.، McLachlan، J.A، Nadal، A.، Sonnenschein، C.، Watson، CS، Zoeller، RT، and Belcher، S.M. 2007. في المختبر الآليات الجزيئية لعمل بيسفينول أ. علم السموم التناسلية 24(2): 178-198.

(65) Kuiper، G.G.J.M.، Lemmen، J.G.، Carlsson، B.، Corton، JC، Safe، S.H.، van der Saag، P.T.، van der Burg، B.، and Gustafsson، J.A. 1998. تفاعل المواد الكيميائية الاستروجينية والأستروجين النباتي مع مستقبلات هرمون الاستروجين β. طب الغدد الصماء 139(10): 4252-4263.

(66) Andersen، HR، Andersson، AM، Arnold، SF، Autrup، H.، Barfoed، M.، Beresford، NA، Bjerregaard، P. Christianen، LB، Gissel، B.، Hummel، R.، Jorgensen، EB و Korsgaard و B. و Le Geuvel و R و Leffers و H. و McLachlan و J. و Møller و A. و Nielsen و JB و Sonnenschein و N. و Soto و AM و Sumpter و JP و Thorpe و SM و Grandjean ، ص 1999. مقارنة بين اختبارات الاستروجين قصيرة المدى لتحديد المواد الكيميائية المسببة لاضطراب الهرمونات. منظورات الصحة البيئية 107(1): 89-108.

(67) Fang، H.، Tong، W.، Perkins، R.، Soto، A.M.، Prechtl، N.V.، and Sheehan، D.M. 2000. مقارنات كمية للمقايسات في المختبر لأنشطة هرمون الاستروجين. منظورات الصحة البيئية 108(8): 723-729.

(68) Alonso-Magdalena، P.، Laribi، O.، Ropero، AB، Fuentes، E.، Ripoll، C.، Soria، B. 2+ إشارات في خلايا البنكرياس ألفا من خلال مستقبلات هرمون الاستروجين في غشاء غير كلاسيكي مع جزر لانجرهانز السليمة. منظورات الصحة البيئية 113(8): 969-977.

(69) Alonso-Magdalena، P.، Morimoto، S.، Ripoll، C.، Fuentes، E.، and Nadal، A. 2006. التأثير الاستروجين للبيسفينول أ يعطل وظيفة خلايا البنكرياس. في الجسم الحي ويحفز مقاومة الأنسولين. منظورات الصحة البيئية 114(1): 106-112.

(70) Zsarnovszky، A.، Le، H.H.، Wang، HS، and Belcher، S.M. 2005. التكوُّن لإشارات كيناز خارج الخلية سريعة التنظيم بإشارة هرمون الاستروجين في قشرة المخيخ للجرذان: ناهض غير نوعي قوي ونشاط معطل للغدد الصماء لمركب الزينوإستروجين بيسفينول أ. طب الغدد الصماء 146(12): 5388-5396.

(71) نادال ، أ ، روبيرو ، أب ، لاريبي ، أو. ، مايليت ، إم ، فوينتيس ، إي ، وسوريا ، ب. 2000. الأفعال غير الجينومية لهرمون الاستروجين والزينوإستروجينات عن طريق الارتباط بمستقبلات غشاء البلازما لا علاقة لها بالإستروجين مستقبلات ألفا ومستقبلات هرمون الاستروجين β. PNAS 97(21): 11603-11608.

(72) Quesada، I.، Fuentes، E.، Viso-Leon، MC، Soria، B.، Ripoll، C.، and Nadal، A. 2002. جرعات منخفضة من مادة bisphenol-A المسببة لاختلال الغدد الصماء والهرمون الأصلي 17β - ينشط الاستراديول بسرعة عامل النسخ CREB. مجلة FASEB 16(12): 1671-1673.

(73) براون ، N.M. ، و Setchell ، K.D. 2001. النماذج الحيوانية المتأثرة بالإستروجين النباتي في الطعام التجاري: الآثار المترتبة على المسارات التي تتأثر بالهرمونات. تحقيقات المختبر 81(5): 735-747.

(74) Thigpen، J.E.، Haseman، J.K.، Saunders، H.E.، Setchell، K.D.R.، Grant، M.G.، and Forsythe، D.B. 2003. الاستروجين النباتي يعمل على تسريع وقت فتح المهبل في الفئران غير الناضجة CD-1. الطب المقارن 53(6): 607-615.

(75) Odum، J.، Tinwell، H.، Jones، K.، Van Miller، JP، Joiner، RL Tobin، G.، Kawasaki، H.، Deghenghi، R.، and Ashby، J. 2001. Effect of حمية القوارض على التطور الجنسي للفئران. علوم السموم 61: 115-127.

(76) Santell، R. مجلة التغذية 127(2): 263-269.

(77) Boettger-Tong، H.، Murthy، L.، Chiapetta، C.، Kirkland، JL، Goodwin، B.، Adlecreutz، H.، Stancel، GM، and Mäkelä، S. 1998. A case of Laboratory animal تتغذى مع نشاط استروجين عالي وتأثيره على في الجسم الحي ردود الفعل لهرمون الاستروجين تدار خارجيا. الصحة البيئية توقعات - وجهات نظر 106(7): 369-373.

(78) كورن ، إي إل ، وغراوبارد ، بي. 1991. الدراسات الوبائية باستخدام المسوح: المحاسبة لتصميم العينات. الجريدة الامريكية للصحة العامة 81(9): 1166-1173.

(79) Howdeshell، K.L.، Peterman، P.H.، Judy، B.M.، Taylor، J.A.، Orazio، CE، Ruhlen، R.L.، vom Saal، F.S.، and Welshons، W.V. 2003. يتم إطلاق بيسفينول أ من أقفاص الحيوانات البولي كربونات المستخدمة في الماء عند درجة حرارة الغرفة. الصحة البيئية توقعات - وجهات نظر 111(9): 1180-1187.

(80) Thigpen، JE، Setchell، KDR، Kissling، GE، Locklear، J.، Caviness، GF، Whiteside، T.، Belcher، SM، Brown، NM، Collins، BJ، Lih، FB، Tomer، KB، Padilla -Banks، E.، Camacho، L.، Adsit، FG، and Grant، M. 2013. المحتوى الإستروجيني لأغذية القوارض ، الفراش ، الأقفاص ، زجاجات المياه ، وتأثيرها على دراسات Bisphenol A. مجلة الجمعية الأمريكية لعلوم الحيوان المختبرية 52(2): 130-141.

(81) Thigpen، J.E.، Joshi، S.، Caviness، G.F.، Whiteside، T.، Locklear، J.، Grant، M.، and Forsythe، D.B. 2006. مسح لأنواع مختلفة من فراش القوارض للنشاط الإستروجين. مجلة الجمعية الأمريكية لعلوم الحيوان المختبرية 45: 87.

(82) موراكامي ، ك. ، أوهاشي ، أ ، هوري ، هـ. ، هيبيا ، إم ، شوجي ، واي ، كونيساكي ، إم ، أكيتا ، إم ، ياغي ، إيه ، سوجياما ، ك. ، شيموزاتو ، S.، Ito، K.، Takahashi، H.، Takahashi، K.، Yamamoto، K.، Kasugai، M.، Kawamura، N.، Nakai، S.، Hasegawa، M.، Tomita، M.، Nabeshima، K. Hiki، Y.، and Sugiyama، S. 2007. تراكم Bisphenol A في مرضى غسيل الكلى. تنقية الدم 25(3): 290-294.

(83) باتل ، في.ف. ، ليو ، ف ، وبراون ، إم. 2011. التطورات في توصيل الأدوية عبر الغشاء المخاطي عن طريق الفم. مجلة الإصدار المحكوم 153: 106-116.

(84) Mielke، H.، and Gundert-Remy، U. 2009. تعتمد مستويات Bisphenol A في الدم على العمر والتعرض. رسائل علم السموم 190: 32-40.

(85) Vandenberg، L.N.، Chahoud، I.، Heindel، J.J.، Padmanabhan، V.، Paumgartten، F.J.R.، and Schoenfelder، G. 2010. منظورات الصحة البيئية 118(8): 1055-1070.

(86) Doerge، D.R.، Twaddle، NC، Woodling، K.A.، and Fisher، J.W. 2010. الحرائك الدوائية للبيسفينول أ في قرود الريسوس الوليدية والبالغين. علم السموم وعلم الأدوية التطبيقي 248: 1-11.

(87) Herbst، A.L.، and Anderson، D. 1990. مسح الخلايا السرطانية في المهبل وعنق الرحم نتيجة التعرض داخل الرحم لثنائي إثيل ستيلبيسترول. ندوات في جراحة الأورام 6(6): 343-346.

(88) Newbold، R.R.، Jefferson، W.N.، Padilla-Banks، E.، and Haseman، J. 2004. التعرض النمائي للديثيلستيلبيسترول (DES) يغير استجابة الرحم لهرمون الاستروجين في الفئران قبل البلوغ: تأثيرات منخفضة مقابل جرعة عالية. علم السموم التناسلية 18: 399-406.

(89) شولز ، K.M. ، Molenda-Figueria ، H.A ، and Sisk ، C.L. 2009. العودة إلى المستقبل: الفرضية التنظيمية التنشيطية تكييفها مع سن البلوغ والمراهقة. الهرمونات والسلوك 55: 597-605.

(90) شولز ك.م. ، وسيسك ، س.ل. 2006. هرمونات البلوغ ودماغ المراهق ونضوج السلوك الاجتماعي: دروس من الهامستر السوري.. علم الغدد الصماء الجزيئية والخلوية 254-255: 120-126.

(91) Primus، R.J.، and Kellogg، C.K. 1990. هرمونات الغدد التناسلية خلال فترة البلوغ تنظم التفاعل الاجتماعي المتعلق بالبيئة في الفئران الذكور. الهرمونات والسلوك 24: 311-323.

(92) سوتو ، إيه إم ، روبين ، بي إس ، سونينشين ، سي 2009. تفسير اضطراب الغدد الصماء من منظور علم الأحياء التكاملي. علم الغدد الصماء الجزيئية والخلوية 304: 3-7.

(93) هاردل ، إل ، ووكر ، إم جي ، والهجالت ، بي ، فريدمان ، إل إس ، وريشتر ، إي. 2007. روابط سرية مع الصناعة وتضارب المصالح في أبحاث السرطان. المجلة الأمريكية للطب الصناعي 50: 227-233.

(94) جيه هوميروس ومينييفي ف.د. 2011. أخلاقيات البحث 3: ممارسات النشر والتأليف ، تضارب المصالح ، وسوء سلوك البحث. مجلة بحوث النطق واللغة والسمع 54: S346-S362.

(95) Schug، TT، Heindel، JJ، Camacho، L.، Delclos، KB، Howard، P.، Johnson، AF، Aungst، J.، Keefe، D.، Newbold، R.، Walker، NJ، Zoeller، RT ، و Bucher ، JR 2013. نهج جديد للتآزر بين البحوث الأكاديمية والمتوافقة مع المبادئ التوجيهية: برنامج بحث CLARITY-BPA. علم السموم التناسلية 40:35–40

(96) Biemann R.، Fischer B.، and Navarrete Santos A. 2014. التأثيرات الدهنية لمزيج من المركبات المعطلة للغدد الصماء Bisphenol A و Diethylhexylphthalate و Tributyltin. حقائق السمنة 7: 48-56 (DOI: 10.1159 / 000358913)

(97) ويبستر ، ت. 2013. مخاليط المواد المسببة لاضطرابات الغدد الصماء: ما مدى تشابه آليات إضافة التركيز؟ علم السموم 313(2-3): 129–133.

(98) Regnier، S.M.، and Sargis، R.M. 2014. الخلايا الشحمية تحت الاعتداء: اضطراب بيئي في علم وظائف الأعضاء الدهنية. Biochimica et Biophysica Acta 1842: 520–533.

(99) Hu، Y.، Wang، R.، Xiang، Z.، Qian، W.، Han، X.، and Li، D. 2014. التأثيرات المعادية لمزيج من جرعة منخفضة من نونيلفينول ودي إن- بوتيل فثالات (مونوبوتيل فثالات) على خلايا سيرتولي وهرمونات التكاثر في الدم في ذكور الجرذان قبل البلوغ في المختبر وفي الجسم الحي. بلوس واحد (DOI: 10.1371 / journal.pone.0093425).

(100) كارلين ، دي جي ، رايدر ، السيرة الذاتية ، وويشيك ، آر ، وبيرنباوم ، إل. 2013. كشف الآثار الصحية للخلطات البيئية: أولوية NIEHS. منظورات الصحة البيئية 121 (1): a6 – a8.

(101) براون ، أ.ب. ، دينجر ، إن ، وليفين ، ب. 2000. الإجهاد الذي أنتجته إدارة جافاج في الفئران. مجلة الجمعية الأمريكية لعلوم الحيوان المختبرية 39(1): 17-21.

(102) ووكر ، إم كيه ، بوبيرج ، جي آر ، والش ، إم تي ، وولف ، ف. الدراسات الدوائية والسمية في الفئران. علم السموم وعلم الأدوية التطبيقي 260(1): 65–69.

(103) أرانتيس-رودريغز ، ر. ، هنريكس ، أ. ، بينتو-لايت ، ر. A.، Colaço، B.، Colaço، A.، and Oliveira، PA 2012. آثار التزقيم الفموي المتكرر على صحة ذكور فئران CD-1. حيوان مختبر 41(5):129-134.

. مجلة الجمعية الأمريكية لعلوم الحيوان المختبرية 51(1): 25–30.

(105) Cao.، J.، Rebuli، M.E.، Rogers، J.، Todd، K.L.، Leyrer، S.M.، Ferguson، SA، and Patisaul، H.B. 2013 قبل الولادة Bisphenol التعرض يغير التعبير الجنسي لمستقبلات هرمون الاستروجين في الفئران حديثي الولادة تحت المهاد واللوزة. علوم السموم 133(1) 157-173.

(106) Nowack، E.، 1965. Die sensible phase bei der thalidomid-embryopathie هومانجينتيك 1(6):516-536.

(107) شيفرييه ، جيه ، جونير ، آر بي ، برادمان ، أ. 2012. الأم البولي بيسفينول أ أثناء الحمل ووظيفة الغدة الدرقية للأم وحديثي الولادة في دراسة تشاماكو. الصحة البيئية توقعات - وجهات نظر 121(1): 138–144.

(108) شين ، أوه ، وو ، دبليو ، دو ، جي ، ليو ، آر ، يو ، إل ، صن ، إتش ، هان ، إكس ، جيانغ ، واي ، شي ، دبليو ، هو ، W. ، Song ، L. ، Xia ، Y. ، Wang ، S. ، and Wang ، X. 2011. اضطراب الغدة الدرقية بواسطة Di-n-Butyl Phthalate (DBP) و Mono-n-Butyl Phthalate (MBP) في Xenopus. بلوس واحد 6 (4): e19159. تم النشر على الإنترنت 2011 22 أبريل. doi: 10.1371 / journal.pone.0019159

(109) شموتزلر ، سي ، جوتهاردت ، آي ، هوفمان ، بي جي ، رادوفيتش ، بي ، كوفاكس ، جي ، ستيملر ، إل ، نوبيس ، آي ، باسينسكي ، إيه ، مينتروب ، بي ، أمبروجر ، بي. .، Grüters، A.، Malendowicz، LK، Christoffel، J.، Jarry، H.، Seidlovà-Wuttke، D.، Wuttke، W.، and Köhrle، J. 2007. Endocrine Disruptors and the Thyroid Gland - A Combined in التحليل المختبري والحيوي للمؤشرات الحيوية الجديدة المحتملة. منظورات الصحة البيئية (ملحق 1): 77-83.

(110) مورياما ، ك ، تاغامي ، ت ، أكاميزو ، ت ، أوسوي ، ت ، سايجو ، إم ، كاناموتو ، إن ، هاتايا ، واي ، شيماتسو ، إيه ، كوزويا ، إتش ، وناكاو. ، K. 2002. يتم تعطيل عمل هرمون الغدة الدرقية عن طريق bisphenol a كمضاد. مجلة الغدد الصماء والتمثيل الغذائي 87: 5185–5190.


نقاش

تشير نتائج هذه الدراسة في المختبر إلى أنه في نموذجين حيوانيين كبيرين ، الخنازير والأغنام ، تتمتع الخلايا المأخوذة من حيوانات غير ناضجة الهيكلية بإمكانية تكاثر وهجرة أكبر من الخلايا البالغة. تدعم هذه النتائج التقارير السابقة التي تفيد بأن القدرة المهاجرة والتكاثرية للخلايا الليفية تعتمد على العمر. 18-23 تم الاستشهاد بكل من تكاثر خلايا الرباط الصليبي الأمامي وهجرتها كشرط أساسي لالتئام الجروح بشكل مناسب 20 ، 24 ، وبالتالي قد تكون نتائجنا سببًا في قدرة الحيوانات غير الناضجة على الشفاء بسرعة وكفاءة أكبر من الفئات العمرية الأكبر سنًا.

غزو ​​موقع الجرح من قبل الخلايا الليفية أمر بالغ الأهمية لتشكيل ندبة ليفية وعائية. 25 كاستجابة مبكرة للإصابة ، سوف تهاجر الخلايا الليفية نحو موقع الجرح. أظهرت الدراسات السابقة أن التئام الجروح المعيب يحدث عندما تكون إمكانية الهجرة أقل من المستوى الأمثل. وبالتالي ، فإن الانخفاض في معدلات الهجرة التي لوحظت في فترة المراهقة والبلوغ يمكن أن يمثل أيضًا آلية لتقليل إمكانات الشفاء في الرباط الصليبي الأمامي بعد إصابات جزئية طفيفة قد تحدث كجزء طبيعي من "البلى" اليومي. إذا كان مثل هذا النقص في الإصلاح موجودًا ، فقد يؤدي إلى عدم توازن في إعادة تشكيل الأنسجة الطبيعية التي تحدث في جميع الأنسجة ، واختلال التوازن نحو الانهيار المستمر مع إصلاح غير كافٍ والضعف التدريجي للأنسجة حتى الفشل.

تم استخدام الصفائح الدموية في هذه الدراسة في محاولة لمحاولة محاكاة الحالة السريرية حيث تتشكل جلطة الصفائح الدموية الليفية في موقع الجرح كخطوة أولى في التئام الجروح. أظهرت التجارب السابقة في المختبر أن CPC تطلق عوامل النمو المهمة في التئام الجروح على مدى فترة 10 أيام. 29 ، 30 وبالتالي ، فمن الممكن أن تكون الصفائح الدموية المستخدمة في هذه التجربة المختبرية قد أطلقت أيضًا عوامل النمو هذه وأنتجت لاحقًا بيئة عامل نمو أكثر تشابهًا مع تلك التي تظهر في جرح الالتئام في الجسم الحي أكثر من التركيبات الخالية من الصفائح الدموية أو المزروعة بتركيزات ثابتة من عوامل النمو في برنامج تلفزيوني. بالتأكيد ، الطبيعة المختبرية لحدود دراستنا هي التطبيق المباشر للاستخدام السريري ، وهذا هو القيد الأساسي لدراستنا. قيد آخر هو أننا لم ندرس الحيوانات البالغة الأكبر سنًا. من المرجح أن تكون أعمار الحيوانات المستخدمة قابلة للمقارنة مع الفئات العمرية الأصغر من البشر - فالفيزياء المفتوحة على نطاق واسع لحيوانات IMMATURE تتوافق مع مريض بشري أقل من 10 سنوات من العمر ، والفيزياء الختامية لحيوانات المراهقة ستكون مماثلة لتلك التي شوهدت في البشر الذين تتراوح أعمارهم بين 12 و 16 سنة ، والفيزياء المغلقة حديثًا نسبيًا في مجموعة البالغين تتوافق مع الشباب في العقد الثالث والرابع من العمر.

بالإضافة إلى الهجرة ، فإن تكاثر الخلايا وتقلصها في موقع الجرح يميز عنصرًا رئيسيًا في التئام الجروح. 24 ، 26 زيادة التكاثر الخلوي مطلوب في وقت مبكر من عملية إصلاح الرباط الصليبي الأمامي للمراحل المناسبة من التئام الجروح. غالبًا ما يكون تكاثر الخلايا الليفية مصحوبًا بتخليق المصفوفة ، والذي يمثل معًا بداية مرحلة الانتشار. أظهر التحليل النسيجي أن الخلايا الليفية تصبح أكثر أنواع الخلايا انتشارًا بعد 3 أسابيع من الإصابة ، مما يسمح للجرح بالشفاء ، ثم يتبعه انخفاض سريع في 6 أسابيع ، مما يشير إلى مرحلة إعادة التشكيل. كانت قيم اختبار MTT لمدة يومين متشابهة في جميع الفئات العمرية الثلاث لكلا النوعين. يشير هذا إلى أن كثافة البذر الأولية كانت متشابهة لكل فئة عمرية في تجارب الانتشار. تشير القيم الأعلى التي شوهدت في الحيوانات غير الناضجة في نقاط زمنية لاحقة إلى ارتفاع معدل تكاثر الخلايا بواسطة خلايا من الحيوانات الأصغر سنًا. تتوافق هذه النتائج مع الدراسات السابقة لتكاثر الخلايا الليفية حيث تظهر الأرومات الليفية من المتبرعين الأكبر سنًا انخفاضًا في معدلات النسخ المتماثل وانخفاض إنتاجية الخلايا عند الالتقاء الخلوي في المختبر. 34 في المجموع ، تشير هذه النتائج إلى أن الزيادة في العمر تؤدي إلى انخفاض معدلات هجرة الخلايا وانتشارها وتقلصها ، ومن المحتمل أن تؤثر سلبًا على قدرة الجرح على الالتئام بعد الإصابة.

ومن المثير للاهتمام ، أن نفس تأثير العمر لوحظ في كلا النوعين ، حيث سجلت الحيوانات غير الناضجة هيكليًا أعلى معدلات الهجرة والتكاثر ، وكانت الحيوانات البالغة هي الأقل. إن التشابه في حالة نضج الهيكل العظمي والتشابه في النتائج في كلا النوعين يجعل من المرجح أن تكون هذه النتائج قابلة للتطبيق عبر الأنواع بدلاً من الأنواع المحددة. إذا كانت هذه النتائج قابلة للتطبيق عبر الأنواع ، وربما تنطبق أيضًا على الوضع البشري ، فقد يشير ذلك إلى أن أحد أسباب التعافي السريع نسبيًا الذي لوحظ عند الأطفال بعد الإصابة عند مقارنته بالبالغين هو القدرة المعززة للخلايا من الأنسجة غير الناضجة على الهجرة والتكاثر إلى وداخل موقع الجرح. من الواضح أن هناك حاجة إلى مزيد من الدراسات للتحقق من صحة هذه الفرضية. بالإضافة إلى ذلك ، كانت الفروق المرتبطة بالعمر في تكاثر الخلايا وانقباض السقالة كبيرة في اليوم الرابع عشر. وما إذا كانت هذه الاختلافات تستمر في فترات زمنية أطول أم لا. غالبًا ما تكون دراسات الهيدروجيل من هذا النوع محدودة في طول الفترة الزمنية التي يمكن دراستها ، حيث يمكن أن تؤدي إعادة تنظيم وتقلص الهلاميات المائية إلى فشل سابق لأوانه في السقالات وإبطال الدراسة. وبالتالي ، لدراسة هذه التأثيرات في فترات زمنية أطول ، قد تكون هناك حاجة لدراسات مستقبلية باستخدام نموذج في الجسم الحي لإصلاح الرباط الصليبي الأمامي.

على الرغم من أن الاختلافات بين الفئات العمرية للنوعين كانت متسقة ، فقد لوحظت اختلافات في حجم الانتشار الخلوي المقاس بين فحوصات الخنازير والأغنام. يمكن أن تكون هذه الاختلافات ناتجة عن عاملين مختلفين على الأقل: أولاً ، أن خلايا الأغنام تهاجر أسرع بكثير من خلايا الخنازير أو الثانية ، أن كل خلية خروف تهاجر تأخذ كمية أكبر من الصبغة من كل خلية خنازير. لا نعرف ما إذا كان أحد هذه العوامل ، أم عامل آخر غير معروف هو المسؤول عن هذه الملاحظة. ومع ذلك ، نظرًا لأن الهدف الرئيسي لدراستنا كان تحديد ليس الفرق بين الأنواع ، ولكن الاختلافات كدالة لعمر الهيكل العظمي ، كان من دواعي السرور ملاحظة أن الاتجاهات في الانتشار الخلوي والهجرة التي لوحظت كدالة للعمر كانت متشابهة في كلا النوعين ، مما يشير إلى أن الاعتماد على العمر قد لا يكون صحيحًا فقط في نموذج حيواني واحد ، ولكن عبر الأنواع.

من المثير للاهتمام ملاحظة أنه على الرغم من أن المرضى غير الناضجين من الناحية الهيكلية والذين لم يبلغوا سن البلوغ هم بالتأكيد نشيطون ، فإن معدل حدوث تمزق الرباط الصليبي الأمامي عند هؤلاء الرياضيين أقل بكثير من المراهقين أو البالغين. 35 ربما يمكن أن تُعزى بعض هذه الاختلافات في معدلات الإصابة الكارثية إلى عوامل جوهرية ، مثل الهجرة الأسرع للخلايا إلى مواقع الجرح ، والتي قد تسمح لهؤلاء المرضى النشطين بنفس القدر بإصلاح الإجهاد الدقيق أو اضطراب الحزم الفردي الذي قد يحدث بشكل شبه دائري ، وبالتالي تجنب تراكم هذه العيوب الصغيرة والاندماج النهائي في اضطراب كامل.

أحد القيود على هذه الدراسة هو استخدام النماذج الحيوانية. نظرًا لأنه من الصعب جدًا الحصول على خلايا الرباط الصليبي الأمامي السليمة من مريض لا يعاني من إصابة في الركبة ، فقد عملنا على التخفيف من هذا القيد من خلال اختيار نموذجين حيوانيين يُعتقد أنهما يقتربان من الحالة البشرية بشكل وثيق. تتشابه الفئات العمرية المختارة لنماذج الخنازير والأغنام المستخدمة في هذه الدراسة من الناحية التشريحية في نمو صفيحة المشاشية (النمو). ترتبط النقاط الزمنية المختارة لكلا النوعين بحيث يكون للحيوانات غير الناضجة لوحة نمو مفتوحة ، والمراهق مفتوح جزئيًا والبالغون لديهم لوحة نمو مغلقة. نموذج الخنازير له خصائص الشفاء الأكثر تشابهًا للإنسان في الجلد. يستخدم بشكل شائع لدراسات التئام الجروح 36 ولديه أيضًا تشريح مماثل وميكانيكا حيوية للركبة البشرية ، 37 في حين أن الأغنام هي واحدة من أكثر النماذج شيوعًا لإعادة بناء الرباط الصليبي الأمامي ، 38 ، 39 ووضع الحزم الأمامية والخلفية الجانبية مشابه أن النموذج البشري. 40 تم تمرير الخلايا الليفية المستزرعة من هذين الحيوانين مرتين قبل التجربة. لقد اخترنا ممرًا منخفضًا لأنه ثبت أن الأرومات الليفية المتأخرة تظهر حجمًا نوويًا متزايدًا ، والذي يرتبط بالخلايا البطيئة وغير المنقسمة ، وبالتالي ، قد تكون خلايا المرور الأعلى تمثيلًا أقل دقة للحالة في الجسم الحي. 34 ، 41 استخدمنا نموذجين حيوانيين كبيرين ، حيث شعرنا أنه إذا شوهدت نتائج مماثلة في كلا النموذجين ، فمن غير المرجح أن تكون النتائج معتمدة على الأنواع. إذا لوحظت نتائج مختلفة ، فقد نكون اختبرنا النتائج في نوع ثالث أو بحثنا عن أسباب فسيولوجية أخرى كانت الاستجابات مختلفة (منحنيات اكتساب الوزن المختلفة ، وتوقيت مختلف للنضج الجنسي فيما يتعلق بنضج الهيكل العظمي ، إلخ). إن التشابه في حالة نضج الهيكل العظمي والتشابه في النتائج في كلا النوعين يجعل من المرجح أن تكون هذه النتائج قابلة للتطبيق عبر الأنواع بدلاً من الأنواع المحددة ، ولكن ستكون هناك حاجة إلى مزيد من الدراسات للتحقق من صحة هذه الفرضية.

القيد الرئيسي لهذه الدراسة هو طبيعتها في المختبر. تختلف بيئة طبق المزرعة اختلافًا كبيرًا عن البيئة الموجودة في الجسم الحي ، وعلى الرغم من أن النموذج المختبر مفيد للبدء في فهم سلوكيات ترحيل خلايا ACL الجوهرية ، فمن المحتمل أن يكون هناك العديد من أنواع الخلايا الأخرى المشاركة في التحكم في استجابة الجرح ، بما في ذلك الخلايا الالتهابية الموجودة في الدم.يتم استبعاد هذه الخلايا من هذا الاختبار في المختبر ، وبالتالي يجب أن تشمل الدراسات المستقبلية دراسات في الجسم الحي حيث يكون من الصعب عزل تأثيرات خلايا الرباط الصليبي الأمامي والتأكد منها ، ولكن خصائص الغزو التراكمي لجميع الخلايا في بيئة الجرح في الجسم الحي يمكن تحديدها كدالة لعمر الحيوان. على الرغم من الحاجة إلى دراسات إضافية ، تشير هذه التجارب إلى أن دور نضج الهيكل العظمي قد يؤثر على قدرة إصلاح خلايا الرباط الصليبي الأمامي (ACL).


شاهد الفيديو: OPTIMALS ORIFLAME FACIAL BOOSTER Optimals 35416 35418 34017 (كانون الثاني 2022).