معلومة

ما هي ميزة استخدام مضادات الجراثيم المشتقة من النباتات بدلاً من مضادات الجراثيم المشتقة من البكتيريا؟


لذلك من الواضح أن لدينا مشكلة كبيرة مع مقاومة المضادات الحيوية. معظم المضادات الحيوية التي نستخدمها تأتي من البكتيريا نفسها (أو هي اختلافات تركيبية على السقالات تنشأ من البكتيريا). لقد سمعت أنه يؤكد أن استخدام مضادات البكتيريا المشتقة من النباتات سيقلل من المشكلة.

إحدى الحجج لاستخدام النباتات هي أن البكتيريا التي نشتق منها مضادًا حيويًا يجب أن تكون هي نفسها مقاومة لهذا المضاد الحيوي ، مما يعني أن أليل المقاومة موجود بالفعل في مجموعة الجينات البكتيرية وعندما نمارس ضغط الاختيار باستخدام المضاد الحيوي ، ستظهر المقاومة في النهاية بين الأنواع المسببة للأمراض.

حجة أخرى سمعتها هي أن النباتات يمكن أن توفر الكثير من المستقلبات المتنوعة هيكليًا والتي قد نكتشف منها فئات جديدة من مضادات الجراثيم.

هل هناك أي شيء آخر لهذا؟

(أعلم أنني قد أجبت على سؤالي الخاص إلى حد ما ، لكني أتساءل عما إذا كانت هناك أي أسباب وجيهة أخرى للبحث عن نباتات الجيل التالي من الأدوية المضادة للبكتيريا).

شكرا لك!


تسمح العزلات البكتيرية من التربة الصقيعية القديمة والكهوف المعزولة بدراسة المقاوم ، أو مجموعة الجينات المقاومة للبكتيريا ، في البيئات دون التعرض للمضادات الحيوية الحديثة للاستخدام الطبي والزراعي. تحتوي هذه العينات على جينات مقاومة المضادات الحيوية المشتقة من مجموعة متنوعة من المصادر ، بما في ذلك المصادر الفطرية (البنسلين ، السيفالوسبورينات) والأصباغ الاصطناعية (السلفوناميدات) ، وكذلك المصادر البكتيرية (الماكروليدات ، الأمينوغليكوزيدات ، إلخ). كانت هذه النتيجة مفاجئة ، لكنها تساعد في تفسير الظهور السريع للمقاومة استجابة للاستخدام السريري. كانت الجينات موجودة طوال الوقت.

OP صحيح أن قدرًا كبيرًا من أسلحتنا الحالية من المضادات الحيوية مشتقة من منتجات بكتيرية ، ولكن نظرًا لأن المنتجات الفطرية والاصطناعية بالكامل لا تحل مشكلة المقاومة ، لا أعتقد أن المنتجات النباتية ستحل أيضًا.


ما هي ميزة استخدام مضادات الجراثيم المشتقة من النباتات بدلاً من مضادات الجراثيم المشتقة من البكتيريا؟ - مادة الاحياء

المجلات العلمية والطبية ذات الوصول المفتوح.

الوصول المفتوح

دوف ميديكال برس هي عضو في OAI.

إعادة طبع

إعادة طبع كميات كبيرة من أجل صناعة المستحضرات الصيدلانية.

المؤلفون المفضلون

نحن نقدم فوائد حقيقية لمؤلفينا ، بما في ذلك المعالجة السريعة للأوراق.

مراقبة المادة الترويجية

قم بتسجيل التفاصيل الخاصة بك والأدوية المحددة ذات الأهمية وسنطابق المعلومات التي تقدمها مع المقالات من قاعدة البيانات الشاملة الخاصة بنا ونُسخ PDF بالبريد الإلكتروني إليك على الفور.

وسائل التواصل الاجتماعي

جزيئات الفضة النانوية لعلاج مرض السل

المؤلفون Tăbăran AF و Matea CT و Mocan T و Tăbăran A و Mihaiu M و Iancu C و Mocan L

مقبولة للنشر 15 فبراير 2020

نشرت 31 مارس 2020 المجلد 2020: 15 صفحة 2231 و mdash2258

تم التحقق من وجود سرقة أدبية نعم

تعليقات المراجعين الزملاء 2

المحرر الذي وافق على النشر: الأستاذ الدكتور توماس جيه ويبستر

Alexandru-Flaviu Tăbăran ، 1 ، 2 ، * كريستيان تيودور ماتيا ، 2 ، * تيودورا موكان ، 2 ، 3 ، ألكسندرا توبيران ، 4 ، * ماريان ميهيو ، 4 ، * كورنيل إيانكو ، 2 ، 5 ، * لوسيان موكان 2 ، 3 ، *

1 قسم علم الأمراض ، جامعة العلوم الزراعية والطب البيطري ، كلوج نابوكا ، رومانيا 2 قسم طب النانو ، المعهد الإقليمي لأمراض الجهاز الهضمي والكبد ، كلوج نابوكا ، رومانيا 3 قسم علم وظائف الأعضاء ، جامعة الطب والصيدلة ، كلوج نابوكا ، رومانيا 4 قسم الصحة العامة وصحة الغذاء ، جامعة العلوم الزراعية والطب البيطري ، كلوج نابوكا ، رومانيا 5 قسم الجراحة الثالثة ، جامعة الطب والصيدلة ، كلوج نابوكا ، رومانيا

*ساهم هؤلاء المؤلفين بالتساوي على هذا العمل

المراسلات: تيودورا موكان
قسم علم وظائف الأعضاء ، جامعة الطب والصيدلة كلوج نابوكا ، رومانيا 1 شارع كليسيلور ، كلوج نابوكا 40006 ، رومانيا
Tel +40264 598575
فاكس +40264 599814
البريد الإلكتروني [البريد الإلكتروني & # 160 محمي]

الملخص: يمثل الظهور السريع لسلالة Mycobacteria العدوانية والمقاومة للأدوية المتعددة السبب الرئيسي لأزمة الأدوية المضادة للبكتيريا الحالية وحالة السل (TB) كمشكلة صحية عالمية كبرى. يساهم الإنتاج المنخفض نسبيًا للمضادات الحيوية المعتمدة حديثًا في التوجه الحالي للبحث نحو جزيئات بديلة مضادة للبكتيريا مثل المواد المتقدمة. تقدم أبحاث تقنية النانو والجسيمات النانوية العديد من المفاهيم والاستراتيجيات الجديدة والمثيرة التي قد تثبت أنها أدوات قيمة في تحسين علاج السل. نموذج جديد في العلاج المضاد للتدرن باستخدام جزيئات الفضة النانوية لديه القدرة على التغلب على القيود الطبية المفروضة في علاج السل من خلال مقاومة الأدوية التي يتم الإبلاغ عنها بشكل شائع لمعظم المضادات الحيوية العضوية الحالية. ليس هناك شك في أن AgNPs تعد علاجات مستقبلية واعدة لأدوية الأمراض التي تسببها الفطريات ، لكن جدوى هذه الاستراتيجية التكميلية تعتمد على التغلب على العديد من المشكلات العلاجية الحرجة مثل سوء التسليم ، وتغير كفاءة مضادات البكتيريا داخل البلع ، والسمية المتبقية. في هذه الورقة ، نقدم لمحة عامة عن أمراض الأمراض التي تسببها الفطريات ، ونسلط الضوء على مزايا وقيود الجسيمات النانوية الفضية (AgNPs) في علاج مرض السل.

الكلمات الدالة: الجسيمات النانوية ، المتفطرة، السل ، الضامة ، الورم الحبيبي


Al-Bayati FA (2008) النشاط التآزري المضاد للبكتيريا بين الغدة الصعترية الشائع و بيمبينيلا أنيسوم الزيوت الأساسية ومستخلصات الميثانول. ي إثنوفارماكول 116 (3): 403-406

Albishri HM، El-Hady DA (2014) استخلاص انتقائي بمساعدة الموجات فوق الصوتية يعتمد على السائل الأيوني الصديق للبيئة إلى جانب كروماتوجرافيا سائلة بسيطة من أجل التحديد الموثوق به لمادة الأكريلاميد في عينات الطعام. تالانتا 118: 129-136

Aligiannis N ، Kalpoutzakis E ، Mitaku S ، Chinou IB (2001) التركيب والنشاط المضاد للميكروبات للزيوت الأساسية اثنين أوريجانوم محيط. J أغريك فود تشيم 49: 4168-4170

Alissandrakis E، Daferera D، Tarantilis P، Polissiou M، Harizanis P (2003) استخراج المركبات المتطايرة بمساعدة الموجات فوق الصوتية من أزهار الحمضيات وعسل الموالح. فود تشيم 82: 575-582

Allaf T، Tomao V، Besombes C، Chemat F (2013) التكثيف الحراري والميكانيكي لاستخراج الزيت العطري من قشر البرتقال عن طريق التبخير التلقائي الفوري. عملية الهندسة الكيميائية 72: 24-30

أنايا أ (2003) Ecología química. بلازا واي فالديز ، المكسيك ، ص 65-68

Anwar F، Zreen Z، Sultana B، Jamil A (2013) الضغط البارد بمساعدة الإنزيم لبذور الكتان (استخدام لينوم L.): زيادة المحصول وجودته ومركبات الفينول الخاصة بالزيت. Grasas Aceites 64 (5): 463-470

Aslan İ، Özbek H، Çalmaşur Ö، ahin F (2004) سمية أبخرة الزيوت العطرية لاثنين من آفات الدفيئة ، Tetranychus urticae كوخ و Bemisia tabaci جين. Ind Crops Prod 19 (2): 167–173

Atti-Santos A، Rossato M، Serafini L، Cassel E، Monya P (2005) استخراج الزيت العطري من الجير (لاتيفوليا الحمضيات تاناكا) بالتقطير المائي وثاني أكسيد الكربون فوق الحرج. Braz Arch Biol Technol 48 (1): 155-160

Attokaran M (2011) نكهات وملونات طبيعية. Blackwell Publishing Ltd. ومعهد تقنيي الأغذية ، آيوا

Babu GDK ، Singh B (2009) محاكاة أوكالبتوس سينيريا تقطير الزيت: دراسة حول تحسين إنتاج 1،8-cineole. Biochem Eng J 44: 226-231

Bagamboula CF ، Uyttendaele M ، Debevere J (2004) التأثير التثبيطي للزيوت العطرية من الزعتر والريحان ، كارفاكرول ، الثيمول ، استراغول ، لينالول وب-سيمين تجاه شيغيلا سوني و S. flexneri. ميكروبيول غذائي 21: 33-42

Baher Z، Mirza M، Ghorbanli M، Bagher M (2002) تأثير الإجهاد المائي على ارتفاع النبات ، وإنتاجية الأعشاب والزيوت العطرية وتكوينها في Staureja hortensis نكهة Fragr J 17: 275-277

Bakkali F ، Averbeck S ، Averbeck D ، Idaomar M (2008) الآثار البيولوجية للزيوت الأساسية - مراجعة. الغذاء تشيم توكسيكول 46 (2): 446-475

Balz R (1999) القوة العلاجية للزيوت الأساسية. Motilal Banarsidass للنشر ، دلهي ، ص 27-48

Bello G، Sisterna M (2010) استخدام المستخلصات النباتية كمبيدات فطريات طبيعية في علاج الأمراض المنقولة بالبذور. في: Arya A ، Perelló A (محرران) إدارة مسببات أمراض نبات الفطريات. مجموعة كتب إم بي جي ، المملكة المتحدة

Bendahou M ، Muselli A ، Grignon-Dubois M ، Benyoucef M ، Desjobert J ، Bernardini A et al (2008) النشاط المضاد للميكروبات والتركيب الكيميائي لـ Origanum glandulosum ديسف. الزيت العطري والمستخلص الناتج عن الاستخلاص بالميكروويف: المقارنة مع التقطير المائي. فود تشيم 106 (1): 132-139

Bousbia N ، Vian M ، Ferhat M ، Meklati B ، Chemat F (2009) عملية جديدة لاستخراج الزيت العطري من قشور الحمضيات: الانتشار المائي في الميكروويف والجاذبية. جي فود إنج 90: 409-413

Boutekedjiret C، Bentahar F، Belabbes R، Bessiere M (2003) استخراج زيت إكليل الجبل العطري عن طريق التقطير بالبخار والتقطير المائي. نكهة فراج ي 18: 481-488

Burt S (1996) النشاط المضاد للبكتيريا للزيوت الأساسية: التطبيقات المحتملة في الغذاء. دكتوراه. فرضية. جامعة يوتريتخت ، هولندا

Burt S (2004) الزيوت الأساسية: خصائصها المضادة للبكتيريا والتطبيقات المحتملة في الأطعمة - مراجعة. Int J Food Microbiol 94 (3): 223-253

Burt S ، Reinders R (2003) النشاط المضاد للبكتيريا للزيوت العطرية النباتية المختارة ضد الإشريكية القولونية O157: H7. Lett Appl Microbiol 36 (3): 162–167

Camel V (2001) تقنيات الاستخراج الحديثة من أجل معالجة السوائل الصلبة ، واستخراج السوائل الحرجة ، واستخراج السوائل المضغوطة ، والاستخراج بمساعدة الميكروويف: إمكاناتها ومخاطرها. محلل 126: 1182-1193

كارسون سي ، هامر ك (2011) الكيمياء والنشاط الحيوي للزيوت الأساسية. في: Thormar H (ed) الدهون والزيوت الأساسية كعوامل مضادة للميكروبات. وايلي ، تشيتشستر ، ص 203 - 238

Cassel E ، Vargas RMF ، Martinez N ، Lorenzo D ، Dellacassa E (2009) نمذجة التقطير بالبخار لعملية استخراج الزيت العطري. Ind Crops Prod 29: 171–176

Cavaleiro C ، Pinto E ، Gonçalves M ، Salgueiro L (2006) النشاط المضاد للفطريات لزيوت جونيبيروس الأساسية ضد الفطريات الجلدية ، فطر الرشاشيات و الكانديدا سلالات. J Appl Microbiol 100 (6): 1333-1338

Chang D ، Chen P ، Chang S (2001) النشاط المضاد للبكتيريا للزيوت الأساسية للأوراق ومكوناتها من أوسموفلويوم القرفة. ي إثنوفارماكول 77 (1): 123-127

Charles D، Simon J (1990) مقارنة بين طرق الاستخراج لتحديد سريع لمحتوى الزيت العطري وتكوين الريحان. J Am Soc Hortic Sci 115 (3): 458-462

Chemat F (2011) تقنيات استخراج النفط. في: Sawamura M (ed) الزيوت الأساسية Citurs: النكهة والرائحة. وايلي ، نيو جيرسي ، ص 9 - 20

Chemat F ، Lucchesi M ، Smadja J ، Favretto L ، Colhaghi G ، Visinoni F (2005) التقطير البخاري المعجل بالميكروويف للزيت العطري من اللافندر: نهج سريع ونظيف وصديق للبيئة. الشرج تشيم اكتا 555 (1): 157-160

Chiralt A، Martínez-Monzó J، Cháfer T، Fito P (2002) الليمونين من الأطعمة الوظيفية الحمضية: الجوانب الكيميائية الحيوية والمعالجة ، المجلد 2. مطبعة CRC ، فلوريدا ، الصفحات 175-178

Clarke S (2008) الكيمياء الأساسية للعلاج بالروائح. العلوم الصحية Elsevier. Elsevier Ltd. ، الصين

Collao C، Curotto E، Zúñiga M (2007) Tratamiento enzimático en la extracción de aceite y obntención de antioxidantes a partir de semilla de onagra، Oenothera biennis، por prensado en frío. Grasas Aceites 58 (1): 10-14

Cox M، Rydberg J (2004) مقدمة لاستخراج المذيبات. في: Rydberg J ، Cox M ، Musikas C ، Choppin G (eds) مبادئ وممارسات استخراج المذيبات ، الطبعة الثانية. مارسيل ديكر ، نيويورك ، ص 2-12

Cravotto G ، Boffa L ، Mantegna S ، Perego P ، Avogadro M ، Cintas P (2008) استخراج محسن للزيوت النباتية تحت الموجات فوق الصوتية عالية الكثافة و / أو الموجات الدقيقة. أولتراسون سونوتشيم 15: 898-902

Cserháti T (2010) اللوني للمركبات العطرية والعطور. سبرينغر ، نيويورك ، ص 271-280

da Cruz-Cabral L، Fernández-Pinto V، Patriarca A (2013) استخدام المركبات المشتقة من النباتات للتحكم في تلف الفطريات وإنتاج السموم الفطرية في الأطعمة. Int J Food Microbiol 166 (1): 1-14

Dao T، Bensoussan M، Gervais P، Dantigny P (2008) Inactivation of conidia of أقحوان البنسليوم, P. digitatum و P. italicum بواسطة محاليل وأبخرة الإيثانول. Int J Food Microbiol 122 (1-2): 68-73

Delaquis P، Stanich K، Girard B، Mazza G (2002) النشاط المضاد للميكروبات للأجزاء الفردية والمختلطة من الشبت والكزبرة والكزبرة والزيوت العطرية. Int J Food Microbiol 74 (1-2): 101-109

إبراهيمي س ، هاديان ج ، ميرجليلي إم ، سنبولي أ ، يوسف زادي م (2008) تكوين الزيت العطري والنشاط المضاد للبكتيريا في الزعتر الكرامانيك في المراحل الصوتية المختلفة. الغذاء كيم 110: 927-931

Edris A، Farrag E (2003) النشاط المضاد للفطريات لزيوت النعناع والريحان الحلو ومكوناتها العطرية الرئيسية على بعض الفطريات المسببة للأمراض النباتية من مرحلة البخار. نهر فود 47 (2): 117-121

Elgayyar M، Draughon A، Golden D، Mount JR (2001) النشاط المضاد للميكروبات للزيوت الأساسية من النباتات ضد الكائنات الحية الدقيقة المسببة للأمراض والرشوة المختارة. جي فود بروت 64 (7): 1019-1024

Fahlén A، Welander M، Wennersten R (1997) تأثيرات نظم درجات الحرارة الخفيفة على نمو النبات ومحصول الزيت العطري لنباتات عطرية مختارة. J Food Sci Agric 73: 111-119

Farhat A، Fabiano-Tixier AS، El Maataoui M، Maingonnat JP، Romdhane M، Chemat F (2011) نشر بخار الميكروويف لاستخراج الزيت العطري من قشر البرتقال: البيانات الحركية ، العائد العالمي للمستخلص وآلية. Food Chem 125: 255–261

فرحات م ، تيجرين كوردجاني ، شيمات إس ، ميكلاتي ب ، شيمات ف (2007) الاستخلاص السريع للمركبات المتطايرة باستخدام تقطير ميكروويف متزامن جديد: جهاز استخلاص بالمذيبات. كروماتوغرافيا 65 (3-4): 217-222

Figueredo G، Unver A، Chalchat J، Arslan D، Özcan M (2011) بحث حول تكوين الزيت العطري المعزول من بعض النباتات العطرية بواسطة الميكروويف والتقطير المائي. J Food Biochem 36: 334–343

Fisher K، Phillips C (2008) الاستخدامات المحتملة لمضادات الميكروبات للزيوت الأساسية في الغذاء: هل الحمضيات هي الحل؟ Trends Food Sci Technol 19 (3): 156-164

Flamini G ، Tebano M ، Cioni P ، Ceccarini L ، Ricci A ، Longo I (2007) مقارنة بين الطريقة التقليدية لاستخراج الزيت العطري من لوروس نوبيليس وطريقة جديدة تستخدم الموجات الدقيقة المطبقة في الموقع دون اللجوء إلى فرن. ي تشروماتوجر أ 1143: 36-40

Frisvad J، Thrane U، Samson R، Pitt J (2006) السموم الفطرية المهمة والفطريات التي تنتجها. في: Hocking A، Pitt J، Samson R، Thrane U (eds) تطورات في علم الفطريات الغذائية. سبرينغر ، نيويورك ، ص 1 - 28

Gil A، de la Fuente E، Lenardis A، López M، Suárez S، Bandoni A، van Baren C، di Leo P، Ghersa C (2002) تشكل تركيبة زيت الكزبرة العطري نمطين وراثيين يزرعان في ظروف بيئية مختلفة. J أغريك فود تشيم 50: 2870-2877

Golmakani M ، Rezaei K (2008) التقطير المائي بمساعدة الميكروويف للزيت العطري من زاتارية نباتات متعددة بويس. Eur J Lipid Sci Technol 110 (5): 448-454

Gutierrez J ، Barry-Ryan C ، Bourke P (2008) الفعالية المضادة للميكروبات لتركيبات الزيوت العطرية النباتية والتفاعلات مع المكونات الغذائية. Int J Food Microbiol 124 (1): 91-97

Hammer K، Carson C، Riley T (1999) النشاط المضاد للميكروبات للزيوت الأساسية والمستخلصات النباتية الأخرى. J Appl Microbiol 86 (6): 985-990

Holley R، Patel D (2005) تحسين العمر الافتراضي للأغذية القابلة للتلف وسلامتها عن طريق الزيوت العطرية النباتية ومضادات الميكروبات المدخنة. ميكروبيول الغذاء 22 (4): 273-292

Huma Z، Vian- M، Elmaataoui M، Chemat F (2011) فكرة جديدة في مجال استخلاص الطعام: دراسة تقنية التفريغ المائي بالميكروويف لاستخراج المنتجات الثانوية. جي فود إنج 105 (2): 351-360

Hüsnü Can Baser K ، Demerici F (2012) الزيوت الأساسية. كيرك أوتمير التكنولوجيا الكيميائية لمستحضرات التجميل. وايلي ، نيو جيرسي ، ص 375-408

حسين إيه آي ، أنور ف ، حسين شيرازي إس تي ، برزيبيلسكي آر (2008) التركيب الكيميائي ، نشاط مضاد للأكسدة ومضاد للميكروبات للريحان (أوسيموم بازيليك) الزيوت الأساسية تعتمد على التغيرات الموسمية. فود تشيم 108 (3): 986-995

حسين آي ، أنور ف ، نيجام بي إس ، أشرف إم ، جيلاني إيه إتش (2010) الاختلاف الموسمي في المحتوى والتركيب الكيميائي والأنشطة المضادة للميكروبات والسمية للخلايا للزيوت الأساسية من أربعة أنواع من النعناع. J Sci Food Agric 90 (11): 1827-1836

Hyldgaard M ، Mygind T ، Meyer R (2012) الزيوت الأساسية في حفظ الطعام: طريقة العمل ، والتآزر ، والتفاعلات مع مكونات مصفوفة الغذاء. الميكروبيول الأمامي 3 (12): 1-24

Inouye S، Takizawa T، Yamaguchi H (2001) النشاط المضاد للبكتيريا للزيوت الأساسية ومكوناتها الرئيسية ضد مسببات أمراض الجهاز التنفسي عن طريق الاتصال الغازي. الشرج البيولوجي الكيميائي 47 (5): 565-573

Inouye S ، Uchida K ، Abe S (2006) نشاط بخار 72 زيوت أساسية ضد أ داء المشعرات. J تصيب Chemother 12 (4): 210-216

Janardhanan M، Thoppil J (2004) زيوت عطرية للأعشاب والتوابل الكيماويات العلاجية والنكهة والعطرية من apiaceae. دار ديسكفري للنشر ، الهند ، ص 16 - 20

Jezler CN و Batista RS و Alves PB و Silva DDC و Costa LCDB (2013) الكيمياء النسيجية والمحتوى والتركيب الكيميائي للزيت العطري في أعضاء مختلفة من ألبينيا زيرومبيت. سينسيا الريفية 43 (10): 1811-1816

Jiang M، Yang L، Zhu L، Piao J، Jiang J (2011) تحليل GC / MS المقارن للزيوت الأساسية المستخرجة بثلاث طرق من برعم النارنج L. فار. عمارة إنجل. J Food Sci 76 (9): C1219-C1224

Jiao J ، Gai Q ، Fu Y ، Zu Y ، Luo M ، Zhao C (2013) معالجة السوائل الأيونية بمساعدة الميكروويف متبوعة بالتقطير المائي لعزل الزيت العطري بكفاءة عن Fructus forsythiae بذرة. سبتمبر Purif Technol 107: 228-237

Joblin J (2000) الزيوت الأساسية: فكرة جديدة لمكافحة أمراض ما بعد الحصاد. فواكه جيدة ماج 11 (3): 50

Jordán MJ، Martinez RM، Goodner KL، Baldwin EA، Sotomayor JA (2006) الغدة الصعترية لانج والإسبانية الغدة الصعترية الشائع تكوين الزيوت الأساسية. Ind Crops Prod 24 (3): 253-263

Kalemba D ، Kunicka A (2003) الخصائص المضادة للبكتيريا والفطريات للزيوت الأساسية. كور ميد تشيم 10 (10): 813-829

Karagözlü N، Ergönül B، Özcan D (2011) تحديد التأثير المضاد للميكروبات لزيوت النعناع والريحان الأساسية على بقاء بكتريا قولونية O157: H7 و S. التيفيموريوم في الخس الطازج و الرجلة. مراقبة الغذاء 22 (12): 1851-1855

Kaufmann B، Christen P (2002) تقنيات الاستخراج الحديثة للمنتجات الطبيعية: الاستخلاص بمساعدة الميكروويف واستخراج المذيبات المضغوطة.Phytochem Anal 13: 105-113

Kloucek P، Smid J، Frankova A، Kokoska L، Valterova I، Pavela R (2012) طريقة الفحص السريع لتقييم نشاط مضادات الميكروبات للزيوت الأساسية في مرحلة البخار. كثافة المواد الغذائية 47 (2): 161–165

Knez Z، Škerget M، Hrnčič M (2010) مبادئ استخلاص السوائل فوق الحرجة والتطبيقات في صناعات الأغذية والمشروبات والمغذيات. في: Rizvi S (ed) عمليات الفصل والاستخراج والتركيز في صناعات الأغذية والمشروبات والمغذيات. وودهيد ، الولايات المتحدة الأمريكية ، ص 3 - 21

Kubeczka K (2010) تاريخ ومصادر أبحاث الزيوت الأساسية. In: Can Başer KH، Buchbauer G (eds) كتيب الزيوت الأساسية: العلوم والتكنولوجيا والتطبيقات. مطبعة CRC ، فلوريدا ، ص 3-10

Lambert R، Skandamis P، Coote P، Nychas G (2001) دراسة للتركيز المثبط الأدنى وطريقة عمل زيت الأوريجانو الأساسي والثيمول والكارفاكرول. J Appl Microbiol 91 (3): 453-462

Lancaster M (2010) الكيمياء الخضراء: نص تمهيدي ، 2da edn. آر سوك كيم ، كامبريدج ، ص 3 - 6

Lawal O ، Ogunwande I (2013) تشكل الزيوت الأساسية النباتات الطبية في إفريقيا. في: Kuete V (ed) أبحاث النباتات الطبية في إفريقيا: علم العقاقير والكيمياء. إلسفير ، لندن ، ص 203 - 210

Lawrence B (2002) المنتجات الطبيعية والزيوت الأساسية. In: Swift KA (محرر) التطورات في النكهات والعطور: من الإحساس إلى التوليف. آر سوك كيم ، كامبريدج ، ص 57-64

Leistner L، Gorris LGM (1995) حفظ الأغذية عن طريق تكنولوجيا الحواجز. Trends Food Sci Tech 6:41–46

Letellier M، Budzinski H (1999) استخلاص المركبات العضوية بمساعدة الميكروويف. تحليل 27: 259-271

Li H، Pordesimo L، Weiss J (2004) استخراج الزيت عالي الكثافة بمساعدة الموجات فوق الصوتية من فول الصويا. Food Res Int 37: 731-738

Liu S ، Yang F ، Zhang C ، Ji H ، Hong P ، Deng C (2009) تحسين معلمات العملية لاستخراج ثاني أكسيد الكربون فوق الحرج من زيت بذور Passiflora من خلال منهجية سطح الاستجابة. J سوبركريت سوائل 48: 9-14

Liu Y، Wang H، Zhang J (2012) مقارنة MAHD مع الإمارات والتقطير المائي لتحليل الزيت المتطاير من أربعة أجزاء من Perilla frutescens المزروعة في جنوب الصين. شرجي Lett 45: 1894–1909

López P، Sánchez C، Batlle R، Nerín C (2007) أنشطة المرحلة البخارية للزيوت الأساسية للقرفة والزعتر والأوريجانو والمكونات الرئيسية ضد الكائنات الحية الدقيقة المنقولة بالغذاء. J أغريك فود تشيم 55 (11): 4348-4356

López-Malo A ، Alzamora S ، Argaiz A (1998) تأثيرات تآزرية الفانيلين ودرجة الحموضة على نمو العفن. J Food Sci 63 (1): 143–146

López-Malo A، Palou E، Parish M، Davidson P (2005) طرق فحص النشاط وتقييم النتائج. في: Davidson P ، Sofos J ، Branen A (محرران) مضادات الميكروبات في الغذاء. مجموعة تايلور وفرانسيس ، فلوريدا ، ص 659-680

Luque de Castro & amp Priego-Capote (2011) الاستخراج بمساعدة الميكروويف. في: Lebovka N ، Vorobiev E ، Chemat F (محرران) تعزيز عمليات الاستخراج في صناعة الأغذية. مطبعة CRC ، بوكا راتون ، ص 85

Magro A ، Carolino M ، Bastos M ، Mexia A (2006) فعالية المستخلصات النباتية ضد الفطريات المخزنة. القس إيبيروم ميكول 23 (3): 176-178

Martinho A ، Matos HA ، Gani R ، Sarup B ، Youngreen W (2008) نمذجة ومحاكاة عمليات زيت الخضروات. عملية الغذاء الحيوي 86: 87-95

Mendes M، Pessoa F، De Melo S، Queiroz E (2007) أوضاع الاستخراج. In: Hui YH (ed) Handbook of products food manufacturing، vol 2. Wiley، New Jersey، pp 148–150

Mendiola J، Herrero M، Castro-Puyana M، Ibáñez E (2013) استخراج السوائل فوق الحرج. In: Rostango M، Prado J، Kraus G (eds) استخراج المنتجات الطبيعية: المبادئ والتطبيقات. آر سوك كيم ، كامبريدج ، ص 196 - 201

ميشرا أ ، دوبي إن (1994) تقييم بعض الزيوت العطرية لسميتها ضد الفطريات التي تسبب تلف السلع الغذائية المخزنة. أبل إنفيرو ميكروبيول 60: 1101-1105

Moreira M ، Ponce A ، del Valle C ، Roura S (2005) المعلمات المثبطة للزيوت الأساسية لتقليل مسببات الأمراض المنقولة بالغذاء. LWT Food Sci Technol 38 (5): 565-570

Müller-Riebau F، Berger B، Yegen O، Cakir C (1997) التغيرات الموسمية في التركيبات الكيميائية للزيوت الأساسية لنباتات عطرية مختارة تنمو برية في تركيا. J أغريك فود تشيم 45: 4821-4825

Nahar L، Sarker S (2005) استخراج السوائل فوق الحرجة. In: Sarker S، Latif Z، Gray A (eds) عزل المنتجات الطبيعية ، الطبعة الثانية. هيومانا برس ، نيو جيرسي ، ص 47-53

Nakatsu T، Lupo A، Chinn J، Kang R (2000) النشاط البيولوجي للزيوت الأساسية ومكوناتها. في: Atta-ur-Rahman (ed) المنتجات الطبيعية النشطة بيولوجيًا (الجزء ب) ، المجلد 21. إلسفير ، أمستردام ، ص 571

Navarrete A ، Mato RB ، Cocero MJ (2012) نهج تنبؤي في نمذجة ومحاكاة انتقال الحرارة والكتلة أثناء تسخين الميكروويف. تطبيق SFME من الزيت العطري من Lavandin Super. علم الهندسة الكيميائية 68: 192 - 201

Nedorostova L، Kloucek P، Kokoska L، Stolcova M، Pulkrabek J (2009) الخصائص المضادة للميكروبات للزيوت الأساسية المختارة في مرحلة البخار مرة أخرى. مراقبة الأغذية 20 (2): 157-160

Nerio L ، Olivero-Verbel J ، Stashenko E (2010) نشاط طارد للزيوت الأساسية: مراجعة. تقنية بيوريسور 101 (1): 372-378

Nguefack J ، Leth V ، Zollo A ، Mathur S (2004) تقييم خمسة زيوت أساسية من النباتات العطرية في الكاميرون للتحكم في تلف الطعام والسموم الفطرية المنتجة للفطريات. Int J Food Microbiol 94 (3): 329-334

Nielsen P ، Rios R (2000) تثبيط نمو الفطريات على الخبز بواسطة المكونات المتطايرة من التوابل والأعشاب ، والتطبيق المحتمل في العبوة النشطة مع التركيز بشكل خاص على زيت الخردل الأساسي. Int J Food Microbiol 60 (2-3): 219-229

Okoh O ، Sadimenko A ، Afolayan A (2010) تقييم مقارن للأنشطة المضادة للبكتيريا للزيوت الأساسية من روزمارينوس أوفيسيناليس تم الحصول عليها عن طريق التقطير المائي وطرق الاستخراج بالميكروويف الخالية من المذيبات. فود تشيم 120: 308-312

Omidbeygi M، Barzegar M، Hamidi Z، Naghdibadi H (2007) النشاط المضاد للفطريات من الزعتر والزيوت العطرية المالحة في الصيف والقرنفل ضد أسبرجيلوس، فلافوس في وسط سائل ومعجون الطماطم. مراقبة الغذاء 18 (12): 1518-1523

Ortega Y (2005) طفيليات الأوليات المنقولة بالغذاء والمياه. في: Fratamico P، Bhunia A، Smith J (eds) مسببات الأمراض المنقولة بالغذاء: البيولوجيا الميكروبية والجزيئية. Caister Academic Press ، المملكة المتحدة ، ص 145 - 148

Oussalah M، Caillet S، Saucier L، Lacroix M (2007) التأثيرات المثبطة للزيوت الأساسية النباتية المختارة على نمو أربعة أنواع من البكتيريا المسببة للأمراض: بكتريا قولونية O157: H7 ، السالمونيلا تيفيموريوم, المكورات العنقودية الذهبية و الليسترية المستوحدة. مراقبة الأغذية 18 (5): 414-420

Ozel M، Kaymaz H (2004) استخراج الماء المسخن والتقطير بالبخار واستخراج Soxhlet للزيوت الأساسية من أوريجانوم أونيتس. الشرج الحيوي الكيميائي 379 (7-8): 1127-1133

Pereda S، Bottini S، Brignole E (2007) أساسيات تكنولوجيا السوائل فوق الحرجة. في: Martínez J (محرر) استخراج السوائل فوق الحرج من المغذيات والمركبات النشطة بيولوجيًا. مطبعة CRC ، بوكا راتون ، ص 2 - 18

Périno-Issartier S، Huma Z، Abert-Vian M، Chemat F (2010) لاستخلاص مضادات الأكسدة بمساعدة الميكروويف الخالية من المذيبات من النبق البحري (Hippophae rhamnoides) المنتجات الثانوية الغذائية. الغذاء Bioprocess Technol. دوى: 10.1007 / s11947-010-0438-x

Perry N ، Anderson R ، Brennan N ، Douglas M ، Heaney A ، McGimpsey J ، Smallfield B (1999) الزيوت الأساسية من dalmatian sage (القويسة L.): الاختلافات بين الأفراد وأجزاء النبات والمواسم والمواقع. J أغريك فود تشيم 47: 2048-2054

Phillips C ، Laird K ، Allen S (2012) استخدام Citri-V ™ - بخار زيت الحمضيات الأساسي المضاد للميكروبات للتحكم في أقحوان البنسليوم, رشاشيات النيجر و البديل البديل في المختبر وعلى الطعام. الغذاء Res Int 47 (2): 310-314

Phutdhawong W ، Kawaree R ، Sanjaiya S ، Sengpracha W ، Buddhasukh D (2007) عزل الزيت العطري بمساعدة الميكروويف iners القرفة رينو. مثال: مقارنة بالتقطير المائي التقليدي. الجزيئات 12: 868-877

Pingret D ، Fabiano-Tixier A ، Chemat F (2013) الاستخراج بمساعدة الموجات فوق الصوتية. In: Rostango M، Prado J، Kraus G (eds) استخراج المنتجات الطبيعية: المبادئ والتطبيقات. آر سوك كيم ، كامبريدج ، ص 89-90

Presti M ، Ragusa S ، Trozzi A ، Dugo P ، Visinoni F ، Fazio A ، Dugo G ، Mondello L (2005) مقارنة بين التقنيات المختلفة لعزل زيت إكليل الجبل العطري. J سبتمبر Sci 28 (3): 273-280

Prusky D، Kolattukudy P (2007) تبادل الحديث بين العائل والفطر في حالات ما بعد الحصاد وتأثيره على تطور الأعراض. في: Dijksterhuis J ، Samson R (محرران) علم الفطريات الغذائية: نهج متعدد الأوجه للفطريات والطعام. مجموعة تايلور وفرانسيس ، بوكا راتون ، ص 3-24

Raybadui-Massilia R ، Mosqueda-Melgra J ، Martín-Belloso O (2006) النشاط المضاد للميكروبات للزيوت الأساسية على السالمونيلا المعوية, الإشريكية القولونية، و ليستيريا إنوكوا في عصائر الفاكهة. J Food Prot 7: 1508-1738

Reis-Vasco EMC ، Coelho JJP ، Palavra AMF ، Marrone C ، Reverchon E (2000) النمذجة الرياضية ومحاكاة الاستخراج فوق الحرج للزيوت العطرية. علم الهندسة الكيميائية 55: 2917-2922

Reverchon E (1996) النمذجة الرياضية للاستخراج فوق الحرج من زيت المريمية. آيتشي ج .42 (6): 1765-1771

Reverchon E (1997) استخراج السوائل فوق الحرجة وتجزئة الزيوت الأساسية والمنتجات ذات الصلة. J سوائل سوبركريت 10: 1–37

Rezzoug SA، Louka N (2009) تكثيف العمليات الحرارية الميكانيكية لاستخراج الزيت من قشور البرتقال. Innov Food Sci Emerg Technol 10: 530-536

Rohloff J (2004) الأدوية الأساسية للزيوت - تركيبة التربين من الأعشاب العطرية. في: Dris R ، Jain M (محرران) معالجة وتقييم الجودة ، المجلد 3 ، الطبعة الرابعة. Kluwer Academic Publishers ، ماساتشوستس ، ص 73-76

Samejo M ، Memon S ، Bhanger M ، Khan K (2013) مقارنة التركيب الكيميائي لـ ارفا جافانيكا الزيوت الأساسية للبذور التي يتم الحصول عليها بطرق الاستخراج المختلفة. باك جي فارم سسي 26 (4): 757-760

Seidel V (2005) الاستخراج الأولي والكمبي. In: Sarker S، Latif Z، Gray A (eds) عزل المنتجات الطبيعية ، الطبعة الثانية. مطبعة هيومانا ، نيو جيرسي ، ص 27 - 35

Seiger D (1998) التمثيل الغذائي الثانوي للنبات. Kluwer Academic Publishers ، ماساتشوستس ، ص 12-320

بيع C (2006) مواد عطرية من أصل طبيعي. In: Sell CS (ed) كيمياء العطور: من العطار إلى المستهلك ، الطبعة الثانية. آر سوك كيم ، المملكة المتحدة ، ص 24-45

Serrano M، Martínez-Romero D، Castillo S، Guillén F، Valero D (2005) يحسن استخدام المركبات الطبيعية المضادة للفطريات التأثير المفيد لخطة تخزين الكرز الحلو. إنوف فود سسي إميرج تكنول 6 (1): 115-123

شي جي ، كاساما إل ، كاكودا واي (2006) تكنولوجيا السوائل فوق الحرجة لاستخراج المكونات النشطة بيولوجيًا. في: Shi P (ed) المكونات الغذائية الوظيفية والمغذيات: تقنيات المعالجة. مطبعة CRC ، بوكا راتون ، ص 5-30

Skandamis P، Nychas G (2002) حفظ اللحوم الطازجة في ظروف تعبئة نشطة ومتغيرة. J Food Microbiol 79 (1-2): 35-45

Smith-Palmer A ، Stewart J ، Fyfe L (1998) الخصائص المضادة للميكروبات للزيوت العطرية النباتية والجواهر ضد خمسة مسببات الأمراض التي تنقلها الأغذية. Lett Appl Microbiol 26 (2): 118-122

Solomakos N ، Govaris A ، Koidis P ، Botsoglou N (2008) التأثير المضاد للميكروبات لزيت الزعتر الأساسي ، النيسين ومزيجها ضد الإشريكية القولونية O157: H7 في لحم البقر المفروم أثناء التخزين المبرد. اللحوم Sci 80: 159–166

Solórzano-Santos F ، Miranda-Novales M (2012) الزيوت الأساسية من الأعشاب العطرية كعوامل مضادة للميكروبات. التكنولوجيا الحيوية بالعملة 23 (2): 136-141

Soto C، Chamy R، Zúñiga M (2007) يؤثر التحلل المائي الأنزيمي وظروف الضغط على استخراج زيت لسان الثور بالضغط على البارد. فود تشيم 102: 834-840

Sovová H، Aleksovski SA (2006) نموذج رياضي للتقطير المائي للزيوت الأساسية. نكهة Frag J 21: 881–889

Speranza B ، Corbo M (2010) زيت أساسي للحفاظ على الأطعمة القابلة للتلف: الاحتمالات والقيود. في: Bevilacqua A ، Corbo M ، Sinigaglia M (محرران) تطبيق تقنيات بديلة لحفظ الأغذية لتعزيز سلامة الأغذية واستقرارها. بينثام ساينس للنشر ، إيطاليا

Suhr K، Nielsen P (2003) تم تقييم النشاط المضاد للفطريات للزيوت الأساسية من خلال تقنيتي تطبيق مختلفتين ضد فطريات تلف خبز الجاودار. J Appl Microbiol 94 (4): 665-674

Tajkarimi M، Ibrahim S، Cliver D (2010) الأعشاب المضادة للميكروبات ومركبات التوابل في الغذاء. مراقبة الغذاء 21 (9): 1199-1218

Temelli F ، Saldaña M ، Moquin P ، Sun M (2007) استخراج السوائل فوق الحرجة من الزيوت المتخصصة. في: Martínez J (محرر) استخراج السوائل فوق الحرج من المغذيات والمركبات النشطة بيولوجيًا. مطبعة CRC ، بوكا راتون ، ص 52-80

Teranishi R، Wick E، Hornstein I (1999) كيمياء النكهة: 30 عامًا من التقدم ، نظرة عامة. في: Teranishi R، Wick E، Hornstein I (محرران) كيمياء النكهة: 30 عامًا من التقدم. Kluwer Academic / Plenum Publishers ، نيويورك ، ص 1-8

Thongson C ، Davidson PM ، Mahakamchanakul W ، Vibulsresth P (2005) تأثير مضادات الميكروبات للأنواع التايلاندية ضد الليسترية المستوحدة والسالمونيلا ثيفيموريوم DT104. J Food Prot 10: 2050-2058

Tisserand R، Young R (2013) سلامة الزيوت الأساسية: دليل لمتخصصي الرعاية الصحية. إلسفير ، الصين ، ص 5-20

Toma M، Vinatoru M، Paniwnyk L، Manson T (2001) التحقيق في آثار الموجات فوق الصوتية على الأنسجة النباتية أثناء الاستخراج بالمذيبات. أولتراسون سونوتشيم 8: 137-142

Tomaniova M، Hajslova J، PavelkaJr J، Kocourek V، Holadova K، Klímova I (1998) استخلاص المذيبات بمساعدة الميكروويف: طريقة جديدة لعزل الهيدروكربونات العطرية متعددة النوى من النباتات. ي تشروماتوجر أ 827: 21-29

Tongnuanchan P، Soottawat B (2014) الزيوت الأساسية: الاستخراج والنشاط الحيوي واستخداماتها لحفظ الطعام. J Food Sci 79 (7): 1231-1248

Tullio V و Nostro A و Mandras N و Dugo P و Banche G و Cannatelli M et al (2007) النشاط المضاد للفطريات للزيوت الأساسية ضد الفطريات الخيطية التي تحددها طرق التخفيف الدقيق للمرق وطرق ملامسة البخار. J Appl Microbiol 102 (6): 1544-1550

Tyagi A ، Malik A (2011) إمكانات مضادات الميكروبات والتركيب الكيميائي لزيت الكافور في الطور السائل والبخار ضد الكائنات الدقيقة التي تسبب تلف الطعام. الغذاء تشيم 126: 228-235

Tzortzakis N (2007) الحفاظ على جودة ما بعد الحصاد للمنتجات الطازجة ذات المركبات المتطايرة. Innov Food Sci Emerg Technol 8 (1): 111-116

Vági E ، Simándi B ، Suhajda A ، Héthelyi E (2005) تكوين الزيت العطري والنشاط المضاد للميكروبات من أوريجانوم ماجورانا مستخلصات L. التي تم الحصول عليها باستخدام الكحول الإيثيلي وثاني أكسيد الكربون فوق الحرج. Food Res Int 38: 51–57

Van Doosselaere P (2013) إنتاج الزيوت. في: Hamm W ، Hamilton R ، Calliauw G (eds) معالجة زيت الطعام. وايلي ، المملكة المتحدة ، ص 70-97

Veggi P ، Martinez J ، Meireles M (2012) أساسيات الاستخراج بالميكروويف. في: Chemat F ، Cravotto G (eds) الاستخراج بمساعدة الميكروويف للمركبات النشطة بيولوجيًا: النظرية والتطبيق. سبرينغر ، نيويورك ، ص 16 - 35

Vian M ، Fernandez X ، Visinoni F ، Chemat F (2008) الانتشار المائي في الميكروويف والجاذبية ، تقنية جديدة لاستخراج الزيوت الأساسية. ي تشروماتوجر أ 1190 (1-2): 14-17

Vilkhu K ، Mawson R ، Simons L ، Bates D (2008) التطبيقات والفرص للاستخراج بمساعدة الموجات فوق الصوتية في مراجعة صناعة الأغذية. Innov Food Sci Emerg Technol 9 (2): 161–169

فوروبييف إي ، شيمات ف (2010) مبادئ الاستخراج بمساعدة جسدية والتطبيقات في صناعات الأغذية والمشروبات والمغذيات. في: Rizvi S (ed) عمليات الفصل والاستخراج والتركيز في صناعات الأغذية والمشروبات والمغذيات. ودهيد للنشر ، الولايات المتحدة الأمريكية ، ص 90-96

Wang C (2003) الحفاظ على جودة توت العليق بعد الحصاد بمركبات متطايرة طبيعية. Int J Food Sci Technol 38 (8): 869-875

Wang L (2008) كفاءة الطاقة وإدارتها في مرافق تجهيز الأغذية. مطبعة CRC ، بوكا راتون ، ص 351–359

Wang L ، Weller C (2006) التطورات الحديثة في استخراج المغذيات من النباتات. Trends Food Sci Technol 17: 300-312

Wenqiang G ، Shufen L ، Ruixiang Y ، Shaokun T ، Can Q (2007) مقارنة الزيوت الأساسية لبراعم القرنفل المستخرجة بثاني أكسيد الكربون فوق الحرج وطرق الاستخراج التقليدية الثلاثة الأخرى. فود تشيم 101: 1558-1564

Wiegand I ، Hilpert K ، Hancock R (2008) طرق تخفيف الآجار والمرق لتحديد الحد الأدنى من التركيز المثبط (MIC) للمواد المضادة للميكروبات. نات بروتوك 3 (2): 163-175

ويليامز د (2008) كيمياء الزيوت الأساسية: مقدمة لأخصائيي العلاج بالروائح والتجميل وتجار التجزئة والطلاب. مطبعة ميسيل ، كرانفورد

Xavier VB، Vargas RMF، Cassel E، Lucas AM، Santos MA، Mondin CA، Santarem ER، Astarita LV، Sartor T (2011) النمذجة الرياضية لاستخراج الزيت العطري من Baccharis spp. عن طريق التقطير بالبخار. Ind Crops Prod 33: 599-604

Yamini Y، Khajeh M، Ghasemi E، Mirza M، Javidnia K (2008) مقارنة تركيبات الزيوت الأساسية من سالفيا ميرزاياني تم الحصول عليها عن طريق استخراج ثاني أكسيد الكربون فوق الحرج وطرق التقطير المائي. Food Chem 108: 341–346

Zizovic I ، Stamenic M ، Orlovic A ، Skala D (2007) استخراج ثاني أكسيد الكربون فوق الحرج للزيوت الأساسية والنمذجة الرياضية على النطاق الصغير. في: بيرتون إل (محرر) اتجاهات أبحاث الهندسة الكيميائية. نوفا ساينس للنشر ، نيويورك


خيارات الوصول

احصل على حق الوصول الكامل إلى دفتر اليومية لمدة عام واحد

جميع الأسعار أسعار صافي.
سيتم إضافة ضريبة القيمة المضافة في وقت لاحق عند الخروج.
سيتم الانتهاء من حساب الضريبة أثناء الخروج.

احصل على وصول محدود أو كامل للمقالات على ReadCube.

جميع الأسعار أسعار صافي.


المواد التكميلية الإلكترونية متاحة على الإنترنت على https://dx.doi.org/10.6084/m9.figshare.c.3647717.

نشرته الجمعية الملكية. كل الحقوق محفوظة.

مراجع

باربي سي ، بارتليت جي ، كونغ إل ، فيني كيه ، لين إتش كيو ، لاركين إم ، كاليجا إس ، بوش إيه ، كاليجا جي

. 2004 جزيئات السيليكا: نظام جديد لتوصيل الأدوية. حال. ماتر . 16، 1959-1966. (دوى: 10.1002 / adma.200400771) كروسريف ، الباحث العلمي من Google

. 2009 توليف وتوصيف جسيمات السيليكا النانوية المسامية متعددة الوظائف والمتوافقة حيوياً وضبط الحجم. تشيم. ماتر . 21، 3979–3986. (دوى: 10.1021 / cm901259n) كروسريف ، الباحث العلمي من Google

Lu J ، Liong M ، Zink JI ، Tamanoi F

. 2007 جزيئات السيليكا النانوية ميسوبوروس كنظام توصيل للأدوية المضادة للسرطان المضادة للماء. صغير 3، ١٣٤١-١٣٤٦. (دوى: 10.1002 / smll.200700005) كروسريف ، PubMed ، الباحث العلمي من Google

Trewyn BG ، و Nieweg JA ، و Zhao Y ، و Lin VSY

. 2008 جسيمات السيليكا النانوية المتوسطة المسامية حيوياً ذات الأشكال المختلفة لاختراق غشاء الخلية الحيوانية. تشيم. م. ي . 137، 23-29. (دوى: 10.1016 / j.cej.2007.09.045) كروسريف ، الباحث العلمي من Google

نانديانتو إيه بي دي ، كيم إس جي ، إسكندر إف ، أوكوياما ك

. 2009 تخليق جزيئات السيليكا النانوية المسامية الكروية ذات المسام القابلة للتحكم بحجم النانومتر والأقطار الخارجية. ميكروبور. ميسوبور. ماتر . 120، 447-453. (دوى: 10.1016 / j.micromeso.2008.12.019) كروسريف ، الباحث العلمي من Google

. 2002 طلب مواد مسامية للتطبيقات الناشئة. طبيعة سجية 417، ٨١٣-٨٢١. (دوى: 10.1038 / nature00785) كروسريف ، PubMed ، ISI ، الباحث العلمي من Google

2007 مادة السيليكا ميسوبوروس TUD-1 كنظام توصيل الأدوية. كثافة العمليات J. فارم . 331، 133-138.(دوى: 10.1016 / j.ijpharm.2006.09.019) كروسريف ، PubMed ، ISI ، الباحث العلمي من Google

Hom C ، Lu J ، Liong M ، Luo H ، Li Z ، Zink JI ، Tamanoi F

. 2010 جسيمات السيليكا النانوية ميسوبوروس تسهل إيصال siRNA لإغلاق مسارات الإشارات في خلايا الثدييات. صغير 6، 1185-1190. (دوى: 10.1002 / smll.200901966) كروسريف ، PubMed ، الباحث العلمي من Google

إسباس سي ، سوكولوف الأول ، أندريسكو إس

. 2009 السيليكا المتوسطة المسامية التي تعمل بالإنزيم للتطبيقات التحليلية الحيوية. شرجي. بيوانال. تشيم . 393، 543-554. (دوى: 10.1007 / s00216-008-2250-2) كروسريف ، PubMed ، الباحث العلمي من Google

كنوب د ، تانغ د ، نيسنر ر

. مراجعة عام 2009: التطبيقات التحليلية الحيوية لجزيئات السيليكا المخدرة ذات الحجم النانوي التي تعمل بالجزيئات الحيوية. شرجي. شيم. اكتا 647، 14-30. (دوى: 10.1016 / j.aca.2009.05.037) كروسريف ، PubMed ، الباحث العلمي من Google

. 2005 كيمياء النانو: نهج كيميائي للمواد النانوية ، 1st edn. كامبريدج ، المملكة المتحدة: الجمعية الملكية لنشر الكيمياء. منحة جوجل

وانغ ف ، غو سي ، يانغ إل آر ، ليو تشيكوسلوفاكيا

. 2010 جزيئات السيليكا النانوية ذات المسام المغناطيسية: التصنيع وأداء تثبيط اللاكاز. بيوريسورس تكنول . 101، 8931-8935. (دوى: 10.1016 / j.biortech.2010.06.115) كروسريف ، PubMed ، الباحث العلمي من Google

Vallet-Regί M ، Balas F ، Arcos D

. 2007 مواد ميسوبوروس لتوصيل الأدوية. انجيو. تشيم . 46، 7548-7558. (دوى: 10.1002 / anie.200604488) كروسريف ، PubMed ، الباحث العلمي من Google

مكوسكر إل بي ، ليباو إف ، إنجلهاردف جي ، شوث إف

. 2003 تسمية الخصائص الهيكلية والتركيبية للمواد الصغيرة التي يسهل اختراقها والمواد المسامية مع مضيفات غير عضوية: توصيات IUPAC 2001. ميكروبور. ميسوبور. ماتر . 58، 3-13. (دوى: 10.1016 / S1387-1811 (02) 00545-0) كروسريف ، الباحث العلمي من Google

Xia TA و Kovochich M و Liong M و Meng H و Kabehie S و George S و Zink JI و Nel AE

. 2009 طلاء البولي إيثيلين أمين يعزز الامتصاص الخلوي لجسيمات السيليكا النانوية المسامية ويسمح بالتوصيل الآمن لبنى سيرنا والحمض النووي. ACS نانو 3، 3273 - 3286. (دوى: 10.1021 / nn900918w) كروسريف ، PubMed ، الباحث العلمي من Google

Zhu Y و Fang Y و Bordchardt L و Kaskel S

. 2011 جزيئات سيليكا مجوفة مجوفة مسامية كمركبات محتملة لتوصيل الأدوية. ميكروبور. ميسوبور. ماتر . 141، 199-206. (دوى: 10.1016 / j.micromeso.2010.11.013) كروسريف ، الباحث العلمي من Google

تشاو إس ، يونغ جي ، أوبرغ سي ، ناكاوكا ك

. 2008 تثبيط مقاومة الميثيسيلين المكورات العنقودية الذهبية (MRSA) بالزيوت الأساسية. نكهة فراج. ي . 23، 444 - 449. (دوى: 10.1002 / ffj.1904) كروسريف ، الباحث العلمي من Google

تشان AC ، Ager D ، Thompson IP

. 2013 حل آلية التثبيط البكتيري عن طريق المستقلبات الثانوية النباتية التي تستخدم مزيجًا من المستشعرات الحيوية للخلية الكاملة. J. ميكروبيول. ميث . 93، 209-217. (دوى: 10.1016 / j.mimet.2013.03.021) كروسريف ، PubMed ، الباحث العلمي من Google

هوانغ X ، يونغ NP ، تاونلي سعادة

. 2013 توصيف ومقارنة جزيئات السيليكا متوسطة المسام من أجل توصيل الدواء الأمثل. نانوماتر. النانو . 4، 2. (دوى: 10.5772 / 58290) كروسريف ، الباحث العلمي من Google

1992 تقدير ميثيل أيزوثيوسيانات في النبيذ بواسطة GC و GC / MS. الغذاء هيغ. علوم السلامة . 33، 603-608. (دوى: 10.3358 / shokueishi.33.603) كروسريف ، الباحث العلمي من Google

. 2002 تقدير دقة التخفيفات المتسلسلة والتعداد البكتيري القابل للحياة. كثافة العمليات J. الغذاء ميكروبيول . 76، 207-214. (دوى: 10.1016 / S0168-1605 (02) 00022-3) كروسريف ، PubMed ، الباحث العلمي من Google

Jia L، Shen J، Liu Z، Zhang D، Zhang Q، Liu G، Zheng D، Tian X

. 2013 تقييم في المختبر وفي الجسم الحي لجسيمات السيليكا النانوية المتوسطة المسامية المحملة بالباكليتاكسيل بثلاثة أحجام للمسام. كثافة العمليات J. فارم . 445، 12-19. (دوى: 10.1016 / j.ijpharm.2013.01.058) كروسريف ، PubMed ، الباحث العلمي من Google

. 2010 كتيب بيانات الذوبان المائي ، الطبعة الثانية. بوكا راتون ، فلوريدا: مطبعة CRC. كروسريف ، الباحث العلمي من Google

فالفاني سك ، يالكوفسكي ش ، روزمان تي جيه

. 1981 الذوبان والتقسيم الرابع: قابلية الذوبان في الماء ومعاملات فصل الأوكتانول والماء للسائل غير الكهربائي. J. فارم. علوم . 70، 502-507. (دوى: 10.1002 / jps.2600700510) كروسريف ، PubMed ، الباحث العلمي من Google

. 1990 التأثيرات المثبطة لنمو العديد من البكتيريا بواسطة الخردل البني والأليل أيزوثيوسيانات. J. Food Sci. تكنول . 37، ٨٢٣-٨٢٩. (دوى: 10.3136 / nskkk1962.37.10_823) كروسريف ، الباحث العلمي من Google

. 1997 النشاط المضاد للميكروبات من غاز الأليل أيزوثيوسيانات. J. الغذاء حماية . 60، 943-947. (دوى: 10.4315 / 0362-028X-60.8.943) كروسريف ، الباحث العلمي من Google

. 1997 نشاط مضادات الميكروبات لمركبات الكبريت المشتقة من الملفوف. J. الغذاء حماية . 60، 67-71. (دوى: 10.4315 / 0362-028X-60.1.67) كروسريف ، PubMed ، الباحث العلمي من Google

لين سم ، كيم جي ، دو دبليو إكس ، وي سي آي

. 2000 النشاط البكتيري للأيزوثيوسيانات ضد مسببات الأمراض على المنتجات الطازجة. J. الغذاء حماية . 63، 25-30. (دوى: 10.4315 / 0362-028X-63.1.25) كروسريف ، PubMed ، الباحث العلمي من Google

. 2000 آلية مضادة للجراثيم من الأليل أيزوثيوسيانات. J. الغذاء حماية . 6، ٧٠٣-٨٣٨. (دوى: 10.4315 / 0362-028x-63.6.727) الباحث العلمي من Google

. 1834 Sur l'Huile de Cannelle ، l'Acide Hippurique ، et l'Acide Sébacique. آن. شيم. فيز . 57، 305 - 334. منحة جوجل

Boerjan W، Ralph J، Baucher M

. 1993 الخصائص المضادة للجراثيم لألدهيدات عطرية وأليفاتية مختارة. J. الغذاء حماية . 56، 788-794. (دوى: 10.4315 / 0362-028X-56.9.788) كروسريف ، الباحث العلمي من Google

بولز بي إل ، ساكيتي إس كي ، ويليامز إيه سي

. 1995 التأثيرات التثبيطية لمركبات النكهة على المكورات العنقودية الذهبية WRRC B124. J. سلامة الغذاء 15، 337–347. (دوى: 10.1111 / j.1745-4565.1995.tb00144.x) كروسريف ، الباحث العلمي من Google

هيلاندر إم ، ألكومي إتش إل ، لاتفا-كالا ك ، ماتيلا ساندهولم تي ، بول إل ، سميد إي جيه ، جوريس إل جي إم ، فون رايت إيه

. 1998 توصيف عمل مكونات الزيت العطري المختارة على البكتيريا سالبة الجرام. J. أجريك. الغذاء تشيم . 46، 3590–3595. (دوى: 10.1021 / jf980154m) كروسريف ، الباحث العلمي من Google

موريسون آر ، جاردينر سي ، إيفيدنت أ ، كيس آر ، تاونلي إتش

. 2014 دمج ophiobolin a في جزيئات الانصمام الكيميائي الجديدة لعلاج الخلايا السرطانية. صيدلية. الدقة . 31، 2904 - 2917. (دوى: 10.1007 / s11095-014-1386-3) كروسريف ، PubMed ، الباحث العلمي من Google

السيليكا متوسطة المسام 2015 ذات البنية النانوية: آفاق جديدة لمكافحة مقاومة مضادات الميكروبات. جى نانوبارت. الدقة . 17، 201. (دوى: 10.1007 / s11051-015-3004-7) كروسريف ، الباحث العلمي من Google

Janatova A، Bernardos A، Smid J، Frankova A، Lhotka M، Kourimská L، Pulkrabek J، Kloucek P

. 2015 نشاط مضاد للفطريات طويل الأمد لمكونات الزيت العطري المتطايرة المنبعثة من مواد السيليكا ميسوبوروس. Ind. المحاصيل. همز . 67، 216 - 220. (دوى: 10.1016 / j.indcrop.2015.01.019) كروسريف ، الباحث العلمي من Google

Bernardos A، Marina T، áček P، Pérez-Esteve É، Martínez-Mañez R، Lhotka M، Kouřimská L، Pulkrábek J، Klouček P

. 2014 تأثير مضاد للفطريات من مكونات الزيوت الأساسية ضد رشاشيات النيجر عند تحميلها في دعامات السيليكا ميسوبوروس. J. Sci. أغذية زراعية . 95، 2824-2831. (دوى: 10.1002 / jsfa.7022) كروسريف ، PubMed ، الباحث العلمي من Google

. 1998 ملاحظات محاضرة حول علم الأحياء الدقيقة (آخر دخول: 10 أغسطس 2016). انظر http://www.mansfield.ohio-state.edu/

. 2001 أساسيات الكيمياء الحيوية . نيويورك ، نيويورك: وايلي. منحة جوجل

كامبل NA و Reece JB و Urry LA و Cain M و Wasserman SA و Minorsky PV و Jackson RB

. 2008 هيكل الغشاء وبيولوجيا الوظيفة ، 8th edn. مينلو بارك ، كاليفورنيا: بنيامين كامينغز. منحة جوجل

. 2008 توصيف المواد البوليمرية خارج الخلية التي تنتجها الإشريكية القولونية باستخدام دراسات البروتيوم الطيفي بالأشعة تحت الحمراء والتجميع. الجزيئات الحيوية 9، 686-695. (دوى: 10.1021 / bm701043c) كروسريف ، PubMed ، الباحث العلمي من Google

مو ح ، تانغ جي ، ليو كيو ، صن سي ، وانغ تي ، دوان ج

. 2016 جسيمات نانوية قوية مضادة للبكتيريا ضد البكتيريا الحيوية والبكتيريا داخل الخلايا. علوم. اعادة عد . 6، 18877. (دوى: 10.1038 / srep18877) كروسريف ، PubMed ، الباحث العلمي من Google

2015 كبسولات مثبتة بالجسيمات النانوية لعلاج الأغشية الحيوية البكتيرية. ACS نانو 9، 7775 - 7785. (دوى: 10.1021 / acsnano.5b01696) كروسريف ، PubMed ، الباحث العلمي من Google

Dohare S، Dubey SD، Kalia M، Verma P، Pandey H، Singh NK، Agarwal V

. 2014 نشاط مضاد للبيوفيلم لزيت الأوكالبتوس غلوبولوس المغلف بجزيئات السيليكا النانوية ضد بكتريا قولونية بيوفيلم. IJPSR 5، 5013-5018. منحة جوجل

. 2001 بيوفيلم عديدات السكاريد الخارجية: إطار قوي ولزج. علم الاحياء المجهري 147، 3-9. (دوى: 10.1099 / 00221287-147-1-3) كروسريف ، PubMed ، ISI ، الباحث العلمي من Google


الملخص

تمتلك مركبات الفلافونويد سابقة التكاثر مجموعة متنوعة من الأنشطة البيولوجية ، بما في ذلك أنشطة الاستروجين ومضادات الأكسدة ومضادات الميكروبات والسرطان. وبالتالي ، لديهم تطبيقات محتملة في المنتجات الغذائية أو الأدوية أو المكملات الغذائية ذات الأنشطة المعززة للصحة. ومع ذلك ، فإن الوفرة المنخفضة من مركبات الفلافونويد السابقة في الطبيعة تحد من استغلالها. لذلك ، قمنا بالتحقيق في احتمال إنتاج مركبات الفلافونويد السابقة في الخميرة خميرة الخميرة. كدليل على المفهوم ، ركزنا على إنتاج فيتوستروجين 8-برينيلنارينجين الفعال. مقدمة من فلافونويد prenyltransferase SfFPT من الصفيراء flavescens في سلالات الخميرة المنتجة للنارينجين من جديد إنتاج 8-برينيلنارينجين. لقد قمنا بتوليد العديد من السلالات مع زيادة إنتاج السلائف الوسيطة naringenin ، مما أدى أخيرًا إلى إنتاج 0.12 مجم لتر -1 (0.35 ميكرومتر) 8-prenylnaringenin تحت ظروف دورق الرج. تم تحديد عدد من الاختناقات في إنتاج الفلافونويد prenylated ومناقشتها.

قضية خاصة

هذه المقالة هي جزء من العدد الخاص لـ Advances in Bioflavor Research.


ما هي ميزة استخدام مضادات الجراثيم المشتقة من النباتات بدلاً من مضادات الجراثيم المشتقة من البكتيريا؟ - مادة الاحياء

وجهات النظر الحالية في اكتشاف الأدوية ضد السل من المنتجات الطبيعية

جوزيف موانزيا نغوتا 1 ، ريجينا أبياه-أوبونج 2 ، ألكسندر ك.نياركو 2 ، دوروثي يبواه-مانو 3 ، فيليس جي إيه أدو 4
1 قسم علم الأمراض السريري ، معهد نوغوتشي التذكاري للبحوث الطبية ، جامعة غانا ، غانا ، قسم الصحة العامة ، علم الأدوية والسموم ، كلية الطب البيطري ، جامعة نيروبي ، كينيا
2 قسم علم الأمراض السريري ، معهد نوغوتشي التذكاري للبحوث الطبية ، جامعة غانا ، غانا
3 قسم علم الجراثيم ، معهد نوغوتشي التذكاري للبحوث الطبية ، جامعة غانا ، غانا
4 قسم التجارب على الحيوانات ، معهد نوغوتشي التذكاري للبحوث الطبية ، جامعة غانا ، غانا

تاريخ النشر على شبكة الإنترنت23-فبراير -2017

عنوان المراسلة:
جوزيف موانزيا نجوتا
قسم علم الأمراض السريري ، معهد نوغوتشي التذكاري للبحوث الطبية ، جامعة غانا

مصدر الدعم: لا أحد، تضارب المصالح: لا أحد

DOI: 10.1016 / j.ijmyco.2015.05.004

حاليًا ، يُصاب ثلث سكان العالم بالعدوى الكامنة السل الفطري (MTB) ، في حين يتم الإبلاغ عن 8.9 & # 82119.9 مليون حالة السل الجديدة والانتكاسية (TB) سنويًا. كانت الاهتمامات البحثية المتجددة في المنتجات الطبيعية على أمل اكتشاف خيوط جديدة ومبتكرة مضادة للتدرن مدفوعة جزئيًا بزيادة الإصابة بالسلالات المقاومة للأدوية المتعددة من MTB والآثار الضارة المرتبطة بالخط الأول والثاني من الأدوية المضادة للتدرن. كانت المنتجات الطبيعية وستظل مصدرًا غنيًا للأدوية الجديدة ضد العديد من الأمراض. لا يمكن مقارنة عمق واتساع العوامل العلاجية التي ترجع أصولها إلى المستقلبات الثانوية التي تنتجها الكائنات الحية مع أي مصدر آخر للعوامل العلاجية. يتطلب اكتشاف جزيئات كيميائية جديدة ضد السل النشط والكامن من المنتجات الطبيعية نهجًا متعدد التخصصات ، وهو تحدٍ كبير يواجه العلماء في هذا المجال. للتغلب على هذا التحدي ، يجب تطوير واستخدام أحدث التقنيات في علم الفطريات وأدوات كيمياء المنتجات الطبيعية المبتكرة. توفر المراجعة الحالية ارتباطًا متصالبًا بأحدث الأدبيات في كلا المجالين وإمكانية تأثيرها على المرحلة المبكرة من اكتشاف الأدوية ضد السل إذا تم دمجها بسلاسة.

الكلمات الدالة: اكتشاف الأدوية ، المنتجات الطبيعية ، السل الفطري، السكون ، التجزئة الموجهة بالمقايسة الحيوية ، كيمياء المنتجات الطبيعية


كيف تستشهد بهذا المقال:
نجوتا جم ، أبياه-أوبونج آر ، نيكو إيه كيه ، يبواه-مانو دي ، أدو بي جي. وجهات النظر الحالية في اكتشاف الأدوية ضد السل من المنتجات الطبيعية. Int J Mycobacteriol 20154: 165-83

كيفية الاستشهاد بعنوان URL هذا:
نجوتا جم ، أبياه-أوبونج آر ، نيكو إيه كيه ، يبواه-مانو دي ، أدو بي جي. وجهات النظر الحالية في اكتشاف الأدوية ضد السل من المنتجات الطبيعية. Int J Mycobacteriol [مسلسل على الإنترنت] 2015 [تم الاستشهاد به في 23 يونيو 2021] 4: 165-83. متاح من: https://www.ijmyco.org/text.asp؟2015/4/3/165/200819

السل (TB) ، وهو مرض قديم شديد العدوى ، أعلن حالة طوارئ صحية عالمية من قبل منظمة الصحة العالمية (WHO) في عام 1993 ، ولا يزال ثاني أكبر قاتل في العالم ، حيث يصاب ما يقرب من ملياري شخص بالعدوى الكامنة. هؤلاء الأفراد المصابون بالعدوى الكامنة السل الفطري (MTB) تمثل ثلث سكان العالم. لا يزال أحد أكثر الأمراض المعدية فتكًا في العالم. تقدر منظمة الصحة العالمية أنه كان هناك ما يقرب من 9.0 مليون حالة جديدة و 1.5 مليون حالة وفاة في عام 2013 & # 8211360،000 منهم كانوا إيجابيين لفيروس نقص المناعة البشرية [1]. يتكون علاج السل بشكل عام من شهرين باستخدام أيزونيازيد وريفامبيسين وإيثامبوتول وبيرازيناميد (المرحلة المكثفة) ، تليها أربعة أشهر إضافية من العلاج بالإيزونيازيد والريفامبيسين (مرحلة الاستمرارية) [1]. لسوء الحظ ، ساهم عدم الالتزام بإجراءات العلاج الموصوفة وتركيبات الرعاية الصحية غير الفعالة في تطوير السل المقاوم للأدوية المتعددة (السل المقاوم للأدوية المتعددة ، والذي يُعرَّف بأنه مقاومة لما لا يقل عن أيزونيازيد وريفامبيسين ، وهما دواءان من الخطوط الأمامية يستخدمان لعلاج السل) التي تتطلب 20 شهرًا على الأقل من العلاج بأدوية الخط الثاني المكونة من كابريوميسين ، كاناميسين ، أميكاسين وفلوروكينولونات ، هذه أكثر سمية وأقل كفاءة ، مع معدلات علاج في حدود 60 & # 821175 & # 37 [2]. ريكاردي وآخرون. [3] يلاحظ أنه في عام 2012 ، أصيب 450.000 شخص بالسل المقاوم للأدوية المتعددة في العالم. تشير التقديرات إلى أن حوالي 9.6 & # 37 من هذه الحالات كانت شديدة المقاومة للأدوية (XDR-TB) ، مما يُظهر مقاومة إضافية لفلوروكينولون واحد على الأقل وعقار الخط الثاني القابل للحقن [1] ، [4]. في المرضى المصابين بالسل الشديد المقاومة للأدوية ، تكون فرص نجاح العلاج منخفضة للغاية [3] ، مما يعزز الحاجة إلى الاكتشاف العاجل لمركبات جديدة ذات نشاط ضد سلالات MTB المقاومة لأدوية الخط الثاني. في الآونة الأخيرة ، ادعت بعض التقارير ظهور سلالة & # 8216 السل المقاوم للأدوية تمامًا & # 8217 مع فرصة محدودة للعلاج الناجح [3] ، [5] ، [6] ، [7] ، [8]. علاوة على ذلك ، هناك حاجة ملحة للتوصل إلى اتفاق بشأن تعريف هذه السلالات من MTB ، لا سيما من حيث شدتها [9]. ومن ثم ، فإن البحث عن عقاقير جديدة مضادة للتدرن يمثل أولوية للتغلب على مشكلة مقاومة الأدوية والقضاء نهائيًا على مرض السل.

الأدوية الأربعة الرائدة من الدرجة الأولى

Isoniazid هو دواء أولي يتطلب التنشيط بواسطة MTB catalase-peroxidase كات جي إنزيم لتشكيل مركب INH-NAD الذي يثبط نيكوتيناميد أدينين ثنائي النوكليوتيد (NADH) - اختزال enoyl-ACP المعتمد (المشفر بواسطة جين inhA) لنظام سينثيز الأحماض الدهنية من النوع الثاني ، وهو لاعب رئيسي في مسار التخليق الحيوي لحمض الميكوليك لـ MTB [ 3]. يؤدي تثبيط إنزيم enoyl-ACP reductase (المشفر بواسطة جين inhA) إلى تراكم الأحماض الدهنية طويلة السلسلة وموت الخلايا [11]. الطفرات في كات جي وقد ثبت أن جينات inhA تساهم بحوالي 70 & # 37 و 80 & # 37 على التوالي في مقاومة أيزونيازيد في عزلات MTB السريرية [3] ، [10]. نظرًا لأن أيزونيازيد هو دواء أولي ، فإن نشاطه يتأثر بشكل كبير بالطفرات في كات جي إنزيم ، وعلى هذا النحو ، فإن الطريقة المعقولة لتجاوز آلية المقاومة هذه هي تصميم الأدوية التي لا تتطلب كات جي تنشيط الإنزيم ، ولكنه يستهدف بشكل أساسي إنزيم inhA. يثبط التريكلوسان إنزيم inhA [3] ، لكن فائدته كدواء مضاد للتدرن لم تكن ناجحة بسبب توافره الحيوي دون المستوى الأمثل [12]. تم تصنيع سلسلة من مشتقات التريكلوسان باستخدام نهج تصميم دواء قائم على التركيب [13]. من المثير للاهتمام أن نلاحظ أن هذه المشتقات أثبتت فعاليتها ضد السلالات السريرية والمخبرية المقاومة لـ MTB isoniazid. أفضل مثبط مشتق من التريكلوسان كان له أقل تركيز مثبط (MIC) بقيمة 4.7 & # 956 جم / مل ، وهو ما يمثل تحسنًا بمقدار عشرة أضعاف مقارنة بنشاط المركب الأصلي ، التريكلوسان ، ولكنه أقل فعالية من أيزونيازيد بقيمة MIC تبلغ 50 نانوغرام. / مل [3] ، [13]. يبحث المحققون عن عقاقير جديدة لمكافحة السل تستهدف جين inhA الذي لا يتطلب تنشيطًا بواسطة كات جي إنزيم بنمط حساسية مشابه لنمط أيزونيازيد. ستكون هذه مهمة صعبة لأن أيزونيازيد دواء قوي للغاية مضاد للتدرن [3]. تم تصنيع مثبطات جديدة لإنزيم inhA مؤخرًا ، لكن فعاليتها ليست بنفس جودة أيزونيازيد [14].

البيريدوميسين ، مركب طبيعي ينتج بواسطة Dactylosporangium fulvum مع نشاط محدد & # 8216cidal & # 8217 ضد البكتيريا الفطرية ، تم مؤخرًا إثبات أنه يستهدف إنزيم inhA [15]. علاوة على ذلك ، أظهرت المقاربات البيوكيميائية والهيكلية أن البيريدوميسين يثبط إنزيم inhA مباشرة عن طريق التثبيط التنافسي لموقع الارتباط NADH ، دون تنشيط بواسطة كات جي انزيم [3]. ومن المثير للاهتمام أن غالبية العزلات السريرية المقاومة للأيزونيازيد في MTB حساسة للبيريدوميسين ، مما يدعم فاعلية هذا الدواء [15].

يتداخل الإيثامبوتول (EMB) ([الشكل 2] ب) مع تخليق جدار الخلية الفطرية في MTB عن طريق تثبيط بلمرة الأرابينوجالاكتان ، وهو مكون هام لجدار الخلية في MTB [22]. علاوة على ذلك ، فإنه يقطع أيضًا استخدام مانح الأرابينوز عن طريق تثبيط النشاط الإنزيمي للرابيينوزيل ترانسفيراز أو تكوين متقبل أرابينوز في البكتيريا الفطرية [22]. تم إثبات أن مشغل embCAB مسؤول عن مقاومة الإيثامبوتول في MTB [23]. تجدر الإشارة إلى أن الإيثامبوتول يعمل بنفس المسار الذي يتم حظره بواسطة البنزوثيازينون ، ولكن ليس في نفس خطوة التمثيل الغذائي.

يتكون الريفامبيسين من مجموعة من الأدوية المضادة للبكتيريا وتشمل المشتقات التالية: ريفامبيسين ، ريفابنتين ، ريفابوتين وريفالازيل [3]. ترتبط بوحدة بوليميريز بيتا RNA البكتيري ، وبالتالي تتداخل مع النسخ [3]. تُمنح مقاومة الريفامبيسين في MTB من خلال الطفرات في منطقة 81-bp من جين rpoB (يرمز بيتا RNA polymerase) [24]. يعتبر كل من ريفامبيسين ([الشكل 1] ب) وإيزونيازيد من الأدوية الأساسية المستخدمة بشكل شائع لعلاج السل بالاشتراك مع جزيئات أخرى [3].

بعد إدخال الريفامبيسين في الاستخدام السريري ، تم تخفيض علاج السل النشط من 9 & # 821112 شهرًا إلى 6 أشهر ، بينما تم تقليل مدة علاج السل الكامن من 9 أشهر إلى 3 أشهر [10]. من المهم أن نلاحظ أن الريفامبيسين هو من بين الأدوية القليلة التي يمكن أن تقتل السلالات الخاملة (غير المتكاثرة) من MTB. تم تطوير ريفامبيسين (RIF) عن طريق فحص الخلايا الكاملة الأعمى في برنامج مكثف من التعديل الكيميائي للريفاميسين ، المستقلبات الطبيعية لـ Amycolatopsis mediterranei تحت إشراف البروفيسور بييرو سينسي [25]. نظرًا لأن rpoB هو جين أساسي في MTB ، و RNA polymerase هو هدف مثبت للعلاج المضاد للبكتيريا ومضاد السل ، سيكون من المعقول البحث عن مثبطات بوليميريز RNA جديدة مرتبطة في مواقع مختلفة عن تلك المستخدمة بواسطة ريفامبيسين [26]. في عام 1989 كتب البروفيسور بييرو سينسي: & # 8220 في العقدين الماضيين ، لم يتم تطوير أي دواء رئيسي جديد لمكافحة السل. على الرغم من أن التحسينات الهائلة في العلاج الكيميائي لمرض السل قد تحققت من خلال الدراسات الدقيقة لأنظمة الأدوية ، لا تزال هناك حاجة إلى عوامل جديدة نشطة للغاية. تم الحصول على الأدوية المضادة للبكتيريا المستخدمة حاليًا في علاج السل عن طريق الفحص الأعمى أو التعديل الكيميائي للمركبات النشطة. يجب تجربة الأساليب الأخرى القائمة على معرفة الكيمياء الحيوية لخلية المتفطرات. قد تمثل مكونات معينة للخلية ، مثل الأحماض الفطرية والأرابينوغالاكتان والببتيدوغليكان والميكوباكتين ، أهدافًا محددة للأدوية الجديدة المضادة لمرض السل [27]. & # 8221 بصفته عالمًا بارزًا ، فهم البروفيسور ب. سينسي ما فهمه علماء الأبحاث في هذا المجال من اكتشاف أدوية مرض السل ستتحقق بعد سنوات عديدة. بعد ذلك ، تم اكتشاف الكثير من المركبات التي تثبط خطوات محددة متضمنة في التركيب الحيوي لحمض الميكوليك أو أرابينوجالاكتان [28]. هناك حاجة حاليًا إلى عقاقير جديدة فعالة وآمنة لمكافحة السل وذلك من أجل: (1) تقصير مدة علاج السل (2) لتكون قادرًا على علاج سلالات السل المقاومة للأدوية (TDR) والمقاومة تمامًا للأدوية (3) لتكون قادرًا لعلاج السل الكامن (4) لتكون قادرًا على العمل بطريقة تآزرية مع الأدوية الأخرى المضادة للسل التي تدار بشكل مشترك ، وأخيراً (5) لتكون قادرًا على التعاطي بأمان مع العوامل المضادة لفيروس نقص المناعة البشرية.

أدوية جديدة للسل في طور الإعداد

تمت الموافقة على Bedaquiline (TMC-207) ، وهو diarylquinoline ، من قبل إدارة الغذاء والدواء (FDA) في ديسمبر 2012 كجزء من العلاج المركب لعلاج المرضى البالغين المصابين بالسل المقاوم للأدوية المتعددة ، وهو الآن في المرحلة الثالثة من التطور السريري ([الشكل 3]). يمكن اعتبار Bedaquiline أول دواء رئيسي معتمد من قبل إدارة الغذاء والدواء الأمريكية لعلاج السل في العقود الأربعة الماضية (40 عامًا). لقد ظهر بعد فحص النمط الظاهري للمركبات ضد MTB ، بينما تم تحديد الهدف المقابل من خلال تسلسل الجينوم الكامل لـ MTB و المتفطرة اللطخة المتحولات العفوية التي كانت مقاومة للجزيئات الكيميائية. ومن المثير للاهتمام ، أن الطفرات المقاومة أظهرت طفرات خاطئة في جين atpE (ترميز الوحدة الفرعية c لـ ATP synthase) [29]. يعمل Bedaquiline عن طريق تثبيط سينسيز ATP وله نشاط ضد سلالات MTB النشطة والخاملة. حاليًا ، من المعروف جيدًا أن مرضى السل المصابين بالسل الرئوي يمكن أن يكونوا مصابين بالعصيات الحديبة النشطة والكامنة ، ومن الصعب القضاء على الأخيرة باستخدام الأدوية المضادة للسل المستخدمة حاليًا ، وبالتالي يفضل تطوير سلالات مقاومة وعدوى كامنة [30]. من المعروف أن سينسيز ATP في الميتوكوندريا البشرية أقل حساسية بمقدار 20000 مرة للداياريلكوينولين من المتفطرات ، وبالتالي التحقق من صحة الإنزيم كهدف دوائي مهم ضد MTB [31]. ارتبط بيداكويلين بزيادة مخاطر الوفيات التي لا يمكن تفسيرها وإطالة فترة كيو تي ، لكنه لا يزال يمثل إضافة كبيرة لعلاج سلالات السل المقاوم للأدوية المتعددة والسل شديد المقاومة للأدوية ، خاصة في المناطق الموبوءة بالسل في العالم [32].

Delamanid (OPC67683) و premomanid & # 8211moxifloxacin & # 8211pyrazinamide (PA-824) هما نوعان من الإيميدازوكسازول الجديدان في المرحلة الثالثة من التطور الإكلينيكي ([الشكل 3]). كلا الجزيئين من الأدوية المؤيدة التي يعتمد تنشيطها على نيتريدوكتاز المعتمد على F420-deazaflavin (Ddn) الموجود في MTB. الشكل النشط لـ PA-824 هو جزيء des-nitroimidazole المقابل ، والذي يطلق أنواع النيتروجين التفاعلية ، مثل أكسيد النيتريك [33] ، مما يتسبب في تسمم الجهاز التنفسي الذي يبدو أنه حاسم لنشاطه اللاهوائي [34]. يحتوي PA-824 على نشاط ضد كل من عدوى السل النشطة والكامنة ، مما قد يؤدي إلى تقصير مدة علاج السل [35]. يثبط Delamanid التخليق الحيوي لحمض الفطريات ويرتبط بزيادة تحويل ثقافة البلغم لدى مرضى السل المقاوم للأدوية المتعددة [36]. بالإضافة إلى ذلك ، فقد ثبت أن Delamanid فعال مع سمية مقبولة عندما يقترن بالعقاقير الأخرى المضادة للسل في نظام MDR-TB [37].

Rifapentine ، وهو مشتق شبه اصطناعي لسيكلوبنتيل ريفاميسين ، يعمل عن طريق ربط الوحدة الفرعية b لبوليميراز الحمض النووي الريبي في MTB ، وهي آلية عمل يستخدمها أيضًا الريفامبيسين [38]. وهو أكثر فعالية من الريفامبيسين ضد MTB ، على حد سواء في المختبر وفي الجسم الحي بقيمة MIC في حدود 0.02 & # 82110.06 & # 956g / ml [39]. يظهر كل من ريفاميسين وريفابنتين مقاومة متقاطعة. وافقت إدارة الغذاء والدواء الأمريكية (FDA) في عام 1998 على عقار ريفابنتين بمعدل جرعة 10 مجم / كجم (عن طريق الفم) مرة أو مرتين أسبوعياً لعلاج السل النشط والكامن. هناك دليل سريري جيد يدعم استخدام ريفابنتين زائد أيزونيازيد لمدة 3 أشهر (نظام مرة واحدة في الأسبوع) ضد السل الكامن [40] ، ولكنه مختلف تمامًا لعلاج السل النشط ، حيث تمت الموافقة عليه من قبل إدارة الغذاء والدواء بجرعة من 600 مجم عن طريق الفم ، مرتين أسبوعياً خلال المرحلة المكثفة من علاج السل (شهرين) ، ثم مرة واحدة أسبوعياً خلال مرحلة المتابعة (4 أشهر) [41]. في الآونة الأخيرة ، أشارت الدراسات التي أجريت على الحيوانات إلى أن الاستخدام المتكرر للريفابنتين قد يعالج كلا من السل النشط والكامن في غضون 3 أشهر أو أقل ، ومع ذلك ، لا يمكن إعادة إنتاج النتائج المرصودة في التجارب السريرية التي تشمل البشر. علاوة على ذلك ، في الدراسات التي أجريت على الحيوانات ، ظهر أن إعطاء الدواء عن طريق الاستنشاق يحسن إزالة الدرنات في الرئتين ، لكن البيانات السريرية لم يتم إنشاؤها بعد [39].

SQ109 ، 1،2-إيثيلين ديامين في المرحلة الثانية من التجارب السريرية ([الشكل 3]). SQ109 فعال ضد سلالات MTB و MDR-TB و XDR-TB الحساسة [42] ، [43]. تم العثور على هذا المركب أثناء فحص مكتبة كيميائية 63،238 ، تم تصميمها حول الدوائية النشطة 1،2 إيثيلين ديامين من إيثامبوتول ، وهو دواء أساسي مضاد للتدرن ، على أمل تحديد جزيء كيميائي شبيه بالإيثامبوتول ، ربما يكون أكثر فعالية وأمانًا من إيثامبوتول. ومن المثير للاهتمام ، أن كلاً من الإيثامبوتول (EMB) و SQ109 لهما هياكل كيميائية مختلفة وآليات عمل مختلفة ، حيث يستهدف SQ109 MmpL3 (ناقل غشاء أساسي ينتمي إلى عائلة المقاومة والتشكيل والتقسيم [RND]) ، وظيفتهما الرئيسية (MmpL3) في MTB هو نقل مونوميكولات طرهالوز إلى الغلاف وبالتالي يتداخل مع تخليق حمض الميكوليك في الخلية الفطرية [44]. يساعد ناقل الغشاء (MmpL3) أيضًا في اكتساب الحديد من أجل بقاء البكتيريا الفطرية ، ويلعب مع Rv0203 دورًا مهمًا في امتصاص الهيم الفطري. حاليًا ، يُعتبر MmpL3 أحد أهم الأهداف في اكتشاف الأدوية ضد MTB ، حيث تم الإبلاغ أيضًا عن العديد من المركبات الأخرى الخاضعة للفحص قبل السريري لتثبيط الناقل ، مثل اليوريا في مرحلة تحسين الرصاص ([الشكل 3]).

انتقلت مركبات أخرى مؤخرًا من المرحلة الأولى إلى المرحلة الثانية من التجارب السريرية. وتشمل هذه PNU-100480 (Sutezolid) ([الشكل 3]) ، وهو نظير قريب من linezolid و AZD5847 ([الشكل 3]) ، وهو عضو في فئة oxazolidinone.

تم توثيق الحاجة الملحة لتطوير عقاقير جديدة للمساعدة في تقليل العبء العالمي للسل في الأدبيات الطبية الحيوية الحالية [45] ، [46] ، [47]. تمت مؤخرًا مراجعة السقالات الجديدة المضادة للبكتيريا من المنتجات الطبيعية [51]. Uplekar et al. [48] ​​يشير إلى أنه من أجل تحقيق أهداف منظمة الصحة العالمية الطموحة المتمثلة في خفض عدد وفيات السل بنسبة 95 و 37 و 90 و 37 الحد من حدوث السل بحلول عام 2035 ، فإن الحاجة إلى نظم دوائية أفضل وأكثر أمانًا لتقصير العلاج أمر أساسي. نظرًا لأن المنتجات الطبيعية هي نموذج مثبت لتطوير سقالات جديدة من الأدوية ، فقد حظيت باهتمام كبير كعوامل محتملة لمكافحة السل [46]. هناك مراجعات ممتازة للمركبات المضادة للتدرن المشتقة من المنتجات الطبيعية [49] ، [50] ، [51] ، [52] ، [53]. في مراجعة حديثة ، Mdluli et al. [54] يسلط الضوء على بعض الأمثلة البارزة الحديثة لمركبات المنتجات الطبيعية التي قد تكون أدلة مفيدة لاكتشاف أدوية مرض السل. تم الإبلاغ مؤخرًا عن عدد من النباتات الطبية ذات النشاط الواعد ضد السل [55]. تم العثور على الجزيئات الكيميائية النشطة بيولوجيًا المضادة للبكتيريا من العديد من الهياكل العظمية للمنتجات الطبيعية ، خاصة من التنوع البيولوجي النباتي ، ولكن أيضًا من الكائنات الحية الأخرى ، مثل الفطريات والكائنات البحرية. تم تلخيص العدد الكبير من الهياكل التي تم الإبلاغ عن وجود نشاط مضاد للسل في مراجعة حديثة تركز على المركبات التي تحدث بشكل طبيعي مع نشاط مثبط للنمو تم الإبلاغ عنه في المختبر تجاه MTB الحساسة والمقاومة [56]. مصدر آخر للمعلومات جدير بالملاحظة هو التجميع الشامل الأخير للأنواع النباتية التي تم الإبلاغ عن نشاط واعد لمكافحة السل [57]. بالنظر إلى عدم تقدم أي من المنتجات الطبيعية غير الميكروبية التي تم فحصها والتي لها نشاط ضد MTB نحو مرحلة التجارب السريرية في تطوير الأدوية المضادة للسل ، يبدو من المعقول تقييم أسباب الفشل. يمكن أن يكون سبب ذلك: (1) انخفاض غلة المركبات المنقاة (2) التعقيد الهيكلي الذي تظهره المنتجات الطبيعية ، مثل حدوث الأيزومرات الفراغية المتعددة ، على سبيل المثال ، ترايتيربينات التي تحتوي على عشرة أو أكثر من المراكز اللولبية (3) معظم الدراسات محض أكاديمي ولا يركزون على تطوير الأدوية (4) انخفاض النشاط الذي تظهره المركبات المعزولة مع MIC & # 8805 1 & # 956g / ml (v) وجود مثبطات عموم (مركبات غير محددة أو مثبطات عموم) (vi) صعوبات في عزل مركبات cidal الجديدة التي تعمل على أهداف جديدة يمكن أن تقلل من مدة العلاج و (7) الصعوبات في تحديد المركبات المضادة لمرض السل ذات ملامح أمان استثنائية دون مشكلة التفاعل الدوائي الدوائي التي تواجه حاليًا علاج السل وفيروس نقص المناعة البشرية المتزامن. بالإضافة إلى ذلك ، لا تحتوي الأدبيات الحالية على أي مؤشر على ملف تعريف الأمان للمركبات المعزولة كما هو موضح في مؤشر الانتقائية (SI) (النشاط المضاد للسل مقابل النشاط السام للخلايا في الثدييات) [58] ، وبالتالي هناك حاجة لتقييم ملف السمية من المنتجات الطبيعية النقية وشبه المنقاة [59] ، [60]. سيكون من الصعب مواجهة الصعوبات المذكورة أعلاه دون زيادة التمويل لاكتشاف أدوية مكافحة السل وبناء خط أنابيب أكثر قوة لتطوير الأدوية من خلال جهود دولية جيدة التنسيق.

يجب أن يكون المسار التقليدي لاكتشاف الأدوية المضادة للسل من المنتجات الطبيعية والأمراض المعدية الأخرى قادرًا على التغلب على عدد من التحديات. الأول هو الكشف الموثوق به عن الضربات الفعالة والآمنة والقدرة على تحديد المركبات المعروفة بالفعل في المراحل الأولى من برنامج اكتشاف الدواء. التحدي الرئيسي الثاني هو توضيح بنية de novo للكيانات الجزيئية الجديدة. لقد تم إحداث ثورة في التحدي الأخير من خلال التطورات الحالية في تقنيات التحليل الطيفي ، وتحديداً تقنيات الرنين المغناطيسي النيوتروني عالية الدقة (NMR). تم تطوير العديد من الأساليب لحل العقبة الرئيسية ، لكنها لا تزال تمثل تحديًا كبيرًا في اكتشاف الأدوية المضادة لمرض السل من المنتجات الطبيعية [58]. من أجل التأثير في المراحل المبكرة من اكتشاف الأدوية المضادة للسل من المنتجات الطبيعية ، يجب الاستفادة من التقنيات المبتكرة للتنقل السريع لزيارات المنتجات الطبيعية من خلال مراحل الاكتشاف والتحقق والعزل والتحسين الرائد والرائد [46] . في هذا الاستعراض ، يتم التعامل مع الاختناقات المذكورة أعلاه من منظور مختلف ، وذلك للتفكير في الطبيعة متعددة التخصصات حقًا للتحديات العلمية التي تمت مواجهتها في المرحلة الأولى من اكتشاف الأدوية المضادة للسل من المنتجات الطبيعية. وفقًا لذلك ، تركز المراجعة الحالية بشكل أكبر على التطورات الحديثة في مجال علم الفطريات وكيمياء المنتجات الطبيعية ، وعلى وجه التحديد لتقديم نظرة عامة على الطرق المتاحة حاليًا ، والإشارة إلى كيف يمكن لكلا المجالين التأثير على المرحلة المبكرة من دواء مكافحة السل. اكتشاف ، إذا تم دمجها بسلاسة ، فإن العقبات التي تواجهها حتى في بيئة يعمل فيها علماء الفطريات وكيميائيو المنتجات الطبيعية معًا ويظهرون أخيرًا بعض وجهات النظر لاكتشاف الأدوية ضد السل من المنتجات الطبيعية.

تمت مراجعة الاحتياجات والتحديات والتطورات الأخيرة نحو تطوير جزيئات كيميائية جديدة ضد السل مؤخرًا [2]. ما يقرب من 2 مليار شخص من سكان العالم مصابون بشكل كامن بـ MTB وهم معرضون لخطر إعادة تنشيط المرض النشط [61]. على الرغم من أن نظام العلاج الدوائي الرباعي غير المكلف والفعال الذي يشتمل على أيزونيازيد وريفامبيسين وإيثامبوتول وبيرازيناميد قد تم إدخاله منذ 40 عامًا ، إلا أن السل يستمر في الانتشار في كل ركن من أركان العالم [62]. لا يزال السل حالة طوارئ عالمية وفقًا لتقرير منظمة الصحة العالمية السابع عشر حول معدل الإصابة بالمرض في جميع أنحاء العالم [63]. على الصعيد العالمي ، هناك ما يقرب من 8 ملايين حالة جديدة و 2 مليون حالة وفاة سنويًا مرتبطة بالسل ، وبالتالي فإن المرض مسؤول عن وفيات بشرية أكثر من أي عدوى جرثومية أخرى. حدث تقدم كبير في علاج السل بعد إدخال الستربتومايسين ، تلاه حمض أمينيوساليسيليك (1949) ، أيزونيازيد (1952) ، بيرازيناميد (1954) ، سيكلوسرين (1955) ، إيثامبوتول (1962) وريفامبين (1963) على مدى 40 عامًا منذ. يحتوي نظام العلاج الحالي على العديد من العيوب ، بما في ذلك وقت العلاج المطول للقضاء تمامًا على البكتيريا (التعقيم). هذا يزيد من فرصة تطوير سلالات مقاومة MTB موثقة في كل بلد تقريبًا ينتشر فيه المرض. هذه العقبات ، بالإضافة إلى الانتشار المتزايد لسلالات MDR و XDR و TDR حاليًا ، تستدعي الحاجة الملحة للبحث عن عوامل جديدة لمكافحة السل وتطويرها. يظل السل الرئوي من المخاطر الصحية الرئيسية في آسيا وإفريقيا ومنطقة غرب المحيط الهادئ ، على الرغم من انخفاضه الحاد في العالم الغربي منذ بداية القرن العشرين [47]. استمر عدد من التحديات ، بما في ذلك الافتقار إلى الحوافز الاقتصادية بسبب غلبة المرض في العالم النامي ، في مواجهة اكتشاف العقاقير تجاه مرض السل. ومع ذلك ، كان هناك اهتمام متجدد من قبل العلماء وهيئات التمويل والدعوة رفيعة المستوى من قبل قسم وقف السل التابع لمنظمة الصحة العالمية والمنظمات الأخرى نحو اكتشاف عوامل جديدة ضد السل ، بالإضافة إلى إنشاء خارطة طريق لتطويرها [46 ]. وقد أدت هذه الجهود مؤخرًا إلى إلغاء الموافقة على عقارين جديدين: delamanid (المعروف سابقًا باسم OPC67683) و bedaquiline (المعروف أيضًا باسم TMC207 أو R207910) لعلاج سلالات MDR من MTB [45] ، [64].

وصفت المراجعات الحديثة التجزئة الموجهة بالمقايسة الحيوية في برامج اكتشاف أدوية السل [46] ، [65]. التجزيء الموجه بالمقايسة الحيوية هو عملية حديثة يتم استخدامها حاليًا لعزل وتحديد المبادئ النشطة بيولوجيًا من المستخلصات الخام للمنتجات الطبيعية. تتكون هذه العملية من خطوات متناوبة لتقييم نشاط المنتجات الطبيعية باستخدام المقايسات الحيوية والتجزئة الكيميائية ، ومن ثم يلزم إجراء انتقالات متعددة للعينات والتصميم المتبادل للبروتوكولات في واجهة الكيمياء الفطرية للمنتج الطبيعي. زادت حساسية إجراءات تجزئة المنتجات الطبيعية بشكل كبير خلال السنوات الأخيرة بسبب التقدم التكنولوجي الهائل في الكروماتوجراف والتحليل الطيفي ، مما أدى إلى فتح أزقة جديدة ليس فقط للمواد غير المدروسة ، ولكن أيضًا للأجناس التي تم فحصها مسبقًا ، مما يوفر الوصول إلى أنواع كيميائية غير متوقعة ومركبات جديدة [ 66]. وبالتالي فإن تطوير وتطبيق طرق جديدة لكيمياء المنتجات الطبيعية يعد أمرًا أساسيًا في برنامج اكتشاف الأدوية المضادة لمرض السل الموجه باختبار حيوي. من أجل تقديم إرشادات صحيحة ، فإن مقايسة المتفطرات هي النقطة الرئيسية الثانية التي يجب معالجتها ويجب اختيارها بحكمة فيما يتعلق بنقطة النهاية النهائية ، أي نشاط عامل مكافحة السل ضد MTB الخبيثة في الجسم الحي. باستخدام هذه الطريقة ، تم عزل ثلاثة مركبات قوية مضادة للجراثيم من أنجستيفوليا دراسينا [65] .

يمكن تصنيف سلالات الفطريات على نطاق واسع اعتمادًا على في المختبر النمو على النحو التالي: (1) سلالات غير ممرضة سريعة النمو و (2) سلالات ممرضة بطيئة النمو. ستكون المتفطرات الممرضة بطيئة النمو كائنًا حيويًا صعبًا لفحص عدد كبير من المرشحين خلال فترة زمنية قصيرة. لذلك ، تم تفضيل M. smegmatis بشكل رئيسي للأسباب التالية: (1) أنها غير مسببة للأمراض ويمكن التعامل معها بسهولة (2) معدل نمو M. smegmatis أسرع بحوالي ثماني مرات من MTB (iii) M. smegmatis يستخدم على نطاق واسع لفهم بيولوجيا MTB ، كما هو الحال في زراعة الخلايا والتعبير الجيني والمثابرة في مواجهة المجاعة للمغذيات و (4) تم العثور على MTB لعرض ملف تعريف حساسية للأدوية مشابه لـ MDR MTB [67]. لذلك ، فحص قابلية الخلية للخلية M. smegmatis يمكن أن يكون بمثابة & # 8216 بديل & # 8217 لـ MDR MTB. عادةً ما يعمل هذا الاختبار الحيوي على تحديد أولويات المرشحين الذين يمكن اختبارهم بشكل أكثر تحديدًا في المختبر المقايسات على سلالات MTB و MDR و XDR المسببة للأمراض. M. smegmatis تم استخدامه في الفحص الأولي لاختيار المركبات ذات النشاط ضد MTB [68]. في الآونة الأخيرة ، تم الإبلاغ عن أن نمط الحساسية M. smegmatis إلى العقارين الأساسيين الأساسيين ضد السل & # 8211 أيزونيازيد و ريفامبيسين & # 8211 مطابقان لعزلات MDR السريرية من MTB [46]. حساسية M. smegmatis على أساس الفحص يجب أن تكون محددة للغاية بحيث يمكن أن تكون النتائج المتولدة في هذا الاختبار الحيوي هدفًا محتملاً لكل من السلالات الحساسة وكذلك السلالات MDR من MTB [68].

MTB ، العامل المسبب للمرض الفعلي لمرض السل ، هو الكائن المستهدف المثالي في جهود اكتشاف الأدوية المضادة للسل. MTB H.37 Rv (ATCC 27294) ، سلالة خبيثة جيدة التوصيف متوفرة من American Type Culture Collection (ATCC ، Rockville ، MD) ، لديها ملف تعريف حساسية للأدوية يشبه إلى حد كبير غالبية عزلات MTB السريرية التي لم تطور مقاومة للأدوية مثل نتيجة العلاج المسبق بواحد أو أكثر من أدوية السل السريرية (عزلات سريرية حساسة).لا يعد اختبار الجزيئات الكيميائية ضد سلالات مقاومة الأدوية و MDR لـ MTB (السلالات الناتجة عن طفرات متدرجة محددة للأدوية الفردية) أمرًا بالغ الأهمية في الفحص الأولي ، نظرًا لأن هذه السلالات ليست & # 8220superbugs & # 8221 ، والتي تقاوم العديد من مضادات السل. العقاقير بحكم آلية واحدة ، مثل مضخات الانصباب الموجودة في البكتيريا الأخرى ، وبالتالي ، من المتوقع أن تكون عرضة لأي مركب جديد ، يعمل في موقع مختلف عن الموقع الذي يستخدمه دواء حالي لمكافحة السل. منذ MTB H.37Rv هي سلالة خبيثة ، يجب التعامل معها فقط في مختبر مستوى السلامة الأحيائية 3 (BSL-3) الذي يتطلب جهاز تعقيم بالتمرير ، وضغط هواء سلبي بالنسبة إلى غرفة الانتظار والممر ، وخزانة السلامة الأحيائية من الفئة 2. يجب أن يكون موظفو المختبر العاملون في مختبرات BSL-3 مدربين تدريباً جيداً ، ويجب أن يرتدوا معدات واقية ، والأهم من ذلك جهاز تنفس ، والذي سيقلل من مخاطر العدوى من MTB المتطاير. يتعاون معظم الباحثين في اكتشاف الأدوية المضادة للسل إما مع مؤسسة ذات منشأة BSL-3 ، أو يعملون مع كائن بديل عديم الفوعة ، مثل M. smegmatis (ATCC 19420) ، نظرًا لأن القليل من المؤسسات لديها مختبر BSL-3. اختار غالبية الباحثين في المنتجات الطبيعية العمل مع هذه البكتيريا الفطرية سريعة النمو والفتاكة والرحم ، والتي يشار إليها خطأً باسم MTB 607 في العديد من المنشورات. لكن، M. smegmatis تمتلك فقط درجة محدودة من التشابه مع MTB فيما يتعلق بقابلية الدواء. بدلاً من ذلك ، يمكن للمرء أيضًا استخدام MTB H.37 Ra (ATCC 25177) ، أو سلالة اللقاح شائعة الاستخدام ، المتفطرة البقريّة BCG (ATCC 35745) ، وكلاهما بطيء النمو وغير مُمْرِض ، والأهم من ذلك أنهما أكثر ارتباطًا بـ MTB H37Rv من المتفطرات سريعة النمو فيما يتعلق بملف حساسية الأدوية والتركيب الجيني. للعمل مع هذه السلالات ، يحتاج المرء فقط إلى خزانة للسلامة الحيوية من الدرجة الثانية وتقنيات ميكروبيولوجية سليمة [46].

إن وجود MTB في حالات فسيولوجية مختلفة أثناء العدوى ، وإمراستها وعلم الأحياء المعقد لها يفرض تحديات محددة لاكتشاف الأدوية ضد مرض السل. التحدي الرئيسي الأول هو عدم التجانس المدرك لسكان عصيات الحديبة في المضيف البشري فيما يتعلق بالحالة الأيضية كما ينعكس في معدل الضرب ، والذي يؤثر بشكل كبير على اختيار في المختبر و خارج الجسم الحي النماذج المستخدمة لفحص المركبات الجديدة المضادة لمرض السل [69]. نتيجة معينة لمعدل النمو البطيء هي الغموض حول & # 8216 ضعف & # 8217 من المسارات الأيضية ، مما يثير أسئلة حرجة. على سبيل المثال: (1) ما هو المسار الأيضي الضروري لبقاء كائن حي مستمر؟ و (2) أثناء الثبات ، هل تكون المستقلبات مطلوبة بتركيزات أقل بكثير؟

التحدي الثاني هو تحديد المركبات الآمنة للعلاج المطول. إن أخطر الآثار الجانبية للعلاج المطول هي التفاعلات بين الأدوية والعقاقير ، حيث عادة ما يتم تناول ملف تعريف السمية الخاص بالمركب في دراسات السلامة. يمكن دراسة هذا الجانب في وقت مبكر جدًا من سلسلة اكتشاف الأدوية ، وبالتالي يتحول تركيز التحدي غير المنجز إلى تحديد الكيانات الكيميائية ذات حركية القتل السريع ، نظرًا لأن هذا أمر أساسي للتقليل السريع للحمل البكتيري ، وفي النهاية ، التعقيم. ومن ثم ، يجب أن يكون المركب المضاد للسل قادرًا على العمل على MTB في حالات التمثيل الغذائي المختلفة. وتجدر الإشارة إلى أن نجاح اكتشاف الدواء القائم على الهدف يعتمد بشكل أساسي على جودة الهدف والمستوى الذي تم التحقق منه [70]. ومن ثم ، من هذا المنظور وأثناء استبعاد الريبوسوم ، تكشف مجموعة الأدوية المتوفرة حاليًا من الأدوية المضادة للسل فقط عددًا صغيرًا من الأهداف التي تم التحقق من صحتها بشكل شامل ، وهي RNA polymerase ، DNA gyrase ، enoyl- (acyl-carrier-protein) اختزال NADH المعتمد على NADH ، و سينثاس ATP [71] ، [72]. نظرًا للحاجة إلى زيادة فرص النجاح في وقت تكون فيه معدلات الاستنزاف عالية جدًا في المرحلة المبكرة من اكتشاف الأدوية المضادة للسل ، فإن الافتقار إلى المعلومات حول العديد من الأهداف التي تم التحقق من صحتها يفرض قيودًا شديدة على تنوع الجهود ، مما يثير أسئلة أساسية حول ما إذا كانت الأساليب البديلة & # 8216 جيل الرصاص & # 8217 أكثر ملاءمة لاكتشاف الأدوية المضادة لمرض السل. لحسن الحظ ، يمكن للتطورات في تقنية تسلسل الجينوم أن تزيد من مقاربات & # 8216 فحص الخلايا بأكملها & # 8217 لأنها يمكن أن تمكن من تحديد المزيد من الأهداف [29] ، [73]. وتجدر الإشارة إلى أن فحص الخلية الكاملة (فحص النمط الظاهري) يمكّن بوضوح من التعرف المبكر على المركبات ذات القدرة على القتل (نشاط cidal) وتطورها على طول مسار اكتشاف الدواء. بالإضافة إلى ذلك ، فإنه يسمح أيضًا باختبار المركبات على حالات التمثيل الغذائي المختلفة لـ MTB ، وبالتالي ، يتغلب على التحدي الرئيسي في وقت مبكر من مسار اكتشاف الدواء [74].

يتم التحايل على عدم القدرة على تحويل التثبيط المستهدف إلى تثبيط النمو ، وفي النهاية إلى موت الخلايا البكتيرية ، والذي يفسد النهج الذي يحركه الهدف ، من خلال تحديد المركبات ذات النشاط الفعال لمكافحة السل عن طريق فحص الخلية الكاملة ، والذي من الواضح أنه نقطة انطلاق ممكنة. لا يوفر نهج الفحص الشامل للخلايا معلومات فيما يتعلق بآلية العمل والسمية المحتملة ، وهو أمر مهم بشكل خاص في العلاج المضاد للسل بسبب طول فترة العلاج. يمكن تخفيف هذا التحدي جزئيًا عن طريق دمج فحص الخلية الكاملة مع النهج القائم على الهدف من خلال إجراء دراسات حول آلية العمل ودراسات السمية على المركب الفعال كامل الخلية الفعال. سيسهل ذلك تحديد المسار و / أو الهدف قبل بدء دراسات مكثفة حول الكيمياء الطبية. على الرغم من أن المزيد من الكيمياء الطبية يمكن ، في الواقع ، أن تكون مدفوعة بأنماط علاقة نشاط هيكل قائم على MIC ، فإن معرفة الهدف و / أو آلية العمل من شأنها أن تمكن من إجراء دراسات حول الآليات المحتملة للسمية [74]. بدلاً من ذلك ، هناك طريقة أخرى واعدة وهي استخدام أنظمة فحص عالية المحتوى [75] ، حيث يتم استخدام قارئ تصوير صفيحة ميكروية متحد البؤر لمراقبة تثبيط نمو البكتيريا الفطرية داخل الخلايا والتأثيرات السامة للخلايا المحتملة ، باستخدام الضامة المصابة في وقت واحد [74].

تشير فحوصات القرص الشائعة أو اختبارات الانتشار الجيدة المستخدمة في العديد من فحوصات مضادات الميكروبات للمنتجات الطبيعية فقط إلى وجود تثبيط للنمو عند بعض التركيز غير المعروف على طول تدرج التركيز ، ولكنها ليست كمية عند استخدامها لتقييم المستخلصات أو المركبات الجديدة. لا يمكن تفسير أحجام مناطق التثبيط إلا على أنها مؤشر على القابلية الميكروبية أو المقاومة في بيئة سريرية مع مضادات حيوية جيدة التوصيف ، نظرًا لأن حجم منطقة التثبيط يعتمد على كل من معدل انتشار العامل النشط ومعدل النمو من الكائن الحي المستهدف. يجب تجنب مقايسات الانتشار مع المتفطرات ، لأن هذه الكائنات الحية ذات جدار الخلية الغني بالدهون والكارهة للماء غالبًا ما تكون أكثر عرضة للمركبات الأقل قطبية [76]. ومن ثم ، فإن المركبات غير القطبية سوف تنتشر بشكل أبطأ من المركبات القطبية ذات الوزن الجزيئي المماثل في وسط أجار مائي مما يؤدي إلى مناطق تثبيط صغيرة نسبيًا ، مما يعطي انطباعًا خاطئًا عن ضعف النشاط الحيوي. بالإضافة إلى ذلك ، الوزن الجزيئي المنخفض النشط ، قد تنتشر المركبات القطبية لتحقيق التوازن قبل ظهور نمو مستعمرة البكتيريا الفطرية بطيئة النمو ، وإذا كان التركيز عند التوازن أقل من MIC ، فلن يكون هناك منطقة تثبيط وبالتالي ، فإن النشاط الحيوي المركب سوف لا تنعكس [46].

التخفيف الكلي والميكرو أجار

يسمح اختبار التركيزات المعروفة للمستخلصات أو الكسور أو المركبات في وسط أجار بتحديد قيمة MIC وتقدير النشاط الحيوي. ستنمو غالبية سلالات المتفطرات ، بما في ذلك MTB ، جيدًا على أجار Middlebrook 7H11 المضاف إليه حمض الأوليك والألبومين وسكر العنب والكتلاز (ملحق OADC ، ديفكو) ، باستثناء عدد قليل من الأنواع الحساسة. يمكن إضافة عينات الاختبار إلى الوسائط المنصهرة (المحتفظ بها عند 50 & # 176 درجة مئوية) عند التركيز النهائي 1 & # 37 v / v ثم إما 100 & # 8211200 & # 956l متوسط ​​إلى 96 صفيحة دقيقة ، 1.5 مل إلى 24 صفيحة ميكروية ، 4 مل إلى 6 أطباق ميكروية أو 20 مل تضاف إلى أطباق بتري القياسية بقطر 150 مم. بعد تصلب الوسط ، يمكن رصد اللقاح على السطح باستخدام ماصة صغيرة. الأحجام المقترحة من اللقاح هي: 1 & # 82115 & # 956 لترًا لـ 96 طبقًا جيدًا ، و 10 & # 956 لترًا للأطباق ذات 6 أو 24 جيدًا و 100 & # 956 لترًا (موزعة بالتساوي) لأطباق بتري القياسية. ثم يتم تحضين الصفائح عند 37 & # 176 درجة مئوية طوال الليل ، وبعد ذلك يمكن قلبها لبقية فترة الحضانة. العيب الرئيسي لهذا الاختبار الحيوي هو أنه يتطلب 18 يومًا على الأقل لاكتشاف نمو مستعمرات الفطريات بشكل واضح [46].

قياس التنفس الإشعاعي

يمكن تحديد تثبيط نمو MTB أو نموه في فترة أسبوع واحد من خلال تقييم مدى أكسدة حمض البالمتيك [1 & # 821114 C] في وسط المتفطرات السائلة Middlebrook 7H12 (BACTEC & # 8482 460TB 12B) إلى 14 CO2 ، والتي يتم قياسها باستخدام أداة BACTEC 460 [77]. كان قياس التنفس الإشعاعي هو الطريقة المفضلة في العالم المتقدم في الجزء الأكبر من الثمانينيات والتسعينيات من القرن الماضي لاختبار الحساسية للعقاقير الفطرية السريرية حيث تم الحصول على النتائج بسرعة أكبر مقارنة بطرق تخفيف الآجار التقليدية. يمكن مقارنة النشاط النسبي لعينات مختلفة عن طريق الاختبار بتركيز واحد أو تركيزين فقط وتحديد النسبة المئوية للتثبيط لـ 14 CO2 يمكن اختبار الإنتاج المرتبط بالضوابط الخالية من الأدوية [78] ، أو يمكن اختبار تركيزات متعددة وحساب MIC [79] ، [80]. يمكن أخذ القراءات على فترات زمنية مختلفة ، عادةً بعد كل 24 ساعة ، وبالتالي ، يمكن أن توفر هذه التقنية صورة حركية لنمو البكتيريا الفطرية أو تثبيطها. العيب الرئيسي لهذا الاختبار الحيوي هو التكاليف المتضمنة ، بما في ذلك تكاليف التخلص من النظائر في بعض البلدان والكميات الكبيرة من المتوسط ​​المطلوب ، والذي يتطلب بدوره اختبار كمية كبيرة من العينة ، عادةً في النطاق 50 & # 8211100 & # 956 لتر . تستخدم الأنظمة الأوتوماتيكية غير الإشعاعية الحديثة للاستخدام السريري مؤشرات استهلاك الأكسجين [81] ، وإنتاج ثاني أكسيد الكربون [82] ، أو ضغط مساحة الرأس [83] لتحديد نمو البكتيريا الفطرية أو تثبيطها ، ولكن بخلاف ذلك ، لها نفس عيوب BACTEC 460. تشمل هذه الأنظمة نظام قياس الإشعاع BACTEC TB-460 (بكتون ديكنسون ، سباركس ، إم دي ، الولايات المتحدة الأمريكية) ومؤخراً أنبوب مؤشر نمو البكتيريا (MGIT) (بيكتون ديكنسون) في كل من نسخته الآلية واليدوية. ] ، [85] ، [86] ، [87]. تكتشف تقنية قياس التنفس الإشعاعي النشاط الأيضي للبكتيريا الفطرية ، على عكس نمو البكتيريا الفطرية كمستعمرات على وسط صلب [46].

تخفيف المرق الدقيق

يوفر تقييم نشاط (قابلية التأثر) للمنتجات الطبيعية في شكل لوحة ميكروسكوبية 96 بئر مزايا متطلبات العينة الصغيرة ، والتكلفة المنخفضة ، والإنتاجية العالية ، بما في ذلك إمكانية الأتمتة. تزرع الفطريات عادة في مرق ميدلبروك 7H9 المضاف إليه 0.5 & # 37 جلسرين ، 0.1 & # 37 كاسيتون ، 0.05 & # 37 توين -80 و 10 & # 37 OADC (حمض الأوليك ، الألبومين ، الدكستروز والكتلاز) ، 7H9GC-Tween 80. يمكن تقييم نمو العديد من سلالات المتفطرات كميًا عن طريق التعكر في وسط سائل ، لكن ميل البكتيريا الفطرية إلى التكتل معًا يجعل هذا اختبارًا صعبًا. قد تضفي المستخلصات الخام من المنتجات الطبيعية بالإضافة إلى ذلك بعض التعكر على وسط الاستزراع ، مما يجعل تفسير النتائج أمرًا صعبًا. استخدام صبغة مؤشر الأكسدة # 8211 مثل Alamar Blue (Trek Diagnostics ، Westlake ، أوهايو) يجعل تخفيف المرق الصغير اختبارًا حيويًا أكثر سرعة وحساسية. تم اقتراح هذه الطريقة لأول مرة بواسطة Yajko et al. [88] في دراسة قيمت نشاط أدوية الخط الأول المضادة للسل (أيزونيازيد ، ريفامبيسين ، إيثامبوتول وستربتومايسين) ضد العزلات السريرية لـ MTB. تم استخدام Alamar blue ، وهو كاشف خاص ، سابقًا لدراسة كل من التمثيل الغذائي والحيوية في الكائنات الحية الدقيقة الأخرى [89] ، [90]. بالإضافة إلى ذلك ، فقد تم استخدامه أيضًا لقياس السمية في كل من الخلايا بدائية النواة وخلايا حقيقية النواة [91]. الكاشف (Alamar blue) لونه أزرق في حالة الأكسدة ، لكنه يتحول إلى اللون الوردي عند تقليله بسبب التمثيل الغذائي البكتيري. يمكن تمييز اللونين (الأزرق والوردي) بسهولة بالعين المجردة. دراسة Yajko et al. [88] كان مهمًا ، لأنه أظهر لأول مرة أن MICs من الأدوية الأساسية المضادة للسل (أيزونيازيد ، ريفامبيسين ، ستربتومايسين وإيثامبوتول) يمكن تحديدها بعد حضانة عزلات MTB لمدة أسبوع إلى أسبوعين فقط في وجود الاختبار المخدرات. هذه الطريقة اللونية (ألامار بلو) تم اقتراحها أيضًا من قبل كولينز وفرانزبلو [92] لاستخدامها في شكل صفيحة ميكروسكوبية ، فحص الصفيحة الزرقاء من ألامار (MABA) ، للفحص عالي الإنتاجية للمركبات ضد MTB و المتفطرة الطيرية ، وبواسطة Shawar et al. [93] ، للفحص السريع للمنتجات الطبيعية بحثًا عن نشاط ضد MTB. يمكن قراءة نتائج MABA بصريًا [94] ولا تتطلب أي أدوات. يمكن أيضًا قياس الشكل المختزل لأزرق ألامار قياسًا لونيًا عن طريق قياس الامتصاصية عند 570 نانومتر (وطرح الامتصاصية عند 600 نانومتر ذروة الشكل المؤكسد) ، أو قياس الفلورومتر [77] عن طريق الإثارة عند 530 نانومتر واكتشاف الانبعاث عند 590 نانومتر. لقد تبين أن الوضع أكثر حساسية. بالنسبة للقراءات غير الفلورية ، يمكن أيضًا إجراء اختبارات تخفيف المرق الدقيق باستخدام resazurin غير مملوك [95] ، [96] أو أصباغ تترازوليوم [97] ، [98] ، [99] ، [100]. ومن ثم ، فمن الممكن إجراء فحوصات عالية الإنتاجية ومضادة للسل في شكل صفيحة ميكروية باستخدام مقياس طيف الصفيحة الميكروسكوبية أو مقياس التألق بالصفائح الدقيقة ، والتي تعد مقايسات حيوية كمية أكثر قدرة على اكتشاف تثبيط جزئي ، مما يجعلها مثالية لتحديد النشاط النسبي للكسور من المستخلصات الخام لمنتج طبيعي باستخدام تركيز واحد أو اثنين.

طريقة مقايسة اختزال النترات / طريقة جرايس

مقايسة اختزال النترات (NRA) ، وهو نهج جديد للكشف اللوني السريع عن مقاومة الأدوية في مرض السل أو حساسية المنتجات الطبيعية ضد MTB ، يعتمد على قدرة MTB على تقليل النترات إلى النتريت. NRA ، والمعروفة أيضًا باسم طريقة Griess ، هي طريقة قديمة تم استخدامها أيضًا لتمييز MTB عن الأنواع الأخرى من المتفطرات [101]. تم إدخال هذه التقنية للكشف السريع عن مقاومة السل للأدوية [102] ، وكذلك في تقييم النشاط المضاد للسل للمنتجات الطبيعية. بعد دمج نترات البوتاسيوم في وسط الاستزراع ، يمكن اكتشاف اختزال النترات إلى نتريت باستخدام كواشف محددة ، والتي تنتج تفاعلًا ملونًا. كانت حساسية وخصوصية NRA ، مقارنةً بنظام BACTEC 460-TB ، 100 & # 37 و 100 & # 37 للريفامبيسين ، 97 & # 37 و 96 & # 37 للإيزونيازيد ، 95 & # 37 و 83 & # 37 للستربتومايسين ، و 75 & # 37 و 98 & # 37 للإيثامبوتول ، على التوالي ، عندما تم اختبار لوحة من سلالات MTB مع أنماط مقاومة مختلفة. كانت غالبية النتائج متاحة بعد الحضانة لمدة 7 أيام ، وتمكنت NRA من تحديد السلالات الأكثر مقاومة وحساسية بشكل إيجابي. في الآونة الأخيرة ، وصفت دراستان استخدام NRA مباشرة مع عينات البلغم. موسى وآخرون [103] قيمت NRA لاختبار الحساسية للأدوية (DST) لـ MTB مباشرة على عينات من البلغم إيجابية اللطاخة تحتوي على أكثر من عشرة عصيات سريعة الحمض (AFB) لكل مجال مجهري ، بينما Solis وآخرون. [104] قارن حساسية ونوعية NRA المباشر مع طريقة النسبة في وسط Lowenstein Jensen (LJ) لتحديد مقاومة أيزونيازيد (INH) وريفامبيسين (RIF) في عزلات إكلينيكية من MTB. أظهرت هاتان الدراستان جدوى تنفيذ NRA كطريقة مباشرة للكشف عن العزلات السريرية المقاومة للأدوية من MTB في عينات البلغم [87]. يمكن أيضًا استخدام مقايسة اختزال النترات (NRA) في اختبار الحساسية لـ MTB مقابل المنتجات الطبيعية.

تم استخدام قياس التدفق الخلوي لأول مرة في بداية الثمانينيات لدراسة تأثير العوامل المضادة للميكروبات في بدائيات النوى [105] ، [106]. زاد عدد المقالات العلمية التي تتناول الاستجابات المضادة للميكروبات للبكتيريا (بما في ذلك المتفطرات) والفطريات والطفيليات للعوامل المضادة للميكروبات بشكل كبير في التسعينيات ، بسبب التطورات المثيرة للاهتمام في مجال قياس التدفق الخلوي من مختبرات علم الأحياء الدقيقة [107]. أبلغ نوردن وآخرون عن استخدام كل من فلورسين ثنائي الأسيتات (FDA) (إستر ثنائي أسيتيل فلوريسئين غير فلوري يتحول إلى فلوري عند التحلل المائي بواسطة إسترات السيتوبلازم) تلطيخ وقياس التدفق الخلوي لاختبار حساسية MTB [108]. بالإضافة إلى ذلك ، بينا فاز وآخرون. ملطخ MTB مع SYTO 16 (بقعة حمض نووي فلورية لا تخترق إلا الخلايا المصابة بآفات شديدة في الغشاء) في غياب أو وجود الأدوية المضادة للبكتيريا [109]. يعد قياس التدفق الخلوي تقنية واعدة يجب أخذها في الاعتبار عند إعداد المختبر السريري للبكتيريا الفطرية ، نظرًا لأنها تعطي نتائج سريعة ، مقارنة بالوقت اللازم للحصول على نتائج حساسية MTB باستخدام المنهجيات الكلاسيكية ، والتي تعد حاليًا طويلة جدًا. العيب الرئيسي لهذه الطريقة هو ارتفاع تكلفة المعدات [105].

فحوصات الجينات المراسل

تم استخدام العديد من أنواع اليراع والخنفساء والقشريات والبكتيريا وطيور البحر لاستنساخ الجينات التي تشفر إنزيمات لوسيفيراز [110]. بالإضافة إلى ذلك ، تم أيضًا إدخال البروتينات الفلورية ، مثل البروتين الفلوري الأحمر (RFP) والبروتين الفلوري الأخضر (GFP) ، في البلازميدات الفطرية. تسمح هذه البروتينات بالتحديد السريع لجدوى البكتيريا عن طريق قياس التعبير عن البروتين الفلوري المُدخل [105]. لا تتطلب هذه البروتينات الفلورية ركيزة خارجية ، وبالتالي تبسيط القياس الكمي وتمكين التحديد السهل للنمو و / أو حركية التثبيط [111] ، [112]. يمكن تطبيق هذه الطريقة في تنسيق متعدد الآبار مع اكتشاف أكثر ملاءمة للإنتاجية العالية. تستخدم بروتينات Luciferase من اليراع [113] ، [114] ، [115] ومن Vibrio harveyi [116] ركائز لوسيفيرين و n-decylaldehyde ، على التوالي ، مع n-decylaldehyde التي تعطي إشارة أعلى في المتفطرات. إنزيمات Luciferase ليست مثالية للقياسات الحركية لأنها تتطلب إضافة ركيزة ، لكنها من المحتمل أن تكون مفيدة لاختبار الحساسية في الضامة المصابة بـ MTB [113] وفي الفئران [116] ، [117] منذ قياسات التلألؤ ، التي أجريت في مقياس اللمعان ، لديه نسبة إشارة إلى الخلفية أعلى بكثير مما يتم الحصول عليه من فحوصات التألق. يتمثل العيب الرئيسي للمقايسات الجينية للمراسل في أن استخدامها للتطبيقات التجارية غالبًا ما يكون محدودًا بسبب قيود براءات الاختراع ، وبالتالي فإن عدد مختبرات الميكوبكتيريولوجي التي تستخدم هذه الطريقة لاختبار حساسية MTB مقابل المنتجات الطبيعية صغير إلى حد ما [105].

اختبار حيوي لعصيات الحديبة الخاملة / اختبار أحيائي منخفض الأكسجين

التحديات العلاجية التي يتم مواجهتها في استئصال عصيات السل الخاملة في عدوى MTB هي المسؤولة عن العلاج المطول للمرض النشط [118] ، مما يجعل مكافحة السل صعبة [119]. تم تحديد سبات عصيات السل على أنه السبب الرئيسي لمعظم المشاكل المرتبطة بعلاج السل [120]. لا يمكن للأدوية الحالية المضادة للسل أن تقتل بشكل فعال الأشكال الخاملة من MTB [121] ، كما أن الافتقار إلى اختبار حيوي للجزيئات الكيميائية ذات النشاط ضد عصيات السل الخاملة كان عقبة أمام تطوير عقاقير جديدة ضد السل الكامن [121]. حاليًا ، يستخدم الباحثون جراثيم فطرية غير مكررة [122] ومتفطرات متكيفة مع نقص الأكسجين (بكتيريا فطرية متكيفة مع انخفاض الأكسجين) والتي تتعرض لاحقًا لاختبار عينات [123]. في ظل ظروف الاختبار ، تكون المتفطرات في حالة سكون. إل جي. لقد ابتكر واين نموذج واين & # 39s ناقص الأكسجين والذي يستخدم حاليًا من أجله في المختبر تقييم المركبات الجديدة ومع ذلك ، فإن هذه الطريقة تمتلك قدرة إنتاجية منخفضة [121] ، [124]. بالإضافة إلى ذلك ، تشو وآخرون. [125] قام بتنفيذ مقايسة عالية الإنتاجية تعتمد على التلألؤ واسترداد الأكسجين المنخفض لفحص المركبات ضد MTB غير المتكرر باستخدام سلالة MTB pFCAluxAB (هذه هي سلالة MTB H37Rv التي تحتوي على بلازميد مع محفز أسيتاميداز يقود الجين البكتيرية لوسيفيراز). في الآونة الأخيرة ، خان وساركار [121] ، أثناء استخدام نموذج واين & # 39s ناقص التأكسج ونشاط اختزال النترات في م. بوفيس طورت ثقافة BCG (Bacillus Calmette-Gu & # 233rin) بروتوكول فحص مضاد للتدرن بمرحلة خاملة في شكل صفيحة ميكروسكوبية [121].

تحليل كروماتوجرافي سائل عالي الأداء

يعتبر تحديد سلالات المتفطرة المعزولة من العينات السريرية عن طريق تحليل حمض الفطريات باستخدام HPLC وكاشف مشتق بروموفيناسيل بروميد للكشف عن الأشعة فوق البنفسجية طريقة راسخة [126] ، [127]. يمكن استخدام المساحة الكلية تحت حمض الفطريات (TAMA) كمقدر جيد لنمو الفطريات وأيضًا كوسيلة لاختبار الحساسية لـ MTB ، نظرًا لعلاقة خطية بين قمم كروماتوغرافيا TAMA لثقافة MTB وسجل CFU / mL وجد أنه موجود [128] ، [127]. على الرغم من أن الكواشف والإمدادات الخاصة بـ HPLC أرخص مقارنة بتلك اللازمة لطريقة قياس الإشعاع BACTEC ، فإن العيب الرئيسي لهذه الطريقة هو التكلفة الأولية للمعدات.

التقييم العددي

من المهم تصميم بروتوكولات تقييم تجريبية مستقلة عن مخطط التخفيف ذي الشقين النموذجي الذي يشيع استخدامه في اختبار الحساسية لـ MTB لغرض إنشاء علاقات هيكلية & # 8211. تم إنشاء مخطط تقييم رقمي يسمح بتحديد قيم MIC أكثر دقة واستقراء نقطة النهاية الدقيقة (99 & # 37 تثبيط النشاط الأيضي الفطري في BACTEC و 90 & # 37 تثبيط النمو في MABA) [129]. يسمح هذا المخطط أيضًا بالتقدير الكمي لبروتوكول العزل الموجه بالمقايسة الحيوية. تم التأكيد أيضًا على أهمية القياس الكمي للنشاط الحيوي في البحث عن عوامل جديدة لمكافحة السل من قبل Eloff [130] ، مشيرًا إلى أن القياس الكمي هو شرط لاكتشاف التأثيرات التآزرية [46].

المقايسات الحيوية الضامة

تم تقييم النشاط داخل الخلايا لمضادات الفطريات باستخدام في المختبر نماذج من عدوى البلاعم بأنواع المتفطرات. يمكن الحصول على البلاعم من البشر والفئران والأرانب. أنواع الفطريات المختلفة (MTB H37رع ، ح37Rv ، Erdman ، والعزلات السريرية ، م. بوفيس BCG و M. avium) ، وبالتالي مصدر تباين النتائج [131] ، [105]. يمكن استخدام خط الخلية أحادي الخلية THP-1 (ATCC / TIB-202) الذي تم الحصول عليه من American Type Culture Collection (Rockville ، MD) لفحص النشاط المثبط للمستخلصات الخام والكسور والمركبات المعزولة ضد العصيات داخل الخلايا. يتم التعامل مع خلايا THP-1 (5 & # 215 10 4 خلايا / مل) بـ 100 نانومتر من phorbol myristate acetate في دورق ثقافة لمدة 24 ساعة لتحويلها إلى بلاعم. يتم تحضين هذه الضامة لمدة 12 ساعة مع MTB H.37رع عند تعدد الإصابة 1: 100 للعدوى. تتم إزالة المتفطرات خارج الخلية عن طريق الغسيل مرتين بمحلول ملحي مخزّن بالفوسفات ثم إضافة وسط جديد إلى الخلايا الملتصقة. يمكن بعد ذلك إضافة المستخلصات الخام والكسور والمركبات المعزولة إلى هذه الضامة المصابة بتركيزات مختلفة. 2-نيتروإيميدازول يستخدم كعنصر تحكم إيجابي. يتم مراقبة تأثير عينات الاختبار عن طريق تحديد الحمل البكتيري داخل الضامة عن طريق تحليلها باستخدام المخزن المؤقت ناقص التوتر (10 مم HEPES ، 1.5 ملي MgCl2 و 10 ملي مولار بوكل) ونشر العينات على أطباق أجار دوبوس على فترات زمنية مختلفة لتعداد المستعمرات بعد 21 يومًا [121].

فحص حيوي للخلايا أحادية النواة في الدم المحيطي للمريض (PBMC)

قبل أن تتمكن الصيغ الجديدة (الزيارات) من المضي قدمًا في إثبات تقييم المفهوم في النماذج الحيوانية ، يمكن اختبار الفعالية ضد MTB بشكل أكبر في خارج الجسم الحي نموذج. في البلدان التي ينتشر فيها السل على نطاق واسع ، يمكن اعتبار الخلايا أحادية النواة في الدم المحيطي (PBMC) المعزولة من مرضى السل كسلعة جيدة جدًا. خارج الجسم الحي نموذج. سيتم الكشف عن الفعالية السريرية للمركب بشكل أفضل بعد تقييمه على مجموعات متنوعة من عينات المرضى في مراحل مختلفة من العدوى بسلالات مختلفة من المتفطرات (MDR أو XDR) في مجموعة متنوعة من حالات المرض. تحدث سلسلة من الأحداث المرضية المناعية بعد الإصابة بـ MTB كما ورد في العديد من الدراسات باستخدام نماذج حيوانية. على سبيل المثال ، تبين أن الخلايا المصابة من مرضى MTB النشطين تنتج كميات كبيرة من أكسيد النيتريك مقارنة بالخلايا غير المصابة [132] ، [133] ، [134]. بالإضافة إلى ذلك ، لوحظ ارتفاع IFN-gamma أيضًا في PBMC البشري المصاب بـ MTB. تُظهر النماذج الحيوانية المصابة بـ MTB تنظيمًا تنازليًا إجماليًا للتعبير الجيني المرتبط بالمناعة الفطرية والتكيفية. على وجه الخصوص ، تعبير نسبي أقل عن الجينات الفطرية الرئيسية المرتبطة بالمناعة ، بما في ذلك جينات المستقبل الشبيهة بـ Toll (جينات TLR 2 و 4) ، ونقص التعبير التفاضلي لنصوص الجينات المناعية التكيفية (IFNG ، IL2 ، IL4) وانخفاض التوافق النسيجي الرئيسي لقد ثبت أن التعبير الجيني من الفئة المعقدة (BOLA) والفئة الثانية (BOLA-DRA) متسق مع التعبير الجيني المناعي الفطري في م. بوفيس (BTB) الحيوانات المصابة [133]. سيؤثر هذا التنوع في التعبير الجيني التفاضلي على تأثير الأدوية في PBMC المعزولة من المرضى مقارنة مع نظرائهم من غير السل. ومن ثم ، تم اختبار مركبات جديدة على المريض PBMC خارج الجسم الحي سيكون الاختبار الحيوي قبل استكشاف النموذج الحيواني في الجسم الحي أكثر إفادة وفعالية من حيث التكلفة.

يجب أن تكون الأدوية المرشحة (الزيارات) للتقييم السريري نشطة في نموذج حيواني في الجسم الحي لعدوى MTB بجرعة يمكن تحملها جيدًا في الأشخاص. تصاب الفئران عادة بالعدوى عن طريق التعرض للهباء الجوي لسلالات خبيثة من MTB ، مما يؤدي إلى ترسب أعداد منخفضة من عصيات الحديبة في الرئتين [46]. بعد تكاثر عصيات الحديبة والاستجابة المناعية للمضيف ، يبدأ العلاج إما خلال مرحلة الضرب السريع (حتى شهر واحد) [135] ، [136] ، أو خلال مرحلة عدم التكاثر / السكون [119] ، والتي يمكن أن تستمر لأشهر. في الآونة الأخيرة ، تم وصف النماذج طويلة المدى التي تقيم قدرة التعقيم للمركبات الجديدة [137]. تم مؤخرًا وصف نماذج في الجسم الحي (الرئيسيات غير البشرية) التي يمكن استخدامها لتقييم نشاط المركبات الجديدة في العدوى الكامنة [138].

السمية هي سبب رئيسي لاستنزاف المركبات الجديدة في جميع مراحل عملية تطوير الدواء [139] ، [140]. في المختبر عادة ما يتم إجراء دراسات السموم قبل دراسات السمية الأولى في الجسم الحي ، وعادةً ما تتنبأ بالسميات المرتبطة بالمركب والتي يمكن أن تحد من تطور جزيء كيميائي جديد. بعد تقييم المركبات الجديدة للنشاط ضد MTB ، يجب تقييم السمية الخلوية لخطوط خلايا الثدييات لتحديد ما إذا كان المركب سامًا فقط للخلايا الفطرية (سمية انتقائية). هناك العديد من المقايسات الحيوية ، بما في ذلك طرق قياس الألوان التي تعتمد على تكوين منتجات شبيهة بالفورمازان [79] ، [141] ، بالإضافة إلى صبغة ألامار بلو وتحليل الإضاءة الحيوية للأدينوسين ثلاثي الفوسفات (ATP) ، والذي يبدو أنه يقدم الإجابة على تتطلب السرعة والبساطة ، مما يوفر الحساسية المطلوبة للكشف عن السمية الخلوية [142]. ومن ثم ، فإن تحديد السمية الخلوية العامة مهم في سياق اكتشاف الدواء ضد MTB.

يجب إجراء دراسات على مؤشر الانتقائية (SI) خلال المراحل المبكرة من اكتشاف الدواء ضد MTB. بناءً على التحديد المتزامن للمتوسط ​​العام للتركيز السام للخلايا لمركب جديد لخط خلية الثدييات (IC50) وأقل تركيز يثبط نمو الفطريات ، يمكن تحديد مؤشر انتقائية MIC (SI) [135] ، [143] كنسبة لكليهما (على سبيل المثال ، IC50 / MIC) ، ويؤخذ في الاعتبار خلال تجزئة النشاط الحيوي الموجهة للمبادئ النشطة في عملية اكتشاف الدواء. يرتبط نشاط الفطريات ذات الصلة على النحو المحدد من قبل معهد المعايير السريرية والمخبرية (CLSI) بقيم MIC أقل من 128 & # 956 جم / مل (& # 60128 & # 956 جم / مل) للمستخلصات النباتية ، أقل من 0.25 & # 37 ت / ت للأساسيات الزيوت ، وأقل من 25 & # 956M (& # 6025 & # 956M) للمركبات النقية [144]. يعتبر مؤشر الانتقائية الأكبر من 10 (& # 6210) ذا أهمية أثناء عملية اكتشاف الدواء ، خاصة بالنسبة لصناعة الأدوية [145].

اعتبارات بسيطة

تبدأ غالبية مجموعات المنتجات الطبيعية عادةً كمستخلصات خام من المواد الطازجة أو المجففة التي تتم معالجتها بطرق مختلفة باستخدام مذيبات كيميائية مختلفة. يتم استخلاص المركبات المحبة للماء باستخدام المذيبات القطبية ، مثل الميثانول أو الإيثانول أو أسيتات الإيثيل ، بينما يتم استخلاص المركبات المحبة للدهون باستخدام مذيبات غير قطبية ، مثل ثنائي كلورو ميثان (DCM) أو خليط من DCM والميثانول (1: 1). مستخلصات المنتجات الطبيعية الخام عبارة عن خلائط معقدة ربما من مئات المركبات المختلفة التي تعمل معًا في تآزر عندما يتم إعطاء المستخلص ككل. يشمل اكتشاف ضربات المنتج الطبيعي وتطورها نحو التطوير استخراج المستخلص الخام من المصدر ، والتركيز ، والتجميد بالتجميد (في الحالات التي تم فيها استخدام المذيبات القطبية) ، والتجزئة والتنقية لإنتاج مركب حيوي واحد. الكروماتوغرافيا هي واحدة من أكثر الوسائل المفيدة لفصل الخلائط المركبة المعقدة ، وأيضًا كطريقة لتنقية المركبات وتحديد الهوية. تشمل الطرق الكروماتوغرافية المستخدمة بشكل أساسي في عزل وتحديد المنتجات الطبيعية كروماتوغرافيا الطبقة الرقيقة (TLC) وكروماتوغرافيا العمود السائل (LC) وكروماتوغرافيا الغاز (GC) والكروماتوغرافيا السائلة عالية الأداء (HPLC) وكروماتوجرافيا السائل البروتيني السريع (FPLC) ) ، كروماتوغرافيا تقارب أيونات معدنية ثابتة وكروماتوجرافيا تقارب الأجسام المضادة [105].

قد يتم تشغيل تقنيات التجزئة التقليدية الموجهة بالمقايسة الحيوية لبضعة أشهر فقط في حملة فحص مكثفة ، وقد لا يكون تنقية المركبات النشطة ممكنًا في هذا الإطار الزمني ، وبالتالي ، يُنظر إليها عمومًا على أنها بطيئة جدًا بحيث لا تتناسب مع وتيرة فحص عالي الإنتاجية [146]. قد تعتمد أو لا تعتمد فرص النجاح في عزل مركب قوي مضاد للجراثيم من مستخلص شبه منقى على قيم MIC المتولدة. هناك احتمال أن يحتوي المستخلص الذي يحتوي على MIC منخفض نسبيًا (نشاط مرتفع) على كميات كبيرة من عدد قليل جدًا من المركبات الرئيسية النشطة بشكل معتدل ، في حين أن مستخلصات المنتجات الطبيعية الخام النشطة بشكل معتدل يمكن أن تحتوي على مكونات ثانوية ذات نشاط مرتفع. مثال على السابق هو مقتطف DCM من ألبينيا جالانجا بميكروفون 1 & # 956 جم / مل (H37Ra ، MABA) ، والذي يحتوي على 5 & # 37 من أسيتات أسيتوكسي شافيكول باعتباره المكون النباتي النشط الرئيسي مع MIC 1 & # 956 جم / مل. مثال على هذا الأخير هو المستخلص الخام الميثانولي من ريموتا أجوجا مع MIC من 100 & # 956 جم / مل (98 & ​​# 37 تثبيط في BACTEC / H)37Rv عند هذا التركيز) ، الذي ثبت أنه يحتوي على 0.1 & # 37 من إرغوستيرول -5 ، 8-إندوبيروكسيد مع MIC 1 & # 956 جم / مل [147]. لقد ثبت أن الجمع بين المستخلصات الخام الطبيعية النشطة بشكل معتدل مع نظائرها الاصطناعية يحمل إمكانات كبيرة لزيادة نشاط مضادات الميكروبات بمقدار أمرين من حيث الحجم ، وبالتالي زيادة الدافع لإجراء دراسات صارمة على المستخلصات ذات النشاط المعتدل. بالإضافة إلى ذلك ، فإن أي فئة هيكلية من المنتجات الطبيعية التي ثبت باستمرار أن لها نشاطًا ضد MTB يجب اعتبارها أكثر جاذبية لمزيد من التطوير كعامل مضاد للسل من مركب واحد ذو فاعلية عالية ، ولكن لم يتم الإبلاغ عن نشاط لمكافحة السل من النظائر الطبيعية ذات الصلة [46]. ومن ثم ، يجب أن يستخدم برنامج اكتشاف الأدوية العقلاني ضد MTB بروتوكول تجزئة موجه للمقايسة الحيوية قادر على عزل المكونات الثانوية من مستخلص خام ذي نشاط مثير للاهتمام ضد الكائن المستهدف ، MTB. الميزة الرئيسية لمثل هذا البروتوكول هي أنه تم تحسين عزل كميات كبيرة من سلسلة كاملة من المركبات المضادة للسل ذات الصلة هيكليًا بشكل كبير ، وبالتالي يمكن إنشاء علاقات الهيكل الأساسي & # 8211 النشاط بعد عزل الزيارات الأولية باستخدام تجزئة موجهة بالنشاط الحيوي. بالإضافة إلى ذلك ، يمكن أن يساعد مثل هذا البروتوكول في تحديد أولويات فئات المنتجات الطبيعية لمزيد من التقييم نحو تحديد المركب الرئيسي لنشاط مكافحة السل. على سبيل المثال ، قلويدات كاربازول هي فئة من المنتجات الطبيعية ذات نشاط معتدل ولكنه ثابت مع إمكانية التطور كمركبات الرصاص ضد MTB [148] ، [149]. ومع ذلك ، في سياق تجزئة النشاط الحيوي الموجهة من Micromelum hirsutum ، من الجدير بالذكر أن نهج & # 8220 أفضل ضرب & # 8221 ركز على مزيد من التطوير على ميكروموليد ، وهو حمض اللاكتون الدهني بميكروفون 1 & # 956 جم / مل ، مقابل نظرائه من الكربازول ذات النشاط الحيوي الأقل (MICs من 16 إلى & # 62 128 & # 956 جم / مل) [147].

توضيح هيكل المنتجات الطبيعية

يعتبر عزل وتنقية وتوضيح هيكل المركبات المستهدفة من مخاليط استخراج الخام المعقدة الاختناقات الرئيسية في كيمياء المنتجات الطبيعية. حاليًا ، الأدوات الطيفية الرئيسية لتوضيح بنية المنتجات الطبيعية هي تقنيات الرنين المغناطيسي النووي (NMR) وتقنيات التحليل الطيفي الكتلي (MS) ، بالإضافة إلى طرق الأشعة تحت الحمراء (IR) والأشعة فوق البنفسجية & # 8211 الطيفية المرئية (UV & # 8211Vis) ، والتي تتساوى أيضًا مهم [150]. أصبح توضيح هيكل المنتجات الطبيعية بكميات صغيرة دون مليغرام من المواد ممكنًا حاليًا من خلال التطورات الحديثة في تقنيات التحليل الطيفي بالرنين المغناطيسي النووي وتقنيات التصلب المتعدد. تم تقليل الخط الزمني لإلغاء التكاثر والعزل والتوضيح الهيكلي للمركبات الفردية الطبيعية الموجودة في المستخلصات الخام بشكل كبير من خلال التطور الأخير في تقنيات الواصلة ، والتي تجمع بين تقنيات الفصل مثل HPLC واستخراج المرحلة الصلبة (SPE) مع NMR و تقنيات التصلب المتعدد [151]. تكون حساسية طرق MS الحديثة الموصولة في نطاق النانو أو الرسم التخطيطي ، وبالتالي فهي أقل بكثير من حد الكشف للمركب النشط بيولوجيًا. تتوفر تقييمات ممتازة حول هذه الموضوعات [46] ، [152] ، [153] ، [154]. العوامل الرئيسية المساهمة في الرنين المغناطيسي النووي هي تكنولوجيا المغناطيس فائق التوصيل [155] ، وتكنولوجيا المسبار الدقيق والبريدي [156] ، [157] ، [158] ، وإنشاء عدد لا يحصى من التجارب متعددة النبضات التي تغطي جميع الجوانب الروتينية من تحديد الهيكل العضوي [159]. الحاجة إلى تحليل كميات المنتجات الطبيعية الكافية للمقايسة الحيوية المضادة لمرض السل (100 & # 956 جم لاختبار MABA المضاد للسل) تجعل طرق 1 H NMR الحساسة أكثر فائدة للتوصيف الهيكلي للمركبات النشطة في اكتشاف الأدوية الموجهة بالمقايسة الحيوية برنامج. جميع تجارب الكشف عن البروتون ، مثل 2D COZY و HSQC / HMBC و NOESY ، هي أدوات قوية في كل من إزالة النسخ وتوضيح هيكل المنتجات الطبيعية النشطة بيولوجيًا إلى جانب الروتين 1D البروتون NMR [160] ، [161] ، [162]. من المهم أن نلاحظ أن تجارب 1D NMR التي تطبق نبضات الإثارة الانتقائية كجزء من متواليات COZY و TOCSY و NOESY الكلاسيكية هي مصادر قيمة للمعلومات الهيكلية بشكل خاص [163] ، [164] ، [165]. على سبيل المثال ، فإن sesquiterpene 2،10-bisaboladiene- 1،4-endoperoxide من Rudbeckia laciniata ، وهو منتج طبيعي مضاد لمرض السل ، تم توصيفه باستخدام نبضات على شكل غاوس في تجربة COZY انتقائية [46].

إزالة التكرار وأخذ بصمات NMR من المنتجات الطبيعية

القوة الدافعة وراء الكثير من الأبحاث الكيميائية النباتية هي اكتشاف مركبات نشطة بيولوجيًا جديدة ذات نشاط مضاد للجراثيم. إذن ، يجب إجراء الاختبارات الحيوية من أجل تحديد المستخلصات النباتية الواعدة ، لتوجيه الفصل والعزل ، وأخيراً لتقييم المركبات الضاربة. إزالة النسخ (تحديد إيجابي للمنتجات الطبيعية المعروفة) ليس مهمة تافهة [166] ، [167] ، [168] ، [169] ، [170] نظرًا لأن مجموعات المعايير الشاملة نادرًا ما تكون متاحة. تحسين الكفاءة في إزالة نسخ المبادئ النشطة له أهمية مزدوجة. أولاً ، يقلل من الجهود الإجمالية أثناء التجزئة الموجهة بالمقايسة الحيوية ، نظرًا لأن عددًا صغيرًا نسبيًا من المكونات (في كل مكان) يمكن أن يطمس وجهة نظر كيميائيي المنتجات الطبيعية للمركبات الجديدة ذات النشاط المرغوب. ثانيًا ، يسمح بتركيز الموارد على توضيح المركبات الجديدة. ومع ذلك ، يجب أن يكون إزالة البيانات نهائية ، والتي في ضوء التعقيد الهيكلي للمنتجات الطبيعية (على سبيل المثال ، الايزومرات [المجسمة] المتعددة) تفرض متطلبات قوية على جودة وشمولية البيانات التحليلية [46]. أحد الأساليب المبسطة ولكن المهمة للغاية لهذه المشكلة هو إزالة المضاعفات عن طريق تحليل بصمة 1 H NMR لإشارات البروتون شديدة التعقيد [171] ، [172] ، [173]. تستخدم هذه المنهجية أنماط بصمات الأصابع المتميزة لإشارات البروتون الناشئة عن نظام دوران البروتون المعقد الموجود في معظم المنتجات الطبيعية. فائدة إضافية لتجارب 1D NMR الانتقائية المذكورة أعلاه هي أنها تسهل إزالة النسخ المركب من خلال توفير اقتران و / أو أطياف فرعية معدلة بالتحول لأطياف 1 H NMR المزدحمة غالبًا ومناسبة لإنشاء بيانات عالية الدقة لبصمة 1 H NMR تحليل [46].

فصل التيار المعاكس للمنتجات الطبيعية

في الوقت الحالي ، تشمل الطرق الكروماتوغرافية الأكثر شيوعًا المطبقة في فصل المنتجات الطبيعية: طرق كروماتوغرافيا الامتزاز ، مثل TLC LC GC HPLC FPLC كروماتوجرافيا تقارب أيونات معدنية مثبتة وكروماتوجرافيا تقارب الجسم المضاد [174] ، [175]. بالإضافة إلى ذلك ، يعتبر الفصل اللوني تقنية فصل أخرى تم تطبيقها حتى الآن من قبل عدد قليل من العلماء [46]. ومع ذلك ، فإن كروماتوغرافيا التيار المعاكس (CCC) وكروماتوغرافيا التقسيم بالطرد المركزي (CPC) ، والمعروفة مجتمعة باسم الفصل المعاكس ، هي أدوات قوية في كل من المراحل المبكرة والمتقدمة من عملية تجزئة مستخلصات المنتجات الطبيعية الخام [176]. هناك مراجعات حديثة حول هذا الموضوع [46] ، [177]. طرق CCC الحديثة ، مثل اللوني عالي السرعة للتيار المعاكس (HSCCC) وكروماتوجرافيا التقسيم بالطرد المركزي [السريع] ([F] CPC) ، تقلل الصعوبات التي ينطوي عليها اكتشاف دواء المنتج الطبيعي ، أي الخطوات باهظة الثمن وتستغرق وقتًا طويلاً لعزل المكونات النشطة ، ولديها القدرة على الحصول على دقة عالية [46]. تم تلخيص التطورات الآلية الحالية [178] ، [179] ، [180] ، والمعلومات المحدثة باستمرار متاحة على الإنترنت [181]. تتطور المزايا الرئيسية لكروماتوغرافيا التقسيم / التيار المعاكس من الافتقار الكامل لمرحلة ثابتة صلبة ، مما يترجم إلى عدم وجود أي امتصاص لا رجعة فيه [46] ، وهو أمر ضروري للبحث الحيوي الموجَّه عن مركبات الرصاص المضادة لمرض السل. يتم التخلص من فرص & # 8220losing & # 8221 النشاط المضاد للسل لمنتج طبيعي أثناء التجزئة [182] ، أو على الأقل تقليلها إلى الاحتمالية الحتمية للتحلل في المحلول في درجة حرارة الغرفة (راجع التبخر الدوراني في كل مكان في درجات حرارة مرتفعة) ، نظرًا لأن CCC / CPC يوفر وسيلة للتجزئة الخالية من الضياع ، والتي تكون ذات قيمة خاصة في سياق التجزئة الموجهة بالمقايسة الحيوية. أنشأ الدكتور يويشيرو إيتو (NHLBI / NIH) ، مخترع CCC الحديث مؤخرًا توثيقًا لا يقدر بثمن لأكثر من 30 عامًا من الخبرة في هذا المجال من خلال صياغة قواعده الذهبية الثمانية عشر والمزالق في اختيار الظروف المثلى لـ CCC [183] . يمكن تفسير الخسارة الكبيرة في النشاط بين الخطوات الكروماتوغرافية للتيار المعاكس / التقسيم اللاحقة بثقة حيث أن العديد من مكونات المنتجات الطبيعية تعمل في تآزر ، والتي تم تحديدها مؤخرًا كعامل رئيسي في شرح النشاط الكلي لمضادات الميكروبات للعوامل المشتقة من النباتات. . على سبيل المثال ، تم ربط التأثير المضاد للميكروبات لقلويدات البربرين الموجودة في مستخلصات بربريس مع فلافونوليجنان 5V-methoxyhydnocarpin ، والذي يثبط مضخات مقاومة الأدوية المتعددة [184]. أثناء استخدام ملف Oplopanax هوريدوس (Devil & # 39s Club) ، فقد تم إثبات أنه يمكن اختيار نافذة القطبية بحيث يمكن إثراء النشاط في جزء فرعي أقل من 90 & # 37 (وزن / وزن) [185]. وقد مكن هذا من التقييم في الجسم الحي لمنتج طبيعي خام مع تقرير أدبي واحد فقط عن نشاط مكافحة السل لمكونات القفزات [186]. في الآونة الأخيرة ، باستخدام CCC ، نافذة قطبية مكافحة السل من O. Horridus تم إثبات احتوائه على polyynes (polyacetylenes) بواسطة تحليل GC & # 8211MS ، بالإضافة إلى مكونات أخرى. علاوة على ذلك ، لم يُظهر أي سمية خلوية على خلايا فيرو ، وهو ليس فقط شرطًا أساسيًا للاختبار في الجسم الحي ، ولكنه جاء أيضًا كمفاجأة نظرًا لأن العديد من التقارير الأدبية ربطت بين البوليين والسمية الخلوية [46] ، [187] ، [188] ، [189] ] ، [190] ، [191] ، [192] ، [193] ، [194].

تستمر سلالات جديدة ومقاومة للأدوية من MTB في الظهور بسبب اللدونة الجينية الرائعة والقابلة للتكيف للميكروبات. كانت المنتجات الطبيعية وستظل مصدرًا غنيًا للأدوية الجديدة. تتوفر أدوات كيمياء المنتجات الطبيعية الجديدة والمقايسات الحيوية الفطرية الجديدة ذات الصلة بضراوة MTB وتنتظر التوظيف الشغوف من قبل فرق البحث متعددة التخصصات. تسمح مجموعة أدوات علم الفطريات الموسعة باكتشاف الأنشطة البيولوجية ذات الصلة على مستويات مختلفة تتوافق مع المرض ، بما في ذلك النمو الفطري (MABA) ، والدفاع عن النفس الممرض (LORA) ، والدفاع المضيف (البلاعم) ، وفي الجسم الحي (الحيوان) بغض النظر عن مصدر المنتج الطبيعي (نباتي أو بحري أو حيواني أو كائنات دقيقة). سيتمكن الباحثون في جميع المؤسسات من المساهمة في تطوير فهم واستخدام موارد المنتجات الطبيعية ، بسبب التطوير المستمر للمقايسات الحيوية الحساسة والسريعة وغير المكلفة. يمكن تصميم الإجراءات المبتكرة للتحليل التحضيري من خلال الاستفادة من المقايسات الحيوية الجديدة والفصل الجديد (CCC / CPC) وطرق الكشف والتعرف (NMR) الموضحة في هذه المراجعة من أجل تحسين الوصول إلى التنوع الكيميائي المناسب للطبيعة والاستفادة منه. ستفتح هذه الأساليب آفاقًا جديدة في اكتشاف العوامل المفيدة المضادة لمرض السل عند دمجها بسلاسة. إن التواتر المتزايد لمرض السل المقاوم للأدوية المتعددة والسل الشديد المقاومة للأدوية وحاليًا السل المقاوم للأدوية تمامًا والخيارات العلاجية المحدودة تؤكد الحاجة الملحة إلى أدوية جديدة لمكافحة السل.

أخيرًا ، تجدر الإشارة إلى أنه ، من منظور كل من الأحياء / الفطريات وكيمياء المنتجات الطبيعية ، فإن الجوانب المختلفة للتحديات التعاونية التي تمت مواجهتها أثناء اكتشاف الأدوية ضد السل من المنتجات الطبيعية قابلة للتطبيق على الأمراض المعدية الأخرى. من المعتقد أن التفاعل بين طرق كيمياء البكتيريا الفطرية والطبيعية المبتكرة المطورة بشكل مشترك على كلا الطرفين سيؤثر بشكل كبير على المراحل المبكرة لاكتشاف الأدوية المضادة للسل ويزيد من فرص النجاح.

ليس لدينا تضارب في المصالح لنعلن.

نود أن نعرب عن تقديرنا لمؤسسة بيل وميليندا جيتس ، من خلال زمالة معهد نوغوتشي التذكاري للبحوث الطبية في مجال الأمراض المعدية للحصول على الدعم والرؤية المشتركة لتقديم مساهمة من خلال تكريس موارد كبيرة نحو مسعى اكتشاف دواء السل.


شاهد الفيديو: الاسبتالية من ألمانيا - كارثة المضادات الحيوية! (كانون الثاني 2022).