معلومة

8.1: مقدمة في التعرف على البكتيريا باستخدام وسائط الثقافة - علم الأحياء


نتائج التعلم

  • تحديد ووصف وسائط الثقافة لنمو البكتيريا والتعرف عليها ، بما في ذلك أمثلة على الوسائط الانتقائية و / أو التفاضلية.

التعرف البكتيرية مع وسائل الإعلام الثقافة

إحدى الطرق الشائعة للتعرف على البكتيريا هي استخدام الوسائط المتخصصة. بالعودة إلى الوحدة الثانية ، تعرفت على هذه الفكرة. إليك خلاصة: في علم الأحياء الدقيقة السريرية ، من المهم غالبًا اكتشاف وجود ميكروبات معينة مرتبطة بمرض أو سوء الصرف الصحي ، لهذه المهمة ، يتم استخدام وسائط انتقائية و / أو تفاضلية. وسائط انتقائية يمنع نمو البكتيريا غير المرغوب فيها ويشجع على نمو الميكروبات المرغوبة. على سبيل المثال ، يمكن استخدام أجار البزموت كبريتات للعزل السالمونيلا التيفية من البراز. كبريتات البزموت يثبط البكتيريا موجبة الجرام ومعظم البكتيريا المعوية سالبة الجرام (بخلاف S. typhi).

الصورة 1: أجار البزموت كبريتات

الوسيط التفاضلييجعل من السهل تمييز مستعمرات الكائنات الحية الدقيقة التي تريدها عن المستعمرات الأخرى التي تنمو على نفس الصفيحة. أجار الدم (الذي يحتوي على خلايا الدم الحمراء / كرات الدم الحمراء) هو وسيلة تستخدم غالبًا لتحديد الأنواع البكتيرية التي تدمر كرات الدم الحمراء. هذه الأنواع ، مثل الأبراج العقدية، التي تسبب التهاب الحلق ، ستظهر حلقة واضحة حول مستعمراتها حيث تخلصت من خلايا الدم المحيطة.

الصورة 2: طبيعية مختلطة مع فلورا الجهاز التنفسي العلوي العقدية محيط. يشير وجود مستعمرات بيتا الحالة للدم (مناطق واضحة حول المستعمرات الصغيرة) إلى احتمال حدوث ذلك الأبراج العقدية عدوى. صورة لريبيكا بوكستون ، جامعة يوتا ، سولت ليك سيتي ، يوتا.

أنواع الوسائط الانتقائية والتفاضلية

A. مانيتول ملح أجار

في بعض الحالات، انتقائي و التفاضليه يتم دمج الخصائص في وسيط واحد. إذا أردت عزل البكتيريا الشائعة ، المكورات العنقودية الذهبية واعلم أنه يتحمل تركيزات عالية من كلوريد الصوديوم ويمكنه تخمير الكربوهيدرات مانيتول لتكوين الأحماض ، يمكنك استخدام وسط انتقائي تفاضلي يسمى “مانيتول ملح أجار أو MSAالذي يحتوي على 7.5٪ كلوريد الصوديوم ، وسوف يثبط نمو الميكروبات المنافسة وبالتالي اختر ل (أو تفضل نمو) بكتريا المكورة العنقودية البرتقالية. MSA مالح جدًا للعديد من الميكروبات. يحتوي الوسيط أيضًا على مؤشر الأس الهيدروجيني ، عندما ينخفض ​​الرقم الهيدروجيني ، مثل عندما يتخمر المانيتول في الوسط إلى أحماض ، فإنه سيتغير اللون. وهكذا ، فإن مستعمرات تخمير المانيتول بكتريا المكورة العنقودية البرتقالية نكون متباينة من مستعمرات البكتيريا التي لا تخمر المانيتول. البكتيريا التي يمكن أن تنمو بتركيز عالٍ من الملح و يمكن التعرف على تخمر مانيتول إلى حمض على MSA عن طريق تغيير اللون ، كما هو موضح في هذه الصورة 3-بكتريا المكورة العنقودية البرتقالية يظهر الخط في النصف الأيسر من اللوحة نمو البكتيريا واللون الأصفر يشير إلى تخمر المانيتول ، بينما في النصف الأيمن من اللوحة ، العقدية الدوران غير قادر على النمو على هذا الوسط (لأنه لا يتحمل تركيز الملح العالي) وبالتالي لا توجد مستعمرات والوسائط تبقى بنفس اللون ، وهي حمراء زهرية.

صورة 3: أجار ملح مانيتول تلقيح المكورات العنقودية الذهبية على الجانب الأيسر من الصفيحة ويظهر تخمر مانيتول (وسط أصفر) وتلقيح به العقدية الدوران على الجانب الأيمن من الصفيحة ، والذي لا يظهر أي نمو (لا توجد مستعمرات مرئية ، يظل الوسط ورديًا محمرًا). صورة آن واي تسانغ وباتريشيا شيلدز ، جامعة ماريلاند ، كوليدج بارك ، دكتوراه في الطب.

شاهد الفيديو 1: شرح مانيتول سالت أجار

شاهد الفيديو 1: شرح مانيتول سولت أجار وعرض أمثلة على الألواح. فيديو للدكتور جاري كايزر (CCCB). (1:38) URL: https://youtu.be/kG1_Tf5Vpc0

ب. ماكونكي أجار

ماكونكي أجار مثال آخر على الوسيط الانتقائي والتفاضلي ، يتم استخدامه لعزل وتمييز العصي المعوية سالبة الجرام. يحتوي أجار MacConkey على أملاح الصفراء والبنفسج الكريستالي التي تثبط البكتيريا الموجبة للجرام ولكنها تسمح بنمو البكتيريا سالبة الجرام. بهذه الطريقة ، تعمل هذه المواد الكيميائية بشكل انتقائي ، لتثبيط مجموعة واحدة ولكنها تعزز نمو مجموعة أخرى.

يحتوي MacConkey أيضًا على سكر اللاكتوز ومؤشر درجة الحموضة أحمر محايد يتحول إلى اللون الوردي / الأحمر في ظل الظروف الحمضية. وبهذه الطريقة ، فإنه يميز بين مخمرات اللاكتوز من المخمرات غير اللاكتوز.

الصورة 4: أجار ماكونكي صفيحة مُلقحة بمخمر اللاكتوز سالب الجرام (مستعمرات / خط وردي) الإشريكية القولونية والتخمير غير اللاكتوز سالب الجرام (خارج المستعمرات الصفراء) السراتية الذابلة. صورة ديفيد ميلر وباتريك هانلي ، كلية هارتويك ، أونونتا ، نيويورك)

شاهد الفيديو 2: شرح MacConkey أجار

شاهد الفيديو 2: وأوضح أجار MacConkey وعرض أمثلة لوحة. جاري كايزر (CCCB). (4:32) URL: https://youtu.be/yInQ9jApAlU

أجار يوزين ميثيلين الأزرق (EMB)

يوزين ميثيلين أزرق (EMB) أجار هو وسيط انتقائي وتفاضلي يستخدم لعزل البكتيريا المعوية سالبة الجرام والتمييز بينها. يحتوي EMB على صبغتين - Eosin و methylene blue - والتي تعمل كعوامل انتقائية لتثبيط البكتيريا موجبة الجرام ولكنها تسمح بنمو البكتيريا سالبة الجرام.

يحتوي EMB أيضًا على سكريات اللاكتوز والسكروز - ويميز بين مخمر اللاكتوز أو السكروز من غير المخمر. تشكل المخمرات مستعمرات ملونة وتشكل غير المخمرة مستعمرات عديمة اللون ، على غرار أجار MacConkey.

الصورة 5: صفيحة أجار Eosin-methylene blue (EMB) مُلقحة بـ الإشريكية القولونية (بكتيريا القولون سالبة الجرام) تظهر نموًا جيدًا للمستعمرات ذات اللون الأزرق الداكن والأسود مع لمعان أخضر معدني يشير إلى تخمر قوي لإنتاج اللاكتوز والحمض الذي يترسب في الصباغ المعدني الأخضر. صورة ناوارات تشيبثام ، جامعة طومسون ريفرز ، كاملوبس ، كولومبيا البريطانية ، كندا.

د. Hektoen Enteric (HE) أجار

Hektoen Enteric (HE) أجار هو وسيط انتقائي وتفاضلي يستخدم لعزل والتمييز بين مسببات الأمراض المعوية السالمونيلا و شيغيلا. يحتوي وسط HE على تركيزات عالية من الأملاح الصفراوية كعوامل انتقائية تثبط البكتيريا موجبة الجرام ولكنها تبطئ أيضًا نمو الجراثيم المعوية الطبيعية. يحتوي HE على السكريات اللاكتوز والسكروز ، مؤشر الرقم الهيدروجيني بروموثيمول الأزرق ، ثيوسلفات الصوديوم وأملاح الحديديك. بكتريا قولونية والبكتيريا القولونية ذات الصلة تخمر اللاكتوز (والسكروز) مكونة مستعمرات برتقالية زاهية إلى مستعمرات السلمون الوردي. السالمونيلا والشيغيلا هي عبارة عن تخمير غير لاكتوز وتشكل مستعمرات خضراء أو زرقاء. السالمونيلا تنتج المستعمرات كبريتيد الهيدروجين (H2S) الذي يتفاعل مع الحديد في الوسط ليشكل كبريتيد الحديد (FeS) مكونًا مستعمرات ذات مراكز سوداء.

جميع وسائل الإعلام التي ناقشناها مخصصة لعزل وتمييز مسببات الأمراض المعوية الشائعة التي يمكن أن تسبب المرض لدى البشر.

صورة 6: أجار هيكتوين المعوي معقمة وغير ملقحة

الصورة 7: السالمونيلا المعوية على أجار هيكتوين المعوي. لاحظ المركز الأسود للمستعمرات الشفافة ، مما يشير إلى إنتاج H2S في غياب تخمير الكربوهيدرات. جميع الأنماط المصلية السالمونيلا يكون هذا المظهر على أجار Hektoen المعوي باستثناء النمط المصلي ريفي، وهو عبارة عن حرف H ضعيف2منتج S. صورة جان هودزيكي ، المركز الطبي بجامعة كانساس ، كانساس سيتي ، كانساس

الصورة 8: المعوية الهوائيات على أجار Hektoen المعوي. لاحظ المستعمرات الصفراء البرتقالية ، مما يشير إلى تخمر واحد على الأقل من الكربوهيدرات الموجودة في الوسط. يشير عدم وجود مستعمرات سوداء إلى عدم وجود H2إنتاج S. يرجع الضباب البرتقالي حول المستعمرات إلى ترسيب الأملاح الصفراوية بواسطة الكائن الحي. مظهر ال E. الهوائيات على أجار Hektoen المعوي نموذجي لمعظم القضبان المعوية سالبة الجرام غير المسببة للأمراض. صورة جان هودزيكي ، المركز الطبي بجامعة كانساس ، كانساس سيتي ، كانساس.


الغرض الأساسي من وسائط الثقافة المستخدمة في علم الجراثيم الروتيني

أنواع مختلفة من وسائط الزراعة البكتريولوجية المستخدمة في معمل الأحياء الدقيقة

تم التحديث الأخير في 21 يونيو 2021

في منشور المدونة هذا ، قمت بإدراج وسائط الثقافة الشائعة الاستخدام في مختبر علم الجراثيم والغرض الأساسي منها. لا يزال هناك الكثير من وسائل الإعلام الثقافية التي لم يتم ذكرها في هذا المنشور والتي قد تكون أو لا تكون تعديلات وسائل الإعلام التي تمت مناقشتها أدناه. أنواع مختلفة من وسائط الزراعة البكتريولوجية المستخدمة في معمل الأحياء الدقيقة

  1. أجار الصفراء إسكولين (BEA): يتم استخدامه للعزل التفاضلي والتعرف الافتراضي للمكورات العقدية المجموعة D والمكورات المعوية.
  2. الصفراء إسكولين أزيد أجار مع فانكومايسين: وسائط الثقافة الانتقائية والتفاضلية شائعة الاستخدام في زراعة المكورات المعوية المقاومة للفانكومايسين من العينات السريرية والمراقبة. : أجار الدم يستخدم لزراعة الكائنات الدقيقة الحساسة. إنها وسيلة تفاضلية تساعد على تصنيف / التعرف على البكتيريا على أساس أنواع انحلال الدم (ألفا أو بيتا أو عدم انحلال الدم) هدية.

شارك هذا:

متعلق ب

كن أول من يعلق

هل لديك اي استفسار؟ من فضلك اترك لي في قسم التعليقات أدناه. سأكون سعيدا لقراءة تعليقاتكم والرد. إلغاء الرد

يستخدم هذا الموقع Akismet لتقليل البريد العشوائي. تعرف على كيفية معالجة بيانات تعليقك.


البحوث الأصلية المادة

دانيال مدينا * ، جينيفر ب. زاكاري جاجوسكي ، ماثيو إتش بيكر ، ميريديث سي سوارتووت و ليزا كيه بيلدن

يتمثل أحد التحديات الحالية في علم البيئة الميكروبية في توضيح الأدوار الوظيفية للتنوع الكبير للبكتيريا التي تعيش بحرية والبكتيريا المرتبطة بالمضيف التي تم تحديدها بواسطة الطرق الجزيئية المستقلة عن الثقافة. الأهم من ذلك ، أن توصيف هذا التنوع البكتيري الهائل سيتطلب على الأرجح دمج البيانات من الأساليب المستقلة عن الثقافة مع العمل على العزلات البكتيرية في الثقافة. أصبحت مجتمعات بكتيريا جلد البرمائيات محورًا حديثًا للعمل في الأنظمة الميكروبية المرتبطة بالمضيف نظرًا للدور المحتمل لبكتيريا الجلد هذه في دفاع المضيف ضد الفطريات المسببة للأمراض Batrachochytrium dendrobatidis (Bd) ، الذي يرتبط بانخفاض وانقراض أعداد البرمائيات العالمية. نظرًا لوجود دليل على أن بعض بكتيريا الجلد قد تمنع نمو Bd وتمنع العدوى في بعض الحالات ، فهناك اهتمام باستخدام هذه البكتيريا كعلاج بروبيوتيك للحفاظ على البرمائيات المعرضة للخطر. في هذه الدراسة ، استخدمنا مسحات من الجلد من الضفادع الأمريكية (أناكسروس أمريكانوس) إلى: (1) تقييم التنوع والبنية المجتمعية لبكتيريا جلد البرمائيات القابلة للزراعة التي تنمو على وسط عالي ومنخفض المغذيات ، (2) تحديد وسائط الاستزراع التي تستعيد أعلى نسبة من المجتمع البكتيري الكلي للضفادع الفردية بالنسبة للثقافة- بيانات مستقلة ، و (3) تقييم ما إذا كانت المجتمعات المطلية من أنواع الوسائط المميزة تختلف في قدرتها على منع نمو Bd في في المختبر المقاييس. بشكل عام ، وجدنا أن وسائط المزرعة ذات التركيزات المنخفضة من المغذيات سهلت نمو أصناف بكتيرية أكثر تنوعًا ونمت مجتمعات متميزة بالنسبة للوسائط التي تحتوي على تركيزات أعلى من المغذيات. أدى استخدام وسائط المغذيات المنخفضة أيضًا إلى زراعة أكثر نسبيًا من التنوع البكتيري على الضفادع الفردية مقارنة بالمجتمع العام المحدد باستخدام طرق مستقلة عن الثقافة. ومع ذلك ، في حين كانت هناك اختلافات في التنوع بين أنواع الوسائط ، كان التباين بين المضيفين الفرديين أكبر من التباين بين أنواع الوسائط ، مما يشير إلى أن مسح المزيد من الأفراد في مجتمع ما هو أفضل طريقة لتعظيم مجموعات الثقافة ، بغض النظر عن نوع الوسائط. أخيرًا ، لم تختلف وظيفة المجتمعات المطلية ضد Bd عبر نوع وسائط الاستنبات أو بين وسط المغذيات العالية والمنخفضة. تُعلم هذه النتائج الجهود الحالية لتطوير نهج قائم على البروبيوتيك للحفاظ على البرمائيات وتساعد على ضمان أن مجموعات الثقافة تستحوذ على غالبية التنوع المهم في هذه الأنظمة.


شاهد الفيديو: المحاضرة السادسة Lec:6 البكتريا المرضية Pathogenic bacteria. الجزء الثالث (كانون الثاني 2022).