معلومة

لماذا البروتينات المستهدفة للبلاستيدات الخضراء تتطلب اثنين من الببتيدات للإشارة؟


يقول السؤال رقم 11 من اختبار ممارسة علم الأحياء GRE أن البروتينات المستهدفة للبلاستيدات الخضراء تتطلب ببتيدين للإشارة:

  1. من المرجح أن يتطلب استهداف البروتين المركب حديثًا نوعين مختلفين من الببتيدات للإشارة لأي من الوجهات التالية؟

    (أ) غشاء البلازما

    (ب) الليزوزوم

    (ج) العصارة الخلوية

    (د) البلاستيدات الخضراء (إجابة صحيحة)

    (هـ) الشبكة الإندوبلازمية

لا يمكنني العثور على مرجع لهذا.

أفهم أن الريبوسوم يبدأ في تخليق البروتين في العصارة الخلوية وأن ببتيد الإشارة يأخذ ذلك إلى الشبكة الإندوبلازمية (ER) التي تنهي تخليق البروتين في تجويف ER ومن ثم يتم إفراز البروتين في الحويصلة إلى وجهتها (إذا كانت) لا يصبح بروتين غشاء ER). ما هو الغرض من إشارة الببتيد الثانية لدخول البلاستيدات الخضراء؟


يمكن أن يكون لاستيراد البروتين إلى البلاستيدات الخضراء (وكذلك الميتوكوندريا) وجهات متعددة ، لأن هذه الهياكل نفسها لها أقسام فرعية:

  • كلاهما لهما مساحة بين الأغشية وكذلك "مساحة داخلية" (السدى في البلاستيدات الخضراء ، المصفوفة في الميتوكوندريا).
  • يمكن أيضًا توجيه البروتينات نحو أي من الغشاءين
  • بالإضافة إلى ذلك ، تحتوي البلاستيدات الخضراء على مكدسات ثايلاكويد في السدى مفصولة بطبقة غشاء أخرى.

بسبب هذا الهيكل المعقد ، فأنت بحاجة إلى ببتيدات إشارة متعددة لاستهداف البروتينات بشكل صحيح إلى وجهتها.

لا أتذكر (أو يمكنني أن أجد) جميع التفاصيل الآن ولكن في الأساس (يمكنك) الحصول على:

  • ببتيد إشارة "رئيسي" يستهدف البروتينات مباشرة نحو السدى (والتي ستزال هناك بواسطة الببتيداز المعالج اللحمي (SPP)).
  • ببتيد إشارة إضافي للاستيراد إلى مكدسات الثايلاكويد (والتي سيتم توفيرها عن طريق انقسام الببتيد الأول)
  • يجب أن يكون هناك ببتيدات إشارة أخرى أو على الأقل متغيرات تسمح بالاستيراد إلى مساحة intermembrande والغشاء الداخلي (عبر مجمع TIC23). [لم أتمكن من العثور على أي مصادر لهذا الآن]

مصادر يمكن أن أجدها:


كان الظهور التطوري للعضيات عملية محددة في تنويع التفاعلات الكيميائية الحيوية داخل الخلية وتمكين تعدد الخلايا. ومع ذلك ، فرض التقسيم أيضًا تحديًا كبيرًا - الحاجة إلى استيراد البروتينات المركبة في العصارة الخلوية إلى مواقع وظيفتها الخاصة. على سبيل المثال ، يقوم ثلث جميع الجينات بترميز البروتينات التي يجب استهدافها ونقلها إلى الشبكة الإندوبلازمية (ER) ، والتي تعمل كموقع دخول إلى غالبية حجرات الغشاء الداخلي. أرست عقود من البحث المبادئ الأساسية لكيفية وصول البروتينات من العصارة الخلوية إلى غرفة الطوارئ ، وقد قدمت الدراسات الحديثة مسارات جديدة ومنظمين إضافيين ، مما أتاح تحديدًا أفضل للقواعد التي تحكم التعرف على الركيزة. في مقالة لمحة سريعة عن Cell Science والملصق المصاحب ، نقدم نظرة عامة على فهمنا الحالي للعمليات متعددة الأوجه والمنظمة لاستهداف البروتين ونقله إلى ER.

تشكل العضيات منافذ كيميائية حيوية متميزة داخل الخلية ، مما يسمح بتنويع عمليات الحياة المعقدة. ومع ذلك ، فإن نتيجة إنشاء التجزئة هي الحاجة إلى الفرز الصحيح ، وغالبًا ما يتم استيراد ، البروتينات التي تسكن كل عضية وتعمل داخلها. يستلزم استيراد البروتين إلى عضية معينة ثلاث خطوات أساسية: (1) التعرف على الركيزة من خلال إشارة / إشارات محددة بواسطة عامل عصاري خلوي أو مسار هذا الاعتراف يمنع خطأ استهداف البروتين أو طي البروتين المبكر أو تراكم البروتين في العصارة الخلوية ، ويمكن أن يحدث إما أثناء أو بعد الترجمة. (2) الاستهداف الموجه عن طريق التفاعل بين عامل (عوامل) التعرف على العصارة الخلوية ومستقبل على الغشاء المستهدف. (3) الانتقال من خلال بوابة أو مسام تتيح إدخال الركيزة في تجويف أو غشاء العضية المرغوبة.

في الخلايا حقيقية النواة ، أكبر ثلاث وجهات مستهدفة هي الميتوكوندريا (تمت مراجعتها في Harbauer et al. ، 2014 Wasilewski et al. ، 2017) ، والبلاستيدات الخضراء (تمت مراجعتها في Bölter and Soll ، 2016 Lee et al. ، 2017) والشبكة الإندوبلازمية (ER ). ER هو موقع الدخول إلى نظام الإفراز / الغشاء الداخلي بالإضافة إلى البيروكسيسومات وقطرات الدهون (LD) والغشاء النووي الداخلي (INM). وبالتالي ، فليس من المستغرب أن 30٪ من جميع الجينات حقيقية النواة تشفر للبروتينات التي يجب أن تستهدف وتنتقل إلى ER (Chen et al.، 2005 Choi et al.، 2010 Wallin and von Heijne، 1998). كان استهداف البروتين في ER موضوع بحث مكثف لعقود من الزمن وهو محور هذه المقالة. نحاول تقديم نظرة عامة واسعة على العوامل والمسارات التي تسهل استيراد التقارير الإلكترونية ، وتسليط الضوء على تنوع أشكال الإشارة التي تتوسط التعرف من خلال مسارات الاستهداف والإزاحة المختلفة ، ومناقشة التفاعلات المعقدة بين المسارات التي تجعل عملية استيراد البروتين إلى ER قوية جدًا.


يستهدف ببتيد الإشارة الإفرازي للنبات البروتينات المؤتلفة المشفرة بالبلاستوم إلى غشاء الثايلاكويد

تعتبر البلاستيدات مفاعلات حيوية واعدة لإنتاج البروتينات المؤتلفة ، لكن معرفة الآليات التي تنظم طي البروتين الأجنبي واستهدافه وتراكمه في هذه العضيات لا تزال غير مكتملة. نوضح هنا أن ببتيد إشارة إفرازي للنبات قادر على استهداف بروتين مؤتلف مشفر بالبلاستوم إلى غشاء الثايلاكويد. بروتين الاندماج الزيولين مع ببتيد الإشارة الأصلي الذي يعبر عنه التبغ (نيكوتيانا تاباكوم) تم توجيه نباتات transplastomic إلى أغشية ثايلاكويد البلاستيدات الخضراء ، في حين أن متحولة الزيولين الخالي من إشارة الببتيد ، Δzeolin ، تتراكم بدلاً من ذلك في السدى. نظهر أيضًا أن الزيولين يطوي في غشاء الثايلاكويد حيث يتراكم كقواطع قادرة على تكوين روابط ثاني كبريتيد. تساهم روابط ثنائي الكبريتيد في تراكم البروتين حيث يُظهر الزيولين مستوى تراكمًا أعلى فيما يتعلق بالسدومال Δzeolin ، الذي يتم إعاقة طيه حيث يتراكم البروتين بكميات منخفضة في شكل أحادي ولا يتأكسد. وهكذا ، يبدو أن عمليات ما بعد النسخ تنظم استقرار وتراكم زيولين البلاستيد المركب. تتم هنا مناقشة آلية استهداف الزيولين الأكثر منطقية للثايلاكويد.

هذه معاينة لمحتوى الاشتراك ، والوصول عبر مؤسستك.


تطور نقل البروتين إلى أغشية غلاف البلاستيدات الخضراء

تنحدر البلاستيدات الخضراء من سلالة البكتيريا الزرقاء التعايش الداخلي القديم التي عاشت داخل خلية حقيقية النواة. لقد ورثوا غلاف الغشاء المزدوج بدائية النواة من البكتيريا الزرقاء. يحتوي هذا المغلف على آلات فرز البروتين بدائية النواة بما في ذلك ثاني أكسيد الكربون وأقارب المكون المركزي لوحدة تجميع الغشاء الخارجي البكتيرية. عندما تم دمج التعايش الداخلي مع بقية الخلية ، تحول تخليق معظم بروتيناته من السدى إلى العصارة الخلوية المضيفة. وشمل هذا ما يقرب من جميع بروتينات الغلاف التي تم تحديدها حتى الآن. وبالتالي ، يجب أن يكون التكوين الحيوي العام لمغلف البلاستيدات الخضراء متميزًا عن البكتيريا الزرقاء. تقترب بروتينات الغلاف في البداية من مواقعها الوظيفية من الخارج وليس من الداخل. في كثير من الحالات ، ثبت أنهم يستخدمون مكونات مسار الاستيراد العام الذي يخدم أيضًا السدى و الثايلاكويدات. إذا كانت آليات فرز البروتين بدائية النواة القديمة لا تزال تستخدم لبروتينات غلاف البلاستيدات الخضراء ، فيجب تعديل أنشطتها أو دمجها مع مسار الاستيراد العام. في هذه المراجعة ، نقوم بتحليل المعرفة الحالية المتعلقة بالتكوين الحيوي لغلاف البلاستيدات الخضراء ومقارنتها بالبكتيريا.

هذه معاينة لمحتوى الاشتراك ، والوصول عبر مؤسستك.


تتضمن صيانة توازن البلاستيدات الخضراء استيراد البروتين وتدهوره

البلاستيدات الخضراء هي عضية معقدة تحتوي على ثلاثة أنظمة غشائية & # x2013 الغلاف الخارجي ، الغلاف الداخلي ، وغشاء الثايلاكويد بالإضافة إلى ثلاث حجرات فرعية رئيسية & # x2013 الفضاء بين الغشاء بين الغلاف الخارجي والداخلي ، السدى ، وتجويف الثايلاكويد (Nakai ، 2018). يتم تقسيم البلاستيدات الخضراء عن طريق انقباض آلية تقسيم البلاستيد ، وهو أمر ضروري للحفاظ على العدد الأمثل للبلاستيد في الخلايا النباتية (Gao et al.، 2013 Wang et al.، 2017a، b). يشفر جينوم البلاستيدات الخضراء أقل من 100 بروتين ومعظم البروتينات (حوالي 95٪) في البلاستيدات الخضراء يتم ترميزها بواسطة الجينات النووية. يجب نقل البروتينات المشفرة بالجينات النووية إلى البلاستيدات الخضراء لتكوينها الحيوي وصيانتها الوظيفية.

الضغوط اللاأحيائية مثل الضوء القوي وثاني أكسيد الكربون2 يمكن أن يؤدي التقييد أو درجات الحرارة القصوى إلى تثبيط ضوئي لـ PSII و PSI وفرض ضرر مؤكسد مستمر على البلاستيدات الخضراء أثناء إنتاج الطاقة ، مما يثبط أيضًا كفاءة التمثيل الضوئي ونمو النبات (Dietz et al.، 2016 Malno & # x000EB، 2018). تعتبر البروتينات في سلسلة نقل الإلكترون الضوئي أهدافًا معرضة للتلف التأكسدي. تتضمن جميع استجابات التلف الضوئي والحماية الضوئية الدوران السريع لبروتينات التمثيل الضوئي المحددة (Li et al. ، 2018). وجدت دراسات دوران البروتين الحديثة أن PetD (وحدة فرعية لمركب السيتوكروم b6f) ، PIFI (وحدة فرعية مساعدة مرتبطة بمركب NDH) ، NAD (P) H dehydrogenase subunit K (NDHK) ، zeaxanthin epoxidase (ZEP) ، وتدرج البروتون تشبه اللوائح 1 (PGRL1) معدلات استيراد وتدهور سريعة (Li et al. ، 2017). جنبًا إلى جنب مع اكتشاف الكلوروفاج الناجم عن التلف الضوئي ، تشير هذه النتائج إلى أن سلسلة نقل الإلكترون بالتمثيل الضوئي ضرورية لجودة البلاستيدات الخضراء.

يجب أن تكون العديد من العمليات البيولوجية صارمة ولكن يتم التحكم فيها بمرونة في البلاستيدات الخضراء لأن البروتينات الوظيفية يتم ترميزها بواسطة عضيتين منفصلتين & # x2013 النواة والبلاستيدات الخضراء. يمكن أن تؤدي الإشارات الضوئية ، ومرحلة النمو ، والهرمونات ، والمستقلبات ، والتغيرات البيئية إلى إعادة البرمجة النصية في البلاستيدات الخضراء (Wang et al. ، 2017a ، b). يرتبط الاتصال بين البلاستيدات الخضراء والنواة تحت ظروف الإجهاد ارتباطًا وثيقًا باستيراد بروتين البلاستيدات الخضراء وتدهورها. يتم تنظيم العديد من العمليات البيولوجية في البلاستيدات الخضراء بواسطة عوامل نووية (إشارات تقدمية) ، في حين أن نسخ بعض الجينات النووية حساس للإشارات من البلاستيدات الخضراء النامية (إشارات رجعية).


مقارنة بين إصدارات مختلفة من SignalP و TargetP لتنبؤات بروتين دياتوم بلاستيد مع ASAFind

يمكن التنبؤ ببروتينات الدياتومات المستهدفة بالبلاست والطحالب ذات الصلة بحساسية وخصوصية عالية باستخدام طريقة ASAFind المنشورة في عام 2015. تعتمد تنبؤات ASAFind على تنبؤات SignalP للشبكة الإندوبلازمية (ER) التي تستهدف ببتيدات الإشارة. في الآونة الأخيرة (في عام 2019) ، تم إصدار إصدار جديد من SignalP ، SignalP 5.0. اختبرنا قدرة SignalP 5.0 على التعرف على ببتيدات الإشارة للبروتينات المسبقة المشفرة بالبلاستيد المشفرة بالنواة ، وللتعرف على موقع انقسام الببتيد الإشارة. تمت مقارنة النتائج بالتنبؤات اليدوية لعنصر موقع الانقسام المميز ، والإصدارات السابقة من SignalP. يعتبر SignalP 5.0 أقل حساسية من الإصدارات السابقة من SignalP في هذه المهمة المحددة ، وكذلك في اكتشاف ببتيدات الإشارة للبروتينات غير البلاستيدية في الدياتومات. ومع ذلك ، بالاقتران مع ASAFind ، فإن أداء التنبؤ الناتج للبروتينات البلاستيد مرتفع. بالإضافة إلى ذلك ، قمنا باختبار أداة التنبؤ متعددة المواقع TargetP لمدى ملاءمتها لتوفير معلومات ببتيد الإشارة إلى ASAFind. أحدث إصدار ، TargetP 2.0 ، لديه أعلى أداء تنبؤ لببتيدات إشارة المشطورة وببتيدات عبور الميتوكوندريا مقارنة بالإصدارات الأخرى من SignalP و TargetP ، وبالتالي فهو يوفر أساسًا جيدًا لتوقعات ASAFind.

مقارنة النتائج من خوادم التنبؤ بمواضع موقع انشقاق ببتيد الإشارة التي تم التنبؤ بها يدويًا في مجموعة التدريب المكونة من 83 زوجًا من متواليات البروتين المفترضة المستهدفة للبلاستيد من Thalassiosira pseudonana و Phaeodactylum tricornutum المستخدمة لإنشاء مصفوفة تسجيل ASAFind (الموجودة في الجدول S1 من [1 ] ، يتم إرفاق البيانات الأولية من خوادم التنبؤ). يستخدم SignalP 3.0 إما نموذج شبكة عصبية (NN) أو نموذج ماركوف (HMM) مخفي. تم اختبار SignalP 4.1 باستخدام الافتراضي (def) ومع الخيارات الحساسة (sen) ، يستخدم SignalP 5.0 شبكة عصبية عميقة ، انظر طرق المراجع. يتم رسم التسلسلات بنفس الترتيب الذي تظهر به في ملفات البيانات الأولية. تشير الأرقام الموجودة أسفل كل خادم تنبؤ إلى عدد مواقع الانقسام التي تطابقت مع التنبؤ اليدوي / والعدد الإجمالي لببتيدات الإشارة المتوقعة.

الحساسيات والخصائص ومعاملات ارتباط ماثيوز (MCC) للاختلافات المختلفة لـ SignalP و TargetP للتنبؤ بببتيدات الإشارة وببتيدات عبور الميتوكوندريا وبروتينات البلاستيد (بالاشتراك مع ASAFind) ، تم تحديدها بمجموعة من 132 بروتينًا مرجعيًا محليًا تجريبيًا من عدة الوجهات داخل الخلايا في Phaeodactylum tricornutum (وجدت في الجدول S3 من [1]). يتم فرز النتائج من الأعلى إلى الأدنى في مركز عملائي. كما تم سرد أداء هيكتار [2] للمقارنة.

تعتبر الدياتومات منتجين أساسيين مهمين في العديد من الموائل المائية [3] وهي ذات أهمية متزايدة لتطبيقات التكنولوجيا الحيوية [4] [5]. كشف تسلسل الجينوم والترنسكريبتوم عن جوانب غير معتادة من استقلاب المشطورة ، يرتبط العديد منها بالموقع داخل الخلايا لمسارات التمثيل الغذائي في خلية المشطورة [6]. لذلك فإن التنبؤ بالمواقع داخل الخلايا للبروتينات من بيانات التسلسل يعد خطوة مهمة في شرح جينوم المشطورة [7] [8] [9].

تكون البروتينات البلاستيدية في الدياتومات إما مشفرة بالبلاستيد أو أنوية مشفرة وتحتاج إلى استهدافها للبلاستيدات المشطورة المعقدة ، عبر أربعة أغشية مغلفة [10] [11]. يتم التعرف على البروتينات البلاستيدية المشفرة للدياتومات من خلال إشارات استهداف ثنائية مميزة تتكون من مجال ببتيد إشارة ، ومجال ببتيد عبور ، ونمط محفوظ في موقع انشقاق ببتيد الإشارة ، وعزف آخر محفوظ في موقع انشقاق الببتيد العابر [12] [ 13] [14] [15] [10] [16] [17] [18] [19] [20] [21].

تم التنبؤ بالبروتينات البلاستيدية لنوعين من الدياتومات باستخدام برنامج التنبؤ المخصص ASAFind ، ويمكن تحليل بيانات التسلسل الجديد باستخدام خدمة الويب ASAFind أو برنامج قابل للتنزيل [1]. كما تم استخدام ASAFind للتنبؤ بالبروتينات البلاستيدية للنمط الخفي Guillardia theta [22] ، والكائنات الحية الأخرى ذات البلاستيدات المعقدة ذات الأصل الطحالب الحمراء [23] [24] [25]. يعتمد ASAFind على التنبؤ بببتيدات إشارة ER بواسطة SignalP ، وهو برنامج تم إصداره في إصدارات مختلفة ، والذي يستخدم خوارزميات تنبؤ مختلفة ، وبالتالي يختلف أيضًا في تنبؤاته وأدائه [26] [27] [28].

منذ إصدار طريقة التنبؤ ASAFind في عام 2015 [1] ، تم إصدار إصدارات جديدة من SignalP [29] و TargetP [30]. الهدف من هذه الدراسة هو معرفة ما إذا كانت أدوات البرامج المحدثة هذه تعمل على تحسين التنبؤ بالتسلسل المسبق لاستهداف دياتوم بلاستيد مع ASAFind ، مقارنة بإصدارات SignalP التي تم تصميم ASAFind في الأصل للعمل معها.

يعتمد التنبؤ بالبروتين البلاستيد ASAFind [1] على التنبؤ بببتيدات الإشارة بواسطة برنامج التنبؤ SignalP [26] [28]. تختلف تنبؤات ببتيدات الإشارة ، بالإضافة إلى مواقع مواقع الانقسام المتوقعة في التسلسل المسبق لاستهداف بلاستيد المشطورة ، بين إصدارات SignalP المتوفرة في عام 2007 [18]. نظرًا لأن ASAFind يقوم بإجراء بحث عن صورة نافذة منزلقة حول موضع موقع انقسام إشارة الببتيد المتنبأ به SignalP ، فإن اختيار الإصدار الأنسب من SignalP أمر بالغ الأهمية لأداء ASAFind [1]. اختبرنا مجموعة التدريب المكونة من 166 تسلسلًا من البروتينات المفترضة المستهدفة للبلاستيد المستخدمة لبناء مصفوفة التسجيل لطريقة ASAFind مع إصدار SignalP 5.0 [29] الذي تم إصداره حديثًا وبنسختين من TargetP [31] [32] [30] ، والتي لم يتم اختبار ASAFind. توقع SignalP 5.0 عددًا أقل من الببتيدات للإشارة مقارنة بمعظم الإصدارات السابقة من SignalP (149 من 166 ببتيدات إشارة). توقع TargetP 1.1 142 ببتيدات إشارة فقط بينما توقع TargetP 2.0 162 ببتيد إشارة (انظر الشكل 1 أ والبيانات الأولية المقابلة).

بالإضافة إلى التنبؤ بببتيد الإشارة ، يتنبأ SignalP و TargetP أيضًا بموضع موقع انقسام إشارة الببتيد [26]. يستخدم ASAFind الموضع المتوقع لموقع الانقسام لتحديد نطاق نوافذ التسلسل التي يتم فيها تسجيل التسلسل وفقًا للعنصر المحفوظ [1]. ويرجع ذلك جزئيًا إلى وجود تباين كبير في المواضع المتوقعة لمواقع انشقاق ببتيد الإشارة بين SignalP 3.0 NN و HMM و SignalP 4.1 ، إصدارات SignalP التي كانت متاحة في 2015 [1]. تختلف SignalP 5.0 و TargetP 1.1 و TargetP 2.0 أيضًا في التنبؤ بموضع موقع الانقسام بين التسلسلات (انظر الشكل 1 أ والبيانات الأولية المقابلة). والجدير بالذكر أنه في حين أن هناك بعض التسلسلات التي يختلف فيها موقع انشقاق ببتيد الإشارة المتوقع عن الموقع المتنبأ به يدويًا عبر العديد من إصدارات برامج التنبؤ ، هناك العديد من الأمثلة الأخرى للتسلسلات الفردية التي تعطي إصدارات مختلفة من برامج التنبؤ نتائج مختلفة.

نظرًا لنهج النافذة المنزلقة لـ ASAFind ، فإن الموضع الدقيق لموقع الانقسام المتوقع لـ SignalP أقل أهمية لنتيجة التنبؤ من الدرجة الفعلية لنافذة التسلسل الأعلى درجة [1]. لذلك قمنا أيضًا باختبار أداء ASAFind بالاشتراك مع SignalP 5.0 و TargetP 1.1 و TargetP 2.0 باستخدام المجموعة المرجعية المكونة من 132 بروتينًا مترجمة تجريبياً من مواقع مختلفة داخل الخلايا في Phaeodactylum tricornutum (الجدول S3 من [1]). تم تجميع الحساسيات والخصائص و MCC في الشكل 1 ب (البيانات الأولية مرفقة أيضًا). بالنسبة لبروتينات البلاستيد ، يتم الحصول على أعلى مركز تحكم في المحرك من خلال الجمع بين ASAFind والإعداد SignalP 4.1 & quotsensitive & quot (الشكل 1 ب). بالنسبة للتنبؤات الإجمالية للببتيد للإشارة (للبروتينات البلاستيدية وغير البلاستيدية) ، وكذلك لتنبؤات الببتيد العابر للميتوكوندريا ، فإن TargetP 2.0 لديه أفضل أداء بواسطة MCC (الشكل 1 ب). نظرًا لأن TargetP 2.0 يؤدي أيضًا أداءً جيدًا على وجه التحديد للبروتينات البلاستيدية بالاشتراك مع ASAFind (الشكل 1 ب) ، فإن TargetP 2.0 أداة قيمة لتحليلات استهداف البروتين في الدياتومات.

SignalP 5.0 هو برنامج تنبؤ محدد للغاية لببتيدات الإشارة ويميز بين ثلاثة أنواع من ببتيدات الإشارة في البكتيريا والعتائق. في حين أن أدائه العام في الكائنات الحية التي تم تطويره من أجلها أعلى من أداء أسلافه [29] ، تظهر نتائجنا أنه في نفس الوقت ، أقل حساسية في اكتشاف ببتيدات الإشارة في بروتينات الدياتومات. ومع ذلك ، فإنه يعطي نتائج جيدة للتنبؤ ببروتين الدياتوم بالاشتراك مع ASAFind. يحتوي TargetP 2.0 [30] على أعلى معاملات ارتباط ماثيوز للتنبؤ بببتيدات الإشارة وببتيدات عبور الميتوكوندريا في الدياتومات ، وبالتالي فهو مناسب أيضًا كأساس لتنبؤات ASAFind للبروتين البلاستيد.

تم تجميع مجموعة المراجع المكونة من 132 بروتينًا [1] بهدف تقييم أداء تنبؤات البروتين البلاستيد (55 عنصرًا إيجابيًا ، 77 سلبيًا ، والتي تحتوي على جميع مواقع البروتين التجريبية في Phaeodactylum tricornutum المنشورة في ذلك الوقت). إنه غير متماثل للغاية فيما يتعلق بفئات التسلسل الأخرى. بالنسبة للميتوكوندريا ، تحتوي فقط على 10 متواليات إيجابية (مقابل 122 سلبيًا) ، وبالنسبة للببتيدات الإشارة ، فإنها تحتوي فقط على 17 تسلسلًا سلبيًا (مقابل 115 تسلسلًا إيجابيًا ، بما في ذلك 55 بروتينًا مستهدفًا بالبلاستيد). يمكن أن تؤدي هذه النسب إلى قياس أداء مفرط في التفاؤل في حالة الحساسية والنوعية. لذلك قمنا أيضًا بتضمين مراكز عملائي ، والتي تمثل حالات عدم التناسق في المجموعة المرجعية. تعتبر مراكز التحكم في المحرك منخفضة بالنسبة لتنبؤات ببتيد الإشارة والببتيد العابر للميتوكوندريا التي تم اختبارها باستخدام مجموعة البيانات هذه ، مقارنةً بمراكز التحكم في المحركات لتنبؤات البروتين البلاستيد (الشكل 1 ب).

قد يكون أداء التنبؤ لـ SignalP و TargetP لببتيدات الإشارة وببتيدات عبور الميتوكوندريا للدياتومات أعلى مما توحي به مراكز التحكم في المحركات المنخفضة (الشكل 1 ب) ، إذا كان من الممكن اختبارها بمجموعات بيانات مرجعية أكثر تناسقًا (انظر & quotLimitation & quot).


لماذا البروتينات المستهدفة للبلاستيدات الخضراء تتطلب اثنين من الببتيدات للإشارة؟ - مادة الاحياء

I) تتناسب النفاذية عبر الأغشية بشكل عام مع قابلية الذوبان في الدهون (مثال مهم هو أن هرمونات الستيرويد تنتشر مباشرة في النوى) (دليل على أن الأغشية كانت دهنية)

(قضية جانبية أخرى مثيرة للاهتمام ، لم يتم ذكرها في الكتب المدرسية هي ذلك
التخدير يعيق توصيل النبضات العصبية والتخدير العام
هي مواد كيميائية قابلة للذوبان في الدهون ، ولكن ليس من المعروف حقًا كيف تعمل !!)
(التخدير الموضعي أفضل بكثير من فهم القنوات الأيونية المحظورة)

II) نسب تركيزات الأيونات في العصارة الخلوية مقابل الخلية الخارجية.
Na + حوالي 10 إلى 30 ضعفًا للخلية الخارجية (منخفضة من الداخل)
K + حوالي 30 ضعفًا داخل الخلايا الداخلية (يسبب الجهد!)
حافظ Ca ++ منخفضًا جدًا داخل العصارة الخلوية (يتم ضخه إلى الخارج وفي ER)
يتم الاحتفاظ بـ H + أعلى قليلاً في الداخل ، عادةً (يفسد في الخلايا السرطانية)
Mg ++ أبقى قليلاً في الداخل

ثالثا) النقل السلبي والمواد الكيميائية الأيونية
غراميسيدين (للكاتيونات أحادية التكافؤ = Na + و K + في الغالب)
يمكن شراء العديد من حاملات الأيونوفورات الاصطناعية: A23187 حامل أيون الكالسيوم

رسم بياني لمعدل الانتشار عبر الغشاء مقابل التركيز

IV) الرواسب والموانع (الطاقة المستعارة)
(هذه بروتينات غشائية تسمح لجزيء واحد بالتسرب عبر الغشاء إلى أسفل منحدره ، ويضخ أيضًا جزيءًا آخر)

أيضا مفهوم النقل عبر الخلية من خلال الظهارة
(قم بضخ شيء في أحد الأطراف واتركه يتسرب من الطرف الآخر ، إلخ.)

ت) * مضخة الصوديوم البوتاسيوم (ATPase) "مضخة الصوديوم"
(هذا بروتين غشائي متكامل يستخدم طاقة ATP
لدفع أيونات الصوديوم إلى الخارج من خلال غشاء البلازما.
(وأيضًا لإجبار أيونات البوتاسيوم على الداخل)
(يمكن استخدام ما يصل إلى نصف أو أكثر من ATP للخلية لهذا الغرض!)

6) إمكانية الراحة (الناتجة عن تسرب البوتاسيوم إلى الخارج)
تخبرك الكتب المدرسية فقط أن الخلايا العصبية وخلايا العضلات لديها إمكانات للراحة ولكن في الواقع جميع الخلايا تقريبًا تفعل ذلك!
العصارة الخلوية حوالي 50-80 ملي فولت سالبة بالنسبة للخارج 0.07 فولت.

تذكر: الخارج أكثر إيجابية من الداخل ،
لأن أيونات البوتاسيوم تميل إلى التسرب وهي موجبة!

الجهد هو الضغط الكهربائي لكل فرق 10 أضعاف في التركيز
يعادل 1.4 كيلو كالوري / مول من الأيونات ، وهذا يساوي

60 ملي فولت
(القوى هي تغير الطاقة لكل إزاحة لشيء ما)

أسئلة: إذا كانت نسبة تركيز البوتاسيوم 100 إلى 1
ثم ماذا سيكون الجهد الراحة؟ ماذا لو 1000 إلى 1؟

حول مقدار الطاقة اللازمة لضخ رقم Avogadro
من الأيونات فوق تدرج عبر الغشاء من 10 إلى 1؟ 100 إلى 1 ، إلخ.
& كيف يرتبط 80 ملي فولت بميل من 30 إلى 1 تقريبًا؟

ملحوظة: تقريبًا جميع الكتب المدرسية الابتدائية تتلاعب في مسألة كيف يمكن أن يحدث الجهد الساكن (الموجب بالخارج) بسبب أيون موجب يتركز أكثر داخل ذلك الخارج! لذا تأكد من أنك تفهم.
(تميل الكتب المدرسية إلى الادعاء بأنها بسبب البروتينات السلبية ، وما إلى ذلك ، وهي b.s.)

إذا كانت الأغشية منفذة للصوديوم وليس البوتاسيوم إذن
ستكون إمكانية الراحة إيجابية في الداخل.
ينتج الجهد عن طريق التسرب ويخلق شحنة زائدة على الجانب الذي يحدث فيه التسرب. هذا هو بيت القصيد.
إذا تسربت الأغشية من كلا الأيونات ، فإن كلاهما سيتوازن ببساطة
ينتج الجهد عن قدرة واحدة فقط على التسرب!

VII) النبضات العصبية (جهد الفعل)
الفتح المؤقت لقنوات الصوديوم ذات الجهد الكهربائي
("جهد العتبة")
(والفتح اللاحق لقنوات البوتاسيوم ذات الجهد الكهربائي)

كما انتشرت موجات نزع الاستقطاب عبر أغشية الخلايا العضلية.
& موجات إزالة الاستقطاب طويلة الأمد تنتشر على أغشية خلايا البويضة!
(الأخير هو جزء من مجموعة من الآليات التي تمنع أكثر من حيوان منوي من أن تكون قادرة على تخصيب البويضات)
تفتح قنوات الصوديوم هذه لحوالي 1/1000 من الثانية فقط
(ثم ​​أغلق: "فترة المقاومة"

المزيد عن النبضات العصبية:
التخدير الموضعي (نوفوكين ، إلخ) يمنع قنوات الصوديوم.

تعمل بعض المبيدات الحشرية عن طريق إبطاء عودة الاستقطاب
حتى لا تعود الأعصاب إلى ما بعد عتبة الجهد
بحلول الوقت الذي تنتهي فيه فترة المقاومة.
(وأعتقد أن سموم النيوت تعمل بهذه الطريقة أيضًا! لا تأكل النوت!)

ثامنا) غمد المايلين: تلتف أغشية البلازما من الخلايا الخاصة حول الألياف العصبية لتسريع النبضات العصبية حوالي 10 أضعاف
(ولكن إذا كان هناك 1.4 سعر حراري متورط في هذا ، فلا أعرف كيف.)

بصرف النظر عن ذلك ، فإن طريقة تسريع النبضات العصبية هي زيادة قطر المحور العصبي. تطورت الحبار محاور عملاقة (قطر مم)
والتي كانت مفيدة للقائمين بالتجربة.

تاسعا) كيف ترسل الرسائل من خلية إلى أخرى؟
طريقتان: 1) التوصيل الكهربائي المباشر (غير مستخدم كثيرًا)
2) تفرز خلية واحدة مادة كيميائية معينة عندما يتم نزع الاستقطاب عنها
ثم تحفز هذه المادة الكيميائية فتح قنوات الصوديوم
في أغشية البلازما للخلايا الأخرى ، يبدأ جهود الفعل

المشابك العصبية (مواد الناقلات العصبية)

على سبيل المثال ، الأسيتيل الكولين هو مادة الناقل العصبي
للمشابك بين الأعصاب وخلايا العضلات.
لكن الأدرينالين هو الناقل العصبي للعديد من المشابك العصبية الأخرى.
حمض الجلوتاميك ، الجلايسين من بين الناقلات العصبية المستخدمة داخل الدماغ
(يتم استخدام حوالي 20 ناقلًا عصبيًا مختلفًا في البشر:
بعض قنوات الصوديوم المفتوحة (إزالة الاستقطاب) ، والبعض الآخر يفتح Cl- إلخ.
ويسبب استقطابًا مفرطًا (= اجعل إمكانات الراحة أكبر!)

تعمل العديد من الأدوية عن طريق تحفيز أو تثبيط النقل المشبكي.
تحاكي الأمفيتامينات الأدرينالين
يؤثر النيكوتين على بعض مستقبلات الأسيتيل الكولين
غاز الأعصاب يرتبط تساهميًا بالسيرين في الموقع النشط لـ
إنزيم يقسم الأسيتيل الكولين إلى الكولين وحمض الخليك
(لذلك يصبح تحفيز العضلات دائمًا!)

X) بروتينات ناقل ABC (ATPases) (جزيئات المضخة)
الملاريا (البروتوزوا يضخ الكينين ، إلخ)
التطور (الانتقاء الطبيعي) للخلايا السرطانية المقاومة للأدوية المتعددة
التليف الكيسي

XI) طريقة لقط التصحيح للكشف عن فتح القنوات الأيونية في أجزاء صغيرة من الغشاء عند أطراف الماصات الدقيقة.

راجع الأسئلة للتحقق من فهمك حول إمكانات الراحة ، وما إلى ذلك.

1) ما هو الضغط الكهربائي؟ وما هي الوحدات التي يقاس بها هذا الضغط؟

2) في حالة راحة الخلايا العصبية والعضلية ، أي جانب من أغشية البلازما لديه مقدار الشحنة بالنسبة للجانب الآخر؟

3) هل أي أنواع أخرى من الخلايا المتمايزة لها نفس فرق الجهد هذا (مقارنة الجهد الكهربائي في العصارة الخلوية مقابل الفضاء خارج الخلية)؟

4) سبب الراحة ناتج عن انتشار أي نوع من الأيونات؟

5) عندما يتسبب أيون موجب منتشر في اختلاف الجهد ، فهل ينتج عن ذلك شحنة موجبة زائدة في المكان الذي يحتوي فيه هذا الأيون على أعلى تركيز ، أو في مكان آخر؟

6) ما الذي يجعل أيونات الصوديوم والبوتاسيوم لها مثل هذه التركيزات المختلفة داخل غشاء البلازما للخلايا الحية مقابل خارجه؟

7) إذا كان من الممكن تغيير أغشية البلازما بطريقة سحرية بحيث تكون أكثر نفاذية للصوديوم من البوتاسيوم ، فهل هذا يغير فرق الجهد؟

8) هل يحدث مثل هذا التغيير في النفاذية النسبية من أي وقت مضى؟

9) أي من هذه العمليات ناتجة عن بروتينات غشائية متكاملة؟

10) المراد بقول أن قناة أيون معينة "مسوّرة" بالجهد ، أو بالحرارة ، إلخ.

11) إذا أراد عالم الأحياء الجزيئية أن يجعل بعض الخلايا العادية قادرة على نشر نبضات كهربائية مثل الأعصاب ، فكيف يمكن القيام بذلك؟

12) إذا احتاج طبيب الأسنان إلى منع انتشار النبضات في أعصاب الإحساس بالألم ، فكيف يتم ذلك على مستوى المواد الكيميائية؟

13) هل يمكن استخدام هذه الآلية أيضًا لمنع الرسائل المرسلة إلى عضلات الدماغ ، وبالتالي تسبب الشلل؟

14) لماذا يتسبب نزع الاستقطاب في مكان واحد على سطح العصب في إزالة الاستقطاب على الفور من المناطق المحيطة بغشاء هذه الخلية؟

15) ماذا يحدث إذا فتحت قنوات الصوديوم في العصب بشكل دائم.

16) ماذا سيحدث إذا أغلقت قنوات الصوديوم هذه بشكل دائم ، بعد أن فتحت مرة واحدة لألف من الثانية من مجدها؟

17) ماذا لو كان نوعًا معينًا من الحيوانات لديه أعصاب ذات قنوات صوديوم يمكن تحفيزها لفتحها بواسطة الحقول المغناطيسية؟

18) ما هي الميزة التطورية للنبات إذا كان بإمكانه صنع مادة كيميائية معينة من شأنها أن تحفز فتح قنوات الصوديوم ذات البوابات الحرارية على الألياف العصبية التي تستشعر الحرارة؟

19) كيف تحفز الأعصاب العضلات على إزالة الاستقطاب؟

20) الدببة أو غيرها من الحيوانات الكبيرة الخطرة يمكن أن "تُسقط" بالسهام التي تحقن المادة الكيميائية سكسينيل-كولين. تحتوي هذه المادة الكيميائية على حمض السكسينيك المرتبط بالكولين بدلاً من حمض الأسيتيك. هل يمكنك معرفة ما إذا كان حقًا "مهدئًا للأعصاب" ، كما يُقال عادةً في الأخبار؟

كيف يمكن استخدام نقاط الاشتباك العصبي لتخزين الذكريات؟ لماذا يجب أن تزحف بعض الخلايا نحو الأقطاب الكهربائية السالبة ، بينما تزحف البلاعم نحو الأقطاب الموجبة ، وتصطف الخلايا الهيكلية بشكل عمودي على المجالات الكهربائية الخارجية؟ ماذا لو كان لديك كومة من الخلايا العضلية المسطحة أو النهايات العصبية ، وكلها لها قنوات صوديوم ذات جهد كهربائي في جانب واحد فقط ، ولكن ليس في الجانب الآخر؟
كيف يمكن للأسماك أن تستشعر المجالات الكهربائية الخارجية الضعيفة؟ هل تولد الأجنة مجالات كهربائية؟
هل هذه المجالات الكهربائية تخدم أي وظيفة مفيدة؟ كيف يمكن أن تأمل في معرفة ذلك؟

1) الجهد المقاس بالمللي فولت هو جزء من ألف فولت.

2) جهد الراحة (= الجهد) حوالي 70 مللي فولت موجب للخارج بالنسبة إلى الداخل السالب.

3) تمتلك جميع خلايا الجسم تقريبًا إمكانات للراحة أيضًا ، لكن الكتب المدرسية تذكر فقط الأعصاب وخلايا العضلات التي تحتوي عليها.

4) انتشار أيونات البوتاسيوم ، من تركيزات عالية إلى منخفضة هو سبب الراحة المحتملة.

5) على الرغم من أنه يبدو متناقضًا ، إلا أن انتشار أيون ينتج عنه فائض من شحنة هذا الأيون في المكان الذي ينتشر فيه! (على الرغم من أنه يحتوي على أقل تركيز!)

6) مضخة الصوديوم عبارة عن إنزيم ATPase ، في أغشية البلازما ، يسحب أيونات الصوديوم إلى الخارج وأيونات البوتاسيوم إلى الداخل.

7) انتشار الصوديوم في الاتجاه الداخلي من شأنه أن يخلق شحنة موجبة في السيتوبلازم ، لأنه المكان الذي تنتشر فيه أيونات الصوديوم الموجبة.

8) تحدث جهود الفعل (مثل النبضات العصبية) عن طريق الفتح المؤقت (لألف من الألف من الثانية) لبروتينات قناة الصوديوم الخاصة.

9) قنوات الصوديوم وقنوات البوتاسيوم ومضخة الصوديوم ATPase ، كلها أمثلة على بروتينات غشائية متكاملة؟

10) عندما يكون لبروتين قناة أيونية معينة خاصية التحفيز للفتح استجابة لمتغير معين ، عندئذٍ يُقال أن القناة "محاطة" بهذا المتغير.

11) إذا كان بإمكانك وضع قنوات الصوديوم ذات الجهد الكهربائي في غشاء بلازما أي خلية معينة ، فيجب أن يكون ذلك كافيًا للسماح لها بنشر جهود الفعل.

12) Blocking the sodium channels (with novacaine, etc.) will prevent propagation of action potentials.

13) Sure it will block any nerve impulse. It might block egg cells from preventing fertilization by extra sperm, for all I know or prevent Paramecia from backing up, maybe!

14) Because the sodium channels are voltage gated in the sense that they become open wherever and whenever the membrane voltage becomes less than some particular amount? If, instead, these channels became open when the voltage was more than a certain amount, then that property wouldn't allow the positive feedback of depolarization, so it wouldn't allow you to send signals.

15) Permanent opening would let sodium ions continue to diffuse inward until the concentrations had become the same in fact, that would also let the potassium concentration equilibrate. So there wouldn't be any voltage differences any more, not even the resting potential!

16) If the sodium channels closed permanently, then that nerve would only be able to propagate one action potential. (At least until it had synthesized some more voltage-gated sodium channel proteins)

17) That kind of animal would thereby be able to "feel" magnetic fields!

18) Such a plant would taste "hot" to any animal that ate it! Like hot peppers, etc.

19) Nerve endings secrete vesicles of certain chemicals, called synaptic transmitters, or neurotransmitters, such as acetyl-choline. These stimulate depolarization of the muscle, because the plasma membrane has sodium channels that are gated by acetyl choline.

20) It works by blocking synaptic transmission of motor nerves, thereby paralyzing the animal.
Look up the structure of succinic acid: you can see that this is a good example of a chemical analog.

The majority of this final list of questions are "unsolved problems". But the answer to the one about cells that have action potentials only on one side is that that's how electric eels work!

Chapter 12 - today's amino acid is GLUTAMINE

    cytosol about 1/2 of total volume (in "average" cells)
    mitochondria about 1/5 to 1/4 of volume
    endoplasmic reticulum (rough and smooth)

one percent = 1/100th except sometimes more

    Plasma membrane 2 to 5% (Surprisingly small fraction of total!)
    Rough endoplasmic reticulum 35% to 60%
    (large in cells that secrete lots of protein)
    Smooth endoplasmic reticulum 1% to 16%
    (large in cells that secrete other things)
    Inner membrane of mitochondria 32-17% .
    (large in cells that use a lot or energy: make ATP)
    Nucleus inner membrane 2 cytochromes Fe +++
    other metalloproteins with FeS Cu +
    (cyanide poisons cytochromes)

chlorophyll (which is fluorescent! and why it should be!)
captures light energy uses this energy to reduce NAD
and also to make ATP (apart from making it by chemiosmosis)

IV) photosystem I and photosystem II
are believed to have evolved separately, in different bacteria
(green sulfur bacteria that used light energy to split H 2 S into elemental sulfur and H+ analogous to release of O2 from water.

V) In photosynthesis, the capture (fixing) of carbon dioxide
to make sugars is entirely separate from the capturing of the energy.
ATP energy is used to make sugar
(thus, for example, if you gave them ATP from some other source, they could fix carbon in the dark)

The distinction between "dark reactions" which don't need light
as opposed to "light reactions" which directly need light.

Sugar synthesis (and carbon fixation) are dark reactions.

5C sugar + CO 2 -> 6C sugar --> two 3C sugars -> etc.

- and which 5 carbon sugar is used? which would you guess?

3 reactions /sec (very slow)
and also it is a very big protein (

1/2 million atomic weight)
وبالتالي

VI) When CO 2 concentrations become low, this enzyme can't help catalysing "photoxidation" , which is combination of O 2 with the 5 carbon sugar.
But this wastes energy! So it's a problem.
Some plants have evolved another set of chemical reactions
that can fix carbon into 4 carbon sugars
(4 carbon plants, as compared with all the others, which are 3 carbon) [sugar cane, etc.)
But really this is just a way to move CO 2 from the edge of the plant to the middle where it is released from the 4C
and then is re-fixed by the 3 C method.

In dry conditions, this 4C method allows less loss of water.
(but if you seal an air-tight container containing both 3-C and 4C plants, then the 4C plants will get almost all the CO 2

Various interesting things about genomes

higher mutation rates useful for figuring out evolution

not nearly enough different t-RNAs for all the codons (only 22)
(thus, they really do "wobble")

it is a puzzle why all of the genes haven't transferred to nucleus
(maybe because the change in codes prevented further transfer?)

Even when most of their DNA is lost, mitochondria still get made!! "petit" mutants in yeast! showing that even if all the DNA had been lost, such an organelle could persist
(note: because of signal peptides, etc. with the receptor proteins that grab these signal peptides also having the same signal peptide: so self-perpetuation would be possible for an organelle, even without having its own genes (maybe peroxisomes
and maybe basal bodies of cilia & flagella.
Review questions:

a) What expected change in acidity in fluid around mitochondria
when making ATP

b) why the change in the opposite direction in fluid around chloroplasts?

c) If you started with mitochondria that had no pH gradient,
then could you help them make more DNA by putting them into a solution with a different acidity? (yes)

d) Why do H+ ionophores poison mitochondria and chloroplasts?

e) How might weak ionophores be used to help people lose weight? (only occasionally killing a few such people)

f) How direct (hint, not very) is the connection between the energy absorbed from light and the energy used to capture carbon from carbon dioxide, in order to make sugar.

g) Do C4 plants really use a different sequence of reactions to make sugars from CO 2 (if not for making sugars, then what good is the C4 fixation route?)

    What conditions cause more photoxidation?
    What enzyme catalyses photoxidation?
    What function is served by photoxidation? (none)


الملخص

The twin-arginine translocation (Tat) pathway is a protein targeting system found in bacteria, archaea, and chloroplasts. Proteins are directed to the Tat translocase by N-terminal signal peptides containing SRRxFLK “twin-arginine” amino acid motifs. The key feature of the Tat system is its ability to transport fully folded proteins across ionically sealed membranes. For this reason the Tat pathway has evolved for the assembly of extracytoplasmic redox enzymes that must bind cofactors, and so fold, prior to export. It is important that only cofactor-loaded, folded precursors are presented for export, and cellular processes have been unearthed that regulate signal peptide activity. One mechanism, termed “Tat proofreading”, involves specific signal peptide binding proteins or chaperones. The archetypal Tat proofreading chaperones belong to the TorD family, which are dedicatedto the assembly of molybdenum-dependent redox enzymes in bacteria. Here, a gene cluster was identified in the archaeon Archaeoglobus fulgidusthat is predicted to encode a putative molybdenum-dependent tetrathionate reductase. The gene cluster also encodes a TorD family chaperone (AF0160 or TtrD) and in this work TtrD is shown to bind specifically to the Tat signal peptide of the TtrA subunit of the tetrathionate reductase. In addition, the 3D crystal structure of TtrD is presented at 1.35 Å resolution and a nine-residue binding epitope for TtrD is identified within the TtrA signal peptide close to the twin-arginine targeting motif. This work suggests that archaea may employ a chaperone-dependent Tat proofreading system that is similar to that utilized by bacteria.

الكاتب الاشتراكات

The manuscript was written through contributions of all authors.

Funding Statement

This research was supported by the Biotechnology and Biological Sciences Research Council (Grant BB/D018986/1) and The Wellcome Trust (Grants 082596 and 083481).


Hard-wired - have organellar genes been 'preferentially maintained'?

The preferential 'maintenance' of a core set of organellar genes is encompassed by the CORR theory (co-location for redox regulation see Box 1), which was first proposed in 1992 [30, 31]. This hypothesis proposes that there is a direct link between coding location and regulation, either transcriptional or post-transcriptional, which gives a fitness advantage compared with nuclear-encoded genes. In this way, expression of a gene within the organelle gives an advantage, thus preventing transfer of the gene to the nucleus. An example often quoted to support the hypothesis is that if more subunits of a protein complex are needed in a particular chloroplast, for example the DI subunit of photosystem II, which might be required because of photo-oxidative damage, it is more efficient to have the gene encoded within the organelle, as nuclear encoding would mean that the protein would be sent even to those chloroplasts that did not require this subunit [32]. Although rich in predictions, there is no direct experimental evidence for CORR (for mitochondria) [5], in contrast to several experimental investigations that support the validity of the hydrophobicity hypothesis [5, 16–26, 28, 29].


This work was supported by Samsung Research Funding Center of Samsung Electronics under Project Number SRFC-MA1301-04.

Ahting, U., Waizenegger, T., Neupert, W., and Rapaport, D. (2005). Signal-anchored proteins follow a unique insertion pathway into the outer membrane of mitochondria. J. بيول. تشيم. 280, 48�. doi: 10.1074/jbc.M410905200

Bae, W., Lee, Y. J., Kim, D. H., Lee, J., Kim, S., Sohn, E. J., et al. (2008). AKR2A-mediated import of chloroplast outer membrane proteins is essential for chloroplast biogenesis. نات. خلية بيول. 10, 220�. doi: 10.1038/ncb1683

Bauer, J., Hiltbrunner, A., Weibel, P., Vidi, P. A., Alvarez-Huerta, M., Smith, M. D., et al. (2002). Essential role of the G-domain in targeting of the protein import receptor atToc159 to the chloroplast outer membrane. J. Cell Biol. 159, 845�. doi: 10.1083/jcb.200208018

Becker, T., Pfannschmidt, S., Guiard, B., Stojanovski, D., Milenkovic, D., Kutik, S., et al. (2008). Biogenesis of the mitochondrial TOM complex: Mim1 promotes insertion and assembly of signal anchored receptors. J. بيول. تشيم. 283, 120�. doi: 10.1074/jbc.M706997200

Brd, J., and Jarvis, P. (2008). Green light for chloroplast outer-membrane proteins. نات. خلية بيول. 10, 120�. doi: 10.1038/ncb0208-120

Boldogh, I. R., Nowakowski, D. W., Yang, H. C., Chung, H., Karmon, S., Royes, P., et al. (2003). A protein complex containing Mdm10p, Mdm12p, and Mmm1p links mitochondrial membranes and DNA to the cytoskeleton-based segregation machinery. مول. بيول. زنزانة 14, 4618�. doi: 10.1091/mbc.E03-04-0225

Borgese, N., Brambillasca, S., and Colombo, S. (2007). How tails guide tail-anchored proteins to their destinations. بالعملة. رأي. خلية بيول. 19, 368�. doi: 10.1016/j.ceb.2007.04.019

Borgese, N., Colombo, S., and Pedrazzini, E. (2003). The tale of tail-anchored proteins: coming from the cytosol and looking for a membrane. J. Cell Biol. 161, 1013�. doi: 10.1083/jcb.200303069

Cavalier-Smith, T. (2000). Membrane heredity and early chloroplast evolution. اتجاهات نباتية. 5, 174�. doi: 10.1016/S1360-1385(00)01598-3

Chacinska, A., Koehler, C. M., Milenkovic, D., Lithgow, T., and Pfanner, N. (2009). Importing mitochondrial proteins: machineries and mechanisms. زنزانة 138, 628�. doi: 10.1016/j.cell.2009.08.005

Chan, N. C., and Lithgow, T. (2008). The peripheral membrane subunits of the SAM complex function codependently in mitochondrial outer membrane biogenesis. مول. بيول. زنزانة 19, 126�. doi: 10.1091/mbc.E07-08-0796

Chartron, J. W., Clemons, W. M. Jr., and Suloway, C. J. M. (2012). The complex process of GETting tail-anchored membrane proteins to the ER. بالعملة. رأي. Struc. بيول. 22, 217�. doi: 10.1016/j.sbi.2012.03.001

Court, D. A., Kleene, R., Neupert, W., and Lill, R. (1996). Role of the N- and C-termini of porin in import into the outer membrane of Neurospora mitochondria. FEBS Lett. 390, 73�. doi: 10.1016/0014-5793(96)00629-1

Dhanoa, P. K., Richardson, L. G., Smith, M. D., Gidda, S. K., Henderson, M. P., Andrews, D. W., et al. (2010). Distinct pathways mediate the sorting of tail-anchored proteins to the plastid outer envelope. بلوس واحد 5:e10098. doi: 10.1371/journal.pone.0010098

Dolezal, P., Likic, V., Tachezy, J., and Lithgow, T. (2006). Evolution of the molecular machines for protein import into mitochondria. علم 313, 314�. doi: 10.1126/science.1127895

Dukanovic, J., and Rapaport, D. (2011). Multiple pathways in the integration of proteins into the mitochondrial outer membrane. بيوكيم. بيوفيز. اكتا 1808, 971�. doi: 10.1016/j.bbamem.2010.06.021

Ellis, R. J., and Minton, A. P. (2006). Protein aggregation in crowded environments. بيول. تشيم. 387, 485�. doi: 10.1515/BC.2006.064

Fleischer, T. C., Weaver, C. M., McAfee, K. J., Jennings, J. L., and Link, A. J. (2006). Systematic identification and functional screens of uncharacterized proteins associated with eukaryotic ribosomal complexes. تطوير الجينات. 20, 1294�. doi: 10.1101/gad.1422006

Flores-Pérez, U., and Jarvis, P. (2013). Molecular chaperone involvement in chloroplast protein import. بيوكيم. بيوفيز. اكتا 1833, 332�. doi: 10.1016/j.bbamcr.2012.03.019

Formighieri, C., Cazzaniga, S., Kuras, R., and Bassi, R. (2013). Biogenesis of photosynthetic complexes in the chloroplast of كلاميدوموناس رينهاردتي requires ARSA1, a homolog of prokaryotic arsenite transporter and eukaryotic TRC40 for guided entry of tail-anchored proteins. مصنع J. 73, 850�. doi: 10.1111/tpj.12077

Fünfschilling, U., and Rospert, S. (1999). Nascent polypeptide-associated complex stimulates protein import into yeast mitochondria. مول. بيول. زنزانة 10, 3289�. doi: 10.1091/mbc.10.10.3289

Gautschi, M., Lilie, H., Fünfschilling, U., Mun, A., Ross, S., Lithgow, T., et al. (2001). RAC, a stable ribosome-associated complex in yeast formed by the DnaK-DnaJ homologs Ssz1p and zuotin. بروك. ناتل. أكاد. علوم. الولايات المتحدة الأمريكية. 98, 3762�. doi: 10.1073/pnas.071057198

Gentle, I., Gabriel, K., Beech, P., Waller, R., and Lithgow, T. (2004). The Omp85 family of proteins is essential for outer membrane biogenesis in mitochondria and bacteria. J. Cell Biol. 164, 19�. doi: 10.1083/jcb.200310092

Hachiya, N., Komiya, T., Alam, R., Iwahashi, J., Sakaguchi, M., Omura, T., et al. (1994). MSF, a novel cytoplasmic chaperone which functions in precursor targeting to mitochondria. EMBO J. 13, 5146�.

Hofmann, N. R., and Theg, S. M. (2005). Chloroplast outer membrane protein targeting and insertion. Trends Plant Sci. 10, 450�. doi: 10.1016/j.tplants.2005.07.009

Hoppins, S. C., and Nargang, F. E. (2004). The Tim8-Tim13 complex of Neurospora crassa functions in the assembly of proteins into both mitochondrial membranes. J. بيول. تشيم. 279, 12396�. doi: 10.1074/jbc.M313037200

Hulett, J. M., Lueder, F., Chan, N. C., Perry, A. J., Wolynec, P., Likic, V. A., et al. (2008). The transmembrane segment of Tom20 is recognized by Mim1 for docking to the mitochondrial TOM complex. جيه مول. بيول. 376, 694�. doi: 10.1016/j.jmb.2007.12.021

Hwang, Y. T., Pelitire, S. M., Henderson, M. P., Andrews, D. W., Dyer, J. M., and Mullen, R. T. (2004). Novel targeting signals mediate the sorting of different isoforms of the tail-anchored membrane protein cytochrome b5 to either endoplasmic reticulum or mitochondria. الخلية النباتية 16, 3002�. doi: 10.1105/tpc.104.026039

Inoue, K. (2011). Emerging roles of the chloroplast outer envelope membrane. اتجاهات نباتية. 16, 550�. doi: 10.1016/j.tplants.2011.06.005

Inoue, K., Baldwin, A. J., Shipman, R. L., Matsui, K., Theg, S. M., and Ohme-Takagi, M. (2005). Complete maturation of the plastid protein translocation channel requires a type I signal peptidase. J. Cell Biol. 171, 425�. doi: 10.1083/jcb.200506171

Inoue, K., and Keegstra, K. (2003). A polyglycine stretch is necessary for proper targeting of the protein translocation channel precursor to the outer envelope membrane of chloroplasts. مصنع J. 34, 661�. doi: 10.1046/j.1365-313X.2003.01755.x

Ishikawa, D., Yamamoto, H., Tamura, Y., Moritoh, K., and Endo, T. (2004). Two novel proteins in the mitochondrial outer membrane mediate β-barrel protein assembly. J. Cell Biol. 166, 621�. doi: 10.1083/jcb.200405138

John, P., and Whatley, F. R. (1975). Paracoccus denitrificans and the evolutionary origin of mitochondria. طبيعة سجية 254, 495�. doi: 10.1038/254495a0

Jonikas, M. C., Collins, S. R., Denic, V., Oh, E., Quan, E. M., Schmid, V., et al. (2009). Comprehensive characterization of genes required for protein folding in the endoplasmic reticulum. علم 323, 1693�. doi: 10.1126/science.1167983

Kanaji, S., Iwahashi, J., Kida, Y., Sakaguchi, M., and Mihara, K. (2000). Characterization of the signal that directs Tom20 to the mitochondrial outer membrane. J. Cell Biol. 151, 277�. doi: 10.1083/jcb.151.2.277

Keenan, R. J., Freymann, D. M., Stroud, R. M., and Walter, P. (2001). The signal recognition particle. Annu. القس Biochem. 70, 755�. doi: 10.1146/annurev.biochem.70.1.755

Kemper, C., Habib, S. J., Engl, G., Heckmeyer, P., Dimmer, K. S., and Rapaport, D. (2008). Integration of tail-anchored proteins into the mitochondrial outer membrane does not require any known import components. J. خلية علوم. 121, 1990�. doi: 10.1242/jcs.024034

Kessler, F., and Schnell, D. (2009). Cloroplast biogenesis: diversity and regulation of the protein import apparatus. بالعملة. رأي. خلية بيول. 21, 494�. doi: 10.1016/j.ceb.2009.03.004

Kim, D. H., and Hwang, I. (2013). Direct targeting of proteins from the cytosol to organelles: the ER versus endosymbiotic organelles. مرور 14, 613�. doi: 10.1111/tra.12043

Kim, D. H., Xu, Z.-H., Na, Y. J., Yoo, Y. J., Lee, J., Sohn, E. J., et al. (2011). Small heat shock protein Hsp17.8 functions as an AKR2A cofactor in the targeting of chloroplast outer membrane proteins in أرابيدوبسيس. Plant Physiol. 157, 132�. doi: 10.1104/pp.111.178681

Kriechbaumer, V., and Abell, B. M. (2012). Chloroplast envelope protein targeting fidelity is independent of cytosolic components in dual organelle assays. أمام. علوم النبات. 3:148. doi: 10.3389/fpls.2012.00148

Kriechbaumer, V., Shaw, R., Mukherjee, J., Bowsher, C. G., Harrison, A. M., and Abell, B. M. (2009). Subcellular distribution of tail-anchored proteins in أرابيدوبسيس. مرور 10, 1753�. doi: 10.1111/j.1600-0854.2009.00991.x

Kutik, S., Stojanovski, D., Becker, L., Becker, T., Meinecke, M., Krüger, V., et al. (2008). Dissecting membrane insertion of mitochondrial β-barrel proteins. زنزانة 132, 1011�. doi: 10.1016/j.cell.2008.01.028

Lee, J., Lee, H., Kim, J., Lee, S., Kim, D. H., Kim, S., et al. (2011). Both the hydrophobicity and a positively charged region flanking the C-terminal region of the transmembrane domain of signal-anchored proteins play critical roles in determining their targeting specificity to the endoplasmic reticulum or endosymbiotic organelles in أرابيدوبسيس cells. الخلية النباتية 23, 1588�. doi: 10.1105/tpc.110.082230

Lee, Y. J., Kim, D. H., Kim, Y. W., and Hwang, I. (2001). Identification of a signal that distinguishes between the chloroplast outer envelope membrane and the endomembrane system in vivo. الخلية النباتية 13, 2175�.

Lee, Y. J., Sohn, E. J., Lee, K. H., Lee, D. W., and Hwang, I. (2004). The transmembrane domain of AtToc64 and its C-terminal lysine-rich flanking region are targeting signals to the chloroplast outer envelope membrane [correction]. مول. الخلايا 17, 281�. doi: 10.1105/tpc.13.10.2175

Leister, D. (2003). Chloroplast research in the genomic age. Trends Genet. 19, 47�. doi: 10.1016/S0168-9525(02)00003-3

Li, H. M., and Chiu, C. C. (2010). Protein transport into chloroplasts. Annu. Rev. Plant Biol. 61, 157�. doi: 10.1146/annurev-arplant-042809-112222

Mariappan, M., Li, X., Stefanovic, S., Sharma, A., Mateja, A., Keenan, R. J., et al. (2010). A ribosome-associating factor chaperones tail-anchored membrane proteins. طبيعة سجية 466, 1120�. doi: 10.1038/nature09296

May, T., and Soll, J. (2000). 14-3-3 proteins form a guidance complex with chloroplast precursor proteins in plants. الخلية النباتية 12, 53�. doi: 10.1105/tpc.12.1.53

Meisinger, C., Pfannschmidt, S., Rissler, M., Milenkovic, D., Becker, T., Stojanovski, D., et al. (2007). The morphology proteins Mdm12/Mmm1 function in the major β-barrel assembly pathway of mitochondria. EMBO J. 26, 2229�. doi: 10.1038/sj.emboj.7601673

Motz, C., Martin, H., Krimmer, T., and Rassow, J. (2002). Bcl-2 and porin follow different pathways of TOM-dependent insertion into the mitochondrial outer membrane. جيه مول. بيول. 323, 729�. doi: 10.1016/S0022-2836(02)00995-6

Neupert, W., and Herrmann, J. M. (2007). Translocation of proteins into mitochondria. Annu. القس Biochem. 76, 723�. doi: 10.1146/annurev.biochem.76.052705.163409

Paschen, S. A., Waizenegger, T., Stan, T., Preuss, M., Cyrklaff, M., Hell, K., et al. (2003). Evolutionary conservation of biogenesis of β-barrel membrane proteins. طبيعة سجية 426, 862�. doi: 10.1038/nature02208

Patel, R., Hsu, S. C., Bedard, J., Inoue, K., and Jarvis, P. (2008). The Omp85-related chloroplast outer envelope protein OEP80 is essential for viability in أرابيدوبسيس. نبات فيزيول. 148, 235�. doi: 10.1104/pp.108.122754

Popov-Celeketic, J., Waizenegger, T., and Rapaport, D. (2008). Mim1 functions in an oligomeric form to facilitate the integration of Tom20 into the mitochondrial outer membrane. جيه مول. بيول. 376, 671�. doi: 10.1016/j.jmb.2007.12.006

Qbadou, S., Becker, T., Mirus, O., Tews, I., Soll, J., and Schleiff, E. (2006). The molecular chaperone Hsp90 delivers precursor proteins to the chloroplast import receptor Toc64. EMBO J. 25, 1836�. doi: 10.1038/sj.emboj.7601091

Rapaport, D. (2003). Finding the right organelle. Targeting signals in mitochondrial outer-membrane proteins. EMBO Rep. 4, 948�. doi: 10.1038/sj.embor.embor937

Rapoport, T. A. (2007). Protein translocation across the eukaryotic endoplasmic reticulum and bacterial plasma membranes. طبيعة سجية 450, 663�. doi: 10.1038/nature06384

Rapaport, D., and Neupert, W. (1999). Biogenesis of Tom40, core component of the TOM complex of mitochondria. J. Cell Biol. 146, 321�. doi: 10.1083/jcb.146.2.321

Sato, S., Nakamura, Y., Kaneko, T., Asamizu, E., and Tabata, S. (1999). Complete structure of the chloroplast genome of نبات الأرابيدوبسيس thaliana. DNA Res. 6, 283�. doi: 10.1093/dnares/6.5.283

Schemenewitz, A., Pollmann, S., Reinbothe, C., and Reinbothe, S. (2009). A substrate-independent, 14:3:3 protein-mediated plastid import pathway of NADPH:protochlorophyllide oxidoreductase A. بروك. ناتل. أكاد. علوم. الولايات المتحدة الأمريكية. 104, 8538�. doi: 10.1073/pnas.0702058104

Schleiff, E., and Becker, T. (2011). Common ground for protein translocation: access control for mitochondria and chloroplasts. نات. Rev. Mol. خلية بيول. 12, 48�. doi: 10.1038/nrm3027

Schlossmann, J., and Neupert, W. (1995). Assembly of the preprotein receptor MOM72/MAS70 into the protein import complex of the outer membrane of mitochondria. J. بيول. تشيم. 270, 27116�. doi: 10.1074/jbc.270.45.27116

Schlünzen, F., Wilson, D. N., Tian, P., Harms, J. M., McInnes, S. J., Hansen, H. A., et al. (2005). The binding mode of the trigger factor on the ribosome: implications for protein folding and SRP interaction. بنية 13, 1685�. doi: 10.1016/j.str.2005.08.007

Schmidt, O., Pfanner, N., and Meisinger, C. (2010). Mitochondrial protein import: from proteomics to functional mechanisms. نات. Rev. Mol. خلية بيول. 11, 655�. doi: 10.1038/nrm2959

Schneider, H., Söllner, T., Dietmeier, K., Eckerskorn, C., Lottspeich, F., Trülzsch, B., et al. (1991). Targeting of the master receptor MOM19 to mitochondria. علم 254, 1659�. doi: 10.1126/science.1661031

Setoguchi, K., Otera, H., and Mihara, K. (2006). Cytosolic factor- and TOM-independent import of C-tail-anchored mitochondrial outer membrane proteins. EMBO J. 25, 5635�. doi: 10.1038/sj.emboj.7601438

Sickmann, A., Reinders, J., Wagner, Y., Joppich, C., Zahedi, R., Meyer, H. E., et al. (2003). The proteome of Sacchoromyces cerevisiae mitochondria. بروك. ناتل. أكاد. علوم. الولايات المتحدة الأمريكية. 103, 13207�. doi: 10.1073/pnas.2135385100

Smith, M. D., Hiltbrunner, A., Kessler, F., and Schnell, D. J. (2002). The targeting of the atToc159 preprotein receptor to the chloroplast outer membrane is mediated by its GTPase domain and is regulated by GTP. J. Cell Biol. 159, 833�. doi: 10.1083/jcb.200208017

Spreter, T., Pech, M., and Beatrix, B. (2005). The crystal structure of archaeal nascent polypeptide-associated complex (NAC) reveals a unique fold and the presence of a ubiquitin-associated domain. J. بيول. تشيم. 280, 15849�. doi: 10.1074/jbc.M500160200

Suzuki, H., Maeda, M., and Mihara, K. (2002). Characterization of rat TOM70 as a receptor of the preprotein translocase of the mitochondrial outer membrane. J. خلية علوم. 115, 1895�.

Thornton, N., Stroud, D. A., Milenkovic, D., Guiard, B., Pfanner, N., and Becker, T. (2010). Two modular forms of the mitochondrial sorting and assembly machinery are involved in biogenesis of alpha-helical outer membrane proteins. جيه مول. بيول. 396, 540�. doi: 10.1016/j.jmb.2009.12.026

Tranel, P. J., and Keegstra, K. (1996). A novel, bipartite transit peptide targets OEP75 to the outer membrane of the chloroplastic envelope. الخلية النباتية 8, 2093�. doi: 10.1105/tpc.8.11.2093

Tu, S. L., Chen, L. J., Smith, M. D., Su, Y. S., Schnell, D. J., and Li, H. M. (2004). Import pathways of chloroplast interior proteins and the outer-membrane protein OEP14 converge at Toc75. الخلية النباتية 16, 2078�. doi: 10.1105/tpc.104.023952

Ullers, R. S., Houben, E. N., Raine, A., ten Hagen-Jongman, C. M., Ehrenberg, M., Brunner, J., et al. (2003). Interplay of signal recognition particle and trigger factor at L23 near the nascent chain exit site on the الإشريكية القولونية ribosome. J. Cell Biol. 161, 679�. doi: 10.1083/jcb.200302130

Waizenegger, T., Stan, T., Neupert, W., and Rapaport, D. (2003). Signal-anchor domains of proteins of the outer membrane of mitochondria: structural and functional characteristics. J. بيول. تشيم. 278, 42064�. doi: 10.1074/jbc.M305736200

Walther, D. M., Papic, D., Bos, M. P., Tommassen, J., and Rapaport, D. (2009a). Signals in bacterial beta-barrel proteins are functional in eukaryotic cells for targeting to and assembly in mitochondria. بروك. ناتل. أكاد. علوم. الولايات المتحدة الأمريكية. 106, 2531�. doi: 10.1073/pnas.0807830106

Walther, D. M., Rapaport, D., and Tommassen, J. (2009b). Biogenesis of beta-barrel membrane proteins in bacteria and eukaryotes: evolutionary conservation and divergence. Cell Mol. حياة. علوم. 66, 2789�. doi: 10.1007/s00018-009-0029-z

Walther, D. M., and Rapaport, D. (2009). Biogenesis of mitochondrial outer membrane proteins. بيوكيم. بيوفيز. اكتا 1793, 42�. doi: 10.1016/j.bbamcr.2008.04.013

Wang, F., Brown, E. C., Mak, G., Zhuang, J., and Denic, V. (2010). A chaperone cascade sorts proteins for posttranslational membrane insertion into the endoplasmic reticulum. مول. زنزانة 40, 159�. doi: 10.1016/j.molcel.2010.08.038

Weis, B. L., Schleiff, E., and Zerges, W. (2013). Protein targeting to subcellular organelles via MRNA localization. بيوكيم. بيوفيز. اكتا 1833, 260�. doi: 10.1016/j.bbamcr.2012.04.004

Wiedemann, N., Kozjak, V., Chacinska, A., Schönfisch, B., Rospert, S., Ryan, M. T., et al. (2003). Machinery for protein sorting and assembly in the mitochondrial outer membrane. طبيعة سجية 424, 565�. doi: 10.1038/nature01753

Wiedemann, N., Truscott, K. N., Pfannschmidt, S., Guiard, B., Meisinger, C., and Pfanner, N. (2004). Biogenesis of the protein import channel Tom40 of the mitochondrial outer membrane: intermembrane space components are involved in an early stage of the assembly pathway. J. بيول. تشيم. 279, 18188�. doi: 10.1074/jbc.M400050200

Yano, M., Terada, K., and Mori, M. (2003). AIP is a mitochondrial import mediator that binds to both import receptor Tom20 and preproteins. J. Cell Biol. 163, 45�. doi: 10.1083/jcb.200305051

Young, J. C., Hoogenraad, N. J., and Hartl, F. U. (2003). Molecular chaperones Hsp90 and Hsp70 deliver preproteins to the mitochondrial import receptor Tom70. زنزانة 112, 41�. doi: 10.1016/S0092-8674(02)01250-3

Keywords : AKR2, β-barrel proteins, chloroplasts, endosymbiotic organelles, mitochondria, outer membrane proteins, signal-anchored proteins, tail-anchored protein

Citation: Lee J, Kim DH and Hwang I (2014) Specific targeting of proteins to outer envelope membranes of endosymbiotic organelles, chloroplasts, and mitochondria. أمام. علوم النبات. 5:173. doi: 10.3389/fpls.2014.00173

Received: 12 March 2014 Accepted: 10 April 2014
Published online: 29 April 2014.

Kentaro Inoue, University of California at Davis, USA

Ben Matthew Abell, Sheffield Hallam University, UK
Hsou-min Li, Academia Sinica, Taiwan

Copyright © 2014 Lee, Kim and Hwang. هذا مقال مفتوح الوصول يتم توزيعه بموجب شروط ترخيص Creative Commons Attribution License (CC BY). يُسمح بالاستخدام أو التوزيع أو الاستنساخ في منتديات أخرى ، بشرط أن يتم اعتماد المؤلف (المؤلفين) الأصلي أو المرخص له وأن يتم الاستشهاد بالنشر الأصلي في هذه المجلة ، وفقًا للممارسات الأكاديمية المقبولة. لا يُسمح بأي استخدام أو توزيع أو إعادة إنتاج لا يتوافق مع هذه الشروط.


شاهد الفيديو: البروتينات من الالف الى الياء - تفاعلات الحموض الامينية والببتيدات تقديم شادي خلوف (ديسمبر 2021).