معلومة

الرحلان الكهربائي للهلام والرغوة


لم أر قط مثل هذا النوع من الأشياء يحدث. ما الذي قد يؤدي إلى هذا ؟؟


يتم ترغية فقاعات الغاز عن طريق التحليل الكهربائي للماء ، مما يؤدي إلى توليد فقاعات من غاز الهيدروجين على القطب السالب وغاز الأكسجين على القطب الموجب.

بالنسبة للرغوة نفسها ... أعتقد أن هناك نوعًا من المنظفات في المخزن المؤقت. تحتوي بعض المخازن المؤقتة للرحلان الكهربي على منظف.


مجموعات استخراج الحمض النووي والرحلان الكهربائي

مجموعة كاملة من مجموعات ومناهج علوم الحمض النووي القائمة على الاستفسار المصممة لمساعدة المعلمين على تعريف الطلاب بعالم الأحياء الجزيئية المثير. تستخدم مجموعات تحليل الحمض النووي التعليمية هذه تقنيات عملية لاستكشاف بنية ووظيفة الحمض النووي ، وهيكل الخلية ، والهضم المقيد ، والرحلان الكهربائي لهلام الاغاروز.


الرحلان الكهربائي للهلام والرغوة - علم الأحياء

مبادئ الرحلان الكهربائي لجيل DNA

هلام الكهربائي يفترق الحمض النووي شظايا حسب الحجم في وسط دعم صلب (أ هلام الاغاروز). الحمض النووي يتم سحب العينات في آبار العينة ، حيث يُنظر إليها على أنها فتحات مظلمة في الجزء العلوي من الصورة. تطبيق التيار الكهربائي في الطرف العلوي (الأنودي ، السالب) يسبب الشحنة السالبة الحمض النووي [تذكر أنه حمض] أن تهاجر (كهربي) نحو النهاية السفلية (كاثودية ، موجبة). يتناسب معدل الهجرة مع الحجم: تتحرك الأجزاء الصغيرة بسرعة أكبر ، وتنتهي في الجزء السفلي من الهلام.

الحمض النووي يتم تخيله من خلال تضمين الهلام صبغة مقحمة ، بروميد الايثيديوم. الحمض النووي تمتص الشظايا الصبغة أثناء انتقالها عبر الهلام. الإضاءة مع ضوء الأشعة فوق البنفسجية يتسبب في تألق الصبغة المقحمة بلون وردي باهت.

لاحظ أن الأجزاء الأكبر تتألق بشكل أكثر كثافة. على الرغم من وجود كل جزء من أجزاء فئة واحدة من الجزيء في متساوي الأقطاب النسب ، تحتوي الأجزاء الأصغر على كتلة أقل من الحمض النووي ، وتأخذ صبغة أقل ، وبالتالي تتألق بشكل أقل كثافة. يتضح هذا بشكل أكبر في الممر الموجود في أقصى اليمين ، والذي يُظهر مجموعة "سلم" من أجزاء الحمض النووي ذات الحجم المعروف والتي يمكن استخدامها لتقدير أحجام الأجزاء الأخرى غير المعروفة.


الرحلان الكهربائي للهلام هو أسلوب شائع يستخدم لفصل وتحليل DNA و RNA والبروتينات بناءً على حجمها وشحنها. هناك نوعان رئيسيان من الرحلان الكهربائي للهلام وهما الاغاروز الكهربائي للهلام والهلام الكهربي بولي أكريلاميد. تستخدم المواد الهلامية Agarose بشكل أساسي لفصل الحمض النووي عند الحاجة إلى دقة أعلى ، ويتم استخدام المواد الهلامية بولي أكريلاميد. SDS Page هو نوع من الرحلان الكهربائي للهلام يستخدم بشكل شائع لفصل الخلائط المعقدة من البروتينات. تعتبر تقنية فصل البروتين عالية الدقة. هذا هو الفرق بين الرحلان الكهربائي للهلام وصفحة SDS.

مراجع:
1. Nowakowski ، Andrew B. ، William J. Wobig ، and David H. Petering. & # 8220 Native SDS-PAGE: الفصل الكهربي عالي الدقة للبروتينات مع الاحتفاظ بالخصائص الأصلية بما في ذلك أيونات المعادن المربوطة. www.ncbi.nlm.nih.gov. ، مايو 2014. الويب. 7 أبريل 2017
2. Stellwagen ، Nancy C. & # 8220 ، الرحلان الكهربائي للحمض النووي في هلام الاغاروز ، هلام بولي أكريلاميد وفي محلول حر. & # 8221 الكهربائي. المكتبة الوطنية الأمريكية للطب ، يونيو 2009. الويب. 07 أبريل 2017

الصورة مجاملة:
1. & # 8220Gelelektrophoreseapparatur & # 8221 (CC BY-SA 3.0) عبر Commons Wikimedia
2. & # 8220DNA Agarose gel electrophoresis & # 8221 بواسطة School of Natural Resources من Ann Arbor & # 8211 DNA lab (CC BY 2.0) عبر Commons Wikimedia


الرحلان الكهربائي للهلام والرغوة - علم الأحياء

BCH5425 البيولوجيا الجزيئية والتكنولوجيا الحيوية
ربيع 1998
الدكتور مايكل بلابر
[email protected]

يستخدم الرحلان الكهربائي للهلام لتوصيف واحدة من أكثر الخصائص الأساسية - الكتلة الجزيئية - لكل من عديد النوكليوتيدات وعديد الببتيدات

  • يمكن أيضًا استخدام التحليل الكهربائي للهلام لتحديد
    • نقاء هذه العينات
    • عدم التجانس / مدى التدهور
    • تكوين الوحدة الفرعية.

    الحمض النووي:
    المواد الأكثر شيوعًا للهلام الكهربائي لجزيئات الحمض النووي هي

    معدل الهجرة الكهربي للحمض النووي من خلال المواد الهلامية الاغاروز يعتمد على أربعة معايير رئيسية:

    1. الحجم الجزيئي للحمض النووي. تنتقل جزيئات الحمض النووي المزدوج الخطي عبر المواد الهلامية agarose بمعدل يتناسب عكسًا مع سجل وزنها الجزيئي.

    مثال: قارن الكتلة الجزيئية مقابل معدل الهجرة المتوقع:

    1 / سجل (كتلة جزيئية)
    أي قريب السيد

    2. تركيز الاغاروز. توجد علاقة خطية عكسية بين لوغاريتم الحركة الكهربية وتركيز الهلام.

    سجل الدخول (1 / جل٪)
    (أي قريب السيد)

    3. تشكيل الحمض النووي.

    • DNA دائري مغلق (شكل I) - ملفوف بشكل نموذجي
    • دائري مصقول (شكل- II)
    • الحمض النووي الخطي (الشكل الثالث)

    هذه الأشكال المختلفة من الحمض النووي نفسه تهاجر بمعدلات مختلفة من خلال هلام الاغاروز.

    • دائمًا ما يهاجر الشكل الخطي (النموذج الثالث) بأبطأ معدل من الأشكال الثلاثة
    • عادةً ما يهاجر الحمض النووي الفائق الالتواء (النموذج I) بشكل أسرع

    نطاق فصل الحمض النووي الخطي

    أخيرًا ، الحمض النووي هو جزيء حمضي ، يهاجر نحو القطب الموجب الشحنة (الكاثود).


    تمارين جل الكهربائي

    في هذا المعمل ، ستستخدم مواد هلامية agarose لفصل جزيئات الحمض النووي المنتجة في تفاعلات تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR). يجب أن يتم حل منتجات PCR بشكل جيد على مواد هلامية بنسبة 1.25٪ محضرة في محلول TAE ، والذي يوفر فصلًا جيدًا للجزيئات التي يقل حجمها عن 2 كيلو بايت. ضع صينية الصب في جهاز الجل. إذا كنت تستخدم أجهزة BioRad ، فضع الأوتاد السوداء على كل طرف من أطراف صينية الصب.

    1. حدد كمية الاغاروز التي ستحتاجها للحصول على جل 1.25٪ (1.25 جم / 100 مل) يناسب منصة الصب الخاصة بك. معظم أجهزة الهلام في المختبر هي أنظمة BioRad Mini-Sub GT مع صينية صب 7 سم × 7 سم تتسع ل 30 مل من الجل. تحقق من حساباتك مع زملائك في الفريق قبل المتابعة.
    2. املأ أسطوانة متدرجة بالحجم المناسب لمخزن TAE المؤقت. صب المحلول في دورق صغير.
    3. وزن الكمية المناسبة من الاغاروز. يرش الاغاروز على سطح TAE في القارورة. ملاحظة: لن يذوب الاغاروز حتى يتم تسخينه.
    4. قم بإذابة الاغاروز عن طريق تسخين المحلول لفترات تتراوح من 15 إلى 20 ثانية في فرن الميكروويف. بعد كل فاصل زمني ، قم بإزالة القارورة وقم بتدويرها برفق حولها قليلاً لتفريق المحتويات. لاحظ ما إذا كانت جزيئات الاغاروز لا تزال ظاهرة أو إذا كان الاغاروز قد ذاب. أفضل المواد الهلامية مصنوعة من الاغاروز الذي لم يتم طهيه بإفراط. ملاحظة السلامة: سيكون محلول الاغاروز ساخنًا جدًا عند إزالته من الميكروويف! توخى الحذر عند التعامل مع القارورة. احرص بشكل خاص على عدم ملامسة البخار المتدفق من فتحة القارورة. قم بطي عدة مناشف ورقية ولفها حول عنق القارورة عند الإمساك بها. إذا حدث انسكاب بعض الأغاروز الساخن على جلدك ، اغسله على الفور بالماء البارد وقم بتنبيه TA الخاص بك.
    5. اترك محلول الاغاروز يبرد حتى تتمكن من لمس القارورة بيديك بشكل مريح. محاليل Agarose التي تزيد درجة حرارتها عن 60 درجة مئوية سوف تشوه صينية الصب! صب الجل. ضع عينة المشط في مكانها. لا تحرك منصة الصب حتى يتماسك الجل. ستعرف أن الجل يتم تثبيته عندما يصبح معتمًا. اترك الجل يجف لمدة 20 دقيقة بعد أن يتماسك.
    إعداد عينة

    تحضير العينات الخاصة بك للرحلان الكهربائي أثناء معالجة الجل عن طريق إضافة عازلة تحميل مركزة. يحتوي المخزن المؤقت للتحميل على صبغين ، بروموفينول أزرق وسيانول زيلين. أثناء الرحلان الكهربائي ، ستهاجر الأصباغ بأوزان جزيئية "ظاهرية"

    0.5 كيلو بايت على التوالي. يحتوي المخزن المؤقت للتحميل أيضًا على الجلسرين ، مما يجعل العينة كثيفة بدرجة كافية لتغرق في قاع العينة جيدًا.

    إضافة 4 ميكرولتر من 6X تحميل المخزن المؤقت مباشرة إلى كل من تفاعلات PCR 20 ميكرولتر من المختبر الأخير. باختصار ، قم بالطرد المركزي لكل أنبوب لخلط الصبغة والعينات ، إذا لزم الأمر. ستستخدم نصف كل عينة في المواد الهلامية. قم بتخزين العينة المتبقية في الثلاجة.

    قم بتحميل وتشغيل هلام الاغاروز
    1. عندما يجف الجل ، قم بإزالة المشط والأوتاد السوداء بعناية.
    2. قم بتوجيه الجل في خزان الرحلان الكهربائي بحيث تكون الآبار (الثقوب التي أحدثها المشط) موجهة نحو القطب الأسود (السالب). ستنتقل جزيئات الحمض النووي من البئر نحو القطب الأحمر (الموجب). املأ الخزان بما يكفي من محلول TAE لغمر الجل (حوالي 275-300 مل).
    3. قم بتحميل عينة واحدة لكل بئر ، والتي يمكن أن تستوعب
    وصمة وتحليل هلام الاغاروز

    ملاحظة السلامة: ارتدِ قفازات يمكن التخلص منها عند تلطيخ المواد الهلامية. تعتبر القفازات مهمة عند التعامل مع الأصباغ المتداخلة ، والتي من المحتمل أن تكون مطفرة.


    Spurthi & # 039s AP Biology Notebook


    الملخص
    الرحلان الكهربائي للهلام هو طريقة تفصل الجزيئات بناءً على معدل الحركة عبر الهلام أثناء تطبيق مجال كهربائي. يعتمد الاتجاه الذي تتحرك فيه الجزيئات (للأمام أو للخلف) على شحنة الجزيئات لأنها ستتحرك باتجاه القطب المعاكس لها. تتأثر سرعة تحرك هذه الجزيئات أيضًا بالجوانب الفيزيائية للجزيء ، مثل الحجم والشكل ، وكثافة الهلام ، وقوة مجال الكهرباء. نظرًا لأن كثافة الهلام وقوة المجال الكهربائي هي نفسها بالنسبة لجميع الجزيئات في غرفة رحلان كهربي معينة ، فإن أصغر الجسيمات سيكون لها أسرع معدل حركة.

    نظرًا لأننا لم نكن قادرين على استخدام الحمض النووي لهذا المختبر ، فقد كان علينا استبدالها بتحميل الأصباغ. تحتوي صبغات التحميل هذه على سكروز وأزرق بروموفينول ومخزن TE. لقد صنعنا الجيلاتين بحيث تحتوي على فتحات صغيرة بها مسافة بادئة في النهاية البعيدة. في تلك الخدوش ، نملأها بصبغة تحميل مختلفة الألوان. غرقت صبغة التحميل إلى الأسفل لأنها تحتوي على السكروز. كان اللون الأزرق البروموفينول هو الطريقة التي تمكنوا من صبغهم من التحرك على طول إما إيجابية أو سلبية. استنادًا إلى مكان تحريك الصبغة ، يمكننا تحديد حجم الجزيئات الموجودة فيه وما إذا كانت موجبة أم سلبية.

    الجزء الأول
    أولاً قمنا بصب مادة هلامية باستخدام حمام مائي وميكروويف ومشط جل 6 آبار وصنبور اخفاء وصينية وهلام الاغاروز. باستخدام شريط التقنيع ، قمنا بتغطية طرفي صينية الصب الهلامية لمنع تساقط هلام الاغاروز. بعد ذلك نترك الجل يذوب في حمام الماء الذي فشل في تسخينه لفترة كافية. لذلك قمنا بتسخين زجاجة الهلام في الميكروويف مع إزالة الغطاء كل دقيقة واحدة حتى تذوب تمامًا. باستخدام القفازات الواقية ، أخرجنا الزجاجة ، وقمنا بقياس 15 مل من السائل في أنبوب اختبار واستخدمنا 15 مل في صينية الصب. ومع ذلك ، قبل أن نسكب الجل على الدرج مباشرة ، نضع مشط الهلام المكون من 6 آبار بالقرب من نهاية الدرج. بعد السماح للجيل بالتماسك على الدرج ، قم بإزالة صنبور التقنيع من جانب واحد. قبل تحريك الجل بعناية دون اقتحام الحجرة ، صب العازل من دورق في جانب واحد من الغرفة. بعد وضع الجل على الغرفة ، أضف المخزن المؤقت حتى يصبح المستوى حوالي 2-3 مم فوق الجزء العلوي من الجل. أغلق الغرفة واسمح لها بالبقاء في هذا الوضع لمدة 24-48 ساعة.
    الجزء 2
    بعد يومين ، انقل الجل من الحجرة مرة أخرى إلى اللوحة حتى يتناسب تمامًا. بعد ذلك ، ضع اللوح مع الجل مرة أخرى في الحجرة وصب المخزن المؤقت في الحجرة بحيث يكون حوالي 2-3 ملليمترات فوق الهلام. باستخدام الماصة الدقيقة ، خذ لونًا من الصبغة واحصل على 10 مايكرولتر منه. كرر هذه الخطوة 4 مرات أخرى بألوان مختلفة من الأصباغ وباستخدام الماصات الدقيقة المختلفة لكل لون. بعد ذلك ، قم بتوصيل 5 بطاريات قلوية في كومة وقم بتوصيل السلك الأحمر والسلك الأسود من البطاريات إلى الأجزاء الخاصة بها من الغرفة. بمجرد توصيل حزمة البطارية بالحجرة ، راقب ظهور الفقاعات وما إذا كانت الأصباغ الملونة المختلفة تتحرك وإذا كان الأمر كذلك في أي اتجاه من الغرفة. بعد الملاحظة ، افصل حزمة البطارية عندما تكون عينة الصبغة الأسرع تتحرك بالقرب من نهاية الجل.


    تم أخذ هذا في غضون دقائق من تفعيل المجال الكهربائي. كما ترى ، فإن معظم الأصباغ لها معدلات حركة بطيئة.

    التقطت هذه الصورة قبل فصل الأسلاك وإيقاف تدفق الكهرباء. النتائج ، التي تم التحقق منها بواسطة هذه الصورة ، مسجلة أدناه.

    يتم تحديد طول واتجاه المدى من خلال شحنة الجزيء. بناءً على النتائج ، يمكننا بعد ذلك أن نستنتج أن صبغة الكريستال البنفسجي هي الأكثر سلبية. إنه أيضًا الجزيء الوحيد ذو الشحنة السالبة في مختبرنا. كان ميثيل جرين الأكثر إيجابية ، يليه خليط الصبغة ، زيلين سيانول ، وأخيراً بروموفينول بلو.

    لم تكن الصبغة الكريستالية البنفسجية في خليط الصبغة لأنه لم يكن هناك شريط صبغ موجود في الممر 6.

    تهاجر بعض الأصباغ نحو القطب الموجب والبعض الآخر نحو القطب السالب لأنه في المجال الكهربائي ، تميل الجزيئات نحو شحنة معاكسة للشحنة التي تحملها. لذلك تميل الجزيئات الموجبة نحو السلبية والعكس صحيح.

    ستؤدي زيادة تركيز الاغاروز في الجل إلى تقليل حجم مسام الجل بمجرد تصلب الجل. يمكن استخدام حجم المسام الأصغر لفصل خليط من الجزيئات الأصغر.

    عندما حدث فصل الأصباغ بنسبة أعلى من هلام الاغاروز من تلك المستخدمة لفصل العديد من مخاليط الحمض النووي. يمكننا أن نفترض أن جزيئات الصبغة بشكل عام أصغر من شظايا الحمض النووي.

    إذا تم استدعاؤنا بعيدًا عن مختبرنا الكهربائي ولم نتمكن من مراقبة مختبرنا ، فبمرور الوقت ، ستستمر عينات الصبغة في التحرك نحو الجانب السلبي أو الإيجابي من القطبين. إذا تركناها لفترة كافية ، فإن الجل سينتقل من الجل.

    يختلف إجراء الرحلان الكهربائي للحمض النووي عن طريق الاغاروز عن الإجراء الخاص بنا لأن الحمض النووي غير مرئي للعين لذلك يتطلب صبغة تتبع على عينات الحمض النووي لتحديد موعد إنهاء معمل الفصل الكهربائي. الفرق الآخر هو أن الحمض النووي يحمل شحنة سالبة لذلك توضع العينات في أحد طرفي الهلام بدلاً من الطرف الآخر.

    الكهربائي مقابل. اللوني

    إعداد الكهربائي


    استخدام آخر للرحلان الكهربائي يمكن أن يكون الهندسة الوراثية ، وتحديد البروتينات ، واختبار الأبوة ، والكشف عن الاضطرابات الوراثية. يمكن استخدام أي شيء يتعلق بالحمض النووي في الرحلان الكهربائي.

    هل ينبغي إنشاء بنوك بيانات لمعلومات الحمض النووي؟ يجب إنشاء بنوك بيانات لمعلومات الحمض النووي طالما أنها تساعد الآخرين ولا يتم إساءة استخدامها. من فوائده استخدامه لدراسة الاضطرابات الجينية أو تحديد الهوية في قضايا المحاكم ، لكن العيب هو البحث لمحاولة تغيير الحمض النووي من أجل المظهر. يجب أن يكون الأشخاص الذين يجب أن يتحكموا في المعلومات هم الشخص الذي يتم تخزين الحمض النووي الخاص به ويجب أن يتحكم الأشخاص الجديرون بالثقة في المعلومات. على سبيل المثال ، الشخص الجيد للوظيفة هو الشخص الذي لن يستخدم بنك الحمض النووي لمنافعه. يجب أيضًا أن تكون تحت حراسة مشددة لأنها معلومات شخصية. يجب استخدام الحمض النووي المأخوذ من المشتبه به لتحديد هويته بدقة لتحديد الهوية والتعرف فقط. فقط الأطفال الذين لديهم تاريخ عائلي للإصابة باضطراب وراثي يجب أن يتم أخذ بصمات الحمض النووي الخاصة بهم عند الولادة لأغراض السلامة ولأغراض الوقاية المبكرة.

    استنتاج
    بعد إجراء هذه التجربة باستخدام صبغات التحميل ، توصلنا إلى أن صبغة الكريستال البنفسجي كانت الأكثر سلبية. خلصنا أيضًا إلى أن الميثيل الأخضر كان الأكثر إيجابية. ساعدتنا هذه التجربة على اكتساب فهم أفضل للهلام الكهربائي.


    استكشاف الأخطاء وإصلاحها والتنظيف

    سؤال: "كيف تتخلص من لوحات بتري المستعملة؟"

    الجواب 1: "التعقيم بالبخار هو الأفضل. إذا كانت مدرستك لا تستطيع تحمل تكلفة الأوتوكلاف ، فإن قدر الضغط الكهربائي الجيد (a la Sears) سيفي بالغرض. 14 # ضغط. 15 دقيقة). يمكنك نقعهم في مبيض بنسبة 10 في المائة ولكن هذا لا يقتل الجراثيم ماذا لو كان لديك عصيات الجمرة الخبيثة؟ لا أقصد أن أكون متخوفًا جدًا من ذلك ، لكن الكائنات الحية المكونة للأبواغ يمكن أن تكون خطيرة مثل الإشريكية القولونية المسببة للسموم ".
    ستو شنيل، مدرسة جون سي فريمان الثانوية ، لوس أنجلوس ، كاليفورنيا. 11/30/99

    الجواب 2: "مجرد اقتراح لكل من يقلق بشأن اللوحات المستخدمة. كوِّن ارتباطًا جيدًا بالمستشفى المحلي الذي تعيش فيه. نحن" صديق التعليم "المعين. إنهم لا يزودوننا فقط بألواح أجار وأكياس بيولوجية ولكنني أعيدهم إلى المستشفى في أكياس بيولوجية ويتخلصون منها من أجلي مع نفاياتهم ".
    مارلا فون، أوروفيل ، كاليفورنيا. 12/6/99

    الجواب 3: "اعتدت أن آخذ أطباقي إلى مختبر علم الأحياء الدقيقة في كلية قريبة. لقد كانوا لطفاء بما يكفي لتعقيمها بالأوتوكلاف. بعض الناس أيضًا يسكبون 10 في المائة من المُبيض عليها ، ثم يتخلصون منها. ومع ذلك ، فإن القوانين تتغير ، وفي ولاية كونيتيكت نحن الآن لدينا ترتيب مع مجموعة النفايات السامة التي تزودنا بحاوية مبطنة بالبلاستيك. عندما تمتلئ الحاوية ، نسميها ، ويأتون لاستلامها - مقابل رسوم (أعتقد أننا رتبنا شيئًا مثل 50 دولارًا لكل شاحنة ). تستغرق مدرسة صغيرة مثلنا وقتًا طويلاً لملء الحاوية. طالما أنك تغلقها جيدًا وتحتوي على الرائحة ، فهذا ليس سيئًا للغاية. لقد وجدت هذا الزي في الصفحات الصفراء. كان علينا صنع القليل قبل أن نجد شركة على استعداد لالتقاط ما يسمونه النفايات الطبية ".
    باربرا بيتش، مدرسة Hamden Hall Country Day School ، هامدن ، كونيتيكت. 12/1/99

    الجواب 4: "إذا لم يكن لديك جهاز تعقيم أو قدر ضغط ، يمكنك تطهير الأطباق بمحلول كلوروكس بنسبة 10 بالمائة. قم بتغطيتها واتركها لمدة 10 دقائق."
    بروس فيتش، مدرسة جيلفورد الثانوية ، جيلفورد ، كونيتيكت. 12/1/99

    الجواب 5: "الميكروويف ليس بديلاً آمنًا للتعقيم في رأيي. إنه لا ينتج حرارة كافية لقتل الجراثيم ، وغالبًا ما يسخن الموضوع بشكل غير متساو. استخدم الأوتوكلاف أو أحد المطهرات التجارية المصممة لقتل الجراثيم. هناك المنتجات الاحترافية الموجودة في السوق والتي يتم تطهيرها تمامًا ، بما في ذلك قتل الجراثيم. يعد Wavacide أحد هذه المنتجات. يقول الملصق أنه مبيد للأبواغ عند استخدامه بالقوة الموصى بها. لقد استخدمته ، وهو يعمل بقدر ما أستطيع أن أقول. قصر استخدامه على البيئة ، مثل كونترتوب ، والأرضية ، وما إلى ذلك ، في حالة حدوث انسكاب عرضي. إذا كنت تعمل مع البكتيريا ، فيجب أن تكون مستعدًا للانسكابات لأنها ستحدث في الفصل الدراسي ، فهذا مضمون! إذا كنت تتحدث عن المطهرات المنزلية ، أوافق على أنهم لا يقتلون الجراثيم - في الواقع ، غالبًا لا يقتلون الخلايا النباتية البكتيرية تمامًا. التعقيم بالبخار هو الطريقة المفضلة للتخلص الآمن. بالنسبة للمعلمين غير المدربين في علم الأحياء الدقيقة ، ربما ينبغي عليهم استخدام جهاز التخلص من البكتيريا. خدمة ل. سأكون ممتنًا لأي معلومات يمكن لأي شخص تقديمها حول قانون يعالج هذه المشكلة ، وإذا كان الأمر كذلك ، فهل هو قانون ولاية أم قانون اتحادي أم مجرد إرشادات ، لأن رأيي المهني هو الذي قام بتدريب المعلمين بشكل صحيح باستخدام المعدات المناسبة (الأوتوكلاف) سيكون قادرًا على التخلص من النفايات البكتيرية بأمان. في الواقع ، لا يُنصح بالانتظار لأسابيع أو حتى شهور حتى يتم التخلص من المحترفين لأن الانتظار قد يزيد من مخاطر التلوث ".
    بروس فيتش، مدرسة جيلفورد الثانوية ، جيلفورد ، كونيتيكت. 4/10/00 و 4/11/00

    سؤال: "هل يمكن لأي شخص أن يعطيني" خط الحفلة "عند إنشاء منحنى قياسي HindIII. لاحظ عدد قليل من طلابي أن أحجام أجزاء EcoRI تكون أكثر دقة عندما يتم إنشاء المنحنى القياسي بمجرد" توصيل النقاط "بدلاً من إنشاء خط أفضل ملاءمة: أول نقطة بيانات على منحنى HindIII ، أكبر جزء ، عادة ما تكون بعيدة عن الخط مع النقاط الأخرى. إذن ما هو؟ هل هو "خط أفضل ملاءمة" أم "ربط النقاط"؟ في عدد قليل من مواقع الجامعات ، قرأت أن ربط النقاط يعطي نتائج أكثر دقة ".

    الجواب 1: "عندما أجريت هذا المعمل نفسه كطالب في دورة البيولوجيا الجزيئية للخريجين ، قيل لي إن الوظيفة هي قطع مكافئ وأن استخدام أفضل منحنى ملائم بدلاً من الخط الأفضل. لدي طلابي في AP Biology يقومون بذلك باستخدام المنحنى وهو يعمل بشكل رائع. "
    مارسيا سلون، مدرسة كليبورن الثانوية ، كليبورن ، تكساس. 1/10/01

    الجواب 2: "لقد تعلمت أن أسقط النقطة العليا (الجزء الكبير) في منحنى HindIII عند استخدام هلام بنسبة 1 في المائة لأن تركيز الهلام هذا يعمل بشكل أفضل مع الأجزاء متوسطة الحجم. لفصل الأجزاء الكبيرة ، سيتم استخدام هلام أقل تركيزًا لفصل شظايا أصغر ، سيتم استخدام هلام أكثر تركيزًا - وبالتالي فإن البروتوكولات المختلفة لإعداد الهلام ، اعتمادًا على حجم الأجزاء الأكثر أهمية. وهذا يعطي نتائج جيدة بالنسبة لنا. راجع للشغل - قبل بضع سنوات عندما تم دفع الآلات الحاسبة بالرسوم البيانية "كتقنية جديدة ، سيستخدم الطلاب هؤلاء للحصول على أفضل منحنى مناسب وحصلوا على نتائج جيدة. ومع ذلك ، نظرًا لعدم تمكنهم من استخدام تلك الموجودة في اختبار AP Biology ، فقد جعلتهم يستخدمون ورقة الرسم البياني أيضًا. كان من المدهش معرفة عدد لا يمكن للأطفال الأذكياء استخدام ورقة الرسم البياني. الآن لن أسمح لهم حتى بإخراج آلاتهم الحاسبة! "
    إلين مايو، مركز ميلز جودوين التخصصي للعلوم والرياضيات والتكنولوجيا ، ريتشموند ، فيرجينيا. 1/10/01


    ما هو الفرق بين Agarose و Polyacrylamide؟

    أصل Agarose و Polyacrylamide:

    الاغاروز: Agarose هو بوليمر من أصل طبيعي. مشتق من الأعشاب البحرية.

    بولي أكريلاميد: بولي أكريلاميد من أصل اصطناعي ولا يوجد تحت أي ظروف طبيعية.

    الصيغة الجزيئية لـ Agarose و Polyacrylamide:

    الاغاروز: الصيغة الجزيئية ل agarose هي C24ح38ا19.

    بولي أكريلاميد: الصيغة الجزيئية لبولي أكريلاميد هي (C 3ح5لا)ن.

    التركيب الكيميائي لـ Agarose و Polyacrylamide:

    الاغاروز: Agarose هو عديد السكاريد الخطي. وهي مكونة من وحدات ثنائي السكاريد المتكررة تسمى agrobiose مرتبطة ببعضها البعض بواسطة روابط هيدروجينية.

    بولي أكريلاميد: بولي أكريلاميد هو بوليمر متصالب كيميائيًا. وهي مكونة من مونومرات الأكريلاميد وعامل تشابك N ، N’-methylenebisacrylamide.

    سمية الاغاروز وبولي أكريلاميد:

    الاغاروز: كل من الاغاروز ووحدة مونومر agrobiose غير سامة بطبيعتها.

    بولي أكريلاميد: تعتبر وحدة مونومر بولي أكريلاميد ، الأكريلاميد ، مادة مسرطنة مفترضة وسم عصبي معروف بينما شكلها المبلمر غير سام بطبيعته.

    خصائص Agarose و Polyacrylamide المواد الهلامية:

    العمر والصفحة:

    الاغاروز: يعد تحضير هلام Agarose لـ AGE أقل استهلاكا للوقت ، وهو سهل وبسيط ، ولا يتطلب بادئ أو محفز بلمرة.

    بولي أكريلاميد: يعد تحضير جل بولي أكريلاميد لـ PAGE مضيعة للوقت ومملة ويتطلب أيضًا بادئًا (كبريتات الأمونيوم) ومحفز البلمرة (N ، N ، N ، N’-tetramethylethylendiamine & # 8211 TEMED).

    طبيعة سجية:

    المواد الهلامية بولي أكريلاميد أكثر ثباتًا كيميائيًا من المواد الهلامية من الاغاروز.

    حجم المسام:

    بالنظر إلى نفس التركيز ، تميل مصفوفات هلام بولي أكريلاميد إلى أن يكون لها أحجام مسام أصغر مقارنة بمصفوفة جل الاغاروز.

    تغيير حجم المسام:

    يمكن تغيير حجم مسام المواد الهلامية بولي أكريلاميد بطريقة أكثر تحكمًا من تلك الموجودة في مواد هلامية الاغاروز.

    قدرة الميز:

    تتمتع المواد الهلامية بولي أكريلاميد بقدرة تحليل عالية بينما تتمتع المواد الهلامية التي تحتوي على مادة الأغاروز بقدرة حل منخفضة.

    استيعاب الحمض النووي:

    يمكن أن تستوعب المواد الهلامية بولي أكريلاميد كميات أكبر من الحمض النووي من المواد الهلامية من الاغاروز لوسائل التحليل.

    الصور مجاملة: Agarose و Structure of polyacrylamide عبر Wikicommons (المجال العام)

    المنشورات ذات الصلة:

    نبذة عن الكاتب: Admin

    قادم من الهندسة وخلفية تنمية الموارد البشرية ، لديه أكثر من 10 سنوات من الخبرة في تطوير المحتوى وإدارته.

    اترك رد إلغاء الرد

    المشاركات مميزة


    شاهد الفيديو: شرح عملي للgel electrophoresis بالعربي (كانون الثاني 2022).