معلومة

7.13H: اندماج المراسل - علم الأحياء

7.13H: اندماج المراسل - علم الأحياء



We are searching data for your request:

Forums and discussions:
Manuals and reference books:
Data from registers:
Wait the end of the search in all databases.
Upon completion, a link will appear to access the found materials.

اندماج المراسل هو مزيج من جين أو جزء من جين بعلامة يمكن تتبعها.

أهداف التعلم

شرح اندماج المراسل

النقاط الرئيسية

  • يسمح بناء المراسل بدراسة وظيفة الجين وتوطين منتج الجين.
  • تسمح تركيبات مراسل المروج بالتعبير عن البروتين تحت سيطرة الجين المستهدف.
  • يمكن أن تدمج عمليات اندماج المراسل بروتينًا مهمًا لبروتينًا له خاصية الاهتمام ، مما يسمح بإجراء مزيد من الدراسة للبروتين الموسوم.

الشروط الاساسية

  • تمثيلي الركيزة: نظائر الركيزة (نظائر حالة الركيزة) ، هي مركبات كيميائية ذات بنية كيميائية تشبه جزيء الركيزة في تفاعل كيميائي محفز بالإنزيم.
  • الانارة: انبعاث الضوء من خلال التلألؤ.

في علم الأحياء الجزيئي ، الجين المراسل (غالبًا ما يكون مجرد مراسل) هو جين يربطه الباحثون بتسلسل تنظيمي لجين آخر مهم في البكتيريا أو ثقافة الخلية أو الحيوانات أو النباتات. يتم اختيار جينات معينة كمراسلين لأن الخصائص التي تمنحها للكائنات الحية التي تعبر عنها يمكن تحديدها وقياسها بسهولة ، أو لأنها علامات قابلة للاختيار. غالبًا ما تُستخدم جينات المراسل كمؤشر على ما إذا كان قد تم تناول جين معين بواسطة أو تم التعبير عنه في مجموعة الخلية أو الكائن الحي.

لإدخال جين مراسل في كائن حي ، يضع العلماء الجين المراسل والجين المعني في نفس بنية الحمض النووي ليتم إدخالها في الخلية أو الكائن الحي. بالنسبة للبكتيريا أو الخلايا بدائية النواة في المزرعة ، يكون هذا عادةً في شكل جزيء DNA دائري يسمى البلازميد. من المهم استخدام جين المراسل الذي لم يتم التعبير عنه أصلاً في الخلية أو الكائن قيد الدراسة ، حيث يتم استخدام تعبير المراسل كعلامة للاستيعاب الناجح للجين محل الاهتمام. عادة ما تتضمن جينات المراسل المستخدمة بشكل شائع والتي تحث على خصائص يمكن التعرف عليها بصريًا بروتينات فلورية ومتألقة. تتضمن الأمثلة الجين الذي يشفر بروتين قنديل البحر الأخضر الفلوري (GFP) ، والذي يتسبب في توهج الخلايا التي تعبر عنه باللون الأخضر تحت الضوء الأزرق ، وإنزيم لوسيفيراز ، الذي يحفز التفاعل مع لوسيفيرين لإنتاج الضوء ، والبروتين الأحمر الفلوري من الجين dsRed . المراسل الشائع للبكتيريا هو جين E. coli lacZ ، الذي يشفر بروتين بيتا جالاكتوزيداز. يتسبب هذا الإنزيم في ظهور البكتيريا التي تعبر عن الجين باللون الأزرق عند نموها على وسط يحتوي على الركيزة التناظرية X-gal. من الأمثلة على الواسمات القابلة للتحديد والتي تعد أيضًا مراسلًا للبكتيريا هي جين الكلورامفينيكول أسيتيل ترانسفيراز (CAT) ، والذي يمنح مقاومة لمضاد الكلورامفينيكول.

يمكن أيضًا استخدام جينات المراسل لفحص التعبير عن الجين المعني ، والذي قد ينتج بروتينًا ليس له تأثير واضح أو فوري على ثقافة الخلية أو الكائن الحي. في هذه الحالات ، يتم ربط المراسل مباشرة بالجين المعني لخلق اندماج جيني. يقع الجينان تحت نفس عناصر المروج ويتم نسخهما إلى جزيء واحد من الحمض النووي الريبي. ثم يتم ترجمة mRNA إلى بروتين. في هذه الحالات ، من المهم أن يكون كلا البروتينين قادرين على الانطواء بشكل صحيح في توافقهما النشط والتفاعل مع ركائزهما على الرغم من اندماجهما. في بناء بنية الحمض النووي ، عادةً ما يتم تضمين جزء من تشفير الحمض النووي لمنطقة رابط مرنة عديد الببتيد بحيث يتداخل المراسل والمنتج الجيني مع بعضهما البعض بشكل ضئيل. يتم ذلك غالبًا باستخدام GFP. الهجين الناتج عن البروتين GFP المنسوخ من بناء المراسل يحتوي الآن على بروتين مرتبط بـ GFP. في حالة GFP التي تتألق يمكن للمرء أن يستنتج أن البروتين المرتبط يكون أينما كان التألق. يسمح هذا للباحثين بتحديد مكان وجود البروتين في الخلية.


شاهد الفيديو: رکورد دار ایرانی که همه اسکینا رو داره (أغسطس 2022).