عام

تفاعل البلمرة المتسلسل (PCR)


تسلسل PCR

تفاعل البلمرة المتسلسل (PCR) هو عملية اصطناعية لتضخيم الحمض النووي.
يجد التطبيق العملي في اختبارات الأبوة ، والبصمات الوراثية للجرائم الجنائية أو للكشف عن الأمراض (الأمراض الوراثية وكذلك الالتهابات الفيروسية)
في ما يسمى بالحرارة الحرارية ، يتم تجميع الحمض النووي المراد تضخيمه مع النيوكليوتيدات الحرة وبوليمرات الدنا والاشعال الخاص. يسمح المعالج الحراري بعد ذلك بالتسلسل التلقائي لـ PCR ، لأنه يستغرق عدة دورات حتى يتم تضخيم عدد كاف من الحمض النووي. بالفعل واحد حبلا المزدوج الحمض النووي يكفي لتطبيق هذا الإجراء. عدد الدوبلكس الحمض النووي ثم يزيد أضعافا مضاعفة لكل دورة (1-2-4-8-16 ، الخ) ، بحيث تتوفر مادة وراثية كافية بعد 30-50 دورة. ومع ذلك ، في تفاعل سلسلة البلمرة ، لا يتم مضاعفة الدوبلكس الحمض النووي الكامل ولكن أقسام محددة سلفا فقط. يمكن تعريف هذه المقاطع بدقة شديدة عن طريق الاشعال المصطنع.
تمسخ: يتم تسخين الحمض النووي إلى حوالي 90 درجة مئوية ، مما يذوب الروابط الهيدروجينية بين القواعد التكميلية. هذا يفصل الحمض النووي في فروعه الفردية.
تهجينعند حوالي 60 درجة مئوية ، تصلب الاشعال المحددة إلى نهايات 3 من فروع الحمض النووي واحد. ينطبق مبدأ التكامل: وفقًا لقواعدهم ، لا يمكن للاشعال أن يرتبط إلا بنظير مكمل (الأدينين مع ثيمين وسيتوزين مع جوانين).
التبلمر: ترتفع درجة الحرارة إلى حوالي 70 درجة مئوية. تبدأ بوليميرات الحمض النووي عند الاشعال من 3 إلى 5 مع ربط القواعد التكميلية (الاستطالة). في النهاية ، تم إنشاء حلقتين مفردة من الحمض النووي DNA ، وسرينتين مزدوجتين لل DNA.
الآن ، كما سبق ذكره ، هناك تكرار لهذه الخطوات الثلاث.