معلومة

ما هي الكيماويات التي تنتجها الخلايا الصباغية؟


أنا أبحث في البهاق ، إنه مرض مناعي ذاتي ينتج عنه موت الخلايا المبرمج للخلايا الصباغية بسبب تراكم البروتين الخاطئ.

كما أنه يزيد بشكل كبير من معدلات الإصابة بسرطان الثدي (600 مرة) في غضون سنة إلى خمس سنوات من ظهور الأعراض الأولى للبهاق. تتمثل إحدى وظائف الخلايا الصباغية في إنتاج مواد كيميائية ولكن لم أتمكن من العثور على أي معلومات عنها.

ما هي الكيماويات التي تنتجها الخلايا الصباغية؟


الحدود في علم المناعة

انتماءات المحرر والمراجعين هي الأحدث التي يتم توفيرها في ملفات تعريف بحث Loop وقد لا تعكس موقفهم في وقت المراجعة.


  • تحميل المادة
    • تحميل PDF
    • ReadCube
    • EPUB
    • XML (NLM)
    • تكميلي
      مادة
    • ملاحظة ختامية
    • مدير المراجع
    • ملف TEXT بسيط
    • BibTex


    مشاركه فى

    الإفراط في إنتاج الكيماويات الخاصة بـ Th2 في الفئران NC / Nga التي تظهر آفات شبيهة بالتهاب الجلد التأتبي

    1 قسم الطب الوقائي الجزيئي ، جامعة طوكيو ، طوكيو 113-0033 ، اليابان 2 قسم الأمراض الجلدية ، مستشفى مارسيليسبورج ، جامعة آرهوس ، 8000 آرهوس سي ، الدنمارك 3 قسم الأمراض الجلدية ، كلية الطب ، جامعة طوكيو ، طوكيو 113- 0033 ، اليابان 4 قسم علم الجراثيم ، كلية الطب ، جامعة كينكي ، أوساكا 589-8511 ، اليابان 5 مختبر بيولوجيا السرطان والمناعة الجزيئية ، كلية الدراسات العليا لعلم الأدوية ، جامعة طوكيو ، طوكيو 113-0033 ، اليابان 6 قسم الأمراض الجلدية ، جامعة مي ، كلية الطب ، مي 547-8507 ، اليابان

    مراسلات العنوان إلى: كوجي ماتسوشيما ، قسم الطب الوقائي الجزيئي ، كلية الطب ، جامعة طوكيو ، 7-3-1 هونغو ، بونكيو-كو ، طوكيو 113-0033 ، اليابان. الفاكس: 81-3-5684-2297 البريد الإلكتروني: [email protected]

    اعثر على مقالات بواسطة Vestergaard، C. في: JCI | PubMed | منحة جوجل

    1 قسم الطب الوقائي الجزيئي ، جامعة طوكيو ، طوكيو 113-0033 ، اليابان 2 قسم الأمراض الجلدية ، مستشفى مارسيليسبورج ، جامعة آرهوس ، 8000 آرهوس سي ، الدنمارك 3 قسم الأمراض الجلدية ، كلية الطب ، جامعة طوكيو ، طوكيو 113- 0033 ، اليابان 4 قسم علم الجراثيم ، كلية الطب ، جامعة كينكي ، أوساكا 589-8511 ، اليابان 5 مختبر بيولوجيا السرطان والمناعة الجزيئية ، كلية الدراسات العليا لعلم الأدوية ، جامعة طوكيو ، طوكيو 113-0033 ، اليابان 6 قسم الأمراض الجلدية ، جامعة مي ، كلية الطب ، مي 547-8507 ، اليابان

    مراسلات العنوان إلى: كوجي ماتسوشيما ، قسم الطب الوقائي الجزيئي ، كلية الطب ، جامعة طوكيو ، 7-3-1 هونغو ، بونكيو-كو ، طوكيو 113-0033 ، اليابان. الفاكس: 81-3-5684-2297 البريد الإلكتروني: [email protected]

    اعثر على مقالات بواسطة Yoneyama، H. في: JCI | PubMed | منحة جوجل

    1 قسم الطب الوقائي الجزيئي ، جامعة طوكيو ، طوكيو 113-0033 ، اليابان 2 قسم الأمراض الجلدية ، مستشفى مارسيليسبورج ، جامعة آرهوس ، 8000 آرهوس سي ، الدنمارك 3 قسم الأمراض الجلدية ، كلية الطب ، جامعة طوكيو ، طوكيو 113- 0033 ، اليابان 4 قسم علم الجراثيم ، كلية الطب ، جامعة كينكي ، أوساكا 589-8511 ، اليابان 5 مختبر بيولوجيا السرطان والمناعة الجزيئية ، كلية الدراسات العليا لعلم الأدوية ، جامعة طوكيو ، طوكيو 113-0033 ، اليابان 6 قسم الأمراض الجلدية ، جامعة مي ، كلية الطب ، مي 547-8507 ، اليابان

    مراسلات العنوان إلى: كوجي ماتسوشيما ، قسم الطب الوقائي الجزيئي ، كلية الطب ، جامعة طوكيو ، 7-3-1 هونغو ، بونكيو-كو ، طوكيو 113-0033 ، اليابان. الفاكس: 81-3-5684-2297 البريد الإلكتروني: [email protected]

    1 قسم الطب الوقائي الجزيئي ، جامعة طوكيو ، طوكيو 113-0033 ، اليابان 2 قسم الأمراض الجلدية ، مستشفى مارسيليسبورج ، جامعة آرهوس ، 8000 آرهوس سي ، الدنمارك 3 قسم الأمراض الجلدية ، كلية الطب ، جامعة طوكيو ، طوكيو 113- 0033 ، اليابان 4 قسم علم الجراثيم ، كلية الطب ، جامعة كينكي ، أوساكا 589-8511 ، اليابان 5 مختبر بيولوجيا السرطان والمناعة الجزيئية ، كلية الدراسات العليا لعلم الأدوية ، جامعة طوكيو ، طوكيو 113-0033 ، اليابان 6 قسم الأمراض الجلدية ، جامعة مي ، كلية الطب ، مي 547-8507 ، اليابان

    مراسلات العنوان إلى: كوجي ماتسوشيما ، قسم الطب الوقائي الجزيئي ، كلية الطب ، جامعة طوكيو ، 7-3-1 هونغو ، بونكيو-كو ، طوكيو 113-0033 ، اليابان. الفاكس: 81-3-5684-2297 البريد الإلكتروني: [email protected]

    اعثر على مقالات بواسطة Nakamura، K. في: JCI | PubMed | منحة جوجل

    1 قسم الطب الوقائي الجزيئي ، جامعة طوكيو ، طوكيو 113-0033 ، اليابان 2 قسم الأمراض الجلدية ، مستشفى مارسيليسبورج ، جامعة آرهوس ، 8000 آرهوس سي ، الدنمارك 3 قسم الأمراض الجلدية ، كلية الطب ، جامعة طوكيو ، طوكيو 113- 0033 ، اليابان 4 قسم علم الجراثيم ، كلية الطب ، جامعة كينكي ، أوساكا 589-8511 ، اليابان 5 مختبر بيولوجيا السرطان والمناعة الجزيئية ، كلية الدراسات العليا لعلم الأدوية ، جامعة طوكيو ، طوكيو 113-0033 ، اليابان 6 قسم الأمراض الجلدية ، جامعة مي ، كلية الطب ، مي 547-8507 ، اليابان

    مراسلات العنوان إلى: كوجي ماتسوشيما ، قسم الطب الوقائي الجزيئي ، كلية الطب ، جامعة طوكيو ، 7-3-1 هونغو ، بونكيو-كو ، طوكيو 113-0033 ، اليابان. الفاكس: 81-3-5684-2297 البريد الإلكتروني: [email protected]

    1 قسم الطب الوقائي الجزيئي ، جامعة طوكيو ، طوكيو 113-0033 ، اليابان 2 قسم الأمراض الجلدية ، مستشفى مارسيليسبورج ، جامعة آرهوس ، 8000 آرهوس سي ، الدنمارك 3 قسم الأمراض الجلدية ، كلية الطب ، جامعة طوكيو ، طوكيو 113- 0033 ، اليابان 4 قسم علم الجراثيم ، كلية الطب ، جامعة كينكي ، أوساكا 589-8511 ، اليابان 5 مختبر بيولوجيا السرطان والمناعة الجزيئية ، كلية الدراسات العليا لعلم الأدوية ، جامعة طوكيو ، طوكيو 113-0033 ، اليابان 6 قسم الأمراض الجلدية ، جامعة مي ، كلية الطب ، مي 547-8507 ، اليابان

    مراسلات العنوان إلى: كوجي ماتسوشيما ، قسم الطب الوقائي الجزيئي ، كلية الطب ، جامعة طوكيو ، 7-3-1 هونغو ، بونكيو-كو ، طوكيو 113-0033 ، اليابان. الفاكس: 81-3-5684-2297 البريد الإلكتروني: [email protected]

    اعثر على مقالات بواسطة Terashima، Y. في: JCI | PubMed | منحة جوجل

    1 قسم الطب الوقائي الجزيئي ، جامعة طوكيو ، طوكيو 113-0033 ، اليابان 2 قسم الأمراض الجلدية ، مستشفى مارسيليسبورج ، جامعة آرهوس ، 8000 آرهوس سي ، الدنمارك 3 قسم الأمراض الجلدية ، كلية الطب ، جامعة طوكيو ، طوكيو 113- 0033 ، اليابان 4 قسم علم الجراثيم ، كلية الطب ، جامعة كينكي ، أوساكا 589-8511 ، اليابان 5 مختبر بيولوجيا السرطان والمناعة الجزيئية ، كلية الدراسات العليا لعلم الأدوية ، جامعة طوكيو ، طوكيو 113-0033 ، اليابان 6 قسم الأمراض الجلدية ، جامعة مي ، كلية الطب ، مي 547-8507 ، اليابان

    مراسلات العنوان إلى: كوجي ماتسوشيما ، قسم الطب الوقائي الجزيئي ، كلية الطب ، جامعة طوكيو ، 7-3-1 هونغو ، بونكيو-كو ، طوكيو 113-0033 ، اليابان. الفاكس: 81-3-5684-2297 البريد الإلكتروني: [email protected]

    1 قسم الطب الوقائي الجزيئي ، جامعة طوكيو ، طوكيو 113-0033 ، اليابان 2 قسم الأمراض الجلدية ، مستشفى مارسيليسبورج ، جامعة آرهوس ، 8000 آرهوس سي ، الدنمارك 3 قسم الأمراض الجلدية ، كلية الطب ، جامعة طوكيو ، طوكيو 113- 0033 ، اليابان 4 قسم علم الجراثيم ، كلية الطب ، جامعة كينكي ، أوساكا 589-8511 ، اليابان 5 مختبر بيولوجيا السرطان والمناعة الجزيئية ، كلية الدراسات العليا لعلم الأدوية ، جامعة طوكيو ، طوكيو 113-0033 ، اليابان 6 قسم الأمراض الجلدية ، جامعة مي ، كلية الطب ، مي 547-8507 ، اليابان

    مراسلات العنوان إلى: كوجي ماتسوشيما ، قسم الطب الوقائي الجزيئي ، كلية الطب ، جامعة طوكيو ، 7-3-1 هونغو ، بونكيو-كو ، طوكيو 113-0033 ، اليابان. الفاكس: 81-3-5684-2297 البريد الإلكتروني: [email protected]

    1 قسم الطب الوقائي الجزيئي ، جامعة طوكيو ، طوكيو 113-0033 ، اليابان 2 قسم الأمراض الجلدية ، مستشفى مارسيليسبورج ، جامعة آرهوس ، 8000 آرهوس سي ، الدنمارك 3 قسم الأمراض الجلدية ، كلية الطب ، جامعة طوكيو ، طوكيو 113- 0033 ، اليابان 4 قسم علم الجراثيم ، كلية الطب ، جامعة كينكي ، أوساكا 589-8511 ، اليابان 5 مختبر بيولوجيا السرطان والمناعة الجزيئية ، كلية الدراسات العليا لعلم الأدوية ، جامعة طوكيو ، طوكيو 113-0033 ، اليابان 6 قسم الأمراض الجلدية ، جامعة مي ، كلية الطب ، مي 547-8507 ، اليابان

    مراسلات العنوان إلى: كوجي ماتسوشيما ، قسم الطب الوقائي الجزيئي ، كلية الطب ، جامعة طوكيو ، 7-3-1 هونغو ، بونكيو-كو ، طوكيو 113-0033 ، اليابان. الفاكس: 81-3-5684-2297 البريد الإلكتروني: [email protected]

    اعثر على مقالات بواسطة Irimura، T. في: JCI | PubMed | منحة جوجل

    1 قسم الطب الوقائي الجزيئي ، جامعة طوكيو ، طوكيو 113-0033 ، اليابان 2 قسم الأمراض الجلدية ، مستشفى مارسيليسبورج ، جامعة آرهوس ، 8000 آرهوس سي ، الدنمارك 3 قسم الأمراض الجلدية ، كلية الطب ، جامعة طوكيو ، طوكيو 113- 0033 ، اليابان 4 قسم علم الجراثيم ، كلية الطب ، جامعة كينكي ، أوساكا 589-8511 ، اليابان 5 مختبر بيولوجيا السرطان والمناعة الجزيئية ، كلية الدراسات العليا لعلم الأدوية ، جامعة طوكيو ، طوكيو 113-0033 ، اليابان 6 قسم الأمراض الجلدية ، جامعة مي ، كلية الطب ، مي 547-8507 ، اليابان

    مراسلات العنوان إلى: كوجي ماتسوشيما ، قسم الطب الوقائي الجزيئي ، كلية الطب ، جامعة طوكيو ، 7-3-1 هونغو ، بونكيو-كو ، طوكيو 113-0033 ، اليابان. الفاكس: 81-3-5684-2297 البريد الإلكتروني: [email protected]

    اعثر على مقالات بواسطة Mizutani، H. in: JCI | PubMed | منحة جوجل

    1 قسم الطب الوقائي الجزيئي ، جامعة طوكيو ، طوكيو 113-0033 ، اليابان 2 قسم الأمراض الجلدية ، مستشفى مارسيليسبورج ، جامعة آرهوس ، 8000 آرهوس سي ، الدنمارك 3 قسم الأمراض الجلدية ، كلية الطب ، جامعة طوكيو ، طوكيو 113- 0033 ، اليابان 4 قسم علم الجراثيم ، كلية الطب ، جامعة كينكي ، أوساكا 589-8511 ، اليابان 5 مختبر بيولوجيا السرطان والمناعة الجزيئية ، كلية الدراسات العليا لعلم الأدوية ، جامعة طوكيو ، طوكيو 113-0033 ، اليابان 6 قسم الأمراض الجلدية ، جامعة مي ، كلية الطب ، مي 547-8507 ، اليابان

    مراسلات العنوان إلى: كوجي ماتسوشيما ، قسم الطب الوقائي الجزيئي ، كلية الطب ، جامعة طوكيو ، 7-3-1 هونغو ، بونكيو-كو ، طوكيو 113-0033 ، اليابان. الفاكس: 81-3-5684-2297 البريد الإلكتروني: [email protected]

    اعثر على مقالات بواسطة Matsushima، K. في: JCI | PubMed | منحة جوجل

    تم النشر في 15 أكتوبر 1999 - مزيد من المعلومات

    لقد قمنا بفحص تعبير الكيموكينات ومستقبلاتها في الآفات الشبيهة بالتهاب الجلد التأتبي (AD-like) لفئران NC / Nga. تتطور مثل هذه الآفات عندما يتم الاحتفاظ بالفئران في ظروف تقليدية ، ولكن ليس عندما يتم عزلها عن مسببات الأمراض المحددة. يتم التعبير بشكل غير متوقع عن Chemokine TARC الذي ينظم التنشيط والغدة الصعترية في البشرة القاعدية لفئران عمرها 14 أسبوعًا مصابة بآفات ، بينما لا يتم التعبير عنها في الجلد بدون آفات. تم تأكيد إنتاج TARC بواسطة الخلايا الكيراتينية عن طريق زراعة خلايا خط الخلايا الكيراتينية الفئران (PAM212) باستخدام TNF-α أو IFN-γ أو IL-1β. لوحظ التعبير عن كيموكين آخر من نوع Th2 ، كيموكين مشتق من البلاعم (MDC) ، في جلد الفئران المحفوظة في كل من الظروف التقليدية والخالية من مسببات الأمراض ، ولكن تم زيادة التعبير عن MDC عدة مرات في الجلد المصاب بآفات. تم تحديد الأصل الخلوي لـ MDC على أنه خلايا شجيرية جلدية. تزامن تسلل الجلد من قبل IL-4 - إنتاج الخلايا التائية والخلايا البدينة ، وزيادة CCR4 mRNA في الجلد ، مع تطور آفات الزهايمر. تشير هذه الملاحظات إلى أن TARC و MDC يشاركان بنشاط في التسبب في الآفات الشبيهة بمرض الزهايمر في الفئران NC / Nga وأن هذه الكيماويات Th2 يمكن أن تكون أهدافًا جديدة للعلاج التدخلي لمرض الزهايمر في البشر.

    التهاب الجلد التأتبي (AD) هو متلازمة سريرية تتميز بآفات جلدية حاكة وإكزيمائية في مواقع مميزة ، إلى جانب علامات سريرية رئيسية وثانوية أخرى (1 ، 2). يُعتقد عمومًا أن مرض الزهايمر اضطراب وراثي في ​​جهاز المناعة ، وغالبًا ما يكون للمرضى تاريخ عائلي للإصابة بمرض الزهايمر (2 ، 3). تم اقتراح عيب في الأدمة الخارجية يؤدي إلى اضطراب نضج الخلايا التائية (4). بالإضافة إلى ذلك ، تم وصف تقليل السيراميد في الجلد التأتبي ، مما يؤدي إلى تعطيل حاجز الجلد كعامل مسبب للمرض (5). تتميز الآفات الجلدية باختراق الخلايا الليمفاوية والخلايا الأحادية / الضامة والخلايا البدينة الحبيبية بالكامل (6) والحمضات (7). كما لوحظ زيادة عدد الخلايا التغصنية الجلدية (DCs) وخلايا لانجرهانز الجلدية في الآفات الجلدية لمرض الزهايمر (8 ، 9). الخلايا الليمفاوية التي تتسلل إلى الآفات الجلدية لمرض الزهايمر هي ، على الأقل في المرحلة الأولى من المرض ، الخلايا التائية من النوع Th2 ، التي تنتج IL-4 و IL-5 و IL-10 (10) ، على الرغم من أنها في مراحل لاحقة من المرض. يتم إنتاج السيتوكينات من النوع Th1 ، مثل IFN-، في آفات الزهايمر (2 ، 10 ، 11). ترتفع مستويات IgE في الدورة الدموية في معظم المرضى المصابين بمرض الزهايمر (2) وليس كلهم ​​، ويُعزى ذلك إلى ارتفاع إنتاج IL-4 ، وهو محفز لإنتاج IgE (12).

    نشأت سلالة الفئران NC / Nga من الفئران الفاخرة اليابانية وتم تأسيسها كسلالة فطرية بواسطة K. Kondo في عام 1957 (13). تم الإبلاغ عن أن الفأر يتمتع بخصائص معينة مثل القابلية العالية للإشعاع والصدمة التأقية التي يسببها الألبومين البيضاوي (13 ، 14). تم الإبلاغ أيضًا عن إصابة فئران NC / Nga بحالة أكزيمائية عند الاحتفاظ بها في محيط تقليدي ولكن ليس عند الاحتفاظ بها تحت ظروف محددة خالية من مسببات الأمراض (SPF) (15). تتطور الإكزيما في عمر 8 أسابيع ، مع أقصى نشاط عند حوالي 17 أسبوعًا مع آفات تتميز بالوذمة والنزيف والتآكل والجفاف والثعلبة الموضعية عادةً على الأذنين والظهر والرقبة وفي منطقة الوجه. تظهر الفئران المصابة أيضًا تأخرًا في النمو. من الناحية المصلية ، يرتفع مستوى IgE بشكل ملحوظ من عمر 8 أسابيع ، بالتزامن مع ظهور الآفات الجلدية ، في حين أن مستوى IgG لا يتأثر حتى سن 12 أسبوعًا. تظهر الآفات فرط تقرن ملحوظ وبعض المظلات ، تسلل الخلايا الليمفاوية مع نسبة CD4 / CD8 عالية ، تسلل البلاعم ، وتحلل الخلايا البدينة والحمضات. يتم إنتاج كل من IL-4 و IL-5 بواسطة الخلايا البدينة في الآفات ، بينما تنتج خلايا CD4 + فقط IL-4 ، وفي المراحل اللاحقة ، أيضًا IFN-(15). تتمتع الخلايا B في الماوس NC / Nga أيضًا بحساسية متزايدة لـ CD40 ligand و IL-4 ، والذي يُقترح أن يكون ناتجًا عن تنشيط محسن لـ Janus kinase 3 (JAK3). علاوة على ذلك ، تُظهر الخلايا البائية لفأر NC / Nga المصابة بآفات التهاب الجلد فسفرة التيروزين التكوينية لـ JAK3 ، وهي ميزة مقترحة تؤدي إلى فرط إنتاج IgE في المرضى المصابين بمرض الزهايمر (16). علاج آفات الفأر NC / Nga باستخدام tacrolimus hydrate (FK506) يمنع تسلل الجلد عن طريق خلايا CD4 + T ، والخلايا البدينة ، والحمضات ، ويثبط أيضًا إنتاج IL-4 و IL-5 و IgE في هذه الفئران. تم العثور على مرهم الستيرويد ليكون له تأثير هامشي (17).

    الكيموكينات عبارة عن بروتينات صغيرة مُفرزة لها وظيفة رئيسية في تنظيم هجرة الكريات البيض ، ولكن كما أصبح واضحًا على مدى السنوات القليلة الماضية ، لها أيضًا مجموعة واسعة من الوظائف في الأنسجة غير المكونة للدم (18). يمكن تجميع الكيميائيات ، بحكم بقايا السيستين المحفوظة بشكل كبير في تسلسلها ، في chemokines CC و CXC و C و CX3C. يتم تصنيف مستقبلات الكيموكينات بناءً على بنية روابطها حتى الآن ، وقد تم تحديد CCR 1–9 و CXCR 1–5 و XCR1 و CX3CR1 (19). في الآونة الأخيرة ، تم الإبلاغ عن مستقبلات الكيموكين بشكل تفاضلي على مجموعات فرعية مختلفة من الخلايا التائية (20 - 23). يتم التعبير عن CXCR3 بشكل تفضيلي في المجموعة الفرعية Th1 (20) ، بينما يتم التعبير عن CCR4 في المجموعة الفرعية Th2 (21). يتم التعبير عن CCR5 في المجموعة الفرعية Th1 (22) ولكن يمكن التعبير عنها أيضًا في الخلايا التائية المنشطة (23). الروابط لـ CCR4 هي كيموكين منظم التنشيط والغدة الصعترية (TARC) (24) والكيموكين المشتق من البلاعم (MDC) (25). TARC عبارة عن كيميائي CC مع كتلة جزيئية تبلغ حوالي 8 كيلو دالتون (26) ويتم تصنيعه بواسطة DCs متمايزة عن الخلايا الأحادية باستخدام GM-CSF و IL-3 و IL-4 (27). وبالمثل ، فإن MDC عبارة عن chemokine CC مع كتلة جزيئية تبلغ 8 كيلو دالتون تم توليفها بواسطة الضامة المشتقة من الخلايا الأحادية (28). كلاهما عامل كيميائي لجزء صغير من خلايا CD4 + CD45RO + T المستقطبة لإنتاج السيتوكينات Th2 (21). تشترك MDC و TARC في الهوية بنسبة 37 ٪ ، وكلاهما مشفر بواسطة الكروموسوم 16 (27 ، 29) ، على عكس الكيماويات CC الأخرى ، والتي يتم ترميز العديد منها بواسطة الكروموسوم 17 (18).

    تشير النتائج المقدمة هنا إلى أن TARC التي تنتجها الخلايا الكيراتينية القاعدية و MDC التي تنتجها DCs الجلدية قد تلعب دورًا مهمًا في تجنيد الخلايا الليمفاوية من النوع Th2 إلى الآفات الجلدية الشبيهة بـ AD ، وأن الجلوكوكورتيكويد فعال في علاج آفات NC / نغا الماوس.

    الفئران. تم شراء فئران من الذكور والإناث من عامل الحماية من الشمس SPF ، بعمر 8 أسابيع ، NC / Nga من SLC (طوكيو ، اليابان). تم تقسيمها إلى مجموعتين ، مجموعة واحدة محفوظة في بيئة SPF والأخرى في ظل ظروف تقليدية. في كل مجموعة من المجموعتين ، تم تزاوج الفئران واستخدام النسل لإجراء التجارب. امتثلت جميع التجارب على الحيوانات للمعايير المنصوص عليها في إرشادات جامعة طوكيو.

    علاج الستيرويد. تم علاج الفئران المحفوظة في ظروف طبيعية مع آفات جلدية متطورة تمامًا باستخدام مرهم الستيرويد (0.05 ٪ كلوبيتاسوليبروبيونات) (جلاكسو ، طوكيو ، اليابان) ، عن طريق تطبيق المرهم على المنطقة المصابة من الأذنين إلى منتصف الظهر. تكرر العلاج مرة واحدة كل يوم لمدة 7 أيام من عمر 14 أسبوعًا. كعنصر تحكم سلبي ، تم علاج الفئران من نفس العمر مع نفس الآفات بالمركبة (هلام البترول ألبا) وحدها.

    خزعات الجلد. تم التضحية بالفئران عن طريق خلع الرقبة ، حيث تمت إزالة شعر الظهر باستخدام كريم مزيل الشعر (كانيبو ، طوكيو ، اليابان). تم استئصال مساحة حوالي 1.5 × 1.5 سم 2 ، وتم تشريح الدهون والأوعية الدموية تحت الجلد بعناية.

    علم الانسجة. تم إصلاح خزعات الجلد باستخدام 10 ٪ من الفورمالين في محلول محايد لمدة 16 ساعة على الأقل وتم تضمينها في البارافين. تم تلوين المقاطع المنفصلة (بسماكة 3-5 ميكرومتر) باستخدام الهيماتوكسيلين والأيوزين وتم تحليلها بواسطة الفحص المجهري الضوئي.

    تحضير الأجسام المضادة ضد MDC. تم تصنيع 21 ببتيد MDC طويل الأحماض الأمينية من الأحماض الأمينية 38-58 (PerSeptive Biosystems / Vestec Products ، طوكيو ، اليابان) ومقترن بهيموسيانين ثقب المفتاح (KLH Calbiochem-Novabiochem Corp. ، سان دييغو ، كاليفورنيا ، الولايات المتحدة الأمريكية) باستخدام ميميدوبنزويل -ن-هيدروكسيكسينيميستر (شركة إم بي بيرس للكيماويات ، روكفورد ، إلينوي ، الولايات المتحدة الأمريكية).كان تسلسل الأحماض الأمينية للجزء هو QDYIRHPLPSRLVREPPWTS. تم عزل البروتين المصهور بمجال KLH-MB الناتج باستخدام عمود Sephadyl S-200HR (Pharmacia Biotech AB ، Uppsala ، السويد) ، وبعد ذلك تم استحلاب البروتين المنصهر في CFA واستخدم لتحصين 2 من الأرانب البيضاء النيوزيلندية بعد 3 ، فترات 2 و 2 و 1 أسبوع. تم نزف الأرانب والحصول على الأمصال ، وتم اختبار خصوصية الجسم المضاد الناتج في ELISA. لم يتم العثور على تفاعل متصالب مع الكيموكينات الفأرية الأخرى ، بما في ذلك TARC و JE والبروتين الالتهابي الضامة 2 (MIP-2).

    المناعية. تم تضمين خزعات الجلد في مركب Tissue-Tek OCT (Miles Inc. ، Elkhart ، إنديانا ، الولايات المتحدة الأمريكية) ، وتم تجميدها في النيتروجين السائل ، وتخزينها في درجة حرارة -80 درجة مئوية حتى الاستخدام. تم قطع الأنسجة بواسطة ناظم البرد إلى أقسام 8 ميكرون وبعد ذلك تم تحضينها مع أول جسم مضاد. كانت الأجسام المضادة المستخدمة هي الأجسام المضادة MDC للأرانب المضادة للفأر ، وهي CD4 mAb مضاد للفأر (RM4-5 ، PharMingen ، سان دييغو ، كاليفورنيا ، الولايات المتحدة الأمريكية) ، CD8 مضاد للفئران (53-6.7 PharMingen) ، مضاد للفئران - الفئران DEC-205 مللي أمبير (NLDC-145 BMA Biomedicals ، جنيف ، سويسرا) ، مضاد للفأر MHC II (ER-TR3 BMA Biomedicals) ، مضاد للفأر c-عدة mAb (ACK45 PharMingen) ، مضاد للفأر IL-4 مللي أمبير (BVD6-24G2 PharMingen) ، مضاد للفأر LOM 14 مللي أمبير (30) ، و TARC مضاد للفأر TARC mAb (31). كعنصر تحكم سلبي ، تم استخدام IgG الجرذ أو الهامستر IgG أو الأرنب IgG. بعد التلوين بالأجسام المضادة الأولى ، تم تحضين العينات إما باستخدام بيروكسيداز الفجل المترافق (HRP- مترافق) الماعز المضاد للهامستر IgG (شركة Southern Biotechnology Associates Inc. ، برمنغهام ، ألاباما ، الولايات المتحدة الأمريكية) ، وهو ماعز مترافق مع HRP IgG (BioSource International ، Camarmillo ، كاليفورنيا ، الولايات المتحدة الأمريكية) أو مضاد IgG مترافق مع الفوسفاتيز القلوي (Jackson ImmunoResearch Laboratories Inc.، West Grove، Pennsylvania، USA). تمت مشاهدة التفاعل إما باستخدام مجموعة ركيزة AEC للبيروكسيديز أو مجموعة ركيزة الفوسفاتيز القلوية ذات اللون الأحمر المتجه I (كلاهما من Vector Laboratories ، Burlingame ، كاليفورنيا ، الولايات المتحدة الأمريكية).

    تم إجراء التلوين المناعي المزدوج كما وصفه ماتسونو وآخرون. (32). تم تحضين المقاطع المجمدة المثبتة بالأسيتون 6 ميكرون مع أول أجسام مضادة للجرذان أو الأرانب لمدة ساعة واحدة. بعد الحضانة المتسلسلة باستخدام الفوسفاتيز القلوي - مضاد للفئران أو الأرانب IgG لمدة 45 دقيقة ، تم تلوين الخلايا المسمى باللون الأحمر أو الأزرق مع Vector Red أو Vector Blue (Vector Laboratories). تم تحضين العينات بعد ذلك باستخدام IgG للجرذ الثاني ، وتم اكتشاف mAb المرتبط بمضاد IgG المسمى HRP ولون بني أو أحمر مع 3،3′-diaminobenzidine (DAB Wako Chemicals ، دالاس ، تكساس ، الولايات المتحدة الأمريكية) محلول الركيزة أو فيكتور نوفا الأحمر. تمت مقاومة الشرائح باستخدام الهيماتوكسيلين لماير.

    التعبير عن chemokines ، سيتوكينات ، ومستقبلات كيموكين في خزعات الجلد. تم عزل إجمالي الحمض النووي الريبي من خزعات الجلد باستخدام RNAzol (مختبرات Biotecx ، هيوستن ، تكساس ، الولايات المتحدة الأمريكية) وفقًا لتعليمات الشركة الصانعة ، وعكس نسخها إلى الحمض النووي باستخدام M-MLV RT 200 U / 20 ميكرولتر حجم تفاعل (سواداي ، طوكيو ، اليابان ) ، مثبط RNase 40 U / 20 ميكرولتر حجم التفاعل (Sawaday) ، الاشعال العشوائي (Promega Corp. ، ماديسون ، ويسكونسن ، الولايات المتحدة الأمريكية) حجم تفاعل 100 ميكروغرام / 20 ميكرولتر ، و 3 ميكروغرام من الحمض النووي الريبي ، وفقًا لتعليمات الشركات المصنعة. تم تضخيم ميكروليتر واحد من (كدنا) الناتج بواسطة PCR ، باستخدام AmpliTaq في المخزن المؤقت باستخدام MgCl2 (Perkin-Elmer Corp. ، Norwalk ، كونيتيكت ، الولايات المتحدة الأمريكية Roche Molecular Systems ، Branchburg ، نيو جيرسي ، الولايات المتحدة الأمريكية). كان الأساس التمهيدي لـ TARC هو 5′-CAGGAAGTTGGTGAGCTGGTATA-3 ′ ، وكان التمهيدي المضاد للتفاعل 5′-TTGTGTTCGCCTGTAGTGCATA-3. كان أساس الإحساس لـ MDC هو 5′-TCTGATGCAGGTCCCTATGGT-3 ′ ، وكان التمهيدي المضاد للتفاعل 5′-TTATGGAGTAGCTTCTTCAC-3. كان أساس الإحساس لـ IL-4 هو 5′-CAGCTAGTTGTCATCCTGCTCTTC-3 ، وكان التمهيدي المضاد للتفاعل 5′-GCCGATGATCTCTCTCAAGTGA-3 ′. كان أساس الإحساس لـ IFN-5′-CTCAAGTGGCATAGATGT-3 ′ ، وكان التمهيدي المضاد للتفاعل 5′-GAGATAATCTGGCTCTGCAGGATT-3. كان أساس الإحساس لـ eotaxin هو 5′-AGAGCTCACAGCGCTTCTATT-3 ′ ، وكان التمهيدي المضاد للتفاعل 5′-GGTGCATCTGTTGTGGTGATT-3 ′. كان أساس الإحساس لـ CCR3 هو 5′-TTGCAGGACTGGCAGCATT-3 ′ ، وكان التمهيدي المضاد للتفاعل 5′-CCATAACGAGGAGAGGAAGCTA-3 ′. كان أساس الإحساس لـ CCR4 هو 5′-TCTACAGCGGCATCTTCTTCAT-3 ، وكان التمهيدي المضاد للتفاعل 5′-CAGTACGTGTGGTGTGCTCTG-3. كان أساس الإحساس لـ CCR5 هو 5′-CATCGATTATGGTATGTCAGCACC-3 ، وكان التمهيدي المضاد للتفاعل 5′-CAGAATGGTAGTGTGAGCAGGAA-3 ′. كان أساس الإحساس لـ CXCR3 هو 5′-ATCAGCGCTTCAATGCCAC-3 ′ ، وكان التمهيدي المضاد للتفاعل 5′-TGGCTTTCTCGACCACAGTT-3 ′. كان الأساس التمهيدي لـ GAPDH هو 5′-AGTATGACTCCACTCACGGCAA-3 ′ ، وكان التمهيدي المضاد للحساسية 5′-TCTCGCTCCTGGAAGATGGT-3. شوهدت نواتج التفاعل على هلام بولي أكريلاميد 3٪ مع إيثيديوم بروميد.

    PCR الكمي. لتقدير كمية الرنا المرسال في جلد السيتوكينات المذكورة أعلاه ، والكيموكينات ، ومستقبلات الكيموكين ، تم إجراء PCR الكمي باستخدام نظام الكشف عن التسلسل ABI 7700 (Perkin-Elmer Applied Biosystems ، فوستر سيتي ، كاليفورنيا ، الولايات المتحدة الأمريكية). تم تحضير خليط التفاعل وفقًا لتعليمات الشركة الصانعة للحصول على تركيزات نهائية من 1 × محلول PCR A 200 ميكرومتر dATP و dGTP و dCTP كل 400 ميكرومتر dUTP 4 ملي MgCl 1.25 U AmpliTaq Gold DNA polymerase و 200 ميكرومتر من كل تمهيدي. تم أيضًا إضافة مجسات التهجين المستهدفة التالية (100 ميكرومتر) إلى التفاعلات المنفصلة للكشف المحدد. بالنسبة لـ MDC ، تمت إضافة المسبار 5′-CCAATGTGGAAGACAGTATCTGCTGCCA-3. بالنسبة لـ CCR5 ، تمت إضافة المسبار 5′-TACCTGCTCAACCTGCCATCTCTGA-3. بالنسبة لـ GAPDH ، تمت إضافة المسبار 5′-AACGGCACAGTCAAGGCCGAGAAT-3. تم تسمية المسبار بصبغة فلورية مراسل ، FAM (6-carboxyflourescein) ، في نهاية 5′. تم ضبط ظروف التدوير الحراري على 50 درجة مئوية لمدة دقيقتين و 95 درجة مئوية لمدة 10 دقائق ، تليها 50 دورة تضخيم عند 95 درجة مئوية لمدة 15 ثانية و 55 درجة مئوية لمدة 1.5 دقيقة للتحويل والتلدين / التمديد ، على التوالي. لمقارنة تعبير mRNA ، تمت مقارنة النتائج كقيم نسبية باستخدام GAPDH كمرجع داخلي والعينات من الفئران المحفوظة في ظروف SPF كمرجع عام. تم حساب القيمة النسبية بعد الصيغة التالية: التعبير النسبي = 2 [- (ΣVs / Ns - ΣGAPDHs / Ns) - (ΣVr / Nr - ΣGAPDHr / Nr)] ، حيث ضد يشير إلى إشارة ABI Prism من عينة معينة ، ن هو عدد العينات ، GAPDHs هي إشارة ABI Prism لـ GAPDH في نفس العينة ، الواقع الافتراضي هي إشارة ABI Prism للعينة نفسها ولكن في العينة المرجعية الإجمالية ، و جابدر هي إشارة ABI Prism GAPDH في العينة المرجعية. كان عدد العينات ن = 3 في كل مجموعة.

    إنتاج TARC بواسطة الخلايا الكيراتينية في الفئران في المختبر. تمت زراعة الخلايا الكيراتينية للمورين (PAM 212 American Type Culture Collection ، Rockville ، Maryland ، الولايات المتحدة الأمريكية) في RPMI-1640 (GIBCO BRL ، Rockville ، Maryland ، الولايات المتحدة الأمريكية) و 10 ٪ FCS بتركيز 4 × 10 4 خلايا / مل في 1- آبار مل لمدة 4 أيام وتم تحفيزها باستخدام 1 من السيتوكينات التالية 10 نانوغرام / مل TNF-α (R & ampD Systems Inc. ، مينيابوليس ، مينيسوتا ، الولايات المتحدة الأمريكية) 100 نانوغرام / مل TNF-α و 10 نانوغرام / مل GM-CSF (Genzyme اليابان ، طوكيو ، اليابان) 1.0 نانوغرام / مل IFN-γ (R & ampD Systems Inc.) 100 نانوغرام / مل IFN-γ و 10 بيكوغرام / مل IL-1β (Genzyme Japan) و 1 نانوغرام / مل IL-1β 1 و 100 بيكوغرام / مل أو 1 نانوغرام / مل IL-4 (بكتون ديكنسون وشركاه ، فرانكلين ليكس ، نيو جيرسي ، الولايات المتحدة الأمريكية). تم إجراء جميع التجارب في ثلاث نسخ ، باستثناء تجربة IL-4 ، والتي تم تنفيذها من نسختين فقط. بعد 4 أيام ، تم عزل المواد الطافية لمزارع الخلايا وتخزينها في درجة حرارة -80 درجة مئوية حتى استخدامها. لتقييم إنتاج TARC ، تم إجراء ELISA. باختصار ، تم طلاء لوحة 96 بئر (F96 MaxiSorp ، NUNC A / S ، روسكيلد ، الدنمارك) بجسم مضاد للهامستر TARC مضاد للفأر وحظر بـ 1 مجم / مل من BSA في PBS ، وبعد ذلك تمت إضافة المواد الطافية. كان الجسم المضاد الثاني عبارة عن أرنب مضاد حيوي لـ TARC ، وبعد الحضانة ، تمت مشاهدة النتيجة باستخدام HRP-streptavidin وفقًا لتعليمات الشركة المصنعة (Vector Laboratories) وقراءتها باستخدام قارئ Emax ELISA بطول موجة 450 نانومتر.

    تم الاحتفاظ بنسل الفئران NC / Nga في مجموعتين: مجموعة واحدة تحت ظروف SPF ، ومجموعة أخرى في ظل ظروف تقليدية. بدأت الفئران التي تم الاحتفاظ بها في ظل الظروف التقليدية في حك نفسها في عمر 8 أسابيع ، وفي ذلك الوقت أصبح الجلد جافًا ومتقشرًا. في غضون الأسبوعين التاليين ، أصيبت الفئران بآفات تقع على الأذنين والرقبة والوجه. كانت الآفات على الظهر تقع من الأذنين ونزولاً إلى منتصف الظهر وتمتد للأمام إلى الخط الإبطي الخلفي. تتكون الآفات من سحجات وتسلل عقيدية يمكن ملامستها من خلال الجلد (الشكل 1 أ). كانت الآفات العقيدية غائبة ، ويمكن فقط العثور على سحجات في الأذنين والوجه. الفئران المحفوظة في ظروف SPF لم تتطور إلى آفات (الشكل 1 ب). وضعت الفئران الإناث الحوامل في ظل الظروف التقليدية آفات أقل حدة.

    ظهور آفات جلدية على فئران عمرها 14 أسبوعًا ، محفوظة في ظروف تقليدية (أ) 14 أسبوعًا من العمر ، محفوظة في ظروف SPF (ب) وعمره 15 أسبوعًا ، يُحفظ في ظروف تقليدية ولكنه يعالج بمرهم الستيرويد لمدة 7 أيام من 14 أسبوعًا من العمر (ج). تمت إزالة الشعر باستخدام كريم مزيل الشعر كما هو موضح بالطرق. تلطيخ الهيماتوكسيلين إيوزين للأقسام المضمنة بالبارافين (بسمك 3-5 ميكرومتر) من خزعات الجلد من فئران عمرها 14 أسبوعًا محفوظة في ظروف تقليدية (د) وظروف SPF (ه) ، ومن الفئران البالغة من العمر 15 أسبوعًا التي تم الاحتفاظ بها في ظروف تقليدية ومعالجتها بالستيرويد لمدة 7 أيام (F). النتائج المعروضة تمثل 3 فئران في كل مجموعة. لاحظ سماكة البشرة وطبقة الكيراتين فيها د مقارنة مع هوتظهر نوى الخلايا الكيراتينية في طبقة الكيراتين. لاحظ أيضًا التأثير الملحوظ لمرهم الستيرويد في قمع كل من التسلل في الأدمة ونمو البشرة. × 100.

    التركيب الخلوي للارتشاح في الآفات الجلدية. تم تحضير المقاطع المضمنة بالبارافين لكل من جلود الآفة (الفئران البالغة من العمر 14 أسبوعًا المحفوظة في ظروف تقليدية) وغير اللاهوائية (الفئران البالغة من العمر 14 أسبوعًا والتي تم الاحتفاظ بها في ظروف SPF). أظهر الجلد الآفات فرط التقرن ، والشواك ، والتضخم في البشرة (الشكل 1 د) على عكس الجلد الطبيعي غير اللاصق (الشكل 1 هـ). أظهر الجلد الآفات أيضًا ارتشاحًا شديدًا في الأدمة مع نسيج ضام كثيف ، في حين أن الجلد غير اللاصق لم يظهر أي ارتشاح. تم التعرف على الخلايا التي تتسلل إلى الأدمة عن طريق التحصين المناعي للأقسام المجمدة. كانت الخلايا الليمفاوية التي تغزو الجلد الآفة عبارة عن خلايا CD4 + بشكل رئيسي (الشكل 2 أ) ، مع عدد قليل من خلايا CD8 + (البيانات غير معروضة). تم تحديد الضامة الجلدية في الجلد الآفات (الشكل 2 ب) وغير اللاصق (الشكل 2 ج) باستخدام جسم مضاد ضد MMGL (LOM14) ، وزاد عدد الضامة في الجلد الآفات (الجدول 1) بالمقارنة مع الجلد غير اللاصق. لوحظ إلى حد كبير أن الخلايا المتغصنة غير اللمفاوية إيجابية (إيجابية NLDC) في كل من الأدمة والبشرة (الشكل 2 د). تم اعتبار الخلايا الإيجابية لـ NLDC في البشرة من خلايا لانجرهانز. الخلايا الموجودة في الأدمة والبشرة ملطخة بالتساوي مع MHC II (الشكل 2 هـ) ، على الرغم من أن عدد الخلايا الإيجابية لـ MHC II في الأدمة كان أعلى بكثير من الخلايا الإيجابية لـ NLDC (الجدول 1). كشف التلقيح المناعي المزدوج ، بالإضافة إلى التشكل والتوزيع المماثل ، أن الخلايا الإيجابية لـ NLDC في الأدمة كانت إيجابية أيضًا لـ MHC II (الشكل 2f) وتم تحديدها على أنها خلايا DC الجلدية. كان للخلايا الإيجابية المتبقية من معقد التوافق النسيجي الكبير II شكلًا وتوزيعًا مشابهًا مع خلايا إيجابية LOM14 وتم تحديدها على أنها بلاعم. أخيرًا ، مجموعات كبيرة جدًا من الخلايا غير المتبلورة الكبيرة إيجابية لـ c-عدة في الأدمة لكل من الآفة (الشكل 2 ز) ، وفي عدد أقل (الجدول 1) ، تم اعتبار الجلد غير اللاصق (الشكل 2 ح) من الخلايا البدينة. بالإضافة إلى ذلك ، ج-عدة-تم العثور على عدد الخلايا الموجبة للخلايا على شكل شجيري في البشرة (الشكل 2 ز) من الجلد الآفة ، ولكن ليس في الخزعات غير الموضعية. خلايا في الجلد تعبر عن ج-عدة تم وصفها بأنها إما الخلايا البدينة (33) وأسلافها (34) أو الخلايا الصباغية (35). لتحديد ج-عدة- الخلايا الموجبة ، تلطيخ التولويدين الأزرق للخلايا البدينة تم إجراؤه. لم تكن الخلايا ذات الشكل التغصني في البشرة ملطخة بأزرق التولويدين ، مما يشير إلى أنها كانت خلايا صباغية (البيانات غير معروضة).

    تلطيخ المناعي الكيميائي للأجزاء المجمدة من خزعات الجلد. (أ) تم الاحتفاظ بتلطيخ CD4 للخزعات المأخوذة من فئران عمرها 14 أسبوعًا في ظروف تقليدية. (ب و ج) يتم الاحتفاظ بتلطيخ MMGL للفئران في الظروف التقليدية (ب) وظروف SPF (ج). (د) أبقى NLDC تلطيخ الفئران في الظروف التقليدية. (ه) أبقى MHC II تلطيخ الفئران في الظروف التقليدية. (F) المناعة المزدوجة لـ MHC II (أحمر غامق) و NLDC (أزرق). الخلايا الإيجابية لـ NLDC في الأدمة إيجابية أيضًا لـ MHC II (السهم). يتم التعرف على الخلايا الإيجابية معقد التوافق النسيجي الكبير II (رؤوس الأسهم) على أنها بلاعم. (ز و ح) ج-عدة تلطيخ خزعات الجلد من الفئران المحفوظة في الظروف التقليدية (ز) وظروف SPF (ح). (أنا و ي) تلطيخ TARC للجلد من الفئران المحفوظة في الظروف التقليدية (أنا) وظروف SPF (ي). (ك) أبقى MDC تلطيخ الفئران في الظروف التقليدية. (ل) المناعة المزدوجة لـ NLDC (بني) و MDC (أحمر). ما يقرب من 80 ٪ من الخلايا الإيجابية لـ NLDC إيجابية أيضًا لـ MDC (السهم). الخلايا إيجابية NLDC المنتجة لـ MDC (خلايا إيجابية مزدوجة ، مقارنة مع ك) على أنها DCs الجلدية. (م) أبقى IL-4 تلطيخ الفئران في الظروف التقليدية. (ن) المناعة المزدوجة لـ CD4 (أزرق) و IL-4 (أحمر غامق). معظم خلايا CD4 + (باللون الأزرق مع سطح الخلية) موجبة لـ IL-4 (لونها أحمر داكن مع سهم السيتوبلازم). تظهر بعض الخلايا إيجابية مفردة لـ IL-4 (رؤوس الأسهم) ، والتي يتم تحديدها كخلايا سارية. التكبير الأصلي: × 100 (أد, زي), ×200 (ه ، و, ك, م، و ن), ×400 (ل).

    التركيب الخلوي للارتشاح في الآفات الجلدية.

    زيادة التعبير عن TARC في الجلد مع تقدم العمر وتفاقم الآفات. تم عزل إجمالي الحمض النووي الريبي من خزعات الجلد التي تم الحصول عليها من الفئران في عمر 6 و 8 و 12 أسبوعًا ، وتم إجراء RT-PCR كما هو موضح في الطرق. في جلد الفئران المحفوظة في ظروف تقليدية ، تم التعبير عن TARC بشكل ضعيف بالفعل في 6 أسابيع من العمر ، وعلى نفس المستوى في 8 أسابيع. في عمر 12 أسبوعًا ، عندما أصبحت الآفات الجلدية واضحة ، زاد تعبير TARC بشكل ملحوظ (الشكل 3 أ). في الجلد من الفئران المحفوظة في ظروف SPF ، لا يمكن الكشف عن تعبير TARC (الشكل 3 أ). كان هذا هو الحال أيضًا عندما تم إجراء RT-PCR الكمي (البيانات غير معروضة ، حيث لا يمكن التعبير عن قيمة نسبية). باستخدام مضاد TARC mAb ، تم ترجمة إنتاج TARC بشكل أساسي إلى الطبقة القاعدية من البشرة (الشكل 2i). علاوة على ذلك ، في جلد الفئران المحفوظة تحت ظروف SPF ، لا يمكن ملاحظة إنتاج TARC عن طريق التلوين المناعي (الشكل 2 ي).

    (أ) عزل RT-PCR من mRNA من خزعات الجلد المأخوذة في الأوقات المحددة. اليسار: تعبير IFN-γ و MDC و TARC و GAPDH من الفئران المحفوظة في ظروف SPF في عمر 6 و 8 و 12 أسبوعًا. على اليمين: التعبير عن mRNA في نفس النقاط الزمنية ، ولكن من الفئران المحفوظة في ظروف طبيعية. النتائج تمثل 6 و 4 و 6 فئران في ظروف SPF و 6 و 4 و 6 فئران في الظروف العادية كانت نسبة الذكور إلى الإناث 1: 1. (ب) تم إجراء RT-PCR على جلد فئران عمرها 14 أسبوعًا تم الاحتفاظ بها في ظروف طبيعية (أعلى) وظروف SPF (وسط) ، ومن فئران عمرها 15 أسبوعًا تم الاحتفاظ بها في ظروف طبيعية ومعالجة بالستيرويد من سن 14 أسبوعًا (قاع). ال x يُظهر المحور التعبير الجيني الذي تم فحصه. النتائج تمثل 6 و 6 و 3 تجارب مستقلة على التوالي.

    إنتاج TARC بواسطة الخلايا الكيراتينية في المختبر. عندما تمت زراعة خلايا خط الخلايا القرنية الفأرية (PAM 212) وتحفيزها باستخدام السيتوكينات المختلفة ، يمكن تحفيز إنتاج TARC بواسطة TNF-α و IFN-γ و IL-1β (الشكل 4) كما تم قياسه بواسطة ELISA. كان إنتاج TARC الناجم عن 10 نانوغرام / مل TNF-α أعلى بكثير من الإنتاج الناجم عن IFN-γ و IL-1β في جميع التركيزات (ص & lt 0.05) ، بينما لم يكن هناك فرق كبير في إنتاج TARC الناجم عن 100 نانوغرام / مل TNF-α وبواسطة IFN-γ و IL-1β في جميع التركيزات. لا يمكن لأي من GM-CSF ولا IL-4 في أي تركيزات تم اختبارها تحفيز TARC ، ولم يكن هناك إنتاج يمكن اكتشافه لـ TARC بواسطة الخلايا الكيراتينية الفأرية غير المحفزة.

    تم إجراء نتائج TARC ELISA على المستنبتات الطافية من مزارع الخلايا الكيراتينية بعد 4 أيام من الاستنبات. ال x يشير المحور إلى المحفزات المضافة إلى الثقافات ، و ذ المحور هو مقدار TARC في الثقافة الطافية من مزارع الخلايا. النتائج هي متوسط ​​القيم التي تم الحصول عليها من 3 تجارب مختلفة كل قيمة محددة في الزوجي. تشير أشرطة الخطأ إلى SD.

    يتم إنتاج MDC بشكل أساسي في كل من الجلد الآفات وغير اللاصق. تم فحص الحمض النووي الريبي الموصوف للتو أيضًا للتعبير عن MDC ، والذي وجد أنه يتم التعبير عنه من سن 6-14 أسبوعًا في كل من الجلد الآفات ، وبدرجة أقل ، الجلد غير اللاصق (الشكل 3 ، أ و ب). باستخدام RT-PCR الكمي ، تم العثور على النسبة بين التعبير في الجلد الآفي وغير اللاصق لتكون 6 (الشكل 5). كشف التلوين بالأجسام المضادة لـ MDC أن الخلايا المنتجة عبارة عن خلايا دائرية كبيرة تقع في الأدمة في الجلد الآفات (الشكل 2 ك). في الجلد غير اللاجلي ، بدت الخلايا المنتجة متشابهة ولكنها كانت أقل من حيث العدد وتقع في عمق الأدمة (البيانات غير معروضة). كانت معظم الخلايا المنتجة لـ MDC إيجابية في تلطيخ NLDC (الشكل 2 ل) ، مما يشير إلى أن هذه الخلايا كانت خلايا DC الجلدية.

    RT-PCR الكمي لـ MDC و CCR5. تم حساب نسب التعبير عن MDC و CCR5 بين الفئران المحفوظة في حالة طبيعية وحالة SPF باستخدام GADPH كمرجع داخلي والتعبير في جلد SPF كخط أساس. تم حساب النتائج من 3 تجارب مستقلة. تشير أشرطة الخطأ إلى SD.

    التعبير عن السيتوكينات ، والكيموكينات ، ومستقبلات الكيموكين. تم فحص تعبير مستقبل TARC و MDC ، CCR4 ، في الفئران البالغة من العمر 14 أسبوعًا ، باستخدام RT-PCR. أظهرت النتيجة أن mRNA لـ CCR4 يتم التعبير عنه في الجلد الآفات ولكن ليس في الجلد غير اللاصق (الشكل 3 ب). تم الحصول على نتيجة مماثلة باستخدام RT-PCR الكمي (البيانات غير معروضة). تم التعبير عن IL-4 و IFN-في الجلد الآفات فقط (الشكل 3 ب) ، وتم تحديد الخلايا المنتجة لـ IL-4 على أنها خلايا سارية وخلايا ليمفاوية (الشكل 2 ، م و ن). تم العثور على Eotaxin بواسطة RT-PCR ليتم التعبير عنها في كل من الجلد الآفات وغير اللاصق. تم التعبير عن المستقبلات CCR3 و CCR5 في كل من الجلد الآفات وغير اللاصق (الشكل 3 ب) ، لكن مستوى التعبير CCR5 كان أعلى بمقدار 10 مرات في الجلد الآفات منه في الجلد غير اللاصق (الشكل 5). لم يتم التعبير عن CXCR3 في الجلد المتقرح أو غير اللاصق.

    تأثير العلاج بالستيرويد الموضعي.عندما تم علاج الفئران البالغة من العمر 14 أسبوعًا والتي تم الاحتفاظ بها في ظروف طبيعية بمرهم الستيرويد لمدة 7 أيام (ن = 3) ، أظهرت الآفات على الظهر انحدارًا واسعًا (الشكل 1 ج). بدت الإصابة على الأذنين والظهر وكأنها تلتئم ، لكن لوحظ أن الجلد كان رقيقًا جدًا. انخفض عدد خلايا CD4 + في الجلد إلى ما دون المستويات الطبيعية (الجدول 1) ، وعاد عدد خلايا CD8 + إلى المستويات الطبيعية (الجدول 1). عدد الضامة و ج-عدة- تناقصت الخلايا الإيجابية مقارنة بالجلد المصاب غير المعالج ، لكنها لم تعد إلى المستويات الطبيعية. انخفض عدد الخلايا الإيجابية لـ NLDC في البشرة والأدمة مقارنة بالجلد غير اللاصق ، كما انخفض عدد الخلايا الإيجابية لـ MHC II في الجلد المعالج بالستيرويد (الجدول 1). تم تقييم التعبير عن السيتوكينات والكيماويات والمستقبلات الكيميائية باستخدام كل من RT-PCR (الشكل 3 ب) و RT-PCR الكمي (البيانات غير معروضة). في أي من الحالتين لا يمكن الكشف عن أي تعبير عن الرنا المرسال للكيموكينات ، السيتوكينات ، والمستقبلات الكيميائية. لم تظهر الفئران التي عولجت بالمركبة أي اختلاف عن الفئران البالغة من العمر 14 أسبوعًا والتي تم الاحتفاظ بها في ظروف تقليدية (لا تظهر البيانات).

    تم اقتراح الماوس NC / Nga كنموذج للإنسان AD. تشبه الآفات الجلدية التي تطورت في هذه الفئران عند الاحتفاظ بها في ظل ظروف تقليدية تلك الخاصة بمرض الزهايمر البشري ، مع تسلل ملحوظ للخلايا الليمفاوية CD4 + مصحوبًا بالضامة والحمضات والخلايا البدينة (15). وقد ثبت أيضًا أن سلالة الفئران هذه لديها زيادة في مستويات IgE في المصل كما هو الحال في المرضى البشر المصابين بمرض الزهايمر ، والذي ثبت أنه ناتج عن الفسفرة المحسنة لـ JAK3 في هذه الفئران وربما أيضًا في المرضى البشر المصابين بمرض الزهايمر (16). عامل الاستنباط لالتهاب الجلد غير معروف ، ولكن عندما تم الاحتفاظ بفئران BALB / c في ظل ظروف تقليدية مع الفئران NC / Nga ، لم تظهر عليهم أي آفات ، مما يشير إلى أن العامل الوراثي بالإضافة إلى العامل البيئي هو المسؤول عن تطور التهاب الجلد (15). تم وصف مرض الزهايمر على أنه مرض من النوع Th2 ، على الأقل في مرحلة البدء ، حيث أن الخلايا الليمفاوية التي تغزو الجلد تنتج بشكل أساسي IL-4 و IL-5 و IL-10 (10). المستقبل الكيميائي المعبر عنه في الغالب على الخلايا التائية البشرية من النوع Th2 هو CCR4 (21 ، 23) ، والروابط الخاصة بهذا المستقبل هي TARC (25) و MDC (24). لقد ثبت أن نظام TARC / MDC-CCR4 متورط في عملية المرض بوساطة Th2 ، حتى في نماذج الفئران (31 ، 36). تم وصف إنتاج IL-4 و IL-5 في الآفات الجلدية لفئران NC / Nga (15) ، كما تم إظهار إنتاج IL-4 في الخلايا البدينة والخلايا الليمفاوية في أدمة الجلد الآفات في تلك الدراسة.

    على أساس هذه النتائج ، تم افتراض أن التسبب في الآفات الجلدية في الفئران NC / Nga تمليه بواسطة السيتوكينات من النوع Th2 ، وتم فحص التعبير عن الروابط لـ CCR4 في هذه الفئران في هذه الدراسة. يشير الإفراط في التعبير عن TARC بواسطة الخلايا الكيراتينية القاعدية مع تطور الآفات في جلد الفئران NC / Nga إلى أن TARC يلعب دورًا رئيسيًا في التسبب في الآفات. عندما تمت زراعة خلايا خط الخلايا الكيراتينية في الفئران في وجود العديد من السيتوكينات الالتهابية ، كان TNF-α هو المحفز الأكثر فاعلية لـ TARC. كان تحريض TARC بواسطة Th1 cytokine IFN-في الخلايا الكيراتينية غير متوقع إلى حد ما ولكنه يتوافق مع التعبير العالي لـ TARC في جلد الفئران NC / Nga في وقت لوحظ فيه التعبير المصاحب لـ IFN-. من ناحية أخرى ، فإن السيتوكين من النوع Th2 IL-4 لا يحفز إنتاج TARC. تم الإبلاغ عن TNF-α أن يتم تنظيمه في الخلايا البدينة في جلد آفات الزهايمر (37) ولحث التعبير عن جزيئات الالتصاق في البطانة في الجلد AD الآفات (38) ، مما يشير إلى دور مزدوج لـ TNF-α كمحفز من الكيموكينات وجزيئات الالتصاق ، وبالتالي تعمل على جزيئين مختلفين في عملية التوجّه الكيميائي. من المعروف أن الخلايا الكيراتينية تنتج العديد من السيتوكينات ، مثل IL-1 و IL-6 و IL-8 (39) ، ولكن هذه هي المرة الأولى التي تنتج فيها الخلايا الكيراتينية TARC. تشير هذه النتيجة إلى أن TARC التي تنتجها الخلايا الكيراتينية المنشطة يمكن أن تكون محفزًا مبكرًا لاستجابة Th2 عن طريق جذب الخلايا الليمفاوية CCR4 + Th2 T إلى الجلد الآفات.

    اللاجند الثاني الذي يستخدم المستقبل الكيميائي CCR4 هو MDC ، ووجدنا تعبيرًا تأسيسيًا لـ MDC في كل من الجلد الآفات وغير اللاصق في الفئران التي تتراوح أعمارها بين 6-14 أسبوعًا. باستخدام الأجسام المضادة المضادة لـ MDC ، تم تحديد الخلايا المنتجة لـ MDC على أنها خلايا كبيرة مستديرة أو على شكل مغزل. أظهر RT-PCR الكمي فرقًا كبيرًا في التعبير عن MDC. ومع ذلك ، فإن توزيع الخلايا الإيجابية لـ MDC اختلف في الجلد الآفي وغير اللاصق ، مع وجود خلايا أعمق في الأدمة والأنسجة تحت الجلد في الجلد غير اللاصق مقارنة بالجلد المصاب. تشير هذه النتائج إلى دور MDC أكثر تعقيدًا من TARC في التسبب في آفات الجلد الشبيهة بمرض الزهايمر في الفئران NC / Nga. قد يعمل MDC ، في ظل ظروف SPF ، بمثابة كيموكين متماثل ، ينظم تهريب الكريات البيض الطبيعي عبر الجلد. إن أهمية TARC و MDC في التسبب في المرض الشبيه بمرض الزهايمر في الفئران NC / Nga هو التعبير المعزز لـ CCR4 mRNA في الجلد الآفات الذي لم يتم التعبير عنه على الإطلاق في الجلد غير اللاصق. تعزز هذه النتيجة أيضًا الدليل على أن مرض الجلد يخضع لاستجابة خلوية من النوع Th2. لتحديد ما إذا كان TARC و MDC متورطان بشكل انتقائي في مرض الجلد بوساطة Th2 ، يلزم إجراء مزيد من التحقيقات في الآفات الأكزيمائية الأخرى الناتجة عن مسببات الحساسية التلامسية والعوامل المعدية.

    يُعرف Eotaxin بأنه جاذب كيميائي قوي للحمضات (40) و ligand لـ CCR3 في كل من البشر (41) والفئران (42). في دراستنا ، تم التعبير عن eotaxin في كل من الجلد الآفات وغير اللاصق ، ولكن تم التعبير عن المستقبل فقط في الجلد الآفات. هذا يتماشى مع وصف الحمضات كخلية تتسلل إلى جلد آفات الزهايمر (7 ، 15).

    فيما يتعلق بالتركيب الخلوي للتسلل الجلدي في الجلد الآفات ، تؤكد نتائجنا تلك التي لوحظت بالفعل (15) ، مع التسلل يتكون من الخلايا الليمفاوية ذات نسبة CD4 + / CD8 + عالية وعدد كبير من البلاعم والخلايا البدينة. بالإضافة إلى ذلك ، زاد عدد الخلايا الإيجابية لـ NLDC و MHC II في الآفات الجلدية ، ولكن مع وجود عدد أكبر بكثير من الخلايا الإيجابية لـ MHC II. كانت بعض الخلايا الإيجابية لـ NLDC إيجابية أيضًا لـ MHC II وكانت ، في جميع الاحتمالات ، خلايا DC الجلدية ، لكن الخلايا الإيجابية المتبقية لـ MHC II كانت على الأرجح بلاعم استنادًا إلى مورفولوجيتها وتوزيعها للخلايا الإيجابية لـ MMGL. بالإضافة إلى ذلك ، تم الكشف عن أن هذه الـ NLDC- و MHC II- موجبة للجلد الجلدي هي مصدر MDC في الجلد الآفة عن طريق التلوين المناعي المزدوج. في البشرة ، تم العثور على عدد كبير من الخلايا الإيجابية لـ NLDC و MHC II ومن المحتمل أن تكون خلايا لانجرهانز.

    كان للعلاج بالستيرويد لمدة أسبوع تأثير مخفف ملحوظ على آفات الفئران المحفوظة في ظروف تقليدية: اختفت الآفات تقريبًا. لكن مثل هذا العلاج كان له أيضًا تأثير سلبي ، حيث أصبح الجلد المعالج في بعض المناطق رقيقًا جدًا. قد يكون الانحدار في الشواك وفرط التقرن ناتجًا عن إزالة الحكة ، والتي بدورها تمنع الماوس من حك نفسه ، وبالتالي مقاطعة عملية الحَزاز ، بدلاً من أن تكون تأثيرًا مباشرًا للستيرويدات على البشرة. مجهريًا ، تم تقليل التسلل بشكل ملحوظ ، ولم يتبق سوى عدد قليل جدًا من خلايا CD4 + وتقريباً لا توجد خلايا CD8 +. من ناحية أخرى ، كان عدد البلاعم الجلدية لا يزال مرتفعًا ، كما كان عدد الخلايا البدينة ، والذي قد يرجع إما إلى انخفاض حساسية هذه الخلايا المعينة للستيرويد أو إلى فترة دوران أطول في الجلد. يبدو أن النتيجة المقدمة هنا تتعارض مع النتائج التي تم الإبلاغ عنها سابقًا (17) ، ولكن قد يكون ذلك بسبب وجود كمية أكبر من الستيرويد الموضعي المستخدم في هذه الدراسة.

    النتائج المقدمة هنا تدعم التقارير السابقة عن الماوس NC / Nga كنموذج للإنسان AD. ومن المثير للاهتمام أن مستويات TARC التي تنتجها الخلايا الكيراتينية للطبقة القاعدية في الجلد مرتبطة بشدة الآفات الجلدية ، بينما تم إنتاج MDC بواسطة DCs الجلدية في كل من الجلد الآفات وغير اللاجلي ، على الرغم من زيادة مستوى إنتاج MDC في الجلد الآفات ، كما فعل عدد الخلايا المنتجة لـ MDC. من المثير للدهشة أن TARC ، وهو كيموكين Th2 ، يمكن تحريضه في خلايا خط الخلايا الكيراتينية بواسطة IFN-γ ، وهو سيتوكين Th1 ، والذي ، على الرغم من توافقه مع النتائج التي لوحظت في جلد فأر NC / Nga وأيضًا في مرضى البشر المصابين بمرض الزهايمر ( 11) ، هو زيادة فريدة للاستجابة من النوع الأول من قبل الآخر. هناك حاجة إلى مزيد من التحقيقات لهذه الملاحظات في البشر ، ولكن قد يكون هذا دليلًا مهمًا في التحقيق في مدى تعقيد التسبب في مرض الزهايمر عند البشر ، حيث يُظهر هذا ارتباطًا مباشرًا بين استجابة Th1 و Th2 في الجلد.

    نحن ممتنون لجوست جيه أوبنهايم (المعهد الوطني للسرطان ، فريدريك ، ماريلاند ، الولايات المتحدة الأمريكية) للمراجعة المسبقة للمخطوطة. تم دعم هذه الدراسة جزئيًا بمنحة من Core Research and Revolutional Science and Technology ، Japan Science and Technology Corporation.


    الملخص

    الكيموكينات Chemokines هي مجموعة من الجزيئات الصغيرة الشبيهة بالخلية ، تنظم نقل الكريات البيض في الجسم. في السنوات الأخيرة ، شهدنا انتقال استراتيجيات العلاج المناعي من المختبر إلى السرير. هنا ، نستعرض دور الكيموكينات في بيولوجيا الورم وتطور دفاع المضيف المضاد للورم. نلخص المعرفة الحالية لتعبير مستقبلات الكيموكين من خلال المكونات الخلوية ذات الصلة لجهاز المناعة ودور روابطها في تنظيم الاستجابة المناعية المضادة للأورام. أخيرًا ، نناقش النتائج الحديثة التي تشير إلى أن الكيموكينات لها إمكانات علاجية كمواد مساعدة أو علاجات في العلاج المناعي المضاد للأورام ، بالإضافة إلى الأسئلة ووجهات النظر المتبقية لترجمة الأدلة التجريبية إلى ممارسة سريرية.


    تم دعم هذا العمل من قبل المعهد الوطني لالتهاب المفاصل والجهاز العضلي الهيكلي وأمراض الجلد منحة AR-047079 (إلى A. Slominski) ومنحة تدريب من مركز جونسون وجونسون لأبحاث الجلد (إلى B. Zbytek).

    تم تحمل تكاليف نشر هذا المقال جزئيًا عن طريق دفع رسوم الصفحة. لذلك يجب وضع علامة على المقالة بموجب هذا "الإعلانات"وفقًا لـ 18 U.S.C. القسم 1734 فقط للإشارة إلى هذه الحقيقة.

    نشكر الدكتور A.Pisarchik على بناء البلازميد الجيني المراسل الذي يحتوي على مروج POMC البشري وجزء من exon 1. تم إجراء RT-PCR في الوقت الفعلي على ABI Prism 7770 في مركز الموارد الجزيئية في جامعة تينيسي ، ممفيس ، تينيسي . كما تم الاعتراف بالمساعدة الإدارية الممتازة التي قدمتها كريستين كروفورد.


    الملخص

    تصلب الشرايين هو مرض التهابي مزمن يصيب الشرايين الكبيرة ، ويتميز ، من بين أمور أخرى ، بالتدفق المستمر للخلايا الأحادية إلى الفراغ تحت البطاني ، وتراكم البلاعم اللاحق ، وتشكيل الخلايا الرغوية. الكيماويات ومستقبلاتها تنسق بإحكام تهريب الخلايا الأحادية والقدر من الولادة حتى الموت. تلخص هذه المراجعة الموجزة فهمنا الحالي للتفاعل بين الخلايا الأحادية والكيموكينات التي تستمتع بالعمليات الحاسمة في تطور تصلب الشرايين وتطوره وانحداره.

    مقدمة

    تتواجد الخلايا الوحيدة والبلاعم بكثرة في كل من لويحات تصلب الشرايين البشرية والآفات التي تم الحصول عليها من نماذج حيوانية. يمكن إثبات الدليل المباشر على أهمية الخلايا الوحيدة في تصلب الشرايين في دراسة حيث أدى استنفادها إلى تقليل تكوين اللويحات في الأرانب. 3 تم وصف ثلاث مجموعات فرعية رئيسية أحادية الخلية (تسمى الكلاسيكية والمتوسطة وغير الكلاسيكية) في الفئران 4،5 والرجل. 5 في البشر ، يمكن التمييز بين الخلايا الوحيدة على أساس التعبير عن CD14 و CD16. يتم تعريف الوحيدات الكلاسيكية على أنها CD14 ++ CD16 - ، وحيدات وسيطة مثل CD14 ++ CD16 + ، في حين أن الخلايا الوحيدة غير الكلاسيكية هي CD14 + CD16 +. 5 في الفئران ، يتم تمييز مجموعات CD115 + monocyte الفرعية بشكل أساسي بناءً على التعبير عن مستضد الخلايا الليمفاوية 6C (Ly6C) ولكن أيضًا CD43. حيدات كونها Ly6C ++ CD43 + هي CX3CR1 منخفض CCR2 مرتفع ويعتقد أنه يتوافق مع حيدات الإنسان الكلاسيكية. في المقابل ، حيدات الفئران Ly6C + CD43 ++ هي CX3CR1 عالية CCR2 منخفضة هي مكافئات النمط الظاهري للوحيدات البشرية غير الكلاسيكية. 5 من الجدير بالملاحظة ، على الرغم من عدم تأكيدها بعد ، أن دراسة حديثة تقدم دليلاً على أن الخلايا الوحيدة الكلاسيكية لها أهمية مهيمنة في تصلب الشرايين والتقدم مقارنة بنظيراتها غير الكلاسيكية في الفئران. 6

    يرجى الاطلاع على http://atvb.ahajournals.org/site/misc/ATVB_in_Focus.xhtml لجميع المقالات المنشورة في هذه السلسلة.

    بشكل عام ، تقدم الخلايا الوحيدة مستقبلات كيموكين لكل عائلة مستقبلات كيموكين معروفة. ومع ذلك ، يختلف التعبير عن المستقبلات بين المجموعات الفرعية ، مما يجعلها عرضة لمجموعة متنوعة من الكيميائيات التي تؤدي إلى عواقب وظيفية تفاضلية. ومن ثم ، فإن الترابطات ومستقبلات كل منها تشارك في مختلف الجوانب الفيزيولوجية المرضية لبيولوجيا الخلية الأحادية ذات الصلة بتصلب الشرايين ، بما في ذلك التنظيم المتماثل ، أو التوظيف ، أو التمايز ، أو الخروج. تركز هذه المراجعة الموجزة على الكيموكينات المشاركة في العمليات المذكورة أعلاه (الشكل). نظرًا لأن معظم الدراسات المذكورة في هذه المراجعة لم تميز بالتالي بين مجموعات فرعية أحادية الخلية وبدلاً من ذلك تشير إلى وحيدات بشكل عام ، فإننا سوف نشير فقط إلى مجموعات فرعية محددة وحيدات حيث تم إجراء مثل هذا التمييز في التقرير الأصلي.

    شكل. تفاعل Chemokine-monocyte أثناء تصلب الشرايين. الزيادات في مستويات البلازما CXCL1 تنظم تعبئة وحيدات تحت فرط كوليسترول الدم. يتم التحكم في الالتصاق الشرياني للخلايا الوحيدة الكلاسيكية بواسطة روابط CCR1 و CCR5 و CXCR2. داخل آفة تصلب الشرايين ، يتم التحكم في تكوين الخلايا الرغوية ، وتنشيط البلاعم ، والبقاء على قيد الحياة بواسطة CXCL5 و CXCL4 و CX3CL1 ، على التوالي. أخيرًا ، تتطلب أهمية روابط CCR7 في خروج البلاعم من آفات تصلب الشرايين مزيدًا من التحقيق. يشير EC إلى HSPC للخلايا البطانية والجذعية المكونة للدم والخلية السلفية متعددة الإمكانات MIF والعامل المثبط للهجرة MMP والبروتين المعدني و VSMC وخلايا العضلات الملساء الوعائية.

    تتحكم الكيماويات في استتباب الخلايا الأحادية في ظل الحالة المستقرة وفي فرط كوليسترول الدم

    يرتبط تعداد الخلايا الوحيدة المنتشرة ، وخاصة الخلايا الوحيدة الكلاسيكية ، ارتباطًا مباشرًا بتمديد تكوين آفة تصلب الشرايين وبالتالي تراكم البلاعم الآفة في الفئران 6-8 وحدوث أمراض القلب التاجية 9 أو احتشاء عضلة القلب عند الإنسان. 10 خلال العقد الماضي ، أصبح من الواضح أن فرط شحميات الدم ، وهو عامل خطر مهم لتصلب الشرايين ، يؤدي إلى تمدد الخلايا النخاعية مثل العدلات 11 والوحيدات 6،7 ويفضل أن يكون من المجموعة الفرعية الكلاسيكية. 7 ومن المثير للاهتمام ، انخفاض عدد الخلايا الوحيدة غير الكلاسيكية في الفئران التي تعاني من نقص CX3تم ربط CR1 مع لويحات تصلب الشرايين الأصغر. 8 ومع ذلك ، لا يمكن تقديم دليل مباشر على أهمية الوحيدات غير الكلاسيكية في هذه الدراسة. بدلاً من ذلك ، فإن CX3CL1 / CX3يبدو أن محور CR1 أكثر أهمية في تنظيم مصير الوحيدات / الضامة الخارجة عن نطاقها كما تمت مناقشته في فقرة لاحقة. ومن ثم ، فإن الآليات التي تتحكم في استتباب الوحيدات الكلاسيكية تساهم بشكل حاسم في تراكم وحيدات الشرايين. في ظل ظروف الحالة المستقرة ، يتم تنظيم التوازن الوحيدي الكلاسيكي بإحكام من خلال محور CCL2 / CCR2 والفئران التي تعاني من نقص في عرض CCR2 تخفض بشدة عدد الخلايا الوحيدة الكلاسيكية المتداولة. 12 في ظل الظروف الالتهابية الحادة ، يتم تعبئة وحيدات الفئران الكلاسيكية من نخاع العظم بطريقة تعتمد على CCL2 / CCR2- و CCL7 / CCR2. 12،13 ومع ذلك ، في سياق تصلب الشرايين ، يبدو أن هذه المحاور ذات أهمية طفيفة لأن تركيزات البلازما لـ CCL2 و CCL7 لا تزيد في صميم البروتين الشحمي E- ناقص (أبوي - / -) الفئران التي تغذت على نظام غذائي عالي الدهون. 6 علاوة على ذلك ، على الرغم من أن الفئران التي تعاني من نقص في CCR2 تعرض عددًا منخفضًا بشكل ملحوظ من الخلايا الوحيدة الكلاسيكية المنتشرة بالفعل في ظل ظروف الحالة المستقرة ، إلا أن تعداد الخلايا الوحيدات في هذه الفئران لا يزال يزداد تحت فرط كوليسترول الدم. 6 بدلاً من ذلك ، تم تفكيك محور CXCL1 / CXCR2 ليكون ذا أهمية كبيرة في كثرة الوحيدات الكلاسيكية التي يسببها نظام غذائي عالي الدهون حيث يزداد البلازما CXCL1 في ظل هذه الظروف ويبطل تحييد CXCL1 توسع الخلايا الوحيدات الكلاسيكية المنتشرة. 6 ونتيجة لذلك ، فإن حقن الأجسام المضادة المعادلة CXCL1 يقلل من أعداد البلاعم الآفة وتكون أحجام الآفة الناتجة أصغر. 6

    إلى جانب التعبئة المباشرة للخلايا الوحيدة الكلاسيكية من نخاع العظام ، تربط دراسة أحدث تربط تدفق الكوليسترول عبر ناقلات الكاسيت المرتبطة بـ ATP مع الجذع المكون للدم وتعبئة الخلايا السلفية متعددة الإمكانات والانتشار خارج النخاع. 14 قد يكون هذا ذا أهمية كبيرة حيث تم تحديد الطحال كمستودع للخلايا الوحيدة الكلاسيكية ، والتي يمكن تعبئتها بسهولة أثناء الالتهاب. 15 وفقًا لهذه النتيجة ، فشلت الفئران التي تم استئصالها من الطحال في تطوير كثرة الوحيدات في ظل ظروف التهابية حادة 15 وتسبب حيدات الطحال في ظهور البلاعم الآفة. 16 وتجدر الإشارة إلى أن العديد من الكيموكينات ، بما في ذلك CCL3 و CXCL8 ، قد ثبت أنها تثبط تكاثر الخلايا الجذعية المكونة للدم وتكاثر الخلايا السلفية متعددة الإمكانات ، وبالتالي قد تتصدى لتكوين الدم في ظروف فرط كوليسترول الدم. 17 ، 18

    Chemokines إغراء وحيدات في آفات تصلب الشرايين

    يؤدي ربط مستقبلات الكيموكين إلى إطلاق سلسلة إشارات تؤدي إلى الانجذاب الكيميائي وتنشيط الإنتجرين ، وهي خطوة ذات أهمية حاسمة في التوقيف الثابت للخلايا الأحادية على البطانة النشطة. يعتبر CCL2 أحد العناصر الكيميائية المهمة في جذب الوحيدات. منذ ما يقرب من 20 عامًا ، تم الإبلاغ عن أن الفئران التي تعاني من نقص في CCR2 تظهر بشكل حاد آفات تصلب الشرايين. 19 ومع ذلك ، مع الأهمية الحاسمة لـ CCL2 في تعبئة وحيدات من مواقع الإنتاج ، يمكن إرجاع النمط الظاهري للآفة التي لوحظت في الفئران التي تعاني من نقص CCR2 إلى انخفاض أعداد الخلايا الأحادية المتداولة بدلاً من التجنيد المثبط. 6

    تُشتق غالبية جزيئات التوجّه الكيميائي من الصفائح الدموية والعدلات المنتشرة أو من الخلايا المقيمة في الأنسجة مثل الخلايا البطانية والضامة. في الواقع ، يمكن تفسير أهمية الصفائح الدموية في تصلب الشرايين 20،21 جزئيًا من خلال توصيل وترسيب الكيموكينات الجاذبة للوحيدات. الصفائح الدموية غنية بالكيموكينات الكيميائية مثل CCL5 (RANTES) و CXCL4 (PF4) و CXCL7. يسلط العمل الأخير الضوء على أهمية CCL5 في توظيف الخلايا الوحيدة الكلاسيكية. 6،23 هنا ، ترسب الصفائح الدموية CCL5 على طول بطانة آفات تصلب الشرايين. 11 يتم التعرف على CCL5 المعطلة عن طريق الخلايا الوحيدة المتدحرجة التي تتضمن كلاً من CCR1 و CCR5. ومن المثير للاهتمام ، أن تفاعل CCL5 مع مستقبلاته يتطلب sialylation للمستقبلات بموجب هذا إنشاء تغييرات توافقية مواتية في مستقبلات Ccl5 أو فرض تفاعلات كهروستاتيكية لبقايا كيموكين أساسية مع أحماض سياليك سالبة الشحنة متصلة بمستقبلات كيموكين. ومن ثم ، فإن الفئران التي تفتقر إلى St3Gal-IV تظهر انخفاضًا حادًا في التصاق الوحيدات الشريانية وتقلص حجم آفات تصلب الشرايين بشكل كبير.تتضح مدى ملاءمة مستقبلات CCL5 كأهداف علاجية في الدراسات حيث يؤدي الحصار العالمي لمستقبلات CCL5 باستخدام Met-CCL5 أو تثبيط CCR5 مع نقص maraviroc أو 27 أو CCR5 28 إلى تقليل أحجام آفات تصلب الشرايين وانخفاض محتويات البلاعم. مع تسارع تصلب الشرايين استجابة لاحتشاء عضلة القلب ، 29 من المثير للاهتمام ملاحظة أن دراسة سريرية حديثة أثبتت وجود علاقة بين مستويات البلازما CCL5 وتطور تصلب الشرايين بعد متلازمة الشريان التاجي الحادة. 30 أخيرًا ، يمكن تحسين التصاق الخلايا الأحادية الشريانية المستحثة بواسطة CCL5 عندما يتفاعل CCL5 مع CXCL4. 31 تم إثبات أهمية هذا التفاعل التآزري في الجسم الحي من خلال النتائج التي تفيد بأن تعطيل تكوين مغاير CCL5-CXCL4 منع بشكل ملحوظ تكوين آفة تصلب الشرايين. 31

    تطلق الخلايا الآفة الكيموكينات التي تتحكم في التصاق الخلايا الأحادية وتناسخها ، حيث قد يكون لرابطات CXCR2 أهمية سائدة. تم اكتشاف CXCL1 (KC في الفئران ، GROα في البشر) في أقسام الصمام الأبهري من الفئران المصلبة للشرايين 32 ومؤخراً ، تم إنشاء اتصال بين البروتين الدهني المؤكسد منخفض الكثافة (oxLDL) وإطلاق CXCL1 البطاني. 33 هنا ، يتطلب oxLDL أنزيم lysophosphatidic - توليد إنزيم autotaxin وكذلك مستقبلات حمض lysophosphatidic 1 و 3 للحث على إطلاق CXCL1 من الخلايا البطانية وكذلك التصاق الوحيدات اللاحق. الدليل على دور CXCR2 في تصلب الشرايين ينبع بشكل رئيسي من الدراسات التي أجريت باستخدام أجهزة هيميرا لنخاع العظام. في الواقع ، نقص CXCR2 في الخلايا المكونة للدم يحمي من تصلب الشرايين ويقلل من محتويات البلاعم الشرياني. 34 وقد لوحظت تأثيرات مماثلة في الفئران المصابة بتصلب الشرايين التي تعاني من نقص CXCL1. من المثير للاهتمام ، أنه تم إثبات أن CXCR2 أكثر أهمية لتراكم البلاعم في الآفات المثبتة أكثر من ارتباطه CXCL1 وحده ، 32 مما يشير إلى أهمية روابط CXCR2 البديلة. في هذا السياق ، برز العامل المثبط للهجرة (MIF) باعتباره رابطًا مهمًا لتوظيف الخلايا الأحادية الشريانية بوساطة CXCR2. يمكن تحرير 35 MIF من الضامة استجابةً لـ oxLDL ومن الخلايا البطانية تحت نقص الأكسجة. بالإضافة إلى ذلك ، تم مؤخرًا عرض MIF على أنه يتم إطلاقه من NG2 + pericytes في دوران الأوعية الدقيقة ، وبالتالي توجيه الكريات البيض إلى مواقع الالتهاب. 37 إلى جانب منع MIF للحث على تراجع البلاك ومنع تراكم البلاعم ، تم تحديد 35 gremlin-1 مؤخرًا كمثبط داخلي لـ MIF. إدارة جزيء الاندماج المأشوب mGremlin-Fc الذي يرتبط بـ MIF قلل بشكل كبير من أحجام آفات تصلب الشرايين ومحتويات البلاعم الشرياني. 38 بالإضافة إلى MIF و CXCL1 ، يتعرف CXCR2 أيضًا على مواد كيميائية أخرى مثل CXCL2 أو 6 أو 7. على الرغم من أن CXCL5 يبدو مهمًا أثناء تكوين خلايا الرغوة (انظر أدناه) ، فإن دور روابط CXCR2 الأخرى في تصلب الشرايين فيما يتعلق بالتأثيرات على الخلايا الوحيدة يتطلب دراسات إضافية.

    تنظم الكيماويات مصير الخلايا الوحيدة داخل آفات تصلب الشرايين

    داخل اللويحة ، تكون الضامة المشتقة من الخلية الوحيدة محاطة بالعديد من الكيميائيات ، وكلها تعدل بشكل مختلف مصير البلاعم فيما يتعلق بالتنشيط ، والانتشار ، والبقاء ، والاستقطاب. تشارك مستقبلات الزبال (على سبيل المثال ، CD36 ، SRA1) في امتصاص LDL المعدل بواسطة الضامة وهي لاعبين مهمين في تكوين خلايا الرغوة. تم العثور على كيموكين الغشاء CXCL16 لعرض نشاط مستقبلات الزبال. 39 في المختبر CXCL16 - / - الضامة تظهر انخفاضًا في امتصاص oxLDL. من المثير للدهشة ، أن نقص CXCL16 في الجسم الحي يسرع من تصلب الشرايين مع زيادة ملحوظة في محتوى البلاعم الآفات مما يشير إلى أن CXCL16 هو مضاد لتصلب الشرايين. 40 في وقت لاحق تم وصف أن CXCL16 يزيد من معدل تدفق الكوليسترول إلى البروتين الدهني عالي الكثافة ومتقبل apoAI مما يعني أن CXCL16 متورط في نقل الكوليسترول العكسي للبلاعم عن طريق تنظيم الناقلين الرئيسيين للكوليسترول ABCA1 و ABCG1 ، وبالتالي تقديم تفسير للنمط الظاهري لوحظ في Cxcl16 - / - الفئران. من الجدير بالملاحظة أن نقص CXCR6 ، مستقبل CXCL16 ، قد ثبت أنه يقي من تصلب الشرايين في المرحلة المتأخرة من تصلب الشرايين. ومع ذلك ، فإن محتوى الخلية الأحادية / البلاعم المتغير داخل جدار الشرايين نتج عن انخفاض تدفق الخلايا التائية المؤثرة CD3 وبيئة أقل التهابية بشكل عام. 42 في الآونة الأخيرة ، تم وصف أن CXCL5 عبر CXCR2 يلعب دورًا وقائيًا في تصلب الشرايين عن طريق الحد من محتوى الكوليسترول في الضامة وتكوين خلايا الرغوة ، وهو تأثير يتوسط فيه زيادة تعبير ABCA1. 43 ومن المثير للاهتمام أن CXCL4 ، الذي يتم إنتاجه بشكل أساسي عن طريق الصفائح الدموية ، يزيد من تعبير ABCG1 في الضامة. على الرغم من أن مستقبل CXCL4 على الضامة لا يزال غير معروف ، فقد أظهر العمل السابق أن CXCL4 يرتبط أيضًا بجزيئات oxLDL ويعزز امتصاصها بواسطة الضامة. 45 على الرغم من أن بعض النتائج المتناقضة توضح الأدوار المعقدة للكيموكينات على البلاعم وتكوين الخلايا الرغوية ، فإن هذه الدراسات تسلط الضوء بوضوح على الكيموكينات للتأثير بشكل مباشر على تكوين الخلايا الرغوية ويمكن اعتبارها أهدافًا علاجية مستقبلية.

    في الآونة الأخيرة ، تم وصف أنه لا سيما في حالة تصلب الشرايين المؤكدة ، تتكاثر الضامة الآفة محليًا وتساهم في تقدم اللويحة 46 مشيرًا إلى أهمية بقاء البلاعم والانتشار المستمر. على الرغم من أن MCSF (عامل تحفيز مستعمرة البلاعم) قد تم تقديره باعتباره أهم عامل بقاء للبلاعم داخل جدار الوعاء الدموي ، فقد أظهرت دراسة أخرى أن CX3CL1 / CX3يوفر محور CR1 إشارة بقاء مهمة للبلاعم الآفة. على وجه التحديد ، استبدال CX3أنقذ CL1 حيدات من موت الخلايا المستحث تجريبياً. 47،48 مجتمعة ، قد يفسر هذا جزئيًا على الأقل انخفاض تكوين الآفة في الفئران التي تعاني من نقص CX3CR1 وتسليط الضوء على أهمية CX3CL1 / CX3محور CR1 في انحدار اللويحة.

    خلال العقد الماضي ، اكتسب عدم تجانس البلاعم واللدونة والاستقطاب مزيدًا من الاهتمام في سياق تصلب الشرايين وتم تلخيصه مؤخرًا. 49 على الرغم من أن معظم المعرفة تنبع من المقايسات في المختبر ولا يُعرف الكثير عن الروابط الوظيفية بين الكيميائيات والمستقبلات الكيميائية ومجموعات الضامة الفرعية والنتيجة على تصلب الشرايين ، فقد تم وصف CXCL4 للحث على نسخة فريدة من البلاعم. هذا النمط الظاهري للبلاعم M4 يختلف عن النمط الظاهري M1 (الضامة المنشطة كلاسيكياً) والنمط الظاهري M2 (الضامة المنشطة بدلاً من ذلك) ، وبالتالي تحديد مجموعة فرعية جديدة من البلاعم. يمكن العثور على 44 M4 الضامة داخل لويحات تصلب الشرايين البشرية وتتميز بالتعبير عن البروتين المعدني 7 والبروتين المرتبط بالكالسيوم S100A8. 50 علاوة على ذلك ، تعرض البلاعم المستحثة بـ CXCL4 خسارة كاملة لتعبير CD163 المعدي العصيدي ، 51 مما قد يؤدي إلى انخفاض حاد في قدرة البلعمة لهذه المجموعة الفرعية من البلاعم. ومن ثم ، يُفترض أن تكون البلاعم M4 مسببة للالتهابات ومسببة للشيخوخة.

    خروج البلاعم من آفات تصلب الشرايين

    نظرًا لكون الكيموكينات جزيئات جاذبة كيميائية قوية ، فقد اقترح منطقيًا أنها يمكن أن تشارك في خروج الخلايا الضامة والخلايا الرغوية من اللويحات. في نموذج جراحي لانحدار اللويحة ، لوحظ انخفاض مهم في حجم اللويحة بسبب هجرة الخلايا الرغوية من آفات تصلب الشرايين إلى الأوعية اللمفاوية. تم إلغاء هذا التأثير عندما تم حظر كل من الروابط لـ CCR7 (CCL19 و CCL21). 52 ومع ذلك ، في هذا النموذج الجراحي ، يحدث داء تفاغر تلقائي بين الأوعية اللمفاوية والبرانية ، وبالتالي قد يؤدي إلى نتائج إيجابية كاذبة. بصرف النظر عن هذه المشكلة الحرجة ، يقلل علاج الستاتين من محتوى الكوليسترول الضامة ويعزز تعبير CCR7 ، والذي قد يعتمد على وجود عنصر استجابة ستيرول في الفأر وجين CCR7 البشري. علاوة على ذلك ، فإن جزيء التوجيه العصبي netrin-1 ، الذي يثبط الاستجابات الكيميائية للخلايا الضامة للعديد من الكيماويات في المختبر ، قد يمنع الانجذاب الكيميائي للبلاعم إلى CCL19 أو CCL21 ، وبالتالي يقلل من احتمال خروج البلاعم المعتمد على CCR7 من البلاك. في الخط ، مشعة قاتلة Ldlr - / - أظهرت الفئران التي أعيد تكوينها بنخاع عظمي ناقص النترين -1 هجرة زائدة للبلاعم من اللويحة. 54 ومن المثير للاهتمام ، أن تركيزات النترين -1 وجزيء توجيه عصبي آخر semaphorin 3E تنخفض ، في حين أن تعبير CCR7 ينجم عن تراجع اللويحات. 54،55 في نموذج غير جراحي لانحدار اللويحات حيث يتم خفض مستويات الكوليسترول عن طريق إعادة التعبير عن ApoE باستخدام فيروس غدي في أبوي - / - الفئران ، لا يوجد فرق في حجم اللويحة ومحتوى الضامة بين Ccr7 - / - أبوي - / - و أبوي - / - الفئران. 56 يشير هذا الاكتشاف الأخير إلى أن هجرة البلاعم قد لا تكون آلية أساسية لانحدار البلاك وأن الآليات الأخرى التي تتحكم في البلاعم / مصير خلية الرغوة قد تكون هي المهيمنة.

    إنطباع

    خضعت أهمية الكيماويات في سياق تصلب الشرايين للكثير من الدراسات خلال العقود الماضية. ومع ذلك ، كانت التجارب السريرية مع مستقبلات الكيموكين أو مضادات الكيموكين مخيبة للآمال. تشمل أسباب مثل هذه الإخفاقات تأثيرات بارزة خارج الهدف بسبب التفاعل المتبادل مع مستقبلات ذات بنية مماثلة ، والتناقضات بين النماذج الحيوانية والأمراض البشرية ، وأهمية الجزيء المستهدف في دفاع المضيف وبالتالي ضعف الاستجابات المناعية. بالإضافة إلى ذلك ، فإن التكرار المذهل للكيماويات التي تتحكم في استتباب الخلايا المناعية ، والتجنيد ، والتنشيط قد يجعل التداخل مع جزيء واحد فقط غير كافٍ. أظهر العمل الأخير أن تسليم أجزاء الملحق A1 قد يتجاوز الإشارات الزائدة التي تمارسها الكيميائيات في سياق تجنيد الوحيدات الشريانية. على الرغم من هذه النتائج الإيجابية ، لاستهداف الكيميائيات ومستقبلات الكيموكين بنجاح في الدراسات العلاجية المستقبلية ، نحتاج إلى فهم أفضل لكيفية تشكيل الكيميائيات لوظيفة الخلية الأحادية في حالة مستقرة وأثناء الالتهاب الحاد والمزمن.


    آليات عمل ACKRs

    تشكيل التدرج الكيميائي

    على الرغم من أنه كما ذكرنا ، فإن القدرة على تشكيل التدرج اللوني الكيميائي هي خاصية مشتركة ، وتستخدم ACKRs المختلفة آليات مختلفة لتنفيذ هذه الوظيفة ، مما يسمح بتصنيف ACKRs إلى 3 فئات "احترافية": الزبالون ، والناقلون ، والمقدم [2] (الشكل 2 أ). يشترك كل من ACKR2 و ACKR3 و ACKR4 و ackr5 في القدرة على البحث عن الكيماويات [41 ، 98 ، 125 –127]. يشترك ACKR1 و ackr5 في القدرة على النقل أو التقديم (ACKR1 [58 ، 62 ، 74 ، 128 ، 129] ackr5 [36 ، 38 ، 42 ، 130]) الروابط الخاصة بهم ، مما يشير إلى أن هاتين الآليتين قد تكون مرتبطة ارتباطًا وثيقًا ، وعند التعبير عنها على كريات الدم الحمراء ، يعمل ACKR1 أيضًا كمغسلة / خزان للكيموكينات ، وبالتالي يعمل كمستقبِل "مؤقت" للكيماويات [45 ، 131]. كما تمت مناقشته في خصائص التشوير لـ ACKRs ، فإن الآلية المستخدمة من قبل ACKR لتشكيل التدرج الكيميائي ترتبط ارتباطًا وثيقًا بخصائص النقل.

    الخرائط الحرارية للخصائص البيولوجية والكيميائية الحيوية ACKR. (أ) الوظائف البيولوجية لـ ACKRs ، من حيث الآليات المشاركة في تشكيل التدرج الكيميائي (التدهور ، التحويل الخلوي ، التقديم ، الحوض) والتأثيرات على إشارات المستقبلات الكيميائية التقليدية. (ب) الخصائص البيوكيميائية لـ ACKRs ، التي تم تحليلها من حيث خصائص الاتجار في الظروف التأسيسية والمحفزة بالرابط. (C و D) تم الإبلاغ عن آليات استيعاب المستقبلات والتوزيع الخلوي ، على التوالي. يشير اللون الأخضر إلى دليل إيجابي ، ويشير الأحمر إلى دليل سلبي ، ويشير اللون الأزرق إلى دليل مثير للجدل ، ويشير الأبيض إلى عدم وجود بيانات. (د) الإيجابية الضعيفة المشار إليها على أنها ناتجة عن اللون الأخضر الفاتح من المقارنة بين المقصورتين الخلويتين.

    التأثيرات على نشاط مستقبلات الكيموكين التقليدية

    تمثل القدرة على التدخل في تنشيط مستقبلات الكيمياء التقليدية موضوعًا مشتركًا إضافيًا بين ACKRs ، على الرغم من أن الآليات الجزيئية الأساسية لا تزال غير محددة إلى حد كبير (الشكل 2 أ). تم إثبات أن جميع ACKRs وليس ACKR4 قادرة على التداخل مع خصائص الإشارة للمستقبلات التقليدية من خلال الارتباط المباشر للروابط المترابطة ، كما تم إثبات أن ACKR1 و ACKR3 و ACKR4 تشكل أوليغومرات مع مستقبلات كيميائية تقليدية [122 ، 124 ، 132 ، 133]. ينتج عن التعبير المشترك لـ ACKR1 ضعف في خصائص الإشارات والتركيز الكيميائي بوساطة CCR5 [122] ، ويضعف ACKR2 الانجذاب الكيميائي بوساطة CCR4 [134] ، ويضعف ackr5 التنشيط المعتمد على CCR7 للخلايا البائية [123] والتنجيم الكيميائي للخلايا المتفرعة [47] ، وتغييرات ACKR3 CXCR3 [135] ، بالإضافة إلى خصائص تشوير CD74 (مستقبل MIF الآخر) [13] ومستقبل AM [32]. بالمقابل ، أظهرت العديد من التقارير أن ACKR3 يحسن الانجذاب الكيميائي المعتمد على CXCR4 [54 ، 132 ، 136]. تتجاوز تأثيرات ACKR على المستقبلات التقليدية المنافسة المباشرة على الروابط المماثلة ، حيث ثبت أن بعض ACKRs تضعف نشاط الإشارة لمستقبلات الكيموكين التقليدية غير المعروفة ، مثل ACKR2 و ACKR4 ، مما يثبط CXCR5 على الخلايا B الشبيهة بالفطرية و CXCR3 على الخلايا التائية ، على التوالي [24 ، 124]. نظرًا لأن ACKR2 و ACKR4 ينشطان أحداث الإشارات المعتمدة على-stopin (انظر خصائص الإشارة المعتمدة على β-Arrestin) ، فمن المغري التكهن بأن التداخل مع الاقتران الفعال للمستقبلات الكيميائية التقليدية مع مستقبلات بيتا قد يكون متورطًا. في الختام ، يبدو أن ACKRs تمارس نشاطها التنظيمي بشكل تفضيلي من خلال تشكيل التدرج الكيميائي عندما يتم التعبير عنها في الخلايا غير المكونة للدم والتدخل في تنشيط مستقبلات الكيموكين التقليدية عند تفاعلها مع الخلايا المكونة للدم (انظر هذا القسم لمعرفة الأهمية البيولوجية لهذه الآليات). كما تمت مناقشته في خصائص الاتجار لـ ACKRs وخصائص التشوير لـ ACKRs ، تمارس ACKRs هذه الوظائف من خلال آليات مختلفة تتعلق بخصائص الاتجار بها والإشارات.


    الملخص

    مرض هودجكين (HD) هو ورم خبيث ليمفاوي يتميز بخلايا خبيثة نادرة محاطة بخلايا التهابية وفيرة. في هذه الدراسة ، درسنا المساهمة المحتملة للكيموكينات في تجنيد الخلايا الالتهابية في أنواع فرعية مختلفة من HD. الكيموكينات هي بروتينات صغيرة تنشط كمجاذبات كيميائية ومنظِّمات لتنشيط الخلايا. وجدنا أن أنسجة HD بشكل عام تعبر عن مستويات أعلى من الإنترفيرون γ –البروتين المحفز -10 (IP-10) ، و Mig ، و RANTES ، والبروتين الالتهابي الضامة -1 (MIP-1) ، و eotaxin ، ولكن ليس الكيميائي المشتق من البلاعم. عامل (MDC) ، من أنسجة تضخم اللمفاوية (LH). ضمن الأنواع الفرعية عالية الدقة ، كان التعبير عن IP-10 و Mig أعلى في النوع الفرعي الخلوي المختلط (MC) ، بينما كان التعبير عن eotaxin و MDC أعلى في النوع الفرعي للتصلب العقدي (NS). تم الكشف عن ارتباط مباشر كبير بين دليل الإصابة بفيروس Epstein-Barr (EBV) في الخلايا الورمية ومستويات التعبير عن IP-10 و RANTES و MIP-1. ترتبط مستويات التعبير eotaxin ارتباطًا مباشرًا بمدى فرط الحمضات في الأنسجة. عن طريق الكيمياء المناعية ، IP-10 ، Mig ، وبروتينات eotaxin المترجمة في خلايا Reed-Sternberg (RS) الخبيثة ومتغيراتها ، وبعض الخلايا الالتهابية المحيطة. تم اكتشاف Eotaxin أيضًا في الخلايا الليفية وخلايا العضلات الملساء للأوعية. توفر هذه النتائج دليلاً على التعبير الكيميائي عالي المستوى في الأنسجة عالية الدقة وتشير إلى أن الكيموكينات قد تلعب دورًا مهمًا في تجنيد الخلايا الالتهابية التي تتسرب إلى الأنسجة المتضمنة في HD.

    حمرض ODGKIN (HD) هو ورم خبيث ليمفاوي يتميز بخلايا خبيثة نادرة من Reed-Sternberg (RS) وخلايا Hodgkin داخل بيئة من الخلايا غير الخبيثة ، بما في ذلك الخلايا التائية والبلاعم والخلايا الليفية وخلايا البلازما والحمضات والعدلات. يشير حدوث الخلايا الورمية النادرة نسبيًا في سياق الخلايا التفاعلية إلى أن الاستجابة الالتهابية المحلية البارزة لخلايا RS و Hodgkin هي سمة رئيسية لهذا الورم الخبيث. يمكن أن يعكس الالتهاب الشديد استجابة غير كافية و / أو غير فعالة لمضاد الأورام والتي قد تساهم في حد ذاتها في المرض.

    لقد وثق عدد من الدراسات أن HD عبارة عن ورم مرتبط بإنتاج خلوي غير طبيعي. 6 ، IL-1 ، وعامل نخر الورم (TNF) -α قد يفسر بعض الأعراض البنيوية التي ترتبط عادةً بـ HD. ساهمت في مستويات السيتوكين المرتفعة بشكل غير طبيعي من IL-3 و IL-5 و IL-6 و IL-11 على التوالي .4 ومع ذلك ، من غير المرجح أن تفسر اختلالات السيتوكينات الجهازية التسلل الخلوي المميز الذي يحيط بالخلايا الخبيثة. بدلاً من ذلك ، يمكن تفسير طبيعة التسلل الخلوي في الأنسجة عالية الدقة على أساس بعض الكيماويات التي يتم إنتاجها محليًا لتعزيز الهجرة الانتقائية للخلايا.

    وصفت الدراسات الحديثة في نموذج الفأر الرياضي استجابة مضيفة للخلايا المموّهة لفيروس إبشتاين بار (EBV) وحددت وسطاء لهذه الاستجابة هما CXC chemokines IP-10 و Mig.5-7 زيادة إنتاج IP-10 و تم التعرف على Mig أيضًا في الأنسجة اللمفاوية الإيجابية لـ EBV التي تمثل الورم الحبيبي اللمفاوي وسرطان الغدد الليمفاوية من النوع T / القاتل الطبيعي (NK) الأنفي أو الأنفي. 9 حظي بعض أفراد هذه العائلة باهتمام كبير لأنهم أظهروا انتقائية لأهداف الخلية ومستقبلاتها. اقترحت هذه الانتقائية إمكانية أن يكون التركيب الخلوي للاستجابات الالتهابية ، جزئيًا ، وظيفة للكيموكينات التي يتم إنتاجها في الموقع. باستثناء النتائج الأولية للتعبير عن IL-8 ، وهو عامل تنشيط كيميائي للعدلات وعامل تنشيط ، والببتيد الكيميائي أحادي الخلية ذي الصلة (MCP-1) الذي يجذب وينشط الخلايا الأحادية ، هناك معلومات محدودة عن مشاركة الكيماويات الأخرى في التسبب في المرض من التسلل الخلوي الذي يميز HD وأنواعه النسيجية الفرعية

    في هذه الدراسة ، قمنا بفحص المساهمة المحتملة للكيموكينات في الاستجابة الالتهابية في الأنسجة عالية الدقة وأنواع الأمراض الفرعية المختلفة. على وجه الخصوص ، لقد ركزنا على CXC chemokines ، IP-10 و Mig ، التي تعتبر جاذبة كيميائية للخلايا T و NK وعلاقتها بالإيجابية مع EBV ، و CC chemokine eotaxin الذي يعد عامل جذب كيميائي للحمضات وعلاقته بفرط الحمضات في الأنسجة. .


    تحتوي الأرومات الليفية على سيتوبلازم متفرّع يحيط بنواة بيضاوية الشكل مرقطة بها نواتان أو أكثر. يمكن التعرف على الخلايا الليفية النشطة من خلال شبكتها الإندوبلازمية الخشنة الوفيرة. تكون الأرومات الليفية غير النشطة (تسمى الخلايا الليفية) أصغر حجمًا وشكل المغزل ولديها كمية أقل من الشبكة الإندوبلازمية الخشنة. على الرغم من أنها مفككة ومبعثرة عندما تضطر إلى تغطية مساحة كبيرة ، إلا أن الأرومات الليفية ، عندما تكون مزدحمة ، غالبًا ما تصطف محليًا في مجموعات متوازية.

    على عكس الخلايا الظهارية المبطنة لهياكل الجسم ، فإن الخلايا الليفية لا تشكل طبقات أحادية مسطحة ولا يتم تقييدها بواسطة ارتباط استقطابي على الصفيحة القاعدية على جانب واحد ، على الرغم من أنها قد تساهم في مكونات الصفيحة القاعدية في بعض الحالات (على سبيل المثال ، قد تفرز الخلايا الليفية العضلية تحت الظهارة في الأمعاء المكون الحامل للسلسلة α-2 من اللامينين ، والذي لا يوجد إلا في مناطق الظهارة المرتبطة بالجريب والتي تفتقر إلى بطانة الأرومة الليفية العضلية). يمكن أن تهاجر الخلايا الليفية أيضًا ببطء فوق الطبقة السفلية كخلايا فردية ، مرة أخرى على عكس الخلايا الظهارية. بينما تشكل الخلايا الظهارية بطانة هياكل الجسم ، فإن الخلايا الليفية والأنسجة الضامة ذات الصلة هي التي تنحت "الجزء الأكبر" من الكائن الحي.

    العمر الافتراضي للأرومة الليفية ، كما تم قياسه في أجنة الصيصان ، هو 57 ± 3 أيام. [3]

    العلاقة مع الخلايا الليفية تحرير

    الخلايا الليفية والخلايا الليفية هما حالتان من نفس الخلايا ، الأولى هي الحالة النشطة ، والأخيرة هي الحالة الأقل نشاطًا ، وتهتم بالحفاظ واستقلاب الأنسجة. حاليًا ، هناك ميل لاستدعاء كلا الشكلين الأرومات الليفية. تُستخدم اللاحقة "-blast" في علم الأحياء الخلوي للإشارة إلى خلية جذعية أو خلية في حالة تنشيط التمثيل الغذائي.

    الخلايا الليفية غير متجانسة شكليًا مع مظاهر متنوعة اعتمادًا على موقعها ونشاطها. على الرغم من أن الخلايا الليفية المزروعة خارج الرحم غير واضحة شكليًا ، إلا أنها غالبًا ما تحتفظ بالذاكرة الموضعية للموقع وسياق الأنسجة حيث أقاموا سابقًا ، على الأقل على مدى بضعة أجيال. [4] قد يؤدي هذا السلوك الرائع إلى الشعور بعدم الراحة. التوضيح المطلوب ] في حالة نادرة أن يكون هناك ركود مفرط.

    تحرير التنمية

    تتمثل الوظيفة الرئيسية للأرومات الليفية في الحفاظ على السلامة الهيكلية للأنسجة الضامة عن طريق الإفراز المستمر لسلائف المصفوفة خارج الخلية. تفرز الخلايا الليفية سلائف جميع مكونات المصفوفة خارج الخلية ، وبشكل أساسي المادة الأرضية ومجموعة متنوعة من الألياف. يحدد تكوين المصفوفة خارج الخلية الخصائص الفيزيائية للأنسجة الضامة.

    مثل خلايا النسيج الضام الأخرى ، تُشتق الأرومات الليفية من اللحمة المتوسطة البدائية. وبالتالي فهي تعبر عن البروتين الخيطي الوسيط vimentin ، وهي ميزة تستخدم كعلامة لتمييز أصلهم من الأديم المتوسط. [5] ومع ذلك ، فإن هذا الاختبار ليس محددًا لأن الخلايا الظهارية المزروعة في المختبر على طبقة أساسية ملتصقة قد تعبر أيضًا عن الفيمنتين بعد مرور بعض الوقت.

    في حالات معينة ، يمكن أن تؤدي الخلايا الظهارية إلى ظهور أرومات ليفية ، وهي عملية تسمى الانتقال الظهاري واللحمة المتوسطة (EMT).

    على العكس من ذلك ، قد تؤدي الأرومات الليفية في بعض الحالات إلى ظهور ظهارة من خلال الخضوع لعملية الانتقال من اللحمة المتوسطة إلى الظهارية (MET) والتنظيم في صفيحة ظهارية حقيقية مكثفة ومستقطبة ومتصلة جانبياً. تظهر هذه العملية في العديد من المواقف التنموية (مثل تطور النيفرون و notocord) ، وكذلك في التئام الجروح وتكوين الأورام. [ بحاجة لمصدر ]

    تصنع الخلايا الليفية ألياف الكولاجين والجليكوزامينوجليكان والألياف الشبكية والمرنة. تنقسم الأرومات الليفية لدى الأفراد المتنامية وتقوم بتصنيع مادة الأرض. يحفز تلف الأنسجة الخلايا الليفية ويحث على إنتاج الأرومات الليفية. [ بحاجة لمصدر ]

    تحرير الالتهاب

    إلى جانب دورها المعروف كمكونات هيكلية ، تلعب الخلايا الليفية دورًا مهمًا في الاستجابة المناعية لإصابة الأنسجة. هم اللاعبون الأوائل في بدء الالتهاب في وجود الكائنات الحية الدقيقة الغازية. إنها تحفز تخليق الكيموكين من خلال عرض المستقبلات على سطحها. ثم تستجيب الخلايا المناعية وتبدأ سلسلة من الأحداث لإزالة الكائنات الدقيقة الغازية. تسمح المستقبلات الموجودة على سطح الخلايا الليفية أيضًا بتنظيم الخلايا المكونة للدم وتوفر مسارًا للخلايا المناعية لتنظيم الخلايا الليفية. [6]

    تعديل وساطة الورم

    تلعب الخلايا الليفية ، مثل الخلايا الليفية المضيفة المرتبطة بالورم (TAF) ، دورًا مهمًا في تنظيم المناعة من خلال مكونات ومُعدِّلات المصفوفة خارج الخلية المشتقة من TAF. من المعروف أن TAF مهم في الاستجابة الالتهابية وكذلك في تثبيط المناعة في الأورام. تتسبب مكونات ECM المشتقة من TAF في حدوث تغييرات في تكوين ECM وبدء إعادة عرض ECM. [7] يوصف إعادة تشكيل ECM بأنه تغييرات في ECM نتيجة لنشاط الإنزيم الذي يمكن أن يؤدي إلى تدهور ECM. يتم تحديد التنظيم المناعي للأورام إلى حد كبير من خلال إعادة تشكيل ECM لأن ECM مسؤولة عن تنظيم مجموعة متنوعة من الوظائف ، مثل الانتشار والتمايز وتشكل الأعضاء الحيوية. [8] في العديد من أنواع الأورام ، خاصة تلك المتعلقة بالخلايا الظهارية ، يعد إعادة تشكيل ECM أمرًا شائعًا. تتضمن أمثلة مكونات ECM المشتقة من TAF Tenascin و Thrombospondin-1 (TSP-1) ، والتي يمكن العثور عليها في مواقع الالتهاب المزمن والسرطانات ، على التوالي. [7]

    يمكن أن يحدث التنظيم المناعي للأورام أيضًا من خلال المُعدِّلات المشتقة من TAF. على الرغم من أن هذه المعدلات قد تبدو مشابهة لمكونات ECM المشتقة من TAF ، إلا أنها تختلف بمعنى أنها مسؤولة عن تباين ودوران ECM. يمكن أن تلعب جزيئات ECM المشقوقة دورًا مهمًا في تنظيم المناعة. من المعروف أن البروتياز مثل البروتينات المعدنية المصفوفة (MMPs) ونظام uPA يشق ECM. هذه البروتياز مشتقة من الخلايا الليفية. [7]

    تحرير الإجراءات الثانوية

    غالبًا ما تستخدم الخلايا الليفية الجنينية للفأر (MEFs) "كخلايا مغذية" في أبحاث الخلايا الجذعية الجنينية البشرية. ومع ذلك ، فإن العديد من الباحثين يتخلصون تدريجياً من MEFs لصالح وسائط الثقافة ذات المكونات المحددة بدقة للاشتقاق البشري الحصري. [ بحاجة لمصدر ] علاوة على ذلك ، غالبًا ما يتم حل صعوبة استخدام الاشتقاق البشري لمكملات الوسائط عن طريق استخدام "وسائط محددة" حيث تكون المكملات تركيبية وتحقق الهدف الأساسي المتمثل في القضاء على فرصة التلوث من مصادر مشتقة. [ بحاجة لمصدر ]

    في ضوء التطبيق السريري للأنسجة المشتقة من الخلايا الجذعية ، تمت دراسة استخدام الخلايا الليفية البشرية كمغذيات. [9] في حين أن الخلايا الليفية تستخدم عادة للحفاظ على تعدد القدرات للخلايا الجذعية ، يمكن استخدامها أيضًا لتسهيل تطور الخلايا الجذعية إلى نوع معين من الخلايا مثل خلايا عضلة القلب. [10]

    مضيف الاستجابة المناعية تحرير

    تعبر الأرومات الليفية من مواقع تشريحية مختلفة في الجسم عن العديد من الجينات التي ترمز للوسطاء والبروتينات المناعية. [11] تعمل وسطاء الاستجابة المناعية على تمكين التواصل الخلوي مع الخلايا المناعية المكونة للدم. [12] يشار إلى النشاط المناعي للخلايا غير المكونة للدم ، مثل الخلايا الليفية ، باسم "المناعة الهيكلية". [11] [13] من أجل تسهيل الاستجابة السريعة للتحديات المناعية ، تقوم الخلايا الليفية بتشفير الجوانب الحاسمة للاستجابة المناعية للخلية الهيكلية في الإبيجينوم. [ بحاجة لمصدر ]


    الدخل

    لقد تقدمنا ​​بطلب للحصول على منح بحثية خاصة ، لكننا بحاجة إلى المزيد من البيانات الأولية لبدء مشروعنا. سيسمح لنا إجراء تحليل مطياف الكتلة للبروتينات في الخلايا بعد العلاجات الكيميائية بتحديد التغيرات في البروتينات / الخلايا التي تنشط جهاز المناعة. يمكننا بعد ذلك دراسة قدرة هذه البروتينات المعدلة على تحفيز أمراض المناعة الذاتية. علاوة على ذلك ، نخطط لاختبار ما إذا كان يمكن استخدام هذه البروتينات المعدلة في العلاجات المناعية للسرطان أم لا.

    سنستخدم مرفق UMass الشامل للمواصفات الأساسية لاختبار عيناتنا. سيغطي 3000 دولار تكلفة تشغيل ما لا يقل عن 5 عينات (500 دولار للعينة) بالإضافة إلى استخدام الكواشف / المخازن المؤقتة (500 دولار). يتم تضمين رسوم التحليل المرتبطة في رسوم العينة.

    مقابل كل 500 دولار نجمعها بعد الهدف الأولي ، سنتمكن من إضافة عينة إضافية.


    شاهد الفيديو: ما هي اتفاقية الأسلحة الكيميائية (كانون الثاني 2022).