معلومة

هل البادئات أو الكاشفات المحددة ، أو كلاهما ، مستخدمة في اختبارات COVID-19؟

هل البادئات أو الكاشفات المحددة ، أو كلاهما ، مستخدمة في اختبارات COVID-19؟



We are searching data for your request:

Forums and discussions:
Manuals and reference books:
Data from registers:
Wait the end of the search in all databases.
Upon completion, a link will appear to access the found materials.

أحاول التعرف على إجراء اختبار rRT-PCR المستخدم لاختبار COVID-19 ، لكنني مرتبك قليلاً بشأن نقطة واحدة. هل البادئات عالية التحديد تُستخدم مع كاشف غير محدد ، أم أنها تستخدم كواشف محددة للغاية ، أو تستخدم كلاً من البادئات والكاشفات المحددة؟ تقول بعض المصادر أنه يتم استخدام تعدد الإرسال PCR ، مما يشير إلى كاشف معين ، ولكن بما أنني ما زلت مبتدئًا في هذا الموضوع ، فأنا لست متأكدًا. وسأكون ممتنًا أيضًا إذا تمكن شخص ما من الإشارة أيضًا إلى مصدر يشرح بالتفصيل بعض إجراءات الاختبار.

شكرا لك


عندما تقوم بتشغيل تفاعل PCR ، فأنت تقوم بعمل نسخ من تسلسل الحمض النووي المهم (cDNA في حالة النسخ العكسي ، نظرًا لأن الفيروسات القهقرية تحتوي على الحمض النووي الريبي كمادة وراثية). يُفترض أن يكون تسلسل الاهتمام في عينة تأخذها من المريض أو من كائن حي (أقول "مفترض" لأن PCR هو بالضبط لتأكيد ذلك). يتم عمل هذه النسخ من قبل مجموعة من الإنزيمات "العامة" ، تسمى بوليميراز ، وأعني من قبل العموميين أنهم لا يميزون على أي تسلسل الحمض النووي الذي ينسخونه. لكنهم لا يستطيعون نسخ الحمض النووي من جديد (من الصفر). يجب أن يتم "تحضير" عملية النسخ من خلال تسلسل قصير من النيوكليوتيدات المكملة للحمض النووي ذي الأهمية. هذه تسمى بادئات ، وهي تعمل بشكل فعال كمجسات لاستهداف نسخ التسلسل المحدد الذي تحتاج إلى تضخيمه. وهذا هو المكان الذي يهتم فيه العلماء كثيرًا: التصميم التمهيدي. البادئات السيئة لن تكون محددة جدًا ، أو لن تكون فعالة جدًا أثناء عملية التضخيم. أما بالنسبة إلى "الآلة" التي تكتشف النسخ فعليًا ، فهناك العديد من المتغيرات. الأكثر استخدامًا في المعامل البحثية والتشخيصية ، يتضمن تلطيخ الحمض النووي المضخم ببعض الجزيئات التي تربط الأحماض النووية (التي يوجد الكثير منها) ، وتصورها عبر الرحلان الكهربائي للحمض النووي. ما تتخيله هو مجموعة من نسخ الحمض النووي (عن طريق التلوين الذي تصنعه) ، لذلك عليك أن تعرف مسبقًا ما يمكن توقعه. على سبيل المثال ، هل تتوقع جزءًا صغيرًا (بضع مئات من أزواج القاعدة) أو جزء كبير (بضعة آلاف؟). لديك "سلم" (يسمى أيضًا علامة) يمنحك مرجعًا للمقارنة ، كما في هذه الصورة:

يعرف الناس ما يمكن توقعه لأنهم يعرفون بالفعل تسلسل الحمض النووي (أو الحمض النووي الريبي) الذي يقومون بتضخيمه (وإلا لما كانوا ليصمموا البادئات المستهدفة). إنهم يعرفون التسلسل لأنهم أجروا شكلاً من أشكال تسلسل الحمض النووي (المعامل والمعاهد الصحية وهكذا ، افعلوا ذلك طوال الوقت وأودعوا التسلسلات في بعض المنصات ، على سبيل المثال GeneBank).

سيمنحك التضخيم "الإيجابي" نطاقًا في نطاق الحجم المتوقع ، ولا توجد نطاقات أخرى (لأن البادئات الخاصة بك تستهدف تسلسل DNA معين). ولكن كما ذكرت ، يوجد أيضًا تفاعل متعدد تفاعل البوليميراز المتسلسل. في ذلك ، تقوم بتصميم عدة بادئات لاستهداف تسلسلات مختلفة (باستخدام نفس عينة الحمض النووي - على سبيل المثال من مريض أو كائن حي -) ، لكن عملية التحقق هي نفسها في الأساس. هنا يكون الناس أكثر حرصًا على تجنب التفاعلات المتقاطعة بين المواد الأولية المضافة إلى التفاعل.

PCR هي عائلة من التقنيات ، وليست واحدة. هناك اختلافات في العملية الفعلية ، وكذلك في "الكشف" (على سبيل المثال ، استخدامات qPCR في الوقت الحالى الكشف عن أرقام النسخ). لكن المبدأ العام هو نفسه: البادئات محددة ، في حين أن "جهاز الكشف" ليس كذلك حقًا.


شاهد الفيديو: المشروع النهائي لدورة الانفوجرافيك بواسطة الباوربوينت كورونا - COVID-19 (أغسطس 2022).